HPV-DNA結(jié)合TCT檢查篩查宮頸癌的臨床意義

湯海華 區(qū)佩雯

【摘要】目的：探討宮頸癌人乳頭瘤病毒（HPV）-DNA基因分型檢測(cè)結(jié)合液基薄層細(xì)胞學(xué)（TCT）檢查篩查宮頸癌的臨床意義。方法：本研究納入2016年1月～2019年12月間在我院進(jìn)行宮頸癌篩查的疑似宮頸病變者206例作為研究對(duì)象，所有患者均行宮頸病理學(xué)活檢、HPV-DNA基因分型檢測(cè)、TCT檢測(cè)，分析診斷結(jié)果。結(jié)果：TCT聯(lián)合HPV-DNA分型檢測(cè)的靈敏度、特異度、陽(yáng)性預(yù)測(cè)值及陰性預(yù)測(cè)值均明顯高于TCT檢測(cè)、HPV-DNA分型檢測(cè)單一檢查結(jié)果，差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05）。結(jié)論：TCT聯(lián)合HPV-DNA分型檢測(cè)診斷早期宮頸癌準(zhǔn)確率較高，能夠?yàn)獒t(yī)務(wù)人員治療提供可靠參考依據(jù)，可在臨床進(jìn)一步推廣。

【關(guān)鍵詞】宮頸癌;人乳頭瘤病毒;HPV-DNA熒光定量分析;液基薄層細(xì)胞學(xué)檢查

[中圖分類(lèi)號(hào)]R737.33 [文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼]A [文章編號(hào)]2096-5249（2020）14-0-02

宮頸癌是世界上居于第二位的婦科惡性腫瘤，僅次于乳腺癌，患者在早期無(wú)典型的臨床表現(xiàn)，難以及時(shí)發(fā)現(xiàn)，嚴(yán)重危害女性的身心健康和生活質(zhì)量。據(jù)相關(guān)流行病學(xué)研究發(fā)現(xiàn)，在發(fā)展中國(guó)家中，宮頸癌的發(fā)病率和致死率明顯高于其他地區(qū)的發(fā)病率，且其發(fā)病特點(diǎn)有趨向于年輕化的趨勢(shì)[1]。我國(guó)作為典型的發(fā)展中國(guó)家，宮頸癌一級(jí)預(yù)防相較于國(guó)外較為落后，多數(shù)患者僅在出現(xiàn)明顯癥狀后才會(huì)到院就醫(yī)，錯(cuò)過(guò)最佳治療時(shí)機(jī)，致使病情加重，手術(shù)范圍擴(kuò)大，對(duì)患者身體造成較大損傷，即使采用化療、放療手段仍會(huì)加大患者治療痛苦，嚴(yán)重者甚至危及生命。因此采取何種有效的篩查和診斷方法以提高宮頸癌的診斷準(zhǔn)確性，是當(dāng)前婦科臨床關(guān)注的重點(diǎn)問(wèn)題。人乳頭瘤病毒（H PV）感染是導(dǎo)致宮頸癌前病變及宮頸癌的主要致病因素[2]。HPV基因分型檢測(cè)是目前臨床篩查宮頸癌的一項(xiàng)較好的技術(shù)，而液基薄層細(xì)胞學(xué)檢查（TCT）也是宮頸癌篩查的常用有效方法之一，但二者的診斷效果及經(jīng)濟(jì)成本各異?；诖吮狙芯縏CT聯(lián)合HPV-DNA分型檢測(cè)診斷早期宮頸癌的價(jià)值作如下探討。

1 資料與方法

1.1一般資料 本次研究納入在我院進(jìn)行宮頸癌篩查的疑似宮頸病變者206例作為研究對(duì)象，病例選取的起始時(shí)間為2016年1月，截止時(shí)間為2019年12月，患者的年齡區(qū)間在35～75歲，平均年齡為（45.50±5.45）歲;產(chǎn)次0～4次，平均（1.89±0.54）次。所有患者行宮頸病理學(xué)活檢、HPV-DNA基因分型檢測(cè)、TCT檢測(cè)，以宮頸病理學(xué)活檢為檢驗(yàn)標(biāo)準(zhǔn)，HPV-DNA基因分型檢測(cè)、TCT檢測(cè)作為單一組，以HPV-DNA基因分型檢測(cè)、TCT檢測(cè)聯(lián)合檢測(cè)作為聯(lián)合組。

納入標(biāo)準(zhǔn)：所有研究對(duì)象均已婚，臨床出現(xiàn)宮頸糜爛、宮頸息肉、白帶增多、陰道分泌物增加等癥狀;均自愿簽署知情同意書(shū)。排除標(biāo)準(zhǔn)：合并心、肝、腎等重要器官功能障礙者;合并宮頸上皮病變史、宮頸手術(shù)或子宮切除史者;精神狀態(tài)、認(rèn)知功能異常，無(wú)法正常配合實(shí)驗(yàn)者。

1.2方法 宮頸病理學(xué)活檢：在陰道鏡下在宮頸3、6、9、12點(diǎn)及可疑區(qū)域采集細(xì)胞樣本進(jìn)行多點(diǎn)活檢，并將樣本送至實(shí)驗(yàn)室進(jìn)行病理組織學(xué)活檢。診斷標(biāo)準(zhǔn)：以宮頸組織病理學(xué)檢查結(jié)果發(fā)現(xiàn)有惡性病變。

TCT檢測(cè)：所有患者均避開(kāi)月經(jīng)期，近幾天無(wú)陰道沖洗、未用藥，由婦產(chǎn)科醫(yī)生用專用宮頸刷采集患者樣本，取宮頸管口鱗柱交界部位具有可疑病變區(qū)域脫落的細(xì)胞，放置于專用的液基細(xì)胞保存液，及時(shí)送檢，采用巴氏染色、晾干封片，用生物安全柜、液基薄層細(xì)胞制片分析系統(tǒng)進(jìn)行檢測(cè)。診斷標(biāo)準(zhǔn)：子宮頸表面細(xì)胞中存在變異細(xì)胞。

HPV-DNA基因分型檢測(cè)：所有患者均避開(kāi)月經(jīng)期進(jìn)行取樣檢測(cè)，將窺陰器插入患者的陰道中;擴(kuò)開(kāi)陰道，暴露宮頸，采用專用宮頸刷由婦產(chǎn)科醫(yī)生探入宮頸管內(nèi)取樣，在宮頸管內(nèi)旋轉(zhuǎn)5～6圈;將毛刷頭折斷保存于盛有細(xì)胞保存液的無(wú)菌專用樣本收集管中并及時(shí)送檢。采用美國(guó)D igeneg HPV-DNA檢測(cè)系統(tǒng)，TL988Real-fimePCR基因擴(kuò)增儀，臺(tái)式離心機(jī)，用PCR熒光法檢測(cè)HPV-DNA，標(biāo)本的提取、擴(kuò)增、雜交、洗膜及顯色等全過(guò)要嚴(yán)格參照本試劑盒說(shuō)明書(shū)和儀器標(biāo)準(zhǔn)操作規(guī)程進(jìn)行操作。監(jiān)測(cè)結(jié)果在控且“G Lobin位點(diǎn)”與探針均同時(shí)顯色為此實(shí)驗(yàn)結(jié)果的有效條件。診斷標(biāo)準(zhǔn)：HPV-DNA感染高危型。

1.4統(tǒng)計(jì)學(xué)處理 將患者信息輸入Excel表格后進(jìn)行分組。分組數(shù)據(jù)輸入SPSS20.0統(tǒng)計(jì)學(xué)軟件加以處理，定量資料以（_x±s）形式表示，采取t檢查對(duì)組建數(shù)據(jù)進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析;定性資料以n，%進(jìn)行標(biāo)示，采取χ2 檢驗(yàn)進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析;以P小于0.05提示數(shù)據(jù)有差，具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1宮頸病理學(xué)活檢 結(jié)果顯示，在206例LCT檢查確診陰性接觸性出血患者中，宮頸組織病理學(xué)活檢，陽(yáng)性有68例，陰性有138例，早期宮頸癌的診斷率為33.01%（68/206）。

2.2 TCT檢測(cè)、HPV-DNA分型檢測(cè)及TCT聯(lián)合HPV-DNA分型檢測(cè) TCT聯(lián)合HPV-DNA分型檢測(cè)的靈敏度、特異度、陽(yáng)性預(yù)測(cè)值及陰性預(yù)測(cè)值均明顯高于TCT檢測(cè)、HPV-DNA分型檢測(cè)單一檢查結(jié)果，差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05），見(jiàn)表1。

3 討論

宮頸癌是最常見(jiàn)的婦科惡性腫瘤之一，近幾年來(lái)，隨著女性生活壓力的加大以及生育觀念的開(kāi)放等諸多因素影響，其發(fā)病人數(shù)呈現(xiàn)出逐年上升趨勢(shì)，降低女性及其家屬幸福指數(shù)，引起社會(huì)各界的廣泛關(guān)注。由于宮頸癌發(fā)病與進(jìn)程均需經(jīng)歷數(shù)年甚至數(shù)十年，有學(xué)者提出，若在患者發(fā)病初期即給予確診，盡早采取有效治療措施，遏制病情發(fā)展，對(duì)于預(yù)防宮頸癌變具有十分重要的意義。以往臨床上多采用宮頸活檢的方法，但具有檢測(cè)標(biāo)本收集難、檢測(cè)時(shí)間長(zhǎng)的缺陷，假陰性、漏診現(xiàn)象普遍存在，使用范圍具有一定局限性。目前，HPV-DNA基因分型檢測(cè)和TCT檢測(cè)均是臨床上常用的篩查早期宮頸癌的方法。

發(fā)生HPV感染是誘發(fā)宮頸癌的主要危險(xiǎn)因素之一，HPV是一組無(wú)包膜的雙鏈的DAN病毒，具有較高的特異性，會(huì)引起皮膚、黏膜異常增生，并導(dǎo)致多種良惡性病變[3]。目前可通過(guò)HPV-DNA基因分型檢測(cè)測(cè)定高危型HPV病毒，可用于篩查在宮頸癌。同傳統(tǒng)篩查方法對(duì)比，采用DNA熒光定量分析檢測(cè)方法具有操作簡(jiǎn)便、快捷、敏感性高、特異性強(qiáng)等優(yōu)點(diǎn)，不會(huì)對(duì)患者正常組織產(chǎn)生額外危害，患者在完成檢測(cè)后也不會(huì)表現(xiàn)出明顯并發(fā)癥，獲得了醫(yī)護(hù)人員以及患者的廣泛認(rèn)可。因此目前已被廣泛用于HPV基因分型檢測(cè)[4]。同時(shí)該方法比傳統(tǒng)的宮頸癌篩查方法還可更早的發(fā)現(xiàn)宮頸癌前病變，能夠預(yù)防癌癥發(fā)生，有利于早期癌前病變的診斷與治療，能夠降低宮頸癌的發(fā)病率[5]。TCT檢測(cè)技術(shù)是一種經(jīng)美國(guó)FDA認(rèn)證的比較先進(jìn)的宮頸癌篩查方法，在臨床上得到了廣泛的應(yīng)用，其可避免血壓、宮頸黏液對(duì)受檢者宮頸標(biāo)本的干擾，提高其檢測(cè)的在準(zhǔn)確度，在宮頸癌的早診斷、早治療中有較高的應(yīng)用價(jià)值，可為臨床治療提供更為可靠的依據(jù)[6]。但是單獨(dú)使用HPV-DNA熒光定量分析檢測(cè)方法和單獨(dú)的TCT檢測(cè)減法用于診斷宮頸癌及宮頸高度病變均有一定的漏診率，因此臨床考慮可以將兩種方法聯(lián)合應(yīng)用[7]。

通過(guò)聯(lián)合檢查，可以發(fā)揮互補(bǔ)作用，從而提高宮頸癌篩查的準(zhǔn)確率和敏感性，并有效反映出腫瘤的惡性程度及生物學(xué)行為特點(diǎn)，進(jìn)而為臨床的后續(xù)治療提供有效的指導(dǎo)[8]。本組研究發(fā)現(xiàn)，TCT聯(lián)合HPV-DNA分型檢測(cè)的靈敏度、特異度、陽(yáng)性預(yù)測(cè)值及陰性預(yù)測(cè)值均明顯高于TCT檢測(cè)、HPV-DNA分型檢測(cè)單一檢查結(jié)果，差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05）;這一結(jié)果與張秀梅[9]的研究結(jié)果相一致。宮頸癌處于不斷的發(fā)展過(guò)程，在長(zhǎng)期的病變中宮頸細(xì)胞會(huì)發(fā)生形態(tài)變化，因而HPV檢測(cè)比比細(xì)胞學(xué)有較高的檢出率，而將TCT聯(lián)合HPV-DNA分型檢測(cè)用于宮頸癌及癌前病變的篩查中可有效提高檢出率和敏感性，還可預(yù)防宮頸癌的發(fā)生。

綜上可以看出，TCT與HPV-DNA分型檢測(cè)兩種檢查方法已經(jīng)日趨成熟，但是單獨(dú)采用TCT檢測(cè)、HPV-DNA分型檢測(cè)均存在局限性和不足之處，而通過(guò)采取TCT聯(lián)合HPV-DNA分型檢測(cè)可以提高診斷的敏感性、特異性和準(zhǔn)確性，此方法在臨床中有著更高的應(yīng)用價(jià)值。

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