氣相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜法分析消瘤藤中揮發(fā)油成分

陳宇 鐘盈盈 劉佳明 盧森華 丘一仙

【摘 要】 目的：研究消瘤藤中揮發(fā)油中的主要成分及其含量。方法：采用水蒸氣蒸餾法提取消瘤藤的揮發(fā)油成分，用氣相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用技術(shù)進(jìn)行測(cè)定，結(jié)合計(jì)算機(jī)檢索技術(shù)對(duì)分離的化合物進(jìn)行結(jié)構(gòu)鑒定并用色譜峰面積歸一化法獲得各化合物的相對(duì)含量。結(jié)果：從消瘤藤中鑒定出27個(gè)成分，占揮發(fā)油總量的87.73%，相對(duì)含量較高的揮發(fā)油成分有棕櫚酸（46.96%）、亞油酸（16.02%）、反油酸（5.12%）、順-9-六癸酸（2.75%）、肉豆蔻酸（2.25%）、正十五酸（2.24%）。結(jié)論：本研究通過(guò)對(duì)消瘤藤揮發(fā)油成分的氣相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用分析，為其綜合開(kāi)發(fā)和利用提供科學(xué)依據(jù)。

【關(guān)鍵詞】 消瘤藤;揮發(fā)油;氣相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜

【中圖分類號(hào)】R284.1? ?【文獻(xiàn)標(biāo)志碼】 A? ? 【文章編號(hào)】1007-8517（2020）9-0020-03

Study on Chemical Constituents of the Volatile Oil from Pileostegia Ttomentella by GC-MS

CHEN Yu ZHONG Yingying LIU Jiaming LU Senhua QIU Yixian*

Yulin Center for Food and Drug Control，Yulin 537000，China

Abstract：ObjectiveTo study the main components and content of the essential oil in Pileostegia tomentella. MethodsThe volatile oil of Pileostegia tomentella was extracted by steam distillation， determined by GC-MS， identified by computer retrieval technology， and the relative content of each compound was obtained by normalization of peak area. Results27 components were identified from Pileostegia tomentella， accounting for 87.73% of the total volatile oil. The relatively high contents of the volatile oil were palmitic acid （46.96%）， linoleic acid （16.02%）， trans oleic acid（5.12%）， cis-9-hexadecanoic acid （2.75%）， myristic acid （2.25%）， n-pentadecanoic acid （2.24%）.ConclusionIn this study， GC-MS analysis of the essential oil components of Pileostegia tomentella was used to provide a scientific basis for its comprehensive development and utilization.

Keywords：Pileostegia tomentella; Volatile Oil ;GC-MS

消瘤藤為虎耳草科植物星毛冠蓋藤（Pileostegia tomentella Hand.Mazz）的根，在《中華本草》[1]，《廣西藥用植物名錄》[2]《廣西植物志》[3]等專著均將其收載，具有祛風(fēng)除濕、消腫解毒、散瘀止痛的功效，臨床常應(yīng)用于腰腿疼痛、風(fēng)濕麻木、癰腫瘡毒，外用治跌打損傷、外傷出血、骨折[1-3]。現(xiàn)代藥理研究[4-5]表明消瘤藤提取物具有很大的潛在抗癌活性。有關(guān)化學(xué)成分方面研究的文獻(xiàn)報(bào)道有陸國(guó)壽[6]、王云卿等[7]從消瘤藤中分離得到25個(gè)化合物，其中包括蒲公英賽醇、3β-乙酰氧基-烏蘇酸、7-羥基-8-甲氧基香豆素、茵芋苷、7-羥基香豆素等成分。經(jīng)查閱文獻(xiàn)，當(dāng)前國(guó)內(nèi)外尚無(wú)消瘤藤的揮發(fā)油成分研究的報(bào)道，因此，本實(shí)驗(yàn)擬對(duì)消瘤藤的揮發(fā)油化學(xué)成分進(jìn)行氣相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用分析，為其藥材資源的開(kāi)發(fā)、化學(xué)成分分析及合理用藥方面提供科學(xué)依據(jù)。

1 儀器與材料

1.1 儀器 7890A-5975C 氣相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用儀（美國(guó)Agilent公司）、揮發(fā)油提取器、ML3002電子分析天平（瑞士METTLER TOLEDO公司）。

1.2 材料 實(shí)驗(yàn)所用消瘤藤樣品采自廣西金秀縣，經(jīng)玉林市食品藥品檢驗(yàn)檢測(cè)中心中藥室黎小偉主任中藥師鑒定為虎耳草科植物星毛冠蓋藤（Pileostegia tomentella Hand.Mazz）。無(wú)水硫酸鈉（分析純，廣東光華科技股份有限公司）、乙酸乙酯（色譜純，默克股份兩合公司），水為三級(jí)水。

2 方法與結(jié)果

2.1 供試品溶液的制備 稱取消瘤藤樣品約150 g，剪碎，置2000 mL圓底燒瓶中，加10倍量純凈水，浸泡1 h后按2015年版《中國(guó)藥典》四部通則“2204揮發(fā)油測(cè)定法”下甲法測(cè)定，提取前于揮發(fā)油測(cè)定器上端加入約2 mL乙酸乙酯，提取6 h，靜置，補(bǔ)足乙酸乙酯至體積為2 mL。取乙酸乙酯層，以無(wú)水硫酸鈉干燥，取上清液，過(guò)0.22 μm微孔濾膜，作為供試品溶液，備用[8]。

2.2 GC-MS分析條件

2.2.1 GC條件 石英毛細(xì)管柱DB-1MS毛細(xì)管柱（30 m×0.25 mm×0.25 μm），載氣為He（≥99.99%），流速為1.0 mL·min-1，進(jìn)樣量為1 μL，分流比為50∶1，進(jìn)樣口溫度為220 ℃，程序升溫：起始溫度60 ℃，保持1 min，以5 ℃·min-1升至250 ℃，保持5 min。溶劑延遲3.0 min。

2.2.2 MS條件 采用EI電離模式，電子能量為70 eV，離子源溫度為230 ℃，四級(jí)桿溫度為150 ℃，質(zhì)譜接口溫度為280℃，全掃描（Scan）采集模式，質(zhì)量范圍m/z 50～400 amu，掃描間隔0.2 s。

2.3 測(cè)量方法 取“2.1”項(xiàng)下制備的供試品溶液，按“2.2”項(xiàng)下的條件設(shè)置GC-MS分析參數(shù)，吸取1 μL進(jìn)樣，記錄總離子流圖，在Nist.08標(biāo)準(zhǔn)普庫(kù)中進(jìn)行檢索，確定各色譜峰代表的化學(xué)成分[9]。

2.4 化合物定性分析 圖1為消瘤藤揮發(fā)油總離子流圖，譜圖在MassHunter工作站經(jīng)Nist.08譜庫(kù)自動(dòng)檢索和解析，采用峰面積歸一法測(cè)定各化學(xué)成分在揮發(fā)油中的相對(duì)百分含量。鑒別出消瘤藤揮發(fā)油成分匹配度大于80的有27個(gè)成分，占總揮發(fā)油的87.73%，相對(duì)含量大于2%的有：棕櫚酸（46.96%）、亞油酸（16.02%）、反油酸（5.12%）、順-9-六癸酸（2.75%）、肉豆蔻酸（2.25%）、正十五酸（2.24%），結(jié)果見(jiàn)表1。

3 結(jié)論

本實(shí)驗(yàn)通過(guò)采用水蒸氣蒸餾法對(duì)消瘤藤揮發(fā)油成分進(jìn)行分析鑒定及相對(duì)含量測(cè)定，由于消瘤藤中揮發(fā)油成分相對(duì)含量不高，完全按2015年版《中國(guó)藥典》四部通則“2204揮發(fā)油測(cè)定法”下甲法測(cè)定，無(wú)法收集足夠供試品溶液，因此在揮發(fā)油測(cè)定器上端加入約2mL乙酸乙酯，使揮發(fā)油成分溶于乙酸乙酯中，以利于分析。消瘤藤主要成分為棕櫚酸（46.96%）、亞油酸（16.02%）和反油酸（5.12%）等，化學(xué)成分類型主要是脂肪族類、芳香族類、萜類。近期有報(bào)道棕櫚酸用于乳腺癌、結(jié)腸癌和宮頸癌的研究[10]，早有研究表明亞油酸具有抗炎、抗氧化作用，范榮等[11]報(bào)道了反油酸用于人神經(jīng)母細(xì)胞瘤的研究，可見(jiàn)瑤藥消瘤藤用于治療腫瘤可能與其揮發(fā)油中所含的脂肪酸含量有關(guān)，與蒲公英賽醇、3β-乙酰氧基-烏蘇酸、7-羥基-8-甲氧基香豆素、茵芋苷、7-羥基香豆素本等其他活性成分[6-7]起協(xié)同作用。本研究可為建立消瘤藤揮發(fā)油提取方法提供參考，為闡述消瘤藤的藥效奠定了物質(zhì)基礎(chǔ)。

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（收稿日期：2020-01-21 編輯：劉 斌）