Ovsynch－TAI技術(shù)在規(guī)?；膛?chǎng)的應(yīng)用研究

劉漢玉，趙 瑋，陳曉華，宓憲偉，王素梅，劉 明，潘明章

（1.黑龍江職業(yè)學(xué)院，哈爾濱 150111；2.黑河市農(nóng)業(yè)農(nóng)村局，黑龍江 黑河 164300；3.哈爾濱市慶元公司，哈爾濱 150111）

我國的奶牛從業(yè)者一直追求提高奶牛繁殖效率的批次化繁殖技術(shù)，因?yàn)槟膛Ａ己梅敝碃顩r和高效的繁殖管理是牛場(chǎng)延續(xù)和種群擴(kuò)大的根本途徑，也直接影響牛場(chǎng)的經(jīng)濟(jì)效益。奶牛的同期排卵－定時(shí)輸精（Ovsynch－TAI）技術(shù)可以使產(chǎn)后奶牛更早受孕，能夠大大縮短奶牛產(chǎn)犢間隔，加快牛場(chǎng)的世代更替，增加奶牛產(chǎn)奶量，提高奶牛泌乳效率，特別是可以在牛奶價(jià)格處于低位時(shí)增加經(jīng)濟(jì)效益。

1 研究背景

1.1 定時(shí)輸精技術(shù)的發(fā)展歷程

隨著奶牛飼養(yǎng)技術(shù)的不斷發(fā)展，奶牛的泌乳性能不斷提高，奶牛的繁殖力卻出現(xiàn)明顯下降。為應(yīng)對(duì)這一問題，20世紀(jì)90年代J.R.Pursley發(fā)明了奶牛的同期排卵－定時(shí)輸精（Ovsynch－TAI）技術(shù)［1－3］。該技術(shù)利用外源性促性腺激素釋放激素（GnRH）和前列腺素（PG）對(duì)奶牛發(fā)情及排卵進(jìn)行人為干預(yù)，使奶牛的發(fā)情及排卵同期化，其經(jīng)典程序?yàn)镚nRH→PG→GnRH→TAI［4－6］，現(xiàn)在基于這一程序開發(fā)出了很多衍生程序。

1.2 定時(shí)輸精技術(shù)的原理

Ovsynch－TAI技術(shù)的原理是根據(jù)奶牛卵泡發(fā)育波的特點(diǎn)開發(fā)而來。奶牛的一個(gè)發(fā)情周期有2～3個(gè)卵泡波，每個(gè)卵泡波都有一個(gè)優(yōu)勢(shì)卵泡發(fā)育，但只有最后一個(gè)卵泡波的優(yōu)勢(shì)卵泡會(huì)破裂排卵。在母牛發(fā)情周期的任意一天注射GnRH，使垂體合成并釋放促卵泡素（FSH）和促黃體素（LH），誘導(dǎo)卵巢上的優(yōu)勢(shì)卵泡破裂排卵，形成黃體；7 d后注射PG溶解黃體，卵巢上會(huì)有新的優(yōu)勢(shì)卵泡被選擇出來并發(fā)育；2 d后注射GnRH，使這個(gè)優(yōu)勢(shì)卵泡在24～32 h內(nèi)排卵。由于卵巢上的卵泡多次發(fā)育，卵巢機(jī)能旺盛，卵子的質(zhì)量較高，輸精后的受胎率較高，在實(shí)踐中發(fā)現(xiàn)在第2次注射GnRH 16 h后輸精受胎率最高，因此，一般選擇在這個(gè)時(shí)間輸精。

2 材料與方法

2.1 試驗(yàn)動(dòng)物

選取哈爾濱市雙城區(qū)某牧場(chǎng)體況良好的健康中國荷斯坦奶牛80頭，隨機(jī)分為4組，每組20頭，即對(duì)照組、試驗(yàn)1組、試驗(yàn)2組、試驗(yàn)3組，對(duì)照組不進(jìn)行生殖激素處理，試驗(yàn)1組、試驗(yàn)2組、試驗(yàn)3組應(yīng)用不同定時(shí)輸精程序進(jìn)行輸精，并在輸精30 d后進(jìn)行B超妊娠診斷。

2.2 試驗(yàn)藥品和儀器

氯前列醇鈉注射液（PG，0.2 mg／支）、舒牛（GnRH，100μg／支），購自寧波激素二廠。

獸用便攜式B超機(jī)（型號(hào)為kx5100），購自徐州市凱信電子設(shè)備有限公司；細(xì)管凍精，購自黑龍江省博瑞遺傳有限公司；輸精設(shè)備，購自廣西蔣氏動(dòng)物用品有限公司。

2.3 試驗(yàn)步驟

對(duì)照組不進(jìn)行處理，應(yīng)用外部觀察法和蠟筆涂抹法進(jìn)行發(fā)情鑒定，進(jìn)行人工輸精，輸精30 d后進(jìn)行B超孕檢。

試驗(yàn)1組應(yīng)用Ovsynch－56［7］法，母牛發(fā)情周期的任意一天為第0天，第0天08：00肌注GnRH，第7天08：00肌注PG，第9天16：00肌注GnRH，第10天08：00輸精。

試驗(yàn)2組應(yīng)用預(yù)同步－11法［8－9］，母牛發(fā)情周期的任意一天為第0天，第0天08：00肌注PG，第14天08：00肌注PG，第25天08：00肌注Gn-RH，第32天08：00肌注PG，第34天16：00肌注GnRH，第35天08：00輸精。

試驗(yàn)3組應(yīng)用雙同步法［10］，母牛發(fā)情周期的任意一天為第0天，第0天08：00肌注GnRH，第7天08：00肌注PG，第10天08：00肌注GnRH，第17天08：00肌注GnRH，第24天08：00肌注PG，第26天16：00肌注GnRH，第27天08：00輸精。

2.4 數(shù)據(jù)的統(tǒng)計(jì)分析

試驗(yàn)數(shù)據(jù)采用Excel軟件進(jìn)行統(tǒng)計(jì)，并用兩樣本百分?jǐn)?shù)資料顯著性檢驗(yàn)進(jìn)行分析。

3 結(jié)果與分析

3.1 參配率

測(cè)定結(jié)果見表1、圖1。

圖1 各組奶牛參配率的比較

由表1可以看出，3個(gè)試驗(yàn)組參配率均極顯著高于對(duì)照組（P＜0.01），各試驗(yàn)組間均差異不顯著（P＞0.05）。

表1 各組奶牛參配率測(cè)定結(jié)果

3.2 受胎率

測(cè)定結(jié)果見表2、圖2。

圖2 各組奶牛受胎率的比較

表2 各組奶牛受胎率測(cè)定結(jié)果

由表2可以看出，3個(gè)試驗(yàn)組奶牛受胎率與對(duì)照組相比均差異不顯著（P＞0.05）。

4 討論

4.1 定時(shí)輸精程序?qū)δ膛⑴渎实挠绊?/h3>

本試驗(yàn)中，對(duì)照組奶牛參配率為40%，應(yīng)用同期排卵－定時(shí)輸精程序輸精的試驗(yàn)組奶牛參配率為100%，對(duì)照組與試驗(yàn)組間差異極顯著。這主要是由于對(duì)照組應(yīng)用常規(guī)發(fā)情鑒定的方法，只有發(fā)現(xiàn)奶牛發(fā)情才能進(jìn)行輸精，有些奶牛由于安靜發(fā)情或未觀察到發(fā)情錯(cuò)過了最佳配種時(shí)期。而應(yīng)用同期排卵－定時(shí)輸精程序處理的母牛，由于生殖激素的作用，卵巢的機(jī)能旺盛，排出的卵子質(zhì)量較好，不進(jìn)行發(fā)情鑒定也可以輸精，因此參配率高于自然發(fā)情。

4.2 定時(shí)輸精程序?qū)δ膛Ｊ芴ヂ实挠绊?/h3>

本試驗(yàn)中，由于樣本數(shù)較少，造成對(duì)照組、試驗(yàn)1組、試驗(yàn)2組、試驗(yàn)3組間奶牛受胎率統(tǒng)計(jì)學(xué)檢驗(yàn)差異不顯著，但在生產(chǎn)實(shí)踐中母牛受胎率的差異具有實(shí)際意義，會(huì)顯著影響牛場(chǎng)的繁殖效率和經(jīng)濟(jì)效益。以后研究會(huì)對(duì)比進(jìn)行補(bǔ)充研究，完善數(shù)據(jù)。

本試驗(yàn)中，試驗(yàn)1組奶牛受胎率為35%，對(duì)照組為20%，這可能是由于應(yīng)用Ovsynch－56法進(jìn)行激素處理，第1次注射GnRH主要是促進(jìn)第一個(gè)卵泡波的優(yōu)勢(shì)卵泡破裂，排卵，并形成黃體；第2次注射PG主要是溶解黃體，使第二個(gè)卵泡波快速發(fā)育；第3次注射GnRH是使第二個(gè)卵泡波的優(yōu)勢(shì)卵泡排卵，這時(shí)卵巢機(jī)能旺盛，排出的卵子質(zhì)量好，受胎率提高。

試驗(yàn)2組奶牛受胎率為45%，高于試驗(yàn)1組和對(duì)照組，這可能是由于試驗(yàn)2組采用預(yù)同步程序，這一程序是在Ovsynch－56程序前注射2次PG［11］。這2次PG注射會(huì)促進(jìn)奶牛黃體溶解，子宮收縮、凈化，使子宮內(nèi)環(huán)境達(dá)到最佳的受胎標(biāo)準(zhǔn)，同時(shí)使奶牛的發(fā)情同期化，這也使排卵一致化率高、受胎率高。

試驗(yàn)3組和試驗(yàn)2組奶牛受胎率均為45%，高于試驗(yàn)1組和對(duì)照組。試驗(yàn)3組的程序更加復(fù)雜、成本更高，但受胎率僅與試驗(yàn)組相同，沒有達(dá)到預(yù)期效果。

5 結(jié)論

采用Ovsynch－56、預(yù)同步－11和雙同步法進(jìn)行定期輸精處理，奶牛受胎率分別為35%、45%和45%，對(duì)照組自然發(fā)情奶牛受胎率為20%。預(yù)同步－11法以較低的成本、較高的受胎率更加適合中型的奶牛企業(yè)使用，而Ovsynch－56法更適合小型牧場(chǎng)或奶牛小區(qū)使用，而雙同步程序需要在以后試驗(yàn)中進(jìn)一步驗(yàn)證。