核酸適配體側(cè)流層析分析技術(shù)在真菌毒素檢測(cè)中的應(yīng)用

趙穎 王楠 陸安祥 馮曉元 郭曉軍 欒云霞

（1. 北京農(nóng)業(yè)質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)與檢測(cè)技術(shù)研究中心 農(nóng)業(yè)部農(nóng)產(chǎn)品質(zhì)量安全風(fēng)險(xiǎn)評(píng)估實(shí)驗(yàn)室（北京），北京 100097；2. 錦州醫(yī)科大學(xué)，錦州121001）

適配體（Aptamer）是通過指數(shù)富集的配體進(jìn)化系統(tǒng)（Systematic evolution of ligands by exponential enrichment，SELEX）獲得的單鏈DNA，具有穩(wěn)定的二級(jí)結(jié)構(gòu)［1］，典型的結(jié)構(gòu)包括莖、凸環(huán)、發(fā)夾、假結(jié)體，三重體和G-四鏈體結(jié)構(gòu)等［2］。適配體通過構(gòu)象變化折疊成三維結(jié)構(gòu)，與目標(biāo)物通過形狀互補(bǔ)、芳香化合物間的堆積作用、堿基堆積作用、靜電作用和氫鍵作用等方式穩(wěn)定結(jié)合［3］。迄今為止，已發(fā)現(xiàn)近300個(gè)目標(biāo)的適配體，包括離子（如Hg2+［4］）、真菌毒素［5］和分子［6］等。目前快速檢測(cè)常用的是抗體，由于在生產(chǎn)和純化過程中需嚴(yán)格控制，并且受操作環(huán)境、pH、溫度等條件的限制［7-8］，使得其對(duì)有著相似結(jié)構(gòu)的小分子快速準(zhǔn)確識(shí)別也存在局限性。相比之下的適配體易于修飾和標(biāo)記，靈敏度高，特異性好，成本低，親和力強(qiáng)，在環(huán)境監(jiān)測(cè)、醫(yī)學(xué)診斷和食品安全等領(lǐng)域中受到了越來越多的關(guān)注。

真菌毒素污染是農(nóng)產(chǎn)品、中藥、食物和飼料中普遍存在的問題［9］，毒素通過抑制蛋白質(zhì)合成、破壞巨噬細(xì)胞系統(tǒng)和削弱免疫功能，對(duì)人體健康造成危害。例如，黃曲霉毒素B1

［5］（Aflatoxin，AFB1）是目前人類發(fā)現(xiàn)的真菌中毒性最強(qiáng)的毒素，是由黃曲霉和寄生曲霉等產(chǎn)生的次級(jí)代謝產(chǎn)物，易對(duì)多種農(nóng)產(chǎn)品，如堅(jiān)果、花生、玉米、谷物和動(dòng)物飼料造成污染，被國(guó)際癌癥研究機(jī)構(gòu)列為一類致癌物［7］。赭曲霉毒素A［1］（Ochratoxin A，OTA）是植物源性食品中廣泛存在的一種由曲霉和青霉菌產(chǎn)生的真菌毒素。在食品、谷物和葡萄酒中有很高的化學(xué)穩(wěn)定性和熱穩(wěn)定性，對(duì)人體有害，易造成腎毒性、肝毒性以及淋巴和胃腸道損傷。近年來，真菌毒素的快速分析與鑒定、多類真菌毒素的同時(shí)檢測(cè)已成為研究人員的研究熱點(diǎn)［1，5，9-11］。毒素的定量分析目前已經(jīng)建立的方法包括：薄層色譜［12］（Thinlayer chromatography，TLC）、高效液相色譜［11，13-14］（High performance liquid chromatography，HPLC）、紫外可見［15］（Ultraviolet-visible，UV）、液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜 法［16］（Liquid chromatography-tandem mass spectrometry，LC-MS/MS）、熒光檢測(cè)器法［17-18］（Fluorescence detector，F(xiàn)LD）等實(shí)驗(yàn)室內(nèi)檢測(cè)目標(biāo)物的確證方法。這些分析檢測(cè)方法需要復(fù)雜的樣品制備過程、大型儀器的配備和專業(yè)的研究人員，因此，不能在現(xiàn)場(chǎng)進(jìn)行快速檢測(cè)。開發(fā)用于現(xiàn)場(chǎng)檢測(cè)樣品中目標(biāo)物的含量的便攜式、靈敏度高、操作簡(jiǎn)單的快速檢測(cè)技術(shù)迫在眉睫。表1總結(jié)了適配體側(cè)流層析技術(shù)在真菌毒素方面的應(yīng)用。

表1 適配體側(cè)流層析分析技術(shù)檢測(cè)不同的分析物

側(cè)流層析分析技術(shù)響應(yīng)時(shí)間快速、簡(jiǎn)單性且低成本使其成為現(xiàn)場(chǎng)檢測(cè)（Point-of-care testing，POCT）的理想選擇，已被應(yīng)用于多種靶標(biāo)的快速檢測(cè)，最常見和最成功的側(cè)流層析分析技術(shù)的產(chǎn)品是檢測(cè)尿液中是否存在人絨毛膜促性腺激素的膠體金側(cè)向?qū)游龇治黾夹g(shù)［28］。核酸適配體側(cè)流層析分析技術(shù)具有良好的魯棒性、特異性、靈敏度，能夠?qū)崿F(xiàn)低成本的快速檢測(cè)。該技術(shù)以硝酸纖維素膜為載體，樣品溶液滴加在樣品墊上，在毛細(xì)管作用下慢慢向吸水墊端滲移，通過適配體與靶標(biāo)結(jié)合，并利用熒光、量子點(diǎn)等標(biāo)記物質(zhì)呈現(xiàn)光學(xué)反應(yīng)，可在T線和C線檢測(cè)到信號(hào)值。目前最廣泛應(yīng)用的側(cè)流層析技術(shù)主要是基于抗體，但是，抗體的使用也會(huì)遇到一些問題，如抗體的生產(chǎn)周期很長(zhǎng)，并且穩(wěn)定性較差，存在交叉反應(yīng)。適配體比抗體小很多，可以在相同的納米金粒子或硝化纖維素膜表面被更好地固定。作為一種新型識(shí)別分子，核酸適配體為食品安全快速檢測(cè)技術(shù)的開發(fā)提供了新思路。以下綜述了熒光素、量子點(diǎn)、熒光微球、膠體金和酶等不同信號(hào)標(biāo)記適配體，通過光學(xué)、比色、表面增強(qiáng)拉曼散射和基于智能手機(jī)等不同的檢測(cè)方法在側(cè)流層析分析技術(shù)中的應(yīng)用。

1 適配體側(cè)流層析分析技術(shù)的不同類型：

側(cè)流層析技術(shù)既可以用肉眼進(jìn)行定性檢測(cè)目標(biāo)物，也可以用簡(jiǎn)易的閱讀器進(jìn)行定量檢測(cè)目標(biāo)物。根據(jù)試紙條的原理不同可以分為夾心型、競(jìng)爭(zhēng)型兩種類型。

1.1 夾心型

采用夾心型測(cè)定時(shí)，以標(biāo)記信號(hào)物的適配體為信號(hào)探針，靶標(biāo)的另一條適配體或抗體固定在硝酸纖維素膜上為捕獲探針，要求信號(hào)探針和捕獲探針分別以不同的結(jié)合位點(diǎn)與靶標(biāo)結(jié)合，在目標(biāo)物存在的情況下與兩個(gè)DNA探針形成夾心結(jié)構(gòu)的穩(wěn)定復(fù)合物，隨著靶標(biāo)濃度的增加，檢測(cè)線（T線）的信號(hào)強(qiáng)度不斷增強(qiáng)（圖1）。過量的信號(hào)探針繼續(xù)滲移到質(zhì)控線（C線）并與其互補(bǔ)鏈結(jié)合。目前，采用夾心法的適配體種類很少，如腺苷［22］和OTA［13］等少量的靶標(biāo)分子有過相關(guān)報(bào)道。Zhu等［29］利用待檢測(cè)靶標(biāo)的兩條識(shí)別不同表面結(jié)合位點(diǎn)的適配體，建立了雙適配體夾心型側(cè)流層析分析技術(shù)，實(shí)現(xiàn)了對(duì)腺苷的有效檢測(cè)。

1.2 競(jìng)爭(zhēng)型

采用競(jìng)爭(zhēng)型測(cè)定時(shí)，以標(biāo)記信號(hào)物的適配體為信號(hào)探針，在T線處固定的捕獲探針為適配體的互補(bǔ)鏈或靶標(biāo)的半抗原（如AFB1-BSA［31］），靶標(biāo)與適配體互補(bǔ)鏈同時(shí)競(jìng)爭(zhēng)適配體，T線處的信號(hào)強(qiáng)度與靶標(biāo)含量成負(fù)相關(guān)性（圖2）。目前，研究者傾向于采用競(jìng)爭(zhēng)型側(cè)流層析技術(shù)的應(yīng)用，因?yàn)槠渲恍枰粭l合適的適配體就可進(jìn)行實(shí)驗(yàn)研究，降低了實(shí)驗(yàn)的難度。2016年，Zhou等［32］成功研發(fā)了一種基于競(jìng)爭(zhēng)法在現(xiàn)場(chǎng)快速檢測(cè)中藥黃芪中OTA的適配體側(cè)流層析技術(shù)，通過優(yōu)化膠體金-適配體結(jié)合物濃度的稀釋倍數(shù)，緩沖液成分和比例，甲醇的濃度等條件，提高試紙條的靈敏度。該膠體金適配體側(cè)流層析檢測(cè)OTA的檢測(cè)時(shí)間為15 min，檢測(cè)限為1 μg/L，表明該方法具有較高的選擇性和靈敏度，結(jié)果準(zhǔn)確可靠，可作為一種快速、經(jīng)濟(jì)、魯棒的復(fù)雜基質(zhì)中微量毒素的現(xiàn)場(chǎng)檢測(cè)技術(shù)。

2 基于不同檢測(cè)方法的側(cè)流層析分析技術(shù)

2.1 光學(xué)檢測(cè)的側(cè)流層析生物傳感器

2.1.1 熒光側(cè)流層析分析技術(shù) 基于熒光的適配體側(cè)流層析分析技術(shù)具有選擇性好、靈敏度高、操作方便、快速等優(yōu)點(diǎn)。熒光染料存在一些固有的問題，如使用壽命短、穩(wěn)定性差等，限制了熒光染料在現(xiàn)場(chǎng)分析中的應(yīng)用。有關(guān)標(biāo)記熒光的適配體側(cè)流層析分析技術(shù)檢測(cè)AFB1的報(bào)道中［31］，靶標(biāo)與檢測(cè)線上的適配體互補(bǔ)鏈形成競(jìng)爭(zhēng)關(guān)系，當(dāng)存在AFB1時(shí)，適配體先與AFB1結(jié)合形成復(fù)合物，T線的信號(hào)強(qiáng)度與靶標(biāo)含量呈負(fù)相關(guān)性，多余的游離Cy5修飾的DNA探針滲流到C線上，被捕獲探針捕獲，并觀察熒光信號(hào)；在沒有靶標(biāo)的情況下，Cy5-DNA與檢測(cè)線上的DNA互補(bǔ)鏈雜交。Zhang等［33］選擇穩(wěn)定性好、熒光強(qiáng)度高和發(fā)射波長(zhǎng)范圍廣的熒光素Cy5作為信號(hào)標(biāo)記物，建立了基于熒光測(cè)流層析技術(shù)檢測(cè)玉米中OTA的方法（圖3）。該方法定量檢測(cè)OTA的線性范圍是1 ng/mL-1 000 ng/mL，檢測(cè)限為0.4 ng/mL，在玉米樣品中的加標(biāo)回收率為96.4%-104.7%，相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差為4.8%-6.4%，說明該方法具有較好的靈敏度、準(zhǔn)確度和穩(wěn)定性，為谷物中OTA的檢測(cè)提供了新型快速的檢測(cè)技術(shù)手段。

圖1 基于夾心型適配體側(cè)流層析分析技術(shù)的反應(yīng)原理圖［30］

圖2 基于競(jìng)爭(zhēng)型適配體側(cè)流層析分析技術(shù)的反應(yīng)原理圖［30］

圖3 基于熒光側(cè)流層析分析技術(shù)檢測(cè)OTA的示意圖［33］

2.1.2 分子發(fā)夾/熒光微球的側(cè)流層析分析技術(shù) 基于側(cè)流層析分析技術(shù)的分子發(fā)夾/熒光微球定量檢測(cè)，結(jié)合墊上包被熒光微球標(biāo)記的DNA分子發(fā)夾探針的“環(huán)”，檢測(cè)線處包被一段與DNA分子發(fā)夾莖的序列互補(bǔ)的一段堿基序列。一條含AFB1適配體的分子發(fā)夾與熒光微球偶聯(lián)后，形成的標(biāo)記探針被噴涂在側(cè)流層析的結(jié)合墊上［34］。如圖4所示，當(dāng)待測(cè)樣本中含有AFB1時(shí)，AFB1先與結(jié)合墊處標(biāo)記探針中的AFB1適配體結(jié)合，同時(shí)，標(biāo)記探針中的DNA分子發(fā)夾“莖”的雙鏈被打開，AFB1與標(biāo)記探針形成的復(fù)合物滲移到檢測(cè)線時(shí)，被檢測(cè)線上的核苷酸序列捕獲，出現(xiàn)亮線反應(yīng)。周子明等［34］利用該原理，通過“OFF-ON”的光信號(hào)，構(gòu)建了一種AFB1檢測(cè)的測(cè)流層析技術(shù)，實(shí)現(xiàn)了對(duì)AFB1高靈敏的檢測(cè)。AFB1在0.1-50 μg/L質(zhì)量濃度范圍內(nèi)，呈良好的線性關(guān)系，檢測(cè)限（S/N=3）達(dá)0.05 μg/L，可實(shí)現(xiàn)對(duì)實(shí)際樣品中AFB1的含量分析，具有較為重要的實(shí)際應(yīng)用和參考價(jià)值。肖理文［35］等研制了一種基于時(shí)間分辨熒光納米微球的玉米赤霉烯酮快速定量檢測(cè)的側(cè)流層析技術(shù)，并在糧食樣品中對(duì)其檢測(cè)性能進(jìn)行了研究。該產(chǎn)品的最低檢出限為3.65 μg/kg，且該方法具有簡(jiǎn)便快速、準(zhǔn)確可靠、重復(fù)性好等特點(diǎn)，可用于不同糧食谷物飼料中玉米赤霉烯酮的快速定量檢測(cè)分析。熒光微球具有高信號(hào)值，線性范圍好，批間重復(fù)性好，適合待測(cè)物的快速定量檢測(cè)。

2.1.3 量子點(diǎn)側(cè)向流動(dòng)層析技術(shù) 近年來，量子點(diǎn)［36］（Quantum dot，QDs）作為熒光標(biāo)記有半峰寬窄、熒光壽命長(zhǎng)、最大發(fā)射峰可調(diào)控等優(yōu)點(diǎn)。常見的高效熒光染料供體量子點(diǎn)有CdTe和CdSe/ZnS［37-38］。Richarte等［39］采用CdSe/ZnS/QDs作為標(biāo)記信號(hào)，研發(fā)了一種在谷物中同時(shí)檢測(cè)DON、ZEN和T2三種毒素的側(cè)流層析技術(shù)，該檢測(cè)方法具有靈敏度高，經(jīng)濟(jì)高效，快速等優(yōu)點(diǎn)。Wang等［40］設(shè)計(jì)了一種快速檢測(cè)OTA的側(cè)流層析分析技術(shù)，采用OTA與固定在檢測(cè)線上的DNA探針（DNA1）同時(shí)競(jìng)爭(zhēng)QDs標(biāo)記的適配體。在沒有OTA的情況下，QDs標(biāo)記的適配體與DNA1，多余游離的標(biāo)記適配體與質(zhì)控線上固定的poly T探針（DNA2）結(jié)合；相反，OTA存在時(shí)，檢測(cè)線的信號(hào)值將會(huì)減弱，質(zhì)控線的信號(hào)值將會(huì)增強(qiáng)，LOD達(dá)到4.7 nmol/L；與熒光偏振免疫測(cè)定方法相一致，但更加節(jié)省時(shí)間（圖5）。

圖4 基于分子發(fā)夾/熒光微球的側(cè)流層析分析技術(shù)檢測(cè)AFB1的原理示意圖［34］

圖5 基于量子點(diǎn)適配體側(cè)流層析技術(shù)的反應(yīng)原理示意圖［40］

2.2 比色法檢測(cè)的側(cè)流層析生物傳感器

在側(cè)流層析技術(shù)中，膠體金側(cè)流層析技術(shù)是最為常用的，不需要任何儀器便能實(shí)現(xiàn)快速現(xiàn)場(chǎng)檢測(cè)的技術(shù)。膠體金屬于惰性金屬［41-42］，具有穩(wěn)定好，生物相容性好、低成本等優(yōu)點(diǎn)。納米金粒子呈紅色，因此肉眼可見成為快速檢測(cè)的趨勢(shì)，更加快了膠體金在檢測(cè)領(lǐng)域的研究［43］。經(jīng)巰基修飾的適配體與膠體金通過Au-S鍵形成穩(wěn)定的復(fù)合結(jié)構(gòu)，T線上是一段用生物素修飾的與靶標(biāo)適配體互補(bǔ)的核酸片段，C線上則是一段用生物素修飾的胸腺嘧啶或腺嘌呤的核酸片段，能與靶標(biāo)適配體結(jié)合。當(dāng)溶液中無靶標(biāo)時(shí)，遷移到T線時(shí)將與適配體互補(bǔ)鏈產(chǎn)生顯色反應(yīng)，多余的適配體溶液向前遷移與C線核酸片段反應(yīng)顯紅色；當(dāng)溶液中含有靶標(biāo)時(shí)，遷移到T線，反應(yīng)減少或無反應(yīng)，顯淡紅色或不顯色，多余的游離適配體與C線核酸片段結(jié)合顯紅色［44］。Wu等［45］提出了一種基于適配體識(shí)別ZEN膠體金側(cè)流層析技術(shù)。將巰基化的ZEN適配體與膠體金偶聯(lián)，作為側(cè)流層析的信號(hào)探針，硝酸纖維素膜表面的檢測(cè)線固定適配體的識(shí)別序列的互補(bǔ)鏈，質(zhì)控線固定適配體的非識(shí)別序列的互補(bǔ)鏈（圖6）。在5-200 ng/mL的檢測(cè)范圍內(nèi)線性良好，可視化檢測(cè)限為20 ng/mL。但該檢測(cè)方法也存在些問題，首先，樣本基質(zhì)效應(yīng)，即實(shí)際樣本中總是含有其他雜質(zhì)分子，在檢測(cè)過程中可能會(huì)產(chǎn)生非特異性信號(hào)。第二，納米金的重現(xiàn)性，復(fù)雜的納米結(jié)構(gòu)，形狀和孔隙度很難精準(zhǔn)制備。第三，現(xiàn)有免疫檢測(cè)試紙只能用于定性或半定量檢測(cè)。

納米材料有很多種，如AuNPs、CBNs、MNPs、QDs和UCNPs等（表2）。一種以銀核和金殼（Ag-Au）為標(biāo)記物的側(cè)流層析分析技術(shù)用于食品中AFB1靈敏、快速的檢測(cè)［46］，與金納米顆粒相比，Ag-Au納米顆粒增強(qiáng)了測(cè)定的靈敏度，重現(xiàn)性和穩(wěn)定性。隨著AFB1濃度的增加，檢測(cè)線上納米復(fù)合材料的顏色強(qiáng)度增加，AFB1的檢測(cè)限為0.1 ng/mL。Kolosova等［47］報(bào)道了一種膠體金側(cè)流層析分析技術(shù)，用于同時(shí)檢測(cè)玉米赤霉烯酮（Zearalenone，ZEN）和脫氧雪腐鐮刀菌烯醇（Deoxynivalenol，DON）。目前，比色法側(cè)流層析技術(shù)的優(yōu)點(diǎn)是靈敏、簡(jiǎn)單、快速，無需多次標(biāo)記和分離步驟，但該技術(shù)尚未成熟，報(bào)道的文章也不多，在食品安全、藥物研發(fā)和醫(yī)學(xué)診斷等領(lǐng)域的現(xiàn)場(chǎng)快速分析檢測(cè)方面有著極大的發(fā)展空間。

圖6 基于適配體的側(cè)流層析技術(shù)結(jié)構(gòu)與原理示意圖

表2 用于快速檢測(cè)中的各種納米材料的優(yōu)越性和局限性

2.3 表面增強(qiáng)拉曼散射（Surface enhanced Raman

scattering，SERS）側(cè)流層析分析技術(shù)

表面增強(qiáng)拉曼散射是一種增強(qiáng)拉曼散射強(qiáng)度的技術(shù)，具有靈敏度高、可提供指紋圖譜等優(yōu)點(diǎn)［55］，金屬納米材料可以大幅度提高拉曼散射強(qiáng)度，因此基于拉曼散射的NPs技術(shù)一直是研究的熱點(diǎn)［56］，激發(fā)光和散射拉曼信號(hào)可以被調(diào)整到近紅外區(qū)域［57］，該技術(shù)能夠在實(shí)驗(yàn)室中進(jìn)行高靈敏的定量分析。SERS應(yīng)用于側(cè)流層析技術(shù)的檢測(cè)方法是基于拉曼散射附加在納米粒子中，顯著提高了實(shí)驗(yàn)的靈敏度。Li等［58］設(shè)計(jì)并構(gòu)建了基于適配體識(shí)別的磁分離輔助的快速檢測(cè)AFB1的SERS傳感器，在羧基化的磁珠上修飾了生物素標(biāo)記的AFB1適配體，作為檢測(cè)探針；合成信號(hào)分子（4-MBA）內(nèi)嵌式金銀核殼納米棒并修飾巰基化互補(bǔ)DNA組裝成SERS探針，作為捕獲探針。通過DNA堿基互補(bǔ)，將金銀核殼納米棒和磁珠組裝構(gòu)建為AFB1檢測(cè)傳感器（圖7）。當(dāng)AFB1存在時(shí)，AFB1被適配體識(shí)別，使磁珠和金銀核殼納米棒分離，SERS的信號(hào)將隨之減弱，從而通過SERS強(qiáng)度的變化達(dá)到快速檢測(cè)AFB1的目的，該傳感器的線性范圍為1 pg/mL-1 000 pg/mL，檢出限為0.4 pg/mL。作為一種新型的鑒定手段［59］，在準(zhǔn)確、客觀、直接的快速檢測(cè)目標(biāo)物方面有著巨大的潛力，有望成為鑒定的強(qiáng)大工具。

圖7 基于SERS側(cè)流層析分析技術(shù)的操作流程圖［58］

2.4 基于智能手機(jī)的適配體側(cè)流層析分析技術(shù)

基于智能手機(jī)的適配體檢測(cè)裝置［60］采用轉(zhuǎn)換納米粒子修飾的適配體互補(bǔ)鏈固定在同一側(cè)流層析上的3條檢測(cè)線，作為檢測(cè)探針，可以同時(shí)對(duì)多個(gè)不同目標(biāo)物（如OTA、汞離子和沙門氏菌）進(jìn)行特異性、靈敏性的快速檢測(cè)，因此，為多目標(biāo)檢測(cè)提供了經(jīng)濟(jì)，高效、快速的檢測(cè)手段。在最佳的條件下，汞離子、OTA和沙門氏菌的檢出限分別為5 ng/mL、3 ng/mL和85 CFU/mL［61］。Jin等［62］開發(fā)了一種基于成像的側(cè)流層析分析儀，該分析儀將T線和C線的信號(hào)成像采集到一張圖像中，然后用手機(jī)軟件對(duì)其進(jìn)行數(shù)據(jù)處理（圖8）。該分析儀已成功用于肌酸激酶-腦［62］（Creatine kinase - brain，CK-MB）的定量分析，LOD值為2 ng/mL，差異性小。手機(jī)具有使用方便、便攜性好、無所不在和數(shù)據(jù)傳輸能力強(qiáng)等優(yōu)點(diǎn)，可作為即時(shí)檢驗(yàn)的閱讀器，因此，基于智能手機(jī)的適配體側(cè)流層析技術(shù)有望在食品安全、毒素檢測(cè)、醫(yī)學(xué)診斷和環(huán)境監(jiān)測(cè)等快速檢測(cè)領(lǐng)域得到廣泛應(yīng)用。

3 結(jié)論

圖8 用于同時(shí)檢測(cè)多個(gè)目標(biāo)的LFAs和基于智能手機(jī)的便攜式裝置示意圖［61］

側(cè)流層析分析技術(shù)屬于干式化學(xué)檢測(cè)技術(shù)，可以兼容裸眼檢測(cè)或簡(jiǎn)單的光學(xué)電子閱讀器，具有靈敏度高、簡(jiǎn)便快捷、不需要復(fù)雜昂貴的儀器設(shè)備且價(jià)格低廉等特點(diǎn)，在食品安全、生物醫(yī)藥等領(lǐng)域已有應(yīng)用。核酸適配體側(cè)流層析技術(shù)相比于傳統(tǒng)的抗原抗體免疫層析法有很多優(yōu)勢(shì)，成本低，批次穩(wěn)定，保存時(shí)間長(zhǎng)，應(yīng)用范圍廣，因此擁有很好的發(fā)展前景；同時(shí)，可實(shí)現(xiàn)現(xiàn)場(chǎng)實(shí)時(shí)的快速檢測(cè)?；诓煌臉?biāo)記方式的檢測(cè)方法具有不同的檢測(cè)性能，乳膠層和金納米粒子（gold nanoparticles，AuNPs）可作為可視化定性檢測(cè)，而熒光、量子點(diǎn)和磁性納米粒子標(biāo)記可進(jìn)行定量分析。目前，適配體側(cè)流層析技術(shù)仍停留在實(shí)驗(yàn)室研制階段，在市場(chǎng)上還沒有低成本和成熟的檢測(cè)產(chǎn)品，同時(shí)也存在一些問題，例如，樣品仍需較復(fù)雜的前處理，樣品必須是液態(tài)均相，基質(zhì)和環(huán)境參數(shù)影響大，穩(wěn)定性差，這些問題將是未來研究的重點(diǎn)。真菌毒素具有種類多、分子結(jié)構(gòu)類似、痕量高等特點(diǎn)，適配體側(cè)流層析技術(shù)在現(xiàn)場(chǎng)快速檢測(cè)真菌毒素領(lǐng)域中具有巨大的潛力。相信在不遠(yuǎn)的將來，適配體側(cè)流層析技術(shù)必將發(fā)展成為毒素、重金屬、農(nóng)殘和致病微生物等污染物的現(xiàn)場(chǎng)篩查的利器。