大青葉的化學(xué)成分及藥理作用研究進(jìn)展

袁銘銘，張文，熊曉麗，鐘瑞建，吳良發(fā)

1.江西省藥品檢驗(yàn)檢測(cè)研究院，國(guó)家藥品監(jiān)督管理局中成藥質(zhì)量評(píng)價(jià)重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室，江西省藥品與醫(yī)療器械質(zhì)量工程技術(shù)研究中心，江西 南昌 330029；2.江西省知識(shí)產(chǎn)權(quán)保護(hù)中心，江西 南昌 330029

大青葉為十字花科菘藍(lán)屬植物菘藍(lán)（Isatis indigoticaFort.）的干燥葉，具有清熱解毒，涼血消斑之功效。用于溫病高熱，神魂，發(fā)斑發(fā)疹，痄腮，喉痹，丹毒，癰腫［1］。現(xiàn)代化學(xué)成分及藥理研究表明，其化學(xué)成分主要為生物堿類(lèi)、有機(jī)酸類(lèi)和黃酮類(lèi)以及其他類(lèi)。具有抗菌、抗內(nèi)毒素、抗炎、抗癌等藥理活性。本文對(duì)近年來(lái)國(guó)內(nèi)外大青葉化學(xué)成分、藥理作用進(jìn)行綜述，從而更好地開(kāi)發(fā)利用該藥用資源。

1 大青葉化學(xué)成分研究進(jìn)展

迄今為止的化學(xué)研究結(jié)果表明，大青葉的化學(xué)成分主要為生物堿類(lèi)，黃酮類(lèi)、酚酸類(lèi)以及其他類(lèi)成分等。

1.1 生物堿類(lèi)

大青葉中分離得到的生物堿主要為吲哚類(lèi)生物堿和喹唑酮類(lèi)生物堿。李薇等［2］從大青葉中分離得到5-羥基-2-吲哚酮。劉瑞等［3］使用HPLC-MS-MS鑒定出大青葉中含有黃嘌呤、次黃嘌呤。阮金蘭等［4］首次從大青葉中分離得到色胺酮。柳繼峰等［5-6］從大青葉中首次分離得到10H-indolo［3,2-b］quinoline、(E)-3-(3＇，5＇-dimethoxy-4＇-hydroxybenzylidene)-2-indolinone，2007 年分離得到兩個(gè)新生物堿類(lèi)化合物9α，13α-Dihydroxylisopropylidenylisatisine A、Isatisine A。鄧湘昱等［7］從大青葉70%乙醇提取液中分離得到靛藍(lán)、青黛酮、脫氧鴨嘴花酮堿。姬志強(qiáng)等［8］從大青葉乙酸乙酯部位中分離得到靛玉紅和4(3H)-喹唑酮。李大偉等［9］從大青葉的水提取物中分離鑒定得到三個(gè)吲哚類(lèi)生物堿indole-3-acetonitrile-4-methoxy-2-S-β-D-glucopyranoside、indole-3-acetonitrile-4-methoxy-2-S-β-D-Glucopyranoside、cappariloside A。Liu 等［10］從大青葉中分離得到6個(gè)新化合物和一個(gè)已知化合物，分別是Indiforine A、Indiforine B、Indiforine C、Indiforine D、Indiforine E、Indiforine F、methyl 2-(4-oxoquinazolin-3 (4H)-yl)benzoate。Liu 等［11］從大青葉中分離鑒定得到8 個(gè)有生物活性的對(duì)映體3S，2＇S，7″R，8″S-Isatindigotindoline A、3R，2＇R，7″S，8″R-Isatindigotindoline A、3S，2＇S，7″S，8″R-Isatindigotindoline B、3R,2＇R,7″R,8″SIsatindigotindoline B、3R，2＇S,3″S，1＇＇＇S-Isatindigotindoline C、3S，2＇R,3″R,1＇＇＇R-Isatindigotindoline C、3R,2＇S,2″Risatindigotindoline D、3S，2＇R，2″R-Isatindigotindoline D。Xi 等［12］從大青葉分離鑒定得到7 個(gè)新的鄰氨基苯甲酸衍生物，Isatiscaloids A、Isatiscaloids B、Isatiscaloids C、(+)-(2＇R)-isatiscaloids D、(-)-(2＇S)-isatiscaloids D、(-)-(2＇S)-isatiscaloids E、(+)-(2＇R)-isatiscaloids E?！吨胁菟帉W(xué)》中記載，大青葉中含有芥苷、新芥苷、菘藍(lán)苷［13］。鄭虎占等［14］在《中藥現(xiàn)代研究與應(yīng)用》中記載，大青葉中含有腺苷。劉瑞等［3］使用HPLC-MS2 鑒定出大青葉中含有胞苷、尿苷、鳥(niǎo)苷。

1.2 有機(jī)酸類(lèi)

李薇等［2］從大青葉中分離鑒定得到煙酸和琥珀酸。阮金蘭等［4］從大青葉中首次分離得到焦谷氨酸。柳繼峰等［5］從大青葉中分離得到苯甲酸、鄰氨基苯甲酸。鄧湘昱等［7］從大青葉70%乙醇提取液中首次分離得到焦脫鎂葉綠酸a 甲酯、焦脫鎂葉綠酸a 乙酯。李雪虎等［15］從大青葉95%乙醇提取液中分離得到亞油酸-1-單甘油酯、水楊酸、丁香酸。姬志強(qiáng)等［8］從大青葉石油醚部位分離得到十八酸、亞油酸。鄭虎占等［14］從大青葉中分離得到棕櫚酸。李大偉等［9,16］從大青葉水提取物中分離得到3 個(gè)新化合物，2-(4-hydroxy-3,5-dimethoxyphenyl)succinic acid、(E)-3-(4-(1-carboxy-2-hydroxyethoxy)-3,5-dimethoxyphenyl) acrylic acid、3-(4-hydroxy-3,5-dimethoxyphenyl) pentanedioic acid。

1.3 黃酮類(lèi)

柳繼峰等［5］從大青葉中首次分離得到6-β-D-glucopyranosyldiosmetin。鄧湘昱等［7］從大青葉中首次分離得到異牡荊素-6＇-O-吡喃葡萄糖苷、異葒草苷、異葒草苷-3＇-O-吡喃葡萄糖苷、肥皂草苷。姬志強(qiáng)等［8］從大青葉中分離鑒定得到異牡荊素。

1.4 其他類(lèi)

姬志強(qiáng)等［8］從大青葉中分離得到β-谷甾醇。柳繼鋒等［5］從大青葉中首次分離得到落葉松脂素、(+)-異落葉松樹(shù)脂醇。李雪虎等［15］首次從大青葉中分離鑒定得到香草醛。此外，大青葉中還含有萜類(lèi)化合物。鄧湘昱等［7］從大青葉中首次分離得到單帖類(lèi)化合物loliolide。李大偉等［9］從大青葉中首次分離得到4 個(gè)倍半萜類(lèi)化合物5β,6α-dihydroxy-3β-(β-D-glucoyranosyloxy)-7-megastigmen-9-one、(6R,9S)-3-oxo-α-ionol-β-D-glucopyranoside、(6R,9R)-3-oxo-α-ionol-β-Dglucopyranoside、saussureoside B 和一個(gè)苷類(lèi)化合物丁香苷。

2 大青葉藥理作用研究進(jìn)展

2.1 抗菌作用

胡永金等［16］為研究大青葉提取物的抗菌效果，所采取的方式為濾紙片擴(kuò)散法。實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示，在含量約為百分之四到百分之七時(shí)，對(duì)金黃色葡萄球菌的抑制作用最大，其后分別為：沙門(mén)菌、李斯特菌、炭疽桿菌、豬糞鏈球菌、大腸桿菌。包俊［17］用經(jīng)改進(jìn)的藥基法，測(cè)定了大青葉甲醇提取物的抗菌活性。結(jié)果顯示，大青葉對(duì)金黃色葡萄球菌的抑制作用較強(qiáng)，然后依次是腸炎沙門(mén)菌耐藥株＞大腸埃希菌標(biāo)準(zhǔn)珠＞酵母菌耐藥株＞肺炎克雷伯菌耐藥株＞白念珠菌耐藥株，且革蘭陽(yáng)性菌＞革蘭陰性菌。陳言峰、鄒記興［18］研究發(fā)現(xiàn)，大青葉提取液對(duì)遲緩愛(ài)德華氏菌有明顯的抑菌作用。劉富康等［19］通過(guò)分光光度法,檢測(cè)了大青葉醇提物中粗黃酮提取量的濃度，將其進(jìn)行了抑菌圈實(shí)驗(yàn)，結(jié)果表明大青葉的粗黃酮萃取率具有顯著抑制大腸桿菌、金黃色葡萄球菌和李斯特菌生長(zhǎng)的效果。

2.2 抗病毒作用

許濤等［20］研究發(fā)現(xiàn)，4(3H)-喹唑酮通過(guò)阻止H1N1 型流感病毒的吸附、增殖而發(fā)揮作用。喻淑慶等［21］采用MTT 比色法，發(fā)現(xiàn)大青葉提取物可以抑制已經(jīng)進(jìn)入細(xì)胞中的單純皰疹病毒Ⅱ型的復(fù)制和增殖。劉釗等［22］研究發(fā)現(xiàn)，大青葉單體能夠抑制呼吸道合胞病毒和柯薩奇病毒B3 在Hep-2 細(xì)胞中的增殖，但是沒(méi)有直接滅活作用，對(duì)病毒的吸附也不起作用。高博等［23］應(yīng)用CPE 法、MTT 法和實(shí)時(shí)熒光RT-PCR 法發(fā)現(xiàn)，大青葉水溶性提取物對(duì)登革熱病毒具有體外抑制作用，且其細(xì)胞毒性小，半數(shù)毒性濃度為 4.68 mg/mL。羅芬［24］發(fā)現(xiàn)大青葉水提物可能通過(guò)提高人體免疫力而達(dá)到抗甲型流感病毒的作用。

2.3 抗氧化

崔旭、李會(huì)端［25］研究表明，大青葉總黃酮對(duì)羥基自由基（·OH）有較強(qiáng)的清除率。

Yu 等［26］采用脫機(jī)DPPH 自由基清除法測(cè)定大青葉乙醇提取液的抗氧化活性，并采用PLS 模型簡(jiǎn)單地探討其指紋圖譜效價(jià)關(guān)系。結(jié)果表明，大青葉乙醇提取液具有抗氧化活性。朱俊杰、徐靜［27］的實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明，大青葉不同功能部分均可提高HepG2 細(xì)胞的抗氧化能力,其中乙酸乙酸部位效果最大，對(duì)其他部分的抑制能力為水部位，醇提取物，正丁醇部位。閆俊等［28］采用鐵離子還原能力法（FRAP）測(cè)定大青葉中不同化學(xué)組成的抗氧化能力，結(jié)果發(fā)現(xiàn)以乙酸丙烯相的抗氧化活性為最高。

2.4 抗內(nèi)毒素

方建國(guó)等［29］對(duì)大青葉抗內(nèi)毒素活性部位進(jìn)行篩選，發(fā)現(xiàn)正丁醇相的體內(nèi)外抗內(nèi)毒素活性均最強(qiáng)，體外實(shí)驗(yàn)中其余部位抗內(nèi)毒素活性乙酸乙酯相＞氯仿相＞水相＞石油醚相，體內(nèi)實(shí)驗(yàn)中水相＞乙酸乙酯相＞氯仿相＞石油醚相。黃繼全［30］對(duì)大青葉氯仿提取物進(jìn)行體內(nèi)外抗內(nèi)毒素實(shí)驗(yàn)，發(fā)現(xiàn)其可以抗大腸桿菌O111B4 內(nèi)毒素。

2.5 抗腫瘤

Nam 等［31］發(fā)現(xiàn)大青葉中的化學(xué)成分靛玉紅是慢性粒細(xì)胞白血病的有效治療藥物。夏小艷等［32］利用兩個(gè)模型（斑馬魚(yú)藥物篩選模型，雞胚絨毛尿囊膜模型）檢測(cè)靛玉紅的抑制血管生成作用。結(jié)果表明，靛玉紅具有顯著的抗血管生成活性。簡(jiǎn)曉順等［33］采用血清藥理學(xué)方法，發(fā)現(xiàn)大青葉乙醇提取液能抑制腫瘤細(xì)胞株K562 和S180 的生長(zhǎng)和增殖。

2.6 其他藥理作用

趙紅等［34］研究發(fā)現(xiàn)，大青葉的水煎液可以使小鼠的免疫功能上調(diào)，其機(jī)制可能是促進(jìn)淋巴細(xì)胞IL-2 的分泌。Poudel 等［35］通過(guò)細(xì)胞實(shí)驗(yàn)研究發(fā)現(xiàn)，異金雀花素可抑制脂肪生成轉(zhuǎn)錄因子，從而抑制脂肪細(xì)胞分化和脂肪代謝相關(guān)的基因的表達(dá)水平，這可能是通過(guò)上調(diào)insig-1 和2 來(lái)實(shí)現(xiàn)。

研究表明，大青葉醇沉物質(zhì)和總有機(jī)酸萃取物質(zhì)，都對(duì)由二甲苯類(lèi)引起的老鼠耳腫有顯著的抑制作用，且對(duì)干酵母引起的高熱有顯著降溫效果。結(jié)果顯示，大青葉醇沉物和總有機(jī)酸提取液有解熱、抗炎效果［36-37］。

3 結(jié)語(yǔ)

大青葉作為一個(gè)具有確切療效的傳統(tǒng)中藥，近年來(lái)國(guó)內(nèi)外學(xué)者雖對(duì)大青葉的化學(xué)成分和藥理作用有所研究，但總體上研究較少。因此，需要繼續(xù)對(duì)其活性物質(zhì)進(jìn)行研究，對(duì)化學(xué)成分與藥理作用之間的關(guān)系進(jìn)行更深入系統(tǒng)的研究，明確其物效基礎(chǔ)。