補(bǔ)骨脂“雷公炮制法”減毒的科學(xué)內(nèi)涵*

呂 彬 ，譚旺曉 ，劉 瀟，王小瑩 ，2，高秀梅

（1.組分中藥國(guó)家重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室，天津 301617；2.天津中醫(yī)藥大學(xué)中藥學(xué)院，天津 301617）

中藥補(bǔ)骨脂，又名破故紙、胡韭子、和蘭莧，是豆科一年生直立草本補(bǔ)骨脂（Psoralea corylifolia L.）的干燥成熟果實(shí)[1]，其性溫，味辛、苦，歸腎、脾經(jīng)，具有溫腎助陽(yáng)，納氣平喘，溫脾止瀉的功效，主要用于治療腎陽(yáng)不足，陽(yáng)痿遺精，遺尿尿頻，腰膝冷痛，腎虛作喘，五更泄瀉；外用治療白癜風(fēng)及斑禿[2]?，F(xiàn)代藥理學(xué)研究發(fā)現(xiàn)，補(bǔ)骨脂具有雌激素樣作用[3]，能夠增加骨密度，多用于治療骨質(zhì)疏松[4]；此外，補(bǔ)骨脂還有抗腫瘤、抗應(yīng)激、抗血栓形成等作用[5-7]，在臨床上應(yīng)用較為廣泛。補(bǔ)骨脂生品性燥，易傷陰助火，具有一定的毒副作用[8-9]，因此臨床上多使用其炮制品。《普濟(jì)本事方》《本草綱目》等醫(yī)學(xué)古籍中對(duì)補(bǔ)骨脂應(yīng)用的記載也均以其酒制品和炒制品為主，生品使用較少。補(bǔ)骨脂炮制方法始見(jiàn)于《雷公炮炙論》，曰：“凡使，性本大燥，毒，用酒浸一宿，漉出，卻用東流水浸三日夜，卻蒸從巳至申出，日干用?！盵10]后世醫(yī)家在雷公法的基礎(chǔ)上發(fā)展出鹽炙、酒浸、清炒等炮制方法[11]。其中，酒浸炒法始見(jiàn)于宋代《太平惠民和劑局方》；元代《瑞竹堂經(jīng)驗(yàn)方》記載補(bǔ)骨脂炮制方法為“酒浸一宿，焙干”；明代至清代的炮制方法主要是用水浸泡后再蒸三時(shí)[12]。其余古籍如《太平圣惠方》《本草乘雅半偈》等也對(duì)補(bǔ)骨脂炮制方法有所記載。《雷公炮炙論》中提出補(bǔ)骨脂炮制的目的是為了解燥毒[13]，后世如《太平惠民和劑局方》中記載的鹽炒法、《經(jīng)史證類(lèi)備急本草》中提到的“入藥微炒用”等，也均以減燥毒為目的[12]?！吨袊?guó)藥典》中收載的補(bǔ)骨脂炮制方法為鹽炙法[2]，中藥炮制理論提到入鹽走腎，鹽炙法能夠增強(qiáng)補(bǔ)骨脂補(bǔ)腎納氣的功效[14]，在臨床應(yīng)用中也主要以其鹽制品為主[11]。有學(xué)者對(duì)補(bǔ)骨脂不同炮制品有效成分補(bǔ)骨脂素進(jìn)行了含量測(cè)定，發(fā)現(xiàn)雷公法炮制品中補(bǔ)骨脂素的含量遠(yuǎn)高于鹽炙品，認(rèn)為鹽炙法不是最佳的炮制方法[15-16]?，F(xiàn)代對(duì)于補(bǔ)骨脂雷公炮制方法描述為將補(bǔ)骨脂浸泡于黃酒中1 d，之后濾去黃酒，以清水浸泡藥材3 d，經(jīng)過(guò)濾、瀝干后，置于鍋中隔水蒸6 h后取出，曬干。研究表明[17]，經(jīng)雷公法炮制后，補(bǔ)骨脂毒性明顯降低，可能與其炮制前后化學(xué)成分的變化有關(guān)。在現(xiàn)代炮制的研究中，為了優(yōu)化炮制工藝，通常是先選擇藥物中某幾種主要成分作為標(biāo)志性成分，再以不同方法對(duì)藥物進(jìn)行炮制，并根據(jù)標(biāo)志性成分的含量差異對(duì)炮制工藝進(jìn)行篩選，而炮制前后標(biāo)志性成分的變化在炮制原理的研究中意義重大[18]。筆者從炮制前后化學(xué)成分的變化分析雷公炮制法對(duì)補(bǔ)骨脂的影響，以探究雷公炮制法減毒的機(jī)制。

1 補(bǔ)骨脂肝損傷的相關(guān)化學(xué)成分研究

有關(guān)補(bǔ)骨脂的毒性記載始見(jiàn)于南北朝的《雷公炮炙論》，“性本大燥，毒”?！侗静菪戮帯分须m未言明補(bǔ)骨脂具有毒性，但指出補(bǔ)骨脂“其性過(guò)于燥”“不可輕用”。其余古籍文獻(xiàn)中皆未見(jiàn)明確的補(bǔ)骨脂毒性記載，但對(duì)其燥性均有一定的描述，提出補(bǔ)骨脂性“大溫而燥”，歷代醫(yī)家均認(rèn)為“陰虛火旺者忌服”。近年來(lái)，隨著對(duì)補(bǔ)骨脂研究的深入，且臨床對(duì)于補(bǔ)骨脂不良反應(yīng)的報(bào)道越來(lái)越多，補(bǔ)骨脂用藥的安全性也引起了廣泛的關(guān)注。婁鑫等[19]建立了一種新的有毒中藥分級(jí)方法，將補(bǔ)骨脂歸為“能導(dǎo)致毒性中藥”；現(xiàn)代醫(yī)藥典籍如《中藥大辭典》《中華本草》等對(duì)于補(bǔ)骨脂毒性也均有所記載。

現(xiàn)代藥理學(xué)研究表明，補(bǔ)骨脂主要毒性為肝臟毒性。據(jù)報(bào)道[20]，長(zhǎng)期給予大劑量補(bǔ)骨脂生藥，對(duì)大鼠肝臟和腎臟功能均造成一定損害。補(bǔ)骨脂能夠造成小鼠肝細(xì)胞壞死，血清中谷氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶（ALT）、天門(mén)冬氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶（AST）及炎癥因子表達(dá)上升，并引起肝細(xì)胞線粒體膜電位的降低[21]。補(bǔ)骨脂化學(xué)成分較為復(fù)雜，自1933年分離出第1個(gè)單體成分補(bǔ)骨脂素起[22]，至今已分離并鑒定出80余種化學(xué)成分，主要包括香豆素類(lèi)、苯并呋喃苷類(lèi)、黃酮類(lèi)及單萜酚類(lèi)化合物[23]。其中，補(bǔ)骨脂苷、異補(bǔ)骨脂苷等苷類(lèi)成分主要分布于種子中，補(bǔ)骨脂酚和黃酮類(lèi)成分存在于補(bǔ)骨脂果皮中，補(bǔ)骨脂素、異補(bǔ)骨脂素等脂溶性香豆素在果皮和種子中均有分布[24]。補(bǔ)骨脂中的主要成分（異）補(bǔ)骨脂素、（異）補(bǔ)骨脂苷均存可造成一定程度上的肝損傷，是補(bǔ)骨脂肝毒性的主要來(lái)源。補(bǔ)骨脂中主要化學(xué)成分見(jiàn)圖1。

圖1 補(bǔ)骨脂中主要化學(xué)成分結(jié)構(gòu)圖Fig.1 Structure of main chemical components in Psoralea corylifolia

1.1 補(bǔ)骨脂肝損傷的臨床表現(xiàn) 近年來(lái)，關(guān)于補(bǔ)骨脂造成肝損傷的臨床報(bào)道屢見(jiàn)不鮮。2005年，韓國(guó)1例44歲婦女以補(bǔ)骨脂泡茶飲用，產(chǎn)生急性膽汁淤積性肝損害，患者有黃疸表現(xiàn)，肝穿刺顯示肝臟有明顯壞死[25]。2001年和2008年，國(guó)家藥品不良反應(yīng)監(jiān)測(cè)中心兩次通報(bào)壯骨關(guān)節(jié)丸（含補(bǔ)骨脂素0.532 mg/g，異補(bǔ)骨脂素0.518 mg/g[26]）能夠造成肝損害，目前已有研究證實(shí)其造成肝損傷的成分為乳香、沒(méi)藥和補(bǔ)骨脂[27]。2006年報(bào)道1例22歲男性患者使用驅(qū)白巴布期片（維藥，含補(bǔ)骨脂素1.15 mg/片，異補(bǔ)骨脂素0.91 mg/片[28]）和補(bǔ)骨脂注射液（含補(bǔ)骨脂素18.66 μg/mL，異補(bǔ)骨脂素36.55 μg/mL[29]）后，出現(xiàn)黃疸和肝臟生化異常，停藥9周后檢測(cè)肝臟生化正常，后經(jīng)毒理學(xué)分析，引起肝損傷的藥物成分主要為補(bǔ)骨脂中的成分[30]。2018年報(bào)道1例49歲男性患者使用驅(qū)白巴布期片聯(lián)合補(bǔ)骨脂顆粒治療白癜風(fēng)，用藥1個(gè)月后患者血清中ALT、AST及谷氨酰轉(zhuǎn)移酶（GGT）表達(dá)明顯升高，給予保肝藥9周后檢測(cè)肝臟生化指標(biāo)恢復(fù)正常，推測(cè)補(bǔ)骨脂為引起該患者肝損傷的主要藥物，其原因可能與兩藥聯(lián)用導(dǎo)致補(bǔ)骨脂劑量加大有關(guān)[31]。夏葉等[32]在研究中發(fā)現(xiàn)，使用加味青娥方（每1 g加味青娥方中含補(bǔ)骨脂生藥5 g）治療的36例患者中，出現(xiàn)1例ALT水平升高，但情況較為輕微；付舒菲等[33]使用丹知青娥方（含補(bǔ)骨脂素2.1 mg/g，異補(bǔ)骨脂素1.8 mg/g）治療更年期癥狀，出現(xiàn)多例心悸、胃部惡心、便秘、多眠等不良反應(yīng)，16例參與者在治療8周后表現(xiàn)出較高的轉(zhuǎn)氨酶水平，治療停止后肝功能檢測(cè)恢復(fù)正常。加味青娥方主要組成藥物為丹參、杜仲、補(bǔ)骨脂，丹知青娥方則在此基礎(chǔ)上加入中藥知母。其中，丹參、知母、杜仲均未見(jiàn)報(bào)道具有肝毒性，且多項(xiàng)研究證實(shí)此3味中藥對(duì)肝損傷均具有保護(hù)作用[34-36]，文獻(xiàn)作者推測(cè)補(bǔ)骨脂為兩方引起肝損傷的主要藥物。

1.2 補(bǔ)骨脂肝損傷成分研究 目前動(dòng)物實(shí)驗(yàn)研究提示，肝損傷的程度與補(bǔ)骨脂給藥時(shí)間、劑量呈一定的相關(guān)性[37]。張玥等[38]研究發(fā)現(xiàn)，小鼠連續(xù)腹腔注射80 mg/kg的補(bǔ)骨脂素和異補(bǔ)骨脂素4周后，補(bǔ)骨脂素組小鼠血清中堿性磷酸酶（ALP）水平明顯降低，異補(bǔ)骨脂素則會(huì)引起小鼠血清中ALT和AST的水平上升，ALP水平下降。病理學(xué)檢查顯示補(bǔ)骨脂素組小鼠肝臟內(nèi)可見(jiàn)散在局灶性壞死，異補(bǔ)骨脂素組部分小鼠肝臟有肝細(xì)胞變性，提示補(bǔ)骨脂素和異補(bǔ)骨脂素均能造成一定程度上的肝損傷；此外，100 μmol/L的異補(bǔ)骨脂素可以抑制多藥耐藥相關(guān)蛋白 2（MRP2）、多藥耐藥相關(guān)蛋白 3（MRP3）的表達(dá)，從而引起HepG2細(xì)胞內(nèi)膽汁酸升高和細(xì)胞毒性[38-39]。宋蕾等[40]研究發(fā)現(xiàn)，采用100 mg/kg的異補(bǔ)骨脂素連續(xù)灌胃給藥ICR小鼠9 d，雌性小鼠肝功能下降，肝臟系數(shù)及血清中ALT和AST水平顯著升高，肝臟中膽汁酸鹽輸出泵（BSEP）、鈉離子-牛磺膽酸共轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白（NTCP）和有機(jī)陰離子轉(zhuǎn)運(yùn)多肽2（OATP2）的mRNA水平均有所降低。連續(xù)灌胃給予大鼠異補(bǔ)骨脂素40 mg/kg，給藥28 d后，能夠?qū)Υ笫蟾挝⒘ｓw中的細(xì)胞色素P450酶（CYP450）產(chǎn)生影響，造成轉(zhuǎn)氨酶升高，進(jìn)而引起肝臟損傷[41]。補(bǔ)骨脂水提物中存在大量的補(bǔ)骨脂苷和異補(bǔ)骨脂苷，連續(xù)灌胃給予小鼠80 g/kg的補(bǔ)骨脂水提物14 d，能夠使其肝臟BSEP和NTCP表達(dá)顯著降低，影響膽汁酸轉(zhuǎn)運(yùn)體的表達(dá)[42]；連續(xù)灌胃給予大鼠2.1 g/kg的補(bǔ)骨脂水提物12周，能夠引起大鼠肝臟出現(xiàn)中度彌漫性脂肪變性[43]。王昭昕等[44]采用70%乙醇滲漉提取補(bǔ)骨脂中的有效成分，給予大鼠不同劑量的補(bǔ)骨脂提取物（生藥組為3 g/kg，其余各組低劑量組為3 g/kg，高劑量組為6 g/kg），連續(xù)灌胃給藥4周后發(fā)現(xiàn)，補(bǔ)骨脂生藥組、補(bǔ)骨脂下層滲漉液高劑量組（主要含有補(bǔ)骨脂素、異補(bǔ)骨脂素和補(bǔ)骨脂酚）與滲漉藥渣高劑量組（主要含有補(bǔ)骨脂苷和異補(bǔ)骨脂苷）能夠造成明顯的肝損傷，其中滲漉藥渣高劑量組大鼠肝損傷最為明顯，推測(cè)（異）補(bǔ)骨脂苷肝毒性高于其他成分。本課題組前期研究也證實(shí)[45]，分別給予大鼠補(bǔ)骨脂水提物（主要含補(bǔ)骨脂苷、異補(bǔ)骨脂苷）及補(bǔ)骨脂水提后的干燥藥渣（主要含補(bǔ)骨脂素、異補(bǔ)骨脂素、補(bǔ)骨脂酚），灌胃給藥4周后水提物藥渣組大鼠肝損傷程度明顯低于生藥組。黃酮類(lèi)成分補(bǔ)骨脂甲素和Corylifol A能夠抑制肝臟微粒體中的葡糖醛酸轉(zhuǎn)移酶1A1，可能是造成膽紅素水平上升的原因[46]；但對(duì)其作用的評(píng)價(jià)僅局限于體外酶活性檢測(cè)，對(duì)機(jī)體肝臟的影響仍有待探究。周昆等[47]發(fā)現(xiàn)HepG2細(xì)胞的存活率與補(bǔ)骨脂酚終濃度和作用時(shí)間呈負(fù)相關(guān)，但是小鼠灌胃給予50 mg/kg補(bǔ)骨脂酚未產(chǎn)生明顯的肝損傷，提示補(bǔ)骨脂酚肝毒性較小。

上述研究表明，（異）補(bǔ)骨脂素、（異）補(bǔ)骨脂苷和補(bǔ)骨脂酚均能造成一定程度的肝損傷，其中補(bǔ)骨脂酚肝毒性最小，（異）補(bǔ)骨脂苷的肝毒性高于（異）補(bǔ)骨脂素。盡管已有多項(xiàng)實(shí)驗(yàn)證實(shí)（異）補(bǔ)骨脂苷的肝毒性較強(qiáng)，但對(duì)于補(bǔ)骨脂中毒性成分的研究仍有所欠缺，需進(jìn)一步完善。筆者對(duì)補(bǔ)骨脂中主要肝毒性成分的半數(shù)致死量（LD50）、半數(shù)有效量（ED50）及毒性劑量進(jìn)行檢索，發(fā)現(xiàn)僅白茹玉等[48]報(bào)道了補(bǔ)骨脂素與異補(bǔ)骨脂素小鼠單次灌胃給藥的LD50分別為638.69 mg/kg與351.72 mg/kg；其余成分的LD50及補(bǔ)骨脂主要成分的ED50和毒性劑量等均未見(jiàn)報(bào)道。對(duì)補(bǔ)骨脂毒性成分的深入研究，不僅能夠?yàn)檠a(bǔ)骨脂臨床用藥提供參考，同時(shí)對(duì)補(bǔ)骨脂減毒的探究也具有指導(dǎo)意義。

補(bǔ)骨脂中主要的活性成分為補(bǔ)骨脂素和異補(bǔ)骨脂素?！吨袊?guó)藥典》規(guī)定，補(bǔ)骨脂安全劑量為6～10 g/d，且飲片中補(bǔ)骨脂素和異補(bǔ)骨脂素總含量不得少于0.7%。在關(guān)于（異）補(bǔ)骨脂素引起肝損傷的實(shí)驗(yàn)中，給藥劑量均遠(yuǎn)大于規(guī)定用量（約為生藥規(guī)定劑量的5～10倍，根據(jù)成分含量及體表面積折合計(jì)算），且多數(shù)研究給藥時(shí)間較長(zhǎng)。（異）補(bǔ)骨脂素口服給藥的消除半衰期超過(guò)4 h，且給藥后24 h仍未代謝完全[49]；長(zhǎng)時(shí)間持續(xù)給藥會(huì)引起代謝不及時(shí)，大量的（異）補(bǔ)骨脂素在體內(nèi)蓄積，從而引起肝臟損傷。此外，本課題組前期研究發(fā)現(xiàn)[45]，（異）補(bǔ)骨脂苷在補(bǔ)骨脂中含量較高，且能夠在體內(nèi)代謝轉(zhuǎn)化為（異）補(bǔ)骨脂素，使服用補(bǔ)骨脂后（異）補(bǔ)骨脂素的體內(nèi)暴露量明顯升高，最終過(guò)量的（異）補(bǔ)骨脂素導(dǎo)致肝損害的發(fā)生。而且，由于（異）補(bǔ)骨脂苷含量的不確定性，也使得（異）補(bǔ)骨脂素含量的控制變得毫無(wú)意義。因此，在用藥劑量不超過(guò)規(guī)定劑量的條件下，通過(guò)炮制的方法降低補(bǔ)骨脂中毒性成分（異）補(bǔ)骨脂苷的含量，同時(shí)保證活性成分（異）補(bǔ)骨脂素含量符合其有效劑量，對(duì)保障補(bǔ)骨脂用藥的安全性和有效性具有重要意義。

2 補(bǔ)骨脂“雷公炮制法”減毒機(jī)制

有關(guān)補(bǔ)骨脂的炮制理論始見(jiàn)于南北朝的《雷公炮炙論》，提出補(bǔ)骨脂炮制的目的是解其“燥毒”。在炮制過(guò)程中，由于受到炮制條件的影響，補(bǔ)骨脂內(nèi)在成分會(huì)發(fā)生質(zhì)或量的改變，毒性成分（異）補(bǔ)骨脂苷轉(zhuǎn)化為活性成分（異）補(bǔ)骨脂素，從而達(dá)到炮制減毒的目的。補(bǔ)骨脂素具有抗癌、調(diào)節(jié)免疫和雌激素樣作用，在血漿中代謝消除緩慢[50]，被認(rèn)為是補(bǔ)骨脂中的主要活性成分，常作為指標(biāo)成分用于補(bǔ)骨脂及其相關(guān)制品的質(zhì)量控制。有關(guān)研究表明，（異）補(bǔ)骨脂苷與（異）補(bǔ)骨脂素具有一定的生物轉(zhuǎn)化關(guān)系[51]，可能與補(bǔ)骨脂中存在的β-葡萄糖苷酶有關(guān)[52]。（異）補(bǔ)骨脂苷和（異）補(bǔ)骨脂素是補(bǔ)骨脂水煎液入血的主要活性成分[53]，（異）補(bǔ)骨脂苷在大鼠體內(nèi)吸收較快，并在一定時(shí)間后轉(zhuǎn)化為（異）補(bǔ)骨脂素[54]。王躍飛等[55]研究發(fā)現(xiàn)，（異）補(bǔ)骨脂苷可通過(guò)腸道微生物發(fā)生去糖基化，代謝為（異）補(bǔ)骨脂素。此外，（異）補(bǔ)骨脂苷在體外可以通過(guò)酸水解進(jìn)行轉(zhuǎn)化，轉(zhuǎn)化條件為水解反應(yīng)溫度100°C、鹽酸濃度3 mol/L、水解時(shí)間30 min[56]。在雷公法炮制過(guò)程中，通過(guò)酒浸可去除部分（異）補(bǔ)骨脂素及少量的（異）補(bǔ)骨脂苷，但其具體含量變化未見(jiàn)明確報(bào)道。王昭昕等[42]采用70%乙醇滲漉提取補(bǔ)骨脂中的有效成分，發(fā)現(xiàn)提取后補(bǔ)骨脂中（異）補(bǔ)骨脂素含量下降約60%，（異）補(bǔ)骨脂苷含量下降約19%，而酒浸后補(bǔ)骨脂化學(xué)成分含量的變化應(yīng)低于滲漉提取。隨后，水浸、高溫加熱等條件則促進(jìn)了（異）補(bǔ)骨脂苷的浸出和轉(zhuǎn)化。宋瀟等[57]研究發(fā)現(xiàn)，與生品組相比，補(bǔ)骨脂雷公炮制組中（異）補(bǔ)骨脂素的增加量約為（異）補(bǔ)骨脂苷的減少量的一半左右；而在酒浸炒法中，補(bǔ)骨脂素和異補(bǔ)骨脂素的含量增加值等同于補(bǔ)骨脂苷和異補(bǔ)骨脂苷的含量下降值，提示在雷公法炮制過(guò)程中有一部分（異）補(bǔ)骨脂苷在酒、水浸泡和水蒸過(guò)程中被消耗掉。此外，炮制后補(bǔ)骨脂中另一毒性成分補(bǔ)骨脂酚含量也有所降低。酒、水浸泡可以使補(bǔ)骨脂藥材結(jié)構(gòu)趨于疏松，補(bǔ)骨脂酚在后續(xù)炮制過(guò)程中易于逸出；水蒸可以促進(jìn)補(bǔ)骨脂酚受熱揮發(fā)[58]。李娜等[59]比較了補(bǔ)骨脂經(jīng)不同方法炮制后補(bǔ)骨脂酚的含量變化，發(fā)現(xiàn)與生品組相比，雷公法與水蒸法炮制品補(bǔ)骨脂酚含量下降約12%；酒浸炒法與藥典法炮制均能促進(jìn)補(bǔ)骨脂酚含量上升；清炒法與生品組相比無(wú)明顯變化，證實(shí)“水蒸”能夠降低補(bǔ)骨脂酚的含量。楊濱等[16]的研究也證實(shí)了補(bǔ)骨脂經(jīng)雷公法炮制后，與生品相比補(bǔ)骨脂酚的含量下降約為10%左右。盡管在酒浸過(guò)程中，補(bǔ)骨脂中的有效成分（異）補(bǔ)骨脂素有所消耗，但在后續(xù)工藝中，經(jīng)（異）補(bǔ)骨脂苷轉(zhuǎn)化而成的（異）補(bǔ)骨脂素則能夠彌補(bǔ)這一損耗，且能保證（異）補(bǔ)骨脂素含量處于安全劑量范圍。郭晏華等[60]對(duì)不同批次的補(bǔ)骨脂炮制前后（異）補(bǔ)骨脂素含量進(jìn)行檢測(cè)，發(fā)現(xiàn)與生品組相比，雷公法炮制組中各批次（異）補(bǔ)骨脂素含量均略有上升，且符合藥典標(biāo)準(zhǔn)；多項(xiàng)研究證實(shí)經(jīng)雷公法炮制后補(bǔ)骨脂中（異）補(bǔ)骨脂素含量均略高于生品組[59，61-62]。經(jīng)雷公法炮制后，（異）補(bǔ)骨脂苷已于炮制過(guò)程中完成轉(zhuǎn)化，因此服用補(bǔ)骨脂雷公法炮制品后，進(jìn)入體內(nèi)的（異）補(bǔ)骨脂苷含量較少，其在體內(nèi)轉(zhuǎn)化而成的（異）補(bǔ)骨脂素也會(huì)被迅速代謝，有利于對(duì)（異）補(bǔ)骨脂素的含量進(jìn)行控制，使得體內(nèi)（異）補(bǔ)骨脂素的含量處于安全用藥范圍。宋迪等[63]基于《雷公炮炙論》，以HepaRG細(xì)胞3D培養(yǎng)獲得的類(lèi)人肝臟模型結(jié)合高內(nèi)涵成像技術(shù)，證實(shí)了《雷公炮炙論》中記載的酒浸水漂法能夠有效降低補(bǔ)骨脂的肝毒性，并設(shè)計(jì)出最優(yōu)減毒工藝。通過(guò)炮制，補(bǔ)骨脂中燥性成分含量減少，印證了補(bǔ)骨脂炮制理論中炮制的目的是為了解燥毒的科學(xué)性。在補(bǔ)骨脂雷公法炮制過(guò)程中，先通過(guò)酒浸去除部分（異）補(bǔ)骨脂苷和（異）補(bǔ)骨脂素，再通過(guò)水浸促進(jìn)部分毒性成分（異）補(bǔ)骨脂苷的浸出，最后通過(guò)水蒸的方法促進(jìn)殘留的毒性成分（異）補(bǔ)骨脂苷轉(zhuǎn)化為活性成分（異）補(bǔ)骨脂素，同時(shí)促進(jìn)補(bǔ)骨脂酚的受熱揮發(fā)，使得（異）補(bǔ)骨脂素的含量保持在有效劑量范圍內(nèi)，保障了補(bǔ)骨脂用藥的安全性及有效性，最終達(dá)到炮制減毒的目的，見(jiàn)圖2。

圖2 補(bǔ)骨脂雷公炮制法減毒機(jī)制Fig.2 Attenuation mechanism of Psoralea corylifolia by“Leigong processing method”

補(bǔ)骨脂作為溫腎助陽(yáng)的傳統(tǒng)中藥，在臨床上應(yīng)用廣泛。補(bǔ)骨脂生品毒性較強(qiáng)，主要表現(xiàn)為慢性肝損傷，也有研究發(fā)現(xiàn)其中的單萜酚類(lèi)成分補(bǔ)骨脂酚能夠造成腎臟損傷。江芳等[64]發(fā)現(xiàn)，補(bǔ)骨脂酚能促進(jìn)HK-2細(xì)胞的凋亡、壞死，造成細(xì)胞膜脫落，且呈劑量和時(shí)間依賴(lài)性，判斷補(bǔ)骨脂酚能夠抑制腎臟細(xì)胞DNA的合成及有絲分裂，或直接破壞細(xì)胞膜，進(jìn)而引起細(xì)胞凋亡，直接造成腎臟的損傷。補(bǔ)骨脂酚在補(bǔ)骨脂中含量較高，約占整體成分的4%[65]，但其在體內(nèi)溶解度較低，生物利用度較差[66]。張玉順等[67]使用補(bǔ)骨脂酚（相當(dāng)于生藥量18.75、37.5、75 g/kg）連續(xù)灌胃昆明小鼠7、14、21和28 d后，出現(xiàn)不同程度腎臟病理性損害，且僅在小鼠中發(fā)現(xiàn)，在狗的研究中未見(jiàn)相同結(jié)果。此外，給予昆明小鼠連續(xù)灌胃21 d補(bǔ)骨脂不同炮制品水煎浸膏5 g/kg（補(bǔ)骨脂生藥量為臨床用量的25倍），發(fā)現(xiàn)腎小球毛細(xì)血管叢的內(nèi)皮細(xì)胞及間質(zhì)細(xì)胞核增大[9]。在腎毒性的實(shí)驗(yàn)中，補(bǔ)骨脂酚的使用劑量均遠(yuǎn)高于《中國(guó)藥典》規(guī)定的用藥劑量范圍（6～10 g），在常規(guī)劑量下尚未見(jiàn)有腎毒性報(bào)道，推測(cè)補(bǔ)骨脂酚的腎毒性可能與其高給藥量有關(guān)[68]，臨床上也未見(jiàn)補(bǔ)骨脂造成腎臟損傷的報(bào)道。

雷公法是傳統(tǒng)的補(bǔ)骨脂炮制方法，炮制后補(bǔ)骨脂毒性明顯降低，其炮制減毒的機(jī)制與主要毒性成分（異）補(bǔ)骨脂苷的含量下降有關(guān)。目前，對(duì)于補(bǔ)骨脂炮制減毒的研究仍存在許多問(wèn)題。首先，對(duì)于補(bǔ)骨脂中毒性成分的研究仍需進(jìn)一步完善；其次，在炮制過(guò)程中，不同炮制步驟如酒浸、水浸及水蒸等對(duì)補(bǔ)骨脂中成分的影響仍有待研究，明確各炮制步驟對(duì)補(bǔ)骨脂成分的影響，有利于為補(bǔ)骨脂炮制工藝的優(yōu)化提供指導(dǎo)。筆者闡述了補(bǔ)骨脂毒性及相關(guān)成分，對(duì)雷公炮制法減毒的科學(xué)內(nèi)涵進(jìn)行探究，為補(bǔ)骨脂炮制減毒的研究提供科學(xué)依據(jù)。