一種保健功能青紅酒30天喂養(yǎng)試驗(yàn)研究

朱賁峰 趙立 闞永軍 胡娟

【摘?要】?目的：大鼠灌胃黃精青紅酒進(jìn)行30天喂養(yǎng)試驗(yàn)，初步評價(jià)其安全性。方法：黃精青紅酒以3.33mL/kg·bw/d、7.23mL/kg·bw/d、11.12mL/kg·bw/d（相當(dāng)于人體推薦量的30倍、65倍、100倍）的劑量給予大鼠30天，測定血液學(xué)指標(biāo)和血液生化指標(biāo)。結(jié)果：受試動(dòng)物一般情況良好，體重?zé)o異常改變;血液學(xué)指標(biāo)及生化指標(biāo)結(jié)果顯示，各項(xiàng)指標(biāo)均在正常值范圍內(nèi)。結(jié)論：30天喂養(yǎng)試驗(yàn)，給予動(dòng)物人體推薦劑量100倍的黃精青紅酒，未觀察到有害作用。

【關(guān)鍵詞】?青紅酒;30天喂養(yǎng)試驗(yàn);安全性評價(jià)

【中圖分類號】R285.5?【文獻(xiàn)標(biāo)志碼】 A?【文章編號】1007-8517（2020）6-0004-03

Abstract：Objective The safety of green red wine was preliminarily evaluated by feeding the rats with green red wine for 30 days.Methods Solomons seal green red wine was given 3.33mL/ kg ·bw / d， 7.23mL / kg ·bw / d， 11.12mL / kg ·bw / d （equivalent to 30 times， 65 times， 100 times of the recommended dose of human body） for 30 days. Hematological indexes and blood biochemical indexes were measured.Results The tested animals were generally in good condition and there was no abnormal change in body weight， and the results of hematological and biochemical indexes showed that all the indexes were in the normal range. Conclusion In the 30-day feeding experiment， 100 times the recommended dose of yellow and green red wine was given to animals， and no harmful effect was observed.

Key?words：Green Red Wine; 30-day feeding test;Safety Evaluation

藥酒在我國有著悠久的歷史，以酒為載體，利用酒的辛溫行散之性，以達(dá)到通經(jīng)活絡(luò)、暢通血脈、活血散瘀、祛風(fēng)散寒、健脾胃、提精神，以達(dá)引藥上行、助藥物之力的功效。保健酒不同于藥酒，其特點(diǎn)以健體、養(yǎng)生為目的，在滿足消費(fèi)者嗜好的同時(shí)對身體狀態(tài)進(jìn)行調(diào)節(jié)。藥酒用于對疾病的治療，而保健酒則重在對疾病的預(yù)防[1]。

以米粉、米糠、白粉土為基礎(chǔ)配方，加入茯苓、當(dāng)歸、白芷、丁香、柴胡、藿香等數(shù)十味中藥制成藥白曲，并與黃精共同發(fā)酵，研制一款黃精青紅酒。其富含粗多糖和總黃酮等功效成分[2]，具有緩解體力疲勞[3]、輔助降血糖之功效。

本文依據(jù)保健食品檢驗(yàn)與評價(jià)技術(shù)規(guī)范，進(jìn)行30天喂養(yǎng)試驗(yàn)，通過檢測白細(xì)胞計(jì)數(shù)、 紅細(xì)胞計(jì)數(shù)、血紅蛋白、中性粒細(xì)胞等血液學(xué)指標(biāo)，觀察黃精青紅酒對大鼠造血系統(tǒng)和功能的影響;通過檢測轉(zhuǎn)氨酶、白蛋白、尿素氮、肌酐、血脂、血糖等血液生化指標(biāo)，觀察黃精青紅酒對大鼠肝、腎損傷及代謝系統(tǒng)的影響。對產(chǎn)品進(jìn)行安全性評價(jià)[4]。

1?材料和方法

1.1?樣品?黃精青紅酒，棕黃色液體，澄清透明、無肉眼可見的雜質(zhì)、久置后允許有少量沉淀物，成品酒精濃度（14±1）% vol。樣品常溫保存，樣品標(biāo)示保質(zhì)期24個(gè)月，成人人體推薦劑量100mL/人/日（以60kg體重計(jì)），因人體推薦劑量大，本實(shí)驗(yàn)室使用為60℃減壓濃縮方法，將受試樣品濃縮為15倍濃縮液作為本次實(shí)驗(yàn)受試樣品，折算成成人人體推薦劑量為6.67mL/人/日。

1.2?實(shí)驗(yàn)動(dòng)物?SPF離乳SD大鼠80只，雌雄各半。按體重隨機(jī)分為對照組、高、中、低劑量共4組，每組20只，雌、雄各半。雌性動(dòng)物初始體重為70～85g;雄性動(dòng)物初始體重為74～90g。

1.3?劑量選擇與受試物給予方式?設(shè)3.33、7.23、11.12mL/（kg·bw）（低、中、高）三個(gè)劑量組，分別相當(dāng)于人體推薦劑量的30、65、100倍。另設(shè)一個(gè)溶劑對照為0mL/kg·bw。15倍濃縮液用50%（v/v）的酒基配制，調(diào)整各劑量組乙醇濃度最終為15%（v/v）。高劑量組用15倍濃縮液11.12mL+50%（v/v）的酒基6mL+無菌水2.88mL，中劑量組用15倍濃縮液7.23mL+50%（v/v）的酒基6mL+無菌水6.77mL，低劑量組用15倍濃縮液3.33mL+50%（v/v）的酒基6mL+無菌水10.67mL，溶劑對照組用50%（v/v）的酒基6mL+無菌水14mL，灌胃量為20mL/ （kg·bw）。

1.4?主要儀器?電子天平、離心機(jī)、全自動(dòng)生化分析儀、血液分析儀等。

2?試驗(yàn)方法

各組動(dòng)物給予基礎(chǔ)飼料，供試品連續(xù)灌胃30天后，禁食隔夜，逐只稱重，10%水合氯醛按3.5mL/（kg·bw）腹腔注射麻醉，腹主動(dòng)脈取血測其血液學(xué)指標(biāo)和血液生化指標(biāo)。

2.1?一般情況觀察?每天觀察并記錄動(dòng)物的一般表現(xiàn)、行為、中毒表現(xiàn)和死亡情況。

2.2?體重?每周稱1次體重，觀察每周體重變化情況。

2.3?血液學(xué)指標(biāo)?取大鼠全血用血液分析儀測定其血紅蛋白含量、紅細(xì)胞計(jì)數(shù)、白細(xì)胞計(jì)數(shù)及其分類等。

2.4?血液生化指標(biāo)?取大鼠血清，用全自動(dòng)生化分析儀測定血清谷丙轉(zhuǎn)氨酶、谷草轉(zhuǎn)氨酶、總蛋白、白蛋白、總膽固醇、尿素氮、肌酐、血糖、甘油三酯等。

2.5?統(tǒng)計(jì)分析?用SPSS軟件對各實(shí)驗(yàn)原始數(shù)據(jù)進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析。各項(xiàng)指標(biāo)進(jìn)行方差齊性檢驗(yàn)，不滿足方差齊要求，用秩和檢驗(yàn)進(jìn)行統(tǒng)計(jì)處理;用單因素方差分析方法中多個(gè)試驗(yàn)組與一個(gè)對照組間均數(shù)的兩兩比較方法進(jìn)行統(tǒng)計(jì)處理，P﹤0.05差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

3?結(jié)果與討論

3.1?一般觀察?各組動(dòng)物一般表現(xiàn)和行為均未見明顯異常、無中毒表現(xiàn)、無死亡。

3.2?黃精青紅酒對大鼠體重的影響?雌、雄性大鼠第0天體重各劑量組與0mL/（kg·bw）/d組比較，差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P>0.05），即試驗(yàn)前大鼠的體重在各組間較為均衡。

3.3?黃精青紅酒對大鼠血液學(xué)指標(biāo)的影響?大鼠灌胃不同劑量的黃精青紅酒30天，測定血液紅細(xì)胞計(jì)數(shù)、血紅蛋白水平、白細(xì)胞計(jì)數(shù)及其分類等指標(biāo)。各項(xiàng)指標(biāo)進(jìn)行方差齊性檢驗(yàn)，均滿足方差齊要求，用單因素方差分析方法中多個(gè)試驗(yàn)組與一個(gè)對照組間均數(shù)的兩兩比較方法進(jìn)行統(tǒng)計(jì)處理。由表1、表2可見，各項(xiàng)指標(biāo)各劑量組與空白對照組比較，差異均無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P>0.05）。

3.4?黃精青紅酒對大鼠血液生化指標(biāo)的影響?大鼠灌胃不同劑量的黃精青紅酒30天，測定血清谷丙轉(zhuǎn)氨酶、谷草轉(zhuǎn)氨酶、總蛋白、白蛋白、總膽固醇、甘油三酯、尿素氮、肌酐及血糖的水平。各項(xiàng)指標(biāo)進(jìn)行方差齊性檢驗(yàn)，雌性大鼠谷草轉(zhuǎn)氨酶不滿足方差齊要求，用秩和檢驗(yàn)進(jìn)行統(tǒng)計(jì)處理;其它指標(biāo)均滿足方差齊要求，用單因素方差分析方法中多個(gè)試驗(yàn)組與一個(gè)對照組間均數(shù)的兩兩比較方法進(jìn)行統(tǒng)計(jì)處理。由表3、表4可見，雄性大鼠7.23mL/kg·bw/d組總膽固醇低于空白對照組 （P<0.05）。此項(xiàng)雖有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異，但數(shù)值在正常值范圍內(nèi)，且無劑量-反應(yīng)關(guān)系，不認(rèn)為具有不良生物學(xué)意義。其它各劑量組各項(xiàng)血液生化指標(biāo)與空白對照組比較，差異均無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P>0.05）。

4?結(jié)論

黃精青紅酒以3.33mL/（kg·bw）/d、7.23mL/（kg·bw）/d、11.12mL/（kg·bw）/d（相當(dāng)于人體推薦量的30倍、65倍、100倍）的劑量給予大鼠30天，受試動(dòng)物一般情況良好，體重?zé)o異常改變;血液學(xué)指標(biāo)及生化指標(biāo)結(jié)果顯示，各項(xiàng)指標(biāo)均在正常值范圍內(nèi)。30天喂養(yǎng)試驗(yàn)，給予動(dòng)物人體推薦劑量100倍的黃精青紅酒，未觀察到有害作用。

參考文獻(xiàn)

[1]周美蘭，胡娟，陳炬烽.福建省中醫(yī)藥傳統(tǒng)知識項(xiàng)目選編[M].福州：福建省科學(xué)技術(shù)出版社，2018：1.

[2]李小沛，張亞玉，趙立春，等.黃精的化學(xué)成分和藥理作用研究進(jìn)展[J].植物學(xué)研究，2017，6（5）：255-261.

[3]周美蘭，許景，闞永軍，等.一種閩產(chǎn)青紅酒功效成分的測定[J].中國民族民間醫(yī)藥，2019.

[4]中華人民共和國衛(wèi)生部.保健食品檢驗(yàn)與評價(jià)技術(shù)規(guī)范[S].2003：223.

（收稿日期：2019-12-25?編輯：劉斌）