哺乳期與非哺乳期乳腺炎患者乳腺膿液分離菌的分布及耐藥性分析

張琴

摘要：目的? 了解哺乳期及非哺乳期乳腺炎患者乳腺膿液的分離菌分布特征及耐藥性，為臨床合理用藥提供實驗室依據(jù)。方法? 收集2017年1月～2018年12月我院哺乳期及非哺乳期乳腺炎患者（包括門診及住院患者）送檢膿液標本2524例，分離細菌采用VITEK 2 Compact 全自動微生物鑒定系統(tǒng)進行菌種鑒定及藥敏試驗，分析哺乳期組及非哺乳期組檢出細菌的分布及藥物敏感性。結(jié)果? 所有標本分離出726株細菌，哺乳期乳腺炎患者分離出586株細菌，其中金黃色葡萄球菌495株（84.47%）居第一位，其次為表皮葡萄球菌52株（8.87%）;非哺乳期乳腺炎患者分離出140株細菌，其中金黃色葡萄球菌59株（42.14%）居第一位，其次是kroppenstedtii.棒狀桿菌53株（37.86%）。哺乳期患者金黃色葡萄球菌檢出比例高于非哺乳期患者（P<0.05）;非哺乳期患者kroppenstedtii.棒狀桿菌檢出比例高于哺乳期患者（P<0.05）;哺乳期乳腺炎患者乳腺膿液耐甲氧西林金黃色葡萄球菌（Methicillin-resistant staphylococcus aureus，MRSA）檢出率（45.25%）高于非哺乳期乳腺炎患者（30.51%）（P<0.05）;哺乳期及非哺乳期乳腺炎患者檢出金黃色葡萄球菌未發(fā)現(xiàn)對萬古霉素、利福平、利奈唑胺、替加環(huán)素、奎奴普丁/達福普耐藥的菌株;對喹諾酮類藥物及慶大霉素、復方新諾明耐藥率<15.50%;對青霉素耐藥率>82.93%。哺乳期及非哺乳期檢出的MRSA對所檢測的抗菌藥物耐藥率比較，差異無統(tǒng)計學意義（P>0.05）。哺乳期檢出的MSSA對復方新諾明的耐藥率（15.50%）高于非哺乳期檢出的MSSA（2.44%）（P<0.05）。結(jié)論? 我院哺乳期及非哺乳期乳腺炎患者膿汁分離菌以金黃色葡萄球菌為主。kroppenstedtii.棒狀桿菌主要分離自非哺乳期乳腺炎患者，哺乳期乳腺炎患者極少檢出。對金黃色葡萄球菌感染首選萬古霉素、利奈唑烷、替加環(huán)素、慶大霉素、利福平及奎奴普丁/達福普汀。

關(guān)鍵詞：乳腺炎;菌群分布;耐藥性;哺乳期;非哺乳期

Abstract：Objective? To understand the distribution characteristics and drug resistance of isolates from breast pus in breast-feeding and non-lactating patients with mastitis， and to provide laboratory evidence for clinical rational drug use.Methods? From January 2017 to December 2018， 2524 pus specimens from lactating and non-lactating mastitis patients （including outpatients and inpatients） were collected for examination in our hospital. The bacteria were isolated using the VITEK 2 Compact automatic microbial identification system. Species identification and drug susceptibility test， analysis of the distribution and drug sensitivity of bacteria detected in the lactating group and non-lactating group.Results? 726 strains of bacteria were isolated from all specimens， 586 strains were isolated from patients with lactating mastitis， of which 495 strains of Staphylococcus aureus （84.47%） ranked first， followed by 52 strains of Staphylococcus epidermidis （8.87%）; non-lactating period 140 strains of bacteria were isolated from patients with mastitis， of which 59 strains of Staphylococcus aureus （42.14%） ranked first， followed by 53 strains of Corynebacterium kroppenstedtii （37.86%）. The proportion of Staphylococcus aureus detected in lactating patients was higher than that in non-lactating patients （P<0.05）; The proportion of Corynebacterium kroppenstedtii. detected in non-lactating patients was higher than that in lactating patients （P<0.05）; breast pus in lactating mastitis patients was detected with（Methicillin-resistant staphylococcus aureus MRSA）the rate （45.25%） was higher than that of patients with non-lactating mastitis （30.51%） （P<0.05）; Staphylococcus aureus was detected in patients with lactating and non-lactating mastitis， but no effect on vancomycin， rifampicin and linen was found. Strains resistant to azolamide， tigecycline， quinupristin/dafopril; resistance to quinolones， gentamicin， and compound trimethoprim： <15.50%; resistance to penicillin> 82.93% . There was no statistically significant difference in the resistance rate of MRSA detected during lactation and non-lactation to the detected antimicrobial drugs （P>0.05）. The resistance rate （15.50%） of MSSA detected during lactation to compound trimethoprim was higher than MSSA detected during non-lactation period （2.44%） （P<0.05）.Conclusion? Staphylococcus aureus is the main bacteria isolates from the pus of breast-feeding and non-lactating mastitis patients in our hospital Corynebacterium kroppenstedtii. is mainly isolated from patients with non-lactating mastitis， and it is rarely detected in patients with lactating mastitis. Vancomycin， linezolid， tigecycline， gentamicin， rifampin and quinupristin/dalfopristin are the first choices for Staphylococcus aureus infection.

Key words：Mastitis;Flora distribution;Drug resistance;Lactating period;Non-lactating peri

人類乳腺的泌乳系統(tǒng)易受到細菌的感染，當乳腺導管可與外界相通時，如哺乳、乳頭發(fā)生疾病或外傷時，細菌可進入乳腺導管引起感染。乳腺炎包括哺乳期乳腺炎及非哺乳期乳腺炎，其中哺乳期乳腺炎多發(fā)病急，臨床表現(xiàn)為局部組織紅腫熱痛，也可伴全身發(fā)熱等癥狀，多由于乳汁淤積、排乳不暢致細菌感染引起[1]，研究顯示[2-4]，其主要致病菌為金黃色葡萄球菌;而非哺乳期乳腺炎病種多樣，為慢性炎癥，極易反復發(fā)作，其病因不明，大多認為是自身免疫性疾病[5，6]，但也有報道顯示[7-10]，細菌感染可能與部分病種相關(guān)，如乳腺導管擴張癥、肉芽腫性乳腺炎及乳腺囊性增生病等。本文對我院哺乳期及非哺乳期乳腺炎患者乳腺膿液分離菌進行菌群分布及耐藥性的回顧性分析，并將二者進行比對分析，為臨床醫(yī)生經(jīng)驗性的合理選用抗菌藥物提供實驗室數(shù)據(jù)。

1對象與方法

1.1研究對象? 選取2017年1月～2018年12月成都市婦女兒童中心醫(yī)院因乳腺炎就診的2524例患者（包括門診及住院患者）。根據(jù)是否哺乳分為哺乳期組及非哺乳期組，其中哺乳期組1902例，年齡19歲～43歲，平均年齡29歲;非哺乳期組622例，年齡16歲～66歲，平均年齡30歲。

1.2試劑和儀器? 采用法國梅里埃VITEK 2 Compact全自動微生物鑒定系統(tǒng)進行細菌鑒定及藥敏試驗。細菌鑒定及藥敏卡片采用法國梅里埃產(chǎn)品。

1.3方法? 患者經(jīng)穿刺或手術(shù)留取膿液標本送檢進行細菌培養(yǎng)。標本接種按照《全國臨床檢驗操作規(guī)程》第四版進行，35℃培養(yǎng)18～24 h。分析耐甲氧西林金黃色葡萄球菌（MRSA）和?甲氧西林敏感金黃色葡萄球菌（MSSA）對15種抗菌藥物的耐藥性和敏感性，藥敏結(jié)果判定標準參照美國臨床與實驗室標準化研究所（The Clinical and Laboratory Standards Institute，CLSI）M100-s27th版推薦的折點標準。同一患者重復分離菌株不計入本研究。

1.4統(tǒng)計學方法? 采用WHONET 5.6軟件對細菌的藥敏結(jié)果進行統(tǒng)計分析，采用SPSS 21.0統(tǒng)計軟件進行數(shù)據(jù)分析，計數(shù)資料采用（n）和（%）表示，比較采用？字2檢驗，P<0.05為差異有統(tǒng)計學意義。

2結(jié)果

2.1菌群分布? 共分離出菌株726株，包括9個菌屬22個菌種。哺乳期乳腺炎患者乳腺膿腫分離出革蘭陽性菌586株（99.49%），革蘭陰性菌3株（0.51%），其中金黃色葡萄球菌占比最高;非哺乳期乳腺炎患者乳腺膿腫分離出革蘭陽性菌132株（96.43%），革蘭陰性菌5株（3.57%），其中金黃色葡萄球菌占比最高。哺乳期患者金黃色葡萄球菌檢出比例高于非哺乳期患者，Kroppenstedtii.棒狀桿菌檢出比例低于非哺乳期患者，差異有統(tǒng)計學意義（P<0.05），見表1。

2.2藥敏結(jié)果分析? 哺乳期乳腺炎患者MRSA、MSSA檢出率高于非哺乳期患者，差異有統(tǒng)計學意義（P<0.05）。哺乳期及非哺乳期乳腺炎患者檢出的金黃色葡萄球菌未發(fā)現(xiàn)對萬古霉素、利福平、利奈唑胺、替加環(huán)素、奎奴普丁/達福普汀耐藥的菌株。哺乳期及非哺乳期乳腺炎患者檢出的MRSA對青霉素未發(fā)現(xiàn)敏感株;MSSA對青霉素的耐藥率>82.93%。哺乳期及非哺乳期乳腺炎患者檢出的MRSA及MSSA對喹諾酮類藥物及慶大霉素、復方新諾明對金黃色葡萄球菌耐藥率較低。哺乳期檢出的MSSA對復方新諾明的耐藥率高于非哺乳期，差異有統(tǒng)計學意義（P<0.05），見表2。

3討論

本研究結(jié)果顯示，我院乳腺炎患者膿液分離出的菌株呈現(xiàn)多樣性，包括9個菌屬，22個菌種。哺乳期及非哺乳期乳腺炎患者檢出菌都是革蘭陽性菌占比最高，革蘭陰性菌極少檢出，與國內(nèi)相關(guān)報道相似[2，3]。我院哺乳期及非哺乳期乳腺炎患者主要檢出菌為金黃色葡萄球菌，與周艷敏等[3]報道一致，其統(tǒng)計的哺乳期與非哺乳期患者乳腺膿腫的檢出菌第1位均為金黃色葡萄球菌。我院哺乳期及非哺乳期乳腺炎患者乳腺膿腫檢出菌的比較結(jié)果來看，哺乳期乳腺炎患者乳腺膿腫檢出的金黃色葡萄球菌占絕對優(yōu)勢（84.47%），其余檢出菌的比例較低，與非哺乳期乳腺炎患者乳腺膿腫的檢出菌與哺乳期患者相比，相同的是金黃色葡萄球菌占比最高（42.14%），不同的是Kroppenstedtii.棒狀桿菌的檢出率（37.86%）高于哺乳期患者，而在周艷敏等[3]報道中未見此菌，但在王業(yè)勝等[11]對華南地區(qū)12例肉芽腫性小葉性乳腺炎的患者膿液進行細菌培養(yǎng)及分子鑒定中發(fā)現(xiàn)2例培養(yǎng)陽性菌株，均鑒定為Kroppenstedtii.棒狀桿菌。國外也有相關(guān)報道，Tauch A等[12]統(tǒng)計了1998～2015年Kroppenstedtii.棒狀桿菌的相關(guān)報道，發(fā)現(xiàn)大部分Kroppenstedtii.棒狀桿菌均由女性乳房分離出，提示Kroppenstedtii.棒狀桿菌可能與肉芽腫性小葉性乳腺炎的發(fā)生密切聯(lián)系。Kroppenstedtii.棒狀桿菌為革蘭陽性桿菌，具有親脂性的生活方式。目前報道大部分Kroppenstedtii.棒狀桿菌自女性乳房分離出，但其在疾病中的致病機理尚不明確[12]。有研究在乳腺組織切片中發(fā)現(xiàn)Kroppenstedtii.棒狀桿菌位于可能富含脂質(zhì)的空泡中，也有研究推測親脂性可能是Kroppenstedtii.棒狀桿菌致病的主要特征，乳房富含脂類可能為Kroppenstedtii.棒狀桿菌提供了生長的有利條件[13，14]。

此外，本研究中哺乳期乳腺炎患者的MRSA檢出率為45.25%，高于非哺乳期乳腺炎的30.51%，差異有統(tǒng)計學意義（P<0.05）。哺乳期及非哺乳期患者檢出金黃色葡萄球菌均未檢出對萬古霉素、利奈唑胺、替加環(huán)素、利福平、奎奴普丁/達福普汀的耐藥株。哺乳期及非哺乳期檢出的MRSA，根據(jù)CLSI規(guī)則，MRSA被認為對所有β-內(nèi)酰胺類藥物耐藥，因此青霉素不能作為治療用藥，且其對所檢測的抗菌藥物耐藥率比較，差異無統(tǒng)計學意義（P>0.05）。哺乳期及非哺乳期檢出的MRSA，除前述未檢出耐藥株的抗菌藥物，其對喹諾酮類藥物以及慶大霉素、復方新諾明耐藥率也較低。哺乳期檢出的MSSA對復方新諾明的耐藥率（15.50%）高于非哺乳期（2.44%），差異有統(tǒng)計學意義（P<0.05），其它所測抗菌藥物對哺乳期及非哺乳期檢出的MSSA的耐藥率比較，差異無統(tǒng)計學意義（P>0.05）;此外，哺乳期及非哺乳期檢出MSSA對青霉素耐藥率為87.08%、82.93%，耐藥率高，因此其也不建議作為治療的首選用藥。哺乳期及非哺乳期檢出的MSSA除對前述未檢出耐藥株的抗菌藥物敏感高，也對喹諾酮類藥物及慶大霉素、苯唑西林、復方新諾明、克林霉素、四環(huán)素的耐藥率低。哺乳期檢出的MRSA及MSSA對抗菌藥物的耐藥率比較中，MRSA對青霉素、苯唑西林、克林霉素、紅霉素、四環(huán)素耐藥率高于MSSA，差異有統(tǒng)計學意義（P<0.05）;MRSA對慶大霉素、復方新諾明耐藥率低于MSSA，差異有統(tǒng)計學意義（P<0.05）。非哺乳期檢出的MRSA及MSSA對抗菌藥物的耐藥率比較中，MRSA對苯唑西林、克林霉素、紅霉素、四環(huán)素耐藥率高于MSSA，差異有統(tǒng)計學意義（P<0.05）。上述結(jié)果提示哺乳期及非哺乳期患者檢出MASA對抗菌藥物的耐藥率與MSSA對抗菌藥物的耐藥率相比，部分藥物耐藥率差異較大。哺乳期及非哺乳期患者檢出MASA對復方新諾明的耐藥率有明顯差異。哺乳期及非哺乳期患者檢出MSSA對抗菌藥物的耐藥率無明顯差異。

綜上所述，哺乳期及非哺乳期患者檢出菌都以金黃色葡萄球菌為主，主要差異為非哺乳期患者檢出的Kroppenstedtii.棒狀桿菌比例高于哺乳期患者?？咕幬锼幟艚y(tǒng)計結(jié)果中萬古霉素、利福平、利奈唑胺、替加環(huán)素、奎奴普丁/達福普汀對金黃色葡萄球菌抑菌作用較強，我院哺乳期及非哺乳期乳腺炎患者膿液標本中分離的金黃色葡萄球菌未發(fā)現(xiàn)上述抗菌藥物的耐藥株。哺乳期患者及非哺乳期患者部分抗菌藥物的敏感性存在差異，治療中應參照藥物敏感性結(jié)果合理使用抗菌藥物，避免濫用抗菌藥物的現(xiàn)象。

參考文獻：

[1]寧平，劉澤宇，湯沈力，等.哺乳期乳腺炎綜合診治的研究進展[J].中華乳腺病雜志（電子版），2019，13（2）：121-123.

[2]賈忠蘭，許麗風，畢福玲.乳腺膿腫穿刺液標本病原菌分布及耐藥性分析[J].中國微生態(tài)學雜志，2016，28（12）：1437-1439.

[3]周艷敏，周艷麗，張雪芹，等.哺乳期與非哺乳期患者乳腺膿腫病原菌分布及耐藥性分析[J].中華醫(yī)院感染學雜志，2017，27（16）：3779-3782.

[4]張景輝，葉秋英，張經(jīng)緯，等.100例乳腺炎癥性疾病的細菌培養(yǎng)結(jié)果分析[J].重慶醫(yī)學，2019，48（4）：681-685.

[5]張超杰，孔成.非哺乳期乳腺炎的免疫學研究進展[J].大連醫(yī)科大學報，2014，36（4）：307-313.

[6]Durur-Subasi I.Diagnostic and Interventional Radiology in Idiopathic Granulomatous Mastitis[J].Eurasian J Med，2019，51（3）：293-297.

[7]Le Fleche-Mateos A，Berthet N，Lomprez F，et al.Recurrent breast abscesses due to corynebacterium kroppenstedtii，a human pathogen uncommon in caucasian women[J].Case Rep Infect Dis，2012（2012）：120-968.

[8]肖敏，李三榮，周戌.特發(fā)性肉芽腫性乳腺炎發(fā)病的危險因素分析[J].中華乳腺病雜志（電子版），2019，13（5）：277-280.

[9]屠道遠，甄林林，李振等.非哺乳期乳腺炎病因?qū)W研究進展[J].中華乳腺病雜志（電子版），2018，12（1）：55-59.

[10]Rahal RM，Júnior RF，Reis C，et al.Prevalence of bacteria in the nipple discharge of patients with duct ectasia[J].Int J Clin Pract，2005，59（9）：1045-1050.

[11]王業(yè)勝，黃松音，張杰豪，等.華南地區(qū)肉芽腫性小葉性乳腺炎患者的細菌鑒定與分析[J].廣東醫(yī)學，2016，37（3）：373-376.

[12]Tauch A，F(xiàn)ernández-Natal I，Soriano F.A microbiological and clinical review on Corynebacterium kroppenstedtii[J].Int J Infect Dis，2016（48）：33-39.

[13]Tauch A，Schneider J，Szczepanowski R，et al.Ultrafast pyrosequencing of Corynebacterium kroppenstedtii DSM44385 revealed insights into the physiology of a lipophilic corynebacterium that lacks mycolic acids[J].J Biotechnol，2008（136）：22-30.

[14]Paviour S，Musaad S，Roberts S，et al.Corynebacterium spcies isolated from patients with mastitis[J].Clin Infect Dis，2002（35）：1434-1440.

收稿日期：2020-07-10;修回日期：2020-07-20

編輯/劉歡