應(yīng)用小動(dòng)物活體激光共聚焦成像系統(tǒng)對(duì)大鼠腹壁循經(jīng)組織組織液分布的初步觀察?

宋曉晶，張維波△，賈術(shù)永，王廣軍，李宏彥，葉豐瑤,2，顧 鑫,2，熊 楓

(1. 中國(guó)中醫(yī)科學(xué)院針灸研究所，北京 100700； 2. 北京中醫(yī)藥大學(xué)，北京 100029)

今年初，ScientificReport發(fā)表了美國(guó)一研究團(tuán)隊(duì)使用激光共聚焦內(nèi)窺鏡對(duì)人體多種組織間質(zhì)進(jìn)行觀察的研究結(jié)果。報(bào)道發(fā)現(xiàn)，在活體的間質(zhì)網(wǎng)狀結(jié)構(gòu)中存在大量組織液，約為人體體液總量的1/5，這類(lèi)網(wǎng)狀空間結(jié)構(gòu)以及其中填充的組織液在常規(guī)形態(tài)學(xué)處理后消失。在此之前，這一間質(zhì)形態(tài)未被報(bào)道[3]。該文章在國(guó)內(nèi)外引起了熱議，國(guó)外媒體的報(bào)道認(rèn)為此研究發(fā)現(xiàn)了人體的一個(gè)新器官，而國(guó)內(nèi)一些學(xué)者認(rèn)為這類(lèi)結(jié)構(gòu)應(yīng)該是中醫(yī)的經(jīng)絡(luò)。然而，美國(guó)團(tuán)隊(duì)的研究主要集中在各臟器黏膜、皮膚組織，并未關(guān)注中醫(yī)經(jīng)絡(luò)循行部位的組織，但為中醫(yī)經(jīng)絡(luò)研究提供了啟示。經(jīng)絡(luò)學(xué)說(shuō)是重要的中醫(yī)基礎(chǔ)理論之一，經(jīng)絡(luò)行血?dú)馐侵嗅t(yī)理論闡釋人體生命活動(dòng)、疾病發(fā)生變化以及針灸等療法原理的核心，揭示經(jīng)絡(luò)的現(xiàn)代科學(xué)內(nèi)涵對(duì)中醫(yī)的發(fā)展至關(guān)重要。圍繞經(jīng)絡(luò)的本質(zhì)，國(guó)內(nèi)外學(xué)者進(jìn)行了大量探索，觀察到一些經(jīng)脈現(xiàn)象，取得了一定成果，初步證實(shí)經(jīng)脈的存在[1-2]。自上世紀(jì)60年代以來(lái)，國(guó)內(nèi)外一部分學(xué)者研究認(rèn)為，組織間隙、組織液與經(jīng)絡(luò)的結(jié)構(gòu)和功能密切相關(guān)，其應(yīng)該是經(jīng)絡(luò)實(shí)質(zhì)的一部分。但由于研究技術(shù)的限制，目前仍缺乏更多的客觀實(shí)驗(yàn)證據(jù)證實(shí)二者在組織結(jié)構(gòu)上的相關(guān)性[4-6]。為進(jìn)一步探討經(jīng)絡(luò)結(jié)構(gòu)與組織間隙、組織液的關(guān)系，研究活體沿經(jīng)絡(luò)循行路線的組織間質(zhì)結(jié)構(gòu)及組織液分布特征，本研究團(tuán)隊(duì)使用先進(jìn)的活體激光共聚焦成像系統(tǒng)對(duì)大鼠腹壁循經(jīng)組織進(jìn)行了初步觀察，現(xiàn)報(bào)道如下。

1 材料與方法

1.1 實(shí)驗(yàn)材料

1.1.1 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物 健康成年雄性SD大鼠10只，平均年齡5～7周，體質(zhì)量380～420 g，由中國(guó)軍事醫(yī)學(xué)科學(xué)院動(dòng)物中心提供(許可證號(hào)SCXK-(軍)2011-004)。本研究的實(shí)驗(yàn)方案已通過(guò)中國(guó)中醫(yī)科學(xué)院針灸研究所動(dòng)物倫理委員會(huì)審查批準(zhǔn)，所有大鼠均按實(shí)驗(yàn)動(dòng)物飼養(yǎng)和使用的國(guó)際標(biāo)準(zhǔn)對(duì)待。

1.1.2 實(shí)驗(yàn)儀器 小動(dòng)物活體激光共聚焦成像系統(tǒng)(ViewnVivoB30，OptiScan公司，澳大利亞)；57-6F30 經(jīng)絡(luò)定位儀(東華儀器廠，中國(guó))；恒冷箱切片機(jī)(Thermo Fisher Scientific公司，英國(guó))；研究級(jí)正置顯微鏡(Nikon，日本)。

1.2 實(shí)驗(yàn)方法

1.2.1 熒光染料尾靜脈注射 用 2% 的戊巴比妥鈉(30 mg/kg) 大鼠腹腔注射進(jìn)行麻醉，待大鼠充分麻醉后，將其按仰臥位固定在實(shí)驗(yàn)臺(tái)上。將熒光素納染料(上海阿拉丁生化科技股份有限公司)用注射用生理鹽水配制成10%的溶液，按0.1 ml/kg的劑量進(jìn)行大鼠尾靜脈注射。

1.2.2 循經(jīng)低電阻點(diǎn)檢測(cè) 熒光染料注射后，立即沿大鼠腹部劍突橫切并剝離腹部皮膚，暴露3×5 cm范圍的腹壁，用消毒脫脂棉擦凈腹壁組織表面滲出物。使用 57-6F30 經(jīng)絡(luò)定位儀(東華儀器廠，中國(guó))檢測(cè)大鼠腹壁正中線(相當(dāng)于任脈循行線)，與任脈線平行旁開(kāi)5 mm、1cm的非經(jīng)循行線上的電阻抗，用油性標(biāo)記筆標(biāo)記出任脈線上的3個(gè)低電阻點(diǎn)(A、B、C點(diǎn))，與任脈線A點(diǎn)平行旁開(kāi)5 mm的非經(jīng)線上的高電阻點(diǎn)D點(diǎn)，與任脈線A點(diǎn)平行旁開(kāi)1 cm的非經(jīng)線上的高電阻點(diǎn)E點(diǎn)。

1.2.3 活體激光共聚焦成像檢測(cè)方法和圖像分析 將活體激光共聚焦成像系統(tǒng)的掃描深度分別設(shè)置為8、20 μm，激光功率設(shè)為130μW。在熒光染料注射30 min時(shí)，將掃描探頭垂直放置在大鼠腹壁表面，觀察、采集大鼠腹壁表面任脈循行線上A、B、C共3點(diǎn)，與任脈A點(diǎn)平行旁開(kāi)5 mm、1 cm的非經(jīng)循行線D、E點(diǎn)，以及腹壁其他區(qū)域組織的激光共聚焦成像圖。用激光共聚焦成像系統(tǒng)軟件分析成像視野中熒光染料的分布特征和組織微觀結(jié)構(gòu)。

1.2.4 活體組織切片觀察 用阿爾新藍(lán)(alcian blue，AB)標(biāo)記腹中線(任脈)上已經(jīng)觀察過(guò)的A、B、C點(diǎn)，迅速切取以標(biāo)記點(diǎn)為中心大小約1×1×0.5 cm的腹壁組織，放置在恒冷箱切片機(jī)速凍臺(tái)速凍，做20 μm的冰凍切片，避光自然風(fēng)干后封片，在熒光顯微鏡下觀察大鼠任脈循行線上的組織與旁開(kāi)組織的形態(tài)結(jié)構(gòu)。

2 結(jié)果

2.1 大鼠腹壁任脈循行線組織的活體激光共聚焦成像特征

圖1示，活體小動(dòng)物激光共聚焦成像系統(tǒng)外觀，從主機(jī)接出的激光發(fā)射器通過(guò)光纜連接到激光探頭上，探頭可插入體腔內(nèi)進(jìn)行觀察，也可直接在組織表面進(jìn)行觀察。本研究使用探頭體表接觸的采集方式。在獲取的圖像中，亮色區(qū)反應(yīng)熒光染料溶液分布或浸染包繞的區(qū)域，白色越多越亮代表含有熒光染料的組織液越多，暗色區(qū)反映為各種實(shí)體組織、細(xì)胞結(jié)構(gòu)。

圖1 ViewnVivoB30活體小動(dòng)物激光共聚焦成像系統(tǒng)

圖2示，熒光染料注射約30 min后，檢測(cè)深度為8 μm或20 μm時(shí)，大鼠腹壁表面正中線(任脈循行線)上的A點(diǎn)組織中大部分為白亮區(qū)域，這些區(qū)域是進(jìn)入組織間隙的熒光染料和組織液混合的成像顯示。在大片的白亮區(qū)域中分布有排列成層狀或散亂分布且粗細(xì)不等的暗色線狀結(jié)構(gòu)，其為膠原纖維和彈性纖維；顯示的暗色不規(guī)則類(lèi)圓形結(jié)構(gòu)為脂肪細(xì)胞，其間隙中分布著分支的線管狀結(jié)構(gòu)，其中包含大量暗色不規(guī)則圓球，在連續(xù)觀察時(shí)沿管腔內(nèi)移動(dòng)，這些不規(guī)則圓球是紅細(xì)胞，管線狀結(jié)構(gòu)為毛細(xì)血管；視野中還出現(xiàn)了一條邊界清晰、粗大的暗色線條狀組織，為粗的膠原纖維(圖2 A、B)。由于動(dòng)物呼吸在同一檢測(cè)位點(diǎn)成像組織范圍會(huì)略有移動(dòng)，因此在A、B圖中的組織結(jié)構(gòu)出現(xiàn)位移。此外，腹壁正中線上3個(gè)不同觀察點(diǎn)的激光共聚焦成像圖均顯示組織中的白亮區(qū)域較多，即均含有大量混有熒光素鈉的組織液；在其中分布著絲狀結(jié)構(gòu)的實(shí)體組織、膠原和彈性纖維，少量的類(lèi)脂肪細(xì)胞和毛細(xì)血管(圖2C，D)。不同深度、不同位點(diǎn)的組織圖像中白亮區(qū)域均較多，表明任脈循行線組織中組織間隙大，組織液含量豐富。

注：A為A點(diǎn)檢測(cè)深度8 μm，B為A點(diǎn)檢測(cè)深度20 μm，C為B點(diǎn)，D為C點(diǎn)。淺箭頭所示為毛細(xì)血管，深箭頭所示可能為纖維結(jié)締組織，稍淺箭頭所示可能為毛細(xì)淋巴管。E為A、B、C觀察位點(diǎn)示意，稍淺線上位點(diǎn)為腹中線水平旁開(kāi)5 mm，淺線上位點(diǎn)為腹中線水平旁開(kāi)1 cm圖2 大鼠腹壁正中線(任脈)組織的活體激光共聚焦圖(×1000)

2.2 大鼠腹壁非經(jīng)脈循行線組織活體激光共聚焦成像特征

圖3示，檢測(cè)深度為20 μm時(shí)，A圖任脈循行線組織中白亮區(qū)域較多，與任脈循行線B點(diǎn)平行旁開(kāi)5 mm的腹壁組織D點(diǎn)處，成像視野中的白亮色區(qū)域減少，出現(xiàn)了大量排列緊密的直徑約為20～40 μm的實(shí)體組織，為脂肪細(xì)胞；在旁開(kāi)1 cm的E點(diǎn)處，白亮色區(qū)域面積顯著減少，而且亮度減弱；視野中出現(xiàn)了大片的黑色區(qū)域?yàn)榧∪饨M織；在肌肉組織之間存在較細(xì)的線狀白亮條帶，這些長(zhǎng)程的白亮線與片狀的白亮區(qū)連通。這一結(jié)果提示，腹壁非經(jīng)組織主要為實(shí)體組織，組織中的間隙空間和組織液含量遠(yuǎn)遠(yuǎn)小于腹中線沿任脈循行的部位。

注：A為B點(diǎn)，B為腹壁正中線水平旁開(kāi)5 mm的D點(diǎn)，C為腹壁正中線水平旁開(kāi)1 cm的E點(diǎn)圖3 大鼠腹壁正中線(任脈)及其旁開(kāi)組織的活體激光共聚焦圖(×1000)

注： 與正中線垂直的腹壁組織橫斷面切片(100×)，B(40×)和C(200×)為與腹壁組織平行的切片，※所示為組織間隙，白箭頭所示為阿爾新藍(lán)(AB)標(biāo)記的腹壁任脈線觀察點(diǎn)，黑箭頭所示為疏松結(jié)締組織層，淺箭頭所示為肌肉組織圖4 大鼠腹壁正中線(任脈)及周?chē)M織新鮮冷凍切片形態(tài)圖

2.3 大鼠腹壁腹中線組織的形態(tài)結(jié)構(gòu)特征

圖4示，熒光顯微鏡下觀察到，大鼠腹壁新鮮組織冰凍切片中綠色熒光浸染的為實(shí)體組織，暗色區(qū)域?yàn)榻M織間隙。在與腹壁表面垂直的組織切片中可以觀察到，被AB標(biāo)記的腹中線任脈上的觀察點(diǎn)A(左側(cè)腹壁表面黑色條帶處)處下方是熒光染料浸染的疏松結(jié)締組織層；其下方是較寬大的暗色空間，為組織間隙；間隙兩側(cè)是熒光染料浸染的肌肉組織，這些肌肉組織在AB標(biāo)記點(diǎn)之外，即為任脈循行線兩側(cè)的非經(jīng)線區(qū)域(圖4A)。組織切片顯示，大鼠腹中線組織具有比旁開(kāi)組織較大的組織間隙，這一形態(tài)結(jié)構(gòu)特征與激光共聚焦成像結(jié)果吻合。在與腹壁表面平行的組織切片中(包含腹中線的腹壁組織)，綠色區(qū)域?yàn)闊晒馊玖辖镜募∈瞪珔^(qū)域?yàn)榻M織間隙；在腹壁的肌纖維之中，分布著大小不等的間隙，縱橫交錯(cuò)且相互連接溝通(圖4B、C)。這一特征也與活體激光共聚焦成像結(jié)果一致。

3 討論

人體組織中含有60%～70%的水，其中約2/3在細(xì)胞內(nèi)為細(xì)胞內(nèi)液，1/3為細(xì)胞外液。在細(xì)胞外液中，1/4為血液，3/4為組織液。早期的生理學(xué)教科書(shū)認(rèn)為，組織液是不流動(dòng)的凝膠態(tài)物質(zhì)，直到1993年挪威的Aukland教授提出了組織液的兩相說(shuō)即凝膠相和液相，認(rèn)為存在流動(dòng)的組織液[7]，但是液相組織液的存在一直未得到證明。2007年，在一篇綜述中報(bào)道瑞士的Swartz使用激光共聚焦顯微鏡，在離體組織中觀察到一個(gè)10 μm的液態(tài)組織液顆粒，但并未介紹該研究詳細(xì)的實(shí)驗(yàn)資料及其他實(shí)驗(yàn)室的驗(yàn)證工作[8]。直至2018年，美國(guó)Benias等使用激光共聚焦內(nèi)窺鏡在活體上觀察到人體間質(zhì)結(jié)構(gòu)中存在液相組織液[3]。這是對(duì)組織液兩相說(shuō)的首次實(shí)驗(yàn)證明，將開(kāi)啟認(rèn)識(shí)生命的新篇章。

組織液與經(jīng)絡(luò)實(shí)質(zhì)密切相關(guān)的學(xué)術(shù)觀點(diǎn)可追溯到上世紀(jì)60年代日本藤田六郎提出的經(jīng)絡(luò)脈管外體液路徑說(shuō)[4]，但該假說(shuō)并未進(jìn)行實(shí)驗(yàn)驗(yàn)證。20世紀(jì)80年代，孟競(jìng)璧等使用同位素示蹤技術(shù)觀察到在人體四肢穴位注射同位素后，可出現(xiàn)沿古典經(jīng)脈循行路線遷移的示蹤軌跡[9]。當(dāng)時(shí)，對(duì)于同位素示蹤軌跡的結(jié)構(gòu)有各種猜測(cè)，孟競(jìng)璧認(rèn)為是一種脈管外的小分子通道，但并未對(duì)循經(jīng)示蹤軌跡的形態(tài)結(jié)構(gòu)進(jìn)行深入研究。90年代以來(lái)，張維波提出經(jīng)脈具有低流阻特性的假設(shè)，并運(yùn)用組織液流動(dòng)的達(dá)西定律和連續(xù)性方程，推論出組織液向經(jīng)脈匯聚和沿經(jīng)脈流動(dòng)的流場(chǎng)模型[10]；隨后使用改進(jìn)的Guyton流阻方法證明了經(jīng)脈的低流阻(高流導(dǎo))特性[11]。同時(shí)，結(jié)合組織液壓波傳播的測(cè)量、同位素及AB示蹤觀察，最終發(fā)現(xiàn)循經(jīng)低流阻通道[12]。他提出經(jīng)脈(絡(luò))是結(jié)締組織中流阻(液體流動(dòng)的阻力)較低的連續(xù)多孔介質(zhì)(孔隙度高、滲透性高)，組織液填充在其中。在生命活動(dòng)過(guò)程中，一定范圍內(nèi)的組織液流動(dòng)引起間質(zhì)環(huán)境內(nèi)物質(zhì)、信息、能量的傳遞和交換，繼而產(chǎn)生各種生物學(xué)效應(yīng)。這一學(xué)說(shuō)很好地與經(jīng)絡(luò)行血?dú)獾睦碚撈鹾蟍13]。但由于當(dāng)時(shí)尚缺乏能夠直接觀察活體的間質(zhì)結(jié)構(gòu)及其中組織液的技術(shù)，因此經(jīng)脈低流阻組織液通道的觀點(diǎn)未能得到最直接的實(shí)驗(yàn)證明。

對(duì)于經(jīng)絡(luò)實(shí)質(zhì)結(jié)構(gòu)的研究，自1963年朝鮮金鳳漢以來(lái)，幾乎所有對(duì)經(jīng)絡(luò)組織結(jié)構(gòu)的研究都沿用常規(guī)的解剖或形態(tài)學(xué)技術(shù)進(jìn)行組織結(jié)構(gòu)觀察。有研究者對(duì)組織中循經(jīng)遷移的同位素進(jìn)行放射性自顯影觀察，可辨識(shí)出同位素位于血管外的組織間隙中[14]，但放射性顯影的分辨率很低，無(wú)法對(duì)間隙的具體形態(tài)結(jié)構(gòu)進(jìn)行顯示，因此無(wú)法揭示同位素循經(jīng)遷移軌跡的結(jié)構(gòu)。蔡國(guó)平等曾對(duì)間質(zhì)中的纖維成分進(jìn)行形態(tài)學(xué)觀察，組織固定脫水后無(wú)法真實(shí)還原間質(zhì)的空間結(jié)構(gòu)[15]?？紤]到組織液本身及其對(duì)保持組織空間形態(tài)的重要性，張維波等用身體接近透明的彩裙魚(yú)為研究對(duì)象，將AB染液注射到彩裙魚(yú)的體內(nèi)，當(dāng)染料出現(xiàn)縱向遷移后立即進(jìn)行整體冷凍，較完整地保留了組織間隙的結(jié)構(gòu)和其中液體，在透射光下觀察1 mm厚的新鮮冰凍切片，結(jié)果顯示AB液 是在透明魚(yú)的組織間隙之中遷移[16]，但該通道的細(xì)微結(jié)構(gòu)特別是細(xì)胞外液體的分布仍難以觀察。

活體激光共聚焦成像技術(shù)是在傳統(tǒng)的電子內(nèi)鏡基礎(chǔ)上整合了共聚焦激光顯微鏡而成，可對(duì)活體組織進(jìn)行一定深度的斷層掃描成像，并能排除聚焦平面之外組織的干擾，具有放大 1000 倍的能力，以亞微米的高分辨率實(shí)時(shí)精準(zhǔn)捕捉活體組織成像，顯示組織、細(xì)胞的顯微結(jié)構(gòu)，目前此技術(shù)已經(jīng)在活體組織微區(qū)高分辨成像[17]、組織分子和微血管事件追蹤[18]、癌細(xì)胞轉(zhuǎn)移追蹤等方面開(kāi)展了應(yīng)用[19]。經(jīng)絡(luò)低流阻組織液通道學(xué)說(shuō)提出已有幾十年，但直到活體激光共聚焦成像技術(shù)出現(xiàn)才有可能得到直接的證明，其將是研究經(jīng)絡(luò)的關(guān)鍵技術(shù)。本實(shí)驗(yàn)采用專用于動(dòng)物實(shí)驗(yàn)的激光共聚焦成像系統(tǒng)在體觀察大鼠腹壁循經(jīng)組織的形態(tài)結(jié)構(gòu)。由于此儀器探頭的激光穿透深度有限，因此本實(shí)驗(yàn)是在剝離皮膚的大鼠腹壁表面進(jìn)行的。

本實(shí)驗(yàn)采用的熒光素鈉是一種易溶于水且無(wú)特異性親和性的“水指示劑”，靜脈注射后主要是存在于血管中，會(huì)隨著血漿從毛細(xì)血管滲透入到組織中，成為組織液，并按照組織液流場(chǎng)規(guī)律向間隙較多且流阻較低的大間隙匯聚。在熒光成像系統(tǒng)的激光激發(fā)下，可用于顯示組織中水的分布，同時(shí)可顯示被熒光染料溶液包圍浸染的組織、細(xì)胞的形態(tài)[20]。因此在活體組織中，以熒光素鈉溶液所發(fā)熒光為背景，經(jīng)過(guò)特殊光學(xué)成像處理，可無(wú)創(chuàng)地觀察原位組織微區(qū)的形態(tài)學(xué)特征，特別是與組織液相關(guān)的結(jié)構(gòu)，為活體研究生命活動(dòng)和組織結(jié)構(gòu)提供了極大的便利。

在本研究中，大鼠尾靜脈注射熒光素鈉溶液30 min后，在大鼠活體和新鮮腹壁任脈循行組織冰凍切片均觀察到，腹壁組織中分布著大小不等、縱橫交錯(cuò)充盈著組織液的組織間隙，這些大小不等的間隙縱橫交錯(cuò)分布在組織中相互溝通連接。其中在腹中線任脈位置上的組織間隙較大，組織液的含量最多，符合任脈為諸陰經(jīng)之匯的特征。而正中線兩側(cè)的組織主要為實(shí)體組織結(jié)構(gòu)，組織間隙較小。此外，在任脈組織中發(fā)現(xiàn)分布著類(lèi)似管道的結(jié)構(gòu)，管道周?chē)植贾M織液，且越靠近管道壁的熒光染料亮度越高，表明管道周隙的組織液量越豐富；在肌間隙中也觀察到細(xì)長(zhǎng)的組織間隙通道，充滿了含有熒光素鈉的組織液與周?chē)M織連通。這一分布特征證明了張維波1997年對(duì)經(jīng)絡(luò)的低流阻假設(shè)和組織液的流場(chǎng)模型[11]。有研究者在肢體穴位注射熒光染料，用體視熒光顯微鏡觀察到長(zhǎng)程的被熒光染料浸染的血管周隙結(jié)構(gòu)，認(rèn)為這一通道結(jié)構(gòu)與中醫(yī)經(jīng)絡(luò)有關(guān)[21]。但此研究在穴位注射前將穴位遠(yuǎn)端血管與周?chē)M織分離，在注射后局部組織間質(zhì)的液壓增加，這些因素均會(huì)引起組織間質(zhì)空間的形變。實(shí)驗(yàn)顯示，通道結(jié)構(gòu)難以真實(shí)反映機(jī)體的間隙結(jié)構(gòu)和組織液分布特征。此外，美國(guó)團(tuán)隊(duì)的研究尚未觀察到間質(zhì)中有通道樣的結(jié)構(gòu)存在，其專門(mén)介紹的膽外總管間質(zhì)為多角形網(wǎng)狀結(jié)構(gòu)，組織液填充其中[3]，這種黑白相間的間質(zhì)形態(tài)可能是管腔黏膜的特征間質(zhì)組織液結(jié)構(gòu)，與本研究在大鼠腹壁觀察到的相互連通的組織間隙，以及條帶樣通道結(jié)構(gòu)在性質(zhì)和功能上可能存在一定的差異。

組織液在通道中流動(dòng)時(shí)，在進(jìn)入淋巴管內(nèi)的同時(shí)還接受來(lái)自上游及周?chē)M織的組織液，形成動(dòng)態(tài)平衡。有序的組織液通道就像城市的排水溝，為淋巴液的高效率生成提供了條件。因此有研究者提出，組織液通道可稱為組織通道(tissue channel)或前淋巴管(pre-lymphatics)[22]。組織液通道的上游源泉是毛細(xì)血管濾出液，其成分與去除血細(xì)胞后的血漿成分相同。組織液的正常流動(dòng)可使細(xì)胞代謝物得到及時(shí)清除，并保證細(xì)胞周?chē)奈h(huán)境與血漿接近，后者是全身生理調(diào)節(jié)的目標(biāo)并時(shí)刻處于穩(wěn)態(tài)中。但由于絕大多數(shù)細(xì)胞并不浸泡在血液里，而是在組織液的環(huán)境中，故將標(biāo)準(zhǔn)成分的血漿及時(shí)輸送到細(xì)胞周?chē)?，使?xì)胞周?chē)奈h(huán)境保持穩(wěn)態(tài)，對(duì)細(xì)胞的正常功能活動(dòng)具有重要意義。因此可以認(rèn)為，遍布于機(jī)體組織間隙中的組織液，其生物學(xué)特性與經(jīng)絡(luò)“行血?dú)舛鵂I(yíng)陰陽(yáng)，濡筋骨，利關(guān)節(jié)”“決生死，處百病”的功能十分相似。此外，組織液和組織液通道是否具有溝通全身表里上下，平衡人體臟腑陰陽(yáng)的功能以及傳遞病邪和針刺治療信息等，有待進(jìn)一步的實(shí)驗(yàn)研究探討，以最終確定它與中醫(yī)經(jīng)絡(luò)的關(guān)系。

本研究首次采用新型的激光共聚焦成像技術(shù)在大鼠體壁組織觀察到縱橫相交的組織間隙和組織液分布，以及長(zhǎng)程的間隙通道存在，活體顯示了循經(jīng)組織與非經(jīng)組織的組織液分布和形態(tài)特征差異，為中醫(yī)經(jīng)絡(luò)實(shí)質(zhì)研究提供了新的實(shí)驗(yàn)資料，這一技術(shù)的應(yīng)用將為中醫(yī)經(jīng)絡(luò)研究開(kāi)辟新方向。對(duì)于初步觀察到的這些特征結(jié)構(gòu)尚需要更多的形態(tài)學(xué)證據(jù)進(jìn)一步驗(yàn)證，而全身其他經(jīng)脈循行區(qū)域的間質(zhì)結(jié)構(gòu)和組織液分布特征也有待進(jìn)一步的觀察研究。