小泛素樣修飾物蛋白酶3 調(diào)控小鼠肺泡Ⅱ型上皮細(xì)胞自噬

朱慧琴，鄒嫣瓊，楊 潔，易 靜，楊 潔

(1. 上海交通大學(xué)醫(yī)學(xué)院生物化學(xué)與分子細(xì)胞生物學(xué)系，上海 200025；2. 上海交通大學(xué)醫(yī)學(xué)院基礎(chǔ)醫(yī)學(xué)公共技術(shù)平臺(tái)，上海 200025)

細(xì)胞自噬（autophagy）是細(xì)胞內(nèi)高度保守的生命活動(dòng)現(xiàn)象之一，是細(xì)胞適應(yīng)環(huán)境變化、維持內(nèi)環(huán)境穩(wěn)定的重要機(jī)制[1]。因自噬程度與應(yīng)激時(shí)細(xì)胞是否能夠適應(yīng)而生存或適應(yīng)不良而死亡的命運(yùn)有關(guān)，故自噬程度的調(diào)控對(duì)細(xì)胞乃至機(jī)體均有重要意義。細(xì)胞自噬程度的控制主要通過在基因轉(zhuǎn)錄、轉(zhuǎn)錄后和翻譯后水平上調(diào)控自噬相關(guān)蛋白的表達(dá)量和相互作用而實(shí)現(xiàn)[2-4]，其中可逆的蛋白質(zhì)翻譯后修飾能夠快速調(diào)控自噬相關(guān)信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)蛋白，因而是重要的自噬調(diào)控方式。目前研究已發(fā)現(xiàn)，磷酸化、泛素化和乙?；揎椩谧允芍芯哂兄匾饔茫》核貥有揎椢铮╯mall ubiquitinlike modifier，SUMO）化修飾在動(dòng)物體內(nèi)是否存在調(diào)控作用的相關(guān)研究報(bào)道較少[5]。

與泛素化修飾類似，SUMO 與底物蛋白質(zhì)的賴氨酸共價(jià)連接的過程被稱為SUM O 化修飾（SUMOylation），SUMO 特異性蛋白酶（SUMOspecific protease，SENP）家族則介導(dǎo)可逆的去SUMO 化修飾（de-SUMOylation），共同影響蛋白質(zhì)的結(jié)構(gòu)、定位及活性[6-8]。本研究組長期關(guān)注SENP 家族的SENP3，發(fā)現(xiàn)其在細(xì)胞應(yīng)激應(yīng)答中具有重要功能[9-13]；研究還發(fā)現(xiàn)，在體外培養(yǎng)細(xì)胞和小鼠體內(nèi)經(jīng)典的營養(yǎng)缺乏或饑餓應(yīng)激可以誘導(dǎo)肝細(xì)胞自噬，且自噬相關(guān)重要蛋白質(zhì)卷曲螺旋狀Myosin 樣Bcl-2 相互作用蛋白1（coiled-coil myosin-like Bcl-2-interacting protein 1，BECN1）發(fā)生了SUMO化修飾，而小鼠肝細(xì)胞中SENP3基因被特異性敲除后SUMO化修飾程度增強(qiáng)并導(dǎo)致自噬水平升高，提示自噬發(fā)生時(shí)SENP3 介導(dǎo)了BECN1的去SUMO化修飾，并且對(duì)自噬程度進(jìn)行精細(xì)調(diào)控[14]。然而，在其他組織中SENP3 是否具有調(diào)控自噬的功能，底物蛋白質(zhì)是什么，目前均不清楚。一些研究初步表明，自噬參與調(diào)節(jié)肺的炎性反應(yīng)，影響肺損傷的程度[15-16]。但因?yàn)閯?dòng)物在體水平的自噬不易被檢測，調(diào)控自噬的研究也很少，故目前對(duì)靜息時(shí)肺組織是否存在自噬，以及饑餓等生理刺激時(shí)自噬是否發(fā)生，肺的上皮細(xì)胞、內(nèi)皮細(xì)胞、間質(zhì)細(xì)胞和炎性細(xì)胞中哪種細(xì)胞類型發(fā)生自噬，SENP3 是否調(diào)控自噬程度等，這些問題均少見報(bào)道。

本研究利用基因敲除雜合子（SENP3+/—）小鼠，比較饑餓后肺組織細(xì)胞自噬水平，以期認(rèn)識(shí)和發(fā)現(xiàn)在體水平的自噬以及SENP3對(duì)自噬的調(diào)節(jié)作用。

1 材料與方法

1.1 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物

SENP3 基因敲除雜合子（SENP3+/－）小鼠由上海交通大學(xué)基礎(chǔ)醫(yī)學(xué)院生物化學(xué)與分子細(xì)胞生物學(xué)系程金科教授惠贈(zèng)。S E N P 3 野生型（SENP3+/+）即背景品系SPF 級(jí)C57BL/6J 小鼠購自上海靈暢生物科技有限公司[S C X K（滬）2018-0003]，飼養(yǎng)于SPF 級(jí)環(huán)境[SYXK（滬 ）2018-0027]。本實(shí)驗(yàn)經(jīng)上海交通大學(xué)醫(yī)學(xué)院動(dòng)物福利倫理委員會(huì)批準(zhǔn)（編號(hào)為A-2019-041）。

1.2 主要試劑與儀器

抗SENP3 抗體、抗微管相關(guān)蛋白1A/1B-輕鏈3（microtubule-associated protein 1A/1B-light chain 3，LC3）抗體、抗SUMO2/3 抗體、抗BECN1 抗體和IgG 抗體均購自美國CST公司；抗β-actin 抗體、氯喹及N- 乙基馬來酰胺（Nethylmaleimide，NEM）均購自美國Sigma 公司；抗表面活性物質(zhì)相關(guān)蛋白C（surfactant protein C，SP-C）抗體購自英國Abcam 公司；辣根過氧化物酶標(biāo)記的二抗購自美國Jackson ImmunoResearch 公司；熒光標(biāo)記二抗購自美國Invitrogen 公司；放射免疫沉淀法（radio immunoprecipitation assay，RIPA）蛋白裂解液購自美國Thermo Fisher 公司。

蛋白質(zhì)免疫印跡（Immunoblotting）裝置購自美國Bio-Rad 公司；透射電子顯微鏡購自日本Hitachi 公司；激光掃描共聚焦顯微鏡購自德國Zeiss 公司。

1.3 建立小鼠自噬誘導(dǎo)及干預(yù)模型

8 周齡雄性SENP3+/+小鼠16 只和SENP3+/-小鼠16 只，分別隨機(jī)分為對(duì)照組、饑餓組、溶酶體抑制劑氯喹組和饑餓合并氯喹組。對(duì)照組為正常飲食；饑餓組小鼠禁食40 h，不斷水[14,17]；氯喹組為腹腔注射氯喹（60 mg/kg）；饑餓合并氯喹處理組為饑餓處理前2 h 腹腔注射氯喹（60 mg/kg），間隔20 h 再注射1次，饑餓時(shí)間為40 h。氯喹可抑制溶酶體功能，用來區(qū)分自噬的發(fā)生或溶酶體降解功能的異常，從而評(píng)估自噬流。上述處理結(jié)束后以脊椎脫臼法處死小鼠，取雙側(cè)肺組織，將肺葉剪開，部分切為小塊，分別置于液氮和固定劑中，準(zhǔn)備用于蛋白質(zhì)檢測、免疫組織化學(xué)染色和電子顯微鏡觀察。

1.4 免疫熒光技術(shù)檢測小鼠肺組織細(xì)胞中SENP3的定位及細(xì)胞自噬

取肺組織，用質(zhì)量分?jǐn)?shù)為4%的多聚甲醛溶液固定，30% 蔗糖溶液脫水，冰凍切片包埋劑（optimal cutting temperature compound，OCT）包埋，冷凍切片機(jī)切片，厚度為5 μ m。封閉1 h，加入抗SENP3 抗體（工作液體積稀釋比例為1 ∶100）以及抗SP-C 抗體（稀釋比例為1∶200），4 ℃孵育過夜；然后加入熒光標(biāo)記二抗（稀釋比例為1∶1000），37 ℃孵育1 h。漂洗后用4',6- 二脒基-2- 苯基吲哚（4',6-diamidino-2-phenylindole，DAPI）（稀釋比例為1∶2000）對(duì)比染色，抗淬滅劑封固，激光掃描共聚焦顯微鏡下拍攝，通過ZEN圖像成像軟件輸出圖片。

應(yīng)用LC3 免疫熒光染色法檢測細(xì)胞自噬，肺組織冰凍切片用LC3 抗體（稀釋比例為1∶100）孵育，4 ℃過夜，其他步驟同前。LC3-Ⅰ彌散分布于細(xì)胞質(zhì)，而 LC3-Ⅱ形成后分布于自噬小體膜或自噬溶酶體膜，呈現(xiàn)為斑點(diǎn)狀（dots），故以點(diǎn)狀LC3 的出現(xiàn)指示自噬的發(fā)生。

1.5 免疫印跡法檢測小鼠肺組織中相關(guān)蛋白表達(dá)水平和細(xì)胞自噬水平

取0.1 g 肺組織，加入含有蛋白酶抑制劑的RIPA 蛋白裂解液，研磨并超聲提取肺組織蛋白，并用BCA 試劑盒檢測蛋白質(zhì)濃度。按每孔20 μg 上樣，通過十二烷基硫酸鈉-聚丙烯酰胺凝膠電泳分離蛋白，并轉(zhuǎn)移至聚偏二氟乙烯膜，脫脂奶粉封閉1 h。分別加入抗SEN P3、LC3、BECN1 和SUMO2/3 抗體（稀釋比例為1∶1000），以及抗β-actin 抗體（稀釋比例為1∶5000），孵育過夜，再加入二抗（稀釋比例為1∶5000），37 ℃孵育1 h，試劑盒顯影，化學(xué)發(fā)光成像儀檢測并輸出圖片。

因細(xì)胞自噬時(shí)LC3- Ⅰ與磷脂酰乙醇胺（phosphatidyl ethanolamine，PE）結(jié)合后轉(zhuǎn)變?yōu)長C3-Ⅱ ，故應(yīng)用抗LC3 抗體進(jìn)行免疫印跡可檢測細(xì)胞自噬。LC3-Ⅰ轉(zhuǎn)化為LC3-Ⅱ提示細(xì)胞自噬啟動(dòng)，LC3- Ⅱ的量反映自噬水平。

1.6 透射電子顯微鏡觀察小鼠肺組織自噬情況

肺組織置于2.5%戊二醛固定液中，4 ℃固定48 h，1%鋨酸固定2 h，梯度乙醇溶液脫水后環(huán)氧丙烷置換，812 包埋劑浸透，60 ℃烘箱聚合48 h。超薄切片機(jī)切90 nm 厚度的肺組織切片，檸檬酸鉛染色，透射電子顯微鏡下觀察肺組織自噬細(xì)胞形態(tài)。

1.7 免疫共沉淀技術(shù)檢測小鼠肺組織中BECN1的SUMO化修飾

取0.1 g 肺組織，加入含有蛋白酶抑制劑和NEM 的RIPA 蛋白裂解液 1 mL，研磨并超聲，14000×g，4 ℃離心15 min 后吸取上清蛋白樣品。留取60 μL 樣品作為對(duì)照，其余樣品中加入抗BEC N1 抗體，4 ℃旋轉(zhuǎn)過夜。加入40 μ L Protein A/G 瓊脂糖珠子，4 ℃旋轉(zhuǎn)過夜，漂洗后加50 μL 上樣緩沖液，100 ℃變性后進(jìn)行免疫印跡法檢測。

1.8 統(tǒng)計(jì)學(xué)分析

使用GraphPad Prism 軟件進(jìn)行數(shù)據(jù)分析。各實(shí)驗(yàn)均獨(dú)立重復(fù)3次，每次每組實(shí)驗(yàn)小鼠為同窩出生，每組 2～6 只（對(duì)照組略少于實(shí)驗(yàn)組），結(jié)果數(shù)據(jù)用±s表示。兩組間比較采用t檢驗(yàn)。P＜0.05 為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 小鼠肺組織細(xì)胞中SENP3 的定位

圖1 免疫熒光技術(shù)顯示小鼠肺組織中SENP3 的定位Figure 1 Localization of SENP3 in mouse lung by immunofluorescence

小鼠肺組織切片在微分干涉相差顯微鏡下觀察（圖1）顯示，肺泡Ⅰ型上皮細(xì)胞扁平，圍成肺泡壁；Ⅱ型上皮細(xì)胞分布于Ⅰ型上皮細(xì)胞之間，呈立方形，細(xì)胞核為圓形，突向肺泡腔內(nèi)。肺泡Ⅱ型上皮細(xì)胞以特異性表達(dá)的SP-C 進(jìn)行標(biāo)記。免疫熒光檢測結(jié)果顯示，SENP3 主要定位于SP-C 陽性細(xì)胞，且以細(xì)胞質(zhì)定位為主，提示SENP3主要表達(dá)于肺泡Ⅱ型上皮細(xì)胞的細(xì)胞質(zhì)中。

2.2 饑餓后SENP3+/+和SENP3+/-小鼠肺組織細(xì)胞的自噬

圖2 免疫印跡法（A 和B）和免疫熒光技術(shù)（C 和D）檢測SENP3+/+小鼠和SENP3+/-小鼠肺組織中自噬相關(guān)蛋白LC3-Ⅰ和LC3-Ⅱ的量Figure 2 Autophagy level in SENP3+/+ and SENP3+/- mouse lung tissues by immunoblotting (A-B) and immunofluorescence(C-D)

小鼠肺組織的免疫印跡法檢測結(jié)果（圖2）顯示，SENP3+/-小鼠的SENP3 水平較SENP3+/+小鼠下降（39.98±2.32）%（P＜0.01），提示雜合子小鼠也具有一定的敲減效率；與對(duì)照組相比，饑餓小鼠肺組織的SENP3 水平有所升高（P＜0.01，圖2A）。在SENP3+/+小鼠中，未饑餓對(duì)照組肺組織中出現(xiàn)少量LC3-Ⅱ，提示肺組織細(xì)胞有基礎(chǔ)的自噬水平；饑餓后LC3-Ⅱ進(jìn)一步增加，LC3-Ⅰ明顯減少，提示饑餓誘導(dǎo)后自噬增加（P＜0.01，圖2A）。關(guān)鍵的是，與SENP3+/+小鼠相比，SENP3+/-小鼠的LC3- Ⅱ水平更高（P＜0.01，圖2A），且LC3- Ⅱ/LC3-Ⅰ比例有所升高，差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.01，圖2B）。同時(shí)，與未加溶酶體抑制劑氯喹組相比，氯喹處理后LC3-Ⅱ/LC3-Ⅰ比例都相應(yīng)升高，且SENP3+/-小鼠中升高最為明顯，說明SENP3 的敲減加速了肺組織細(xì)胞自噬流。

因肺組織蛋白樣品中檢測出LC3-Ⅱ的量只能反映整體水平的自噬程度，故研究仍需分析發(fā)生自噬的細(xì)胞類型和程度。免疫熒光染色結(jié)果顯示，未饑餓時(shí)，SENP3 高表達(dá)的肺泡Ⅱ型上皮細(xì)胞質(zhì)中無明顯的點(diǎn)狀LC3，而SENP3+/-小鼠中開始少量出現(xiàn)（圖2C 和2D）；饑餓48 h 后，SENP3+/+小鼠組的點(diǎn)狀LC3 有所增加（P＜0.05），而SENP3+/-小鼠組明顯增多（P＜0.01，圖2C 和2D）。另外，SENP3 低表達(dá)的肺泡Ⅰ型上皮細(xì)胞及其他細(xì)胞中無明顯的點(diǎn)狀LC3 形成，提示饑餓后自噬發(fā)生在肺泡Ⅱ型上皮細(xì)胞，且受到SENP3 的抑制。

2.3 饑餓后SENP3+/+小鼠和SENP3+/-小鼠肺組織中發(fā)生自噬的細(xì)胞類型

透射電子顯微鏡下觀察發(fā)現(xiàn)，SENP3+/+小鼠和SENP3+/-小鼠肺組織結(jié)構(gòu)正常。肺泡Ⅱ型上皮細(xì)胞表面有短小的微絨毛，細(xì)胞質(zhì)中可見特征性的嗜鋨性板層小體。饑餓組小鼠的Ⅱ型上皮細(xì)胞中出現(xiàn)明顯的自噬溶酶體結(jié)構(gòu)，內(nèi)含已經(jīng)消化的內(nèi)容物或碎片，而肺泡Ⅰ型上皮中未見相關(guān)結(jié)構(gòu)（圖3），提示饑餓主要誘導(dǎo)了肺泡Ⅱ型上皮細(xì)胞的自噬。同時(shí)，SENP3+/-小鼠較SENP3+/+小鼠Ⅱ型上皮細(xì)胞中的自噬溶酶體數(shù)量更多（圖3）。

圖3 透射電子顯微鏡下觀察SENP3+/+小鼠和SENP3+/-小鼠肺泡Ⅱ型上皮細(xì)胞的自噬Figure 3 Autophage of alveolar type Ⅱ epithelial cells in SENP3+/+ and SENP3+/- mouse lung tissues under transmission electron microscopy

2.4 SENP3+/+小鼠和SENP3+/-小鼠肺組織中BECN1的SUMO化修飾

在肺組織樣品中檢測BECN1 的SUMO 化修飾，結(jié)果顯示BECN1 的量未受到饑餓和SENP3基因敲除的影響，但與SENP3+/+相比，SENP3+/-小鼠中可檢測到明顯的BECN1的SUMO2/3修飾條帶（圖4 上圖中泳道2 與泳道1 相比），提示在野生型小鼠中SENP3去除了BECN1的SUMO2/3修飾。但在SENP3+/-小鼠中，與未饑餓的對(duì)照組相比，饑餓后BECN1 的SUMO2/3 修飾是否增強(qiáng)，結(jié)果尚不明確，SUMO2/3抗體檢測時(shí)顯示為修飾減弱（圖4 上圖中泳道4 與泳道2 相比），BECN1 抗體檢測時(shí)顯示為修飾增強(qiáng)（圖4 中圖泳道4 與泳道2 相比）。

圖4 免疫共沉淀法檢測SENP3+/+和SENP3+/-小鼠肺組織中BECN1 的SUMO2/3 修飾Figure 4 SUMO2/3-modified BECN1 in SENP3+/+ and SENP3+/- mouse lung tissues by co-immunoprecipitation

3 討論

本研究初步在動(dòng)物體內(nèi)水平檢測了肺組織細(xì)胞的基礎(chǔ)自噬水平和饑餓誘導(dǎo)的自噬水平，發(fā)現(xiàn)饑餓時(shí)自噬主要發(fā)生于肺泡Ⅱ型上皮細(xì)胞。同時(shí)，研究也觀察到SENP3定位于肺泡Ⅱ型上皮細(xì)胞的細(xì)胞質(zhì)，介導(dǎo)了重要的自噬相關(guān)蛋白BECN1的去SUMO 化修飾，并能夠抑制饑餓誘導(dǎo)的自噬，發(fā)揮自噬調(diào)控的作用。本研究結(jié)果一方面確認(rèn)了SENP3可抑制肺組織細(xì)胞自噬，并初步探討了其作用機(jī)制，另一方面也對(duì)在動(dòng)物水平檢測細(xì)胞自噬的方法進(jìn)行了摸索，使得研究者對(duì)在體自噬調(diào)控提高了認(rèn)識(shí)。

目前在體或器官水平檢測自噬流是自噬研究中較為困難的領(lǐng)域之一，應(yīng)用LC3-Ⅱ的檢測并不理想。研究者通常采用LC3-GFP轉(zhuǎn)基因小鼠，器官類型則集中在骨骼肌、腦、心臟和視網(wǎng)膜，而肺較少[18-19]。本研究也確實(shí)發(fā)現(xiàn)免疫印跡技術(shù)檢測LC3-Ⅱ的量以及免疫熒光技術(shù)檢測LC3形成的點(diǎn)狀結(jié)構(gòu)均不明顯，較培養(yǎng)細(xì)胞更難檢測。研究中預(yù)先給小鼠腹腔注射抑制劑氯喹，一定程度上改善了LC3-Ⅱ的檢測結(jié)果，提示該策略是研究在體自噬的可行方法。另外，本研究也綜合應(yīng)用多種技術(shù)檢測自噬水平，可以在自噬的定量、細(xì)胞特異性及超微結(jié)構(gòu)的水平上分別反映自噬的特征，也是在體水平全面檢測自噬的必要方法。

自噬水平的控制是自噬研究領(lǐng)域的一個(gè)重要問題，也是研究者理解自噬在疾病發(fā)生和治療中的角色的關(guān)鍵問題。在自噬的調(diào)控機(jī)制中，有研究發(fā)現(xiàn)SUMO化修飾這種蛋白質(zhì)翻譯后修飾方式可能參與其中，并證明SUMO能增強(qiáng)神經(jīng)細(xì)胞和心肌細(xì)胞的自噬水平[20-22]，但是去SUMO 化修飾的蛋白酶在自噬過程中發(fā)揮負(fù)調(diào)控作用的相關(guān)研究報(bào)道較少。本實(shí)驗(yàn)室前期研究已發(fā)現(xiàn)，小鼠肝臟中BECN1的SUMO化修飾促進(jìn)自噬，而SENP3通過對(duì)其去SUMO 化修飾抑制自噬的發(fā)生[14]。在小鼠睪丸組織中，饑餓應(yīng)激后自噬發(fā)生于支持細(xì)胞（Sertoli 細(xì)胞），SENP3 基因敲除雜合子小鼠中自噬增加[23]。本研究在小鼠肺組織中繼續(xù)探索，發(fā)現(xiàn)饑餓后肺泡Ⅱ型上皮細(xì)胞出現(xiàn)自噬，而SENP3能抑制這種細(xì)胞的自噬，提示SENP3抑制自噬的角色在各種組織中具有一定的普遍性。

SE N P3 調(diào)控自噬的分子機(jī)制與蛋白質(zhì)的SUMO2/3修飾有關(guān)。本研究中肺組織與其他研究中的肝組織類似，BECN1 的SUMO2/3 修飾能夠被SEN P3 去除。在機(jī)制研究上，人們已發(fā)現(xiàn)BECN1的SUMO2/3修飾易化了與紫外線抵抗相關(guān)基因（ultraviolet radiation resistance-associated gene，UVRAG）、磷脂酰肌醇-3-激酶催化亞單位3（phosphatidylinositol 3-kinase catalytic subunit type 3，PI3KC3，又稱為VPS34）、自噬相關(guān)蛋白14 樣蛋白（autophagy-related protein 14-like protein， ATG14L）的相互作用，增強(qiáng)了自噬起始核心復(fù)合物的活性。由于HEK293T細(xì)胞和肝細(xì)胞中均存在該機(jī)制，提示這個(gè)分子機(jī)制可能也存在于肺泡Ⅱ型上皮細(xì)胞。但因其他研究在體外發(fā)現(xiàn)這個(gè)復(fù)合物中的VPS34可以被SUMO1修飾[24]，故后續(xù)研究需要探索肺組織細(xì)胞中VPS34是否作為SENP3 的底物引起SUMO2/3 修飾的逆轉(zhuǎn)，以及是否參與自噬調(diào)控，以期進(jìn)一步明確SENP3的作用機(jī)制。

雖然SENP3在體外培養(yǎng)細(xì)胞和機(jī)體中扮演重要角色，其基因敲除造成小鼠早期胚胎的死亡，但其在各種組織中的功能和定位均不明確。在體外培養(yǎng)的多種正常細(xì)胞和腫瘤細(xì)胞中，SENP3 定位于細(xì)胞核，且集中于核仁，尤其是基因過度表達(dá)時(shí)更為顯著[25]。研究發(fā)現(xiàn)在肝細(xì)胞的細(xì)胞質(zhì)中存在SENP3 分布，并與BECN1 相互作用介導(dǎo)其去SUMO 化修飾[14]。本研究中免疫熒光檢測結(jié)果顯示SENP3 定位于肺泡Ⅱ型上皮細(xì)胞的細(xì)胞質(zhì)，與其他研究結(jié)果不同，在細(xì)胞核中幾乎沒有發(fā)現(xiàn)SENP3，故未來仍需用多種技術(shù)綜合考察其定位，以全面了解其功能。

本研究探討肺組織細(xì)胞的自噬及其調(diào)控，具有一定的意義。自噬的程度影響應(yīng)激時(shí)的細(xì)胞命運(yùn)，即可能促進(jìn)細(xì)胞存活抑或造成細(xì)胞死亡，而細(xì)胞命運(yùn)的不同與刺激類型、程度和細(xì)胞類型有關(guān)。在肺部疾病中，自噬是否發(fā)生，與疾病的關(guān)系如何，這些研究報(bào)道不多，但研究結(jié)果已初步顯示了不同病原體誘導(dǎo)的自噬、發(fā)生自噬的細(xì)胞類型及對(duì)細(xì)胞的生物學(xué)意義。細(xì)菌、敗血癥及高氧誘導(dǎo)的急性肺損傷中，自噬發(fā)揮保護(hù)細(xì)胞和減少損傷的作用[15]。但也有研究報(bào)道了與此相反的現(xiàn)象，肺泡Ⅱ型上皮細(xì)胞的自噬導(dǎo)致炎性因子分泌量增加、細(xì)胞死亡和功能障礙，造成急性肺損傷加重[26-29]。H5N1 流感患者中，肺泡Ⅱ型上皮細(xì)胞的過度自噬也導(dǎo)致急性呼吸窘迫綜合征[30-31]，BECN1 基因敲除或3-甲基腺嘌呤抑制自噬后發(fā)病率降低，故抑制自噬可能成為治療H5N1感染的一個(gè)新策略[31-32]。本研究發(fā)現(xiàn)SENP3在肺組織中能夠發(fā)揮抑制細(xì)胞自噬的功能，故提高SENP3的量或增強(qiáng)其活性有望成為治療急性肺損傷的一個(gè)新策略。