吸煙對(duì)穩(wěn)定期COPD患者Th17/Treg細(xì)胞表達(dá)的影響及其與血清炎性因子的相關(guān)性分析

葉彩虹 王輝 陳斯亮 咸子超

【摘要】 目的 研究吸煙對(duì)穩(wěn)定期慢性阻塞性肺疾病（COPD）患者輔助性T細(xì)胞17/調(diào)節(jié)性T細(xì)胞（Th17/Treg）細(xì)胞表達(dá)的影響及其與血清炎性因子的相關(guān)性。方法 選取50例穩(wěn)定期COPD患者作為觀察組， 根據(jù)患者吸煙情況分為吸煙組（15例）、戒煙組（20例）、非吸煙組（15例）;另選取同期體檢健康志愿者50例作為對(duì)照組。檢測(cè)并對(duì)比兩組肺功能指標(biāo)及實(shí)驗(yàn)室指標(biāo)[第1秒用力呼氣容積（FEV1）、第1秒用力呼氣容積占用力肺活量比例（FEV1/FVC）、輔助性T細(xì)胞17/調(diào)節(jié)性T細(xì)胞（Th17/Treg）、腫瘤壞死因子-α（TNF-α）、白介素-6（IL-6）、白介素-8（IL-8）]， 對(duì)比吸煙組、戒煙組、非吸煙組患者FEV1、FEV1/FVC、Th17/Treg、TNF-α、IL-6、IL-8水平， 采用Pearson相關(guān)系數(shù)分析FEV1、FEV1/FVC與Th17/Treg、TNF-α、IL-6、IL-8及Th17/Treg與TNF-α、IL-6、IL-8的相關(guān)性。結(jié)果 觀察組FEV1（42.59±7.52）%、FEV1/FVC（43.24±8.26）%均顯著低于對(duì)照組的（89.40±10.43）%、（90.62±10.33）%， 差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05）;觀察組Th17/Treg（3.11±0.54）%、TNF-α（14.25±6.32）ng/L、IL-6（19.52±8.98）ng/L、IL-8（78.52±7.85）ng/L均顯著高于對(duì)照組的（1.06±0.21）%、（5.34±2.40）ng/L、（8.85±5.95）ng/L、（62.43±3.24）ng/L， 差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05）。吸煙組、戒煙組、非吸煙組患者的FEV1、FEV1/FVC水平呈升高趨勢(shì)， 組間比較差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05）;吸煙組、戒煙組、非吸煙組患者的Th17/Treg、TNF-α、IL-6、IL-8水平呈下降趨勢(shì)， 組間比較差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05）。經(jīng)相關(guān)性分析， FEV1、FEV1/FVC與Th17/Treg、TNF-α、IL-6、IL-8呈負(fù)相關(guān)（P<0.05）。經(jīng)相關(guān)性分析， Th17/Treg與TNF-α、IL-6、IL-8呈正相關(guān)（r=0.547、0.526、0.634， P=0.000、0.000、0.000<0.05）。結(jié)論 穩(wěn)定期COPD患者Th17/Treg、TNF-α、IL-6、IL-8水平呈現(xiàn)出高表達(dá)， 且Th17/Treg、TNF-α、IL-6、IL-8水平的上升與吸煙密切相關(guān)， 患者應(yīng)當(dāng)及早戒煙。

【關(guān)鍵詞】 吸煙;穩(wěn)定期慢性阻塞性肺疾病;輔助性T細(xì)胞17;調(diào)節(jié)性T細(xì)胞;炎性因子

DOI：10.14163/j.cnki.11-5547/r.2020.15.004

Effect of smoking on Th17/Treg cell expression in stable COPD patients and its correlation with serum inflammatory factors? ?YE Cai-hong， WANG Hui， CHEN Si-liang. Department of Clinical Laboratory， Shenzhen Mental Health Center （Shenzhen Kangning Hospital）， Shenzhen 518000， China

【Abstract】 Objective? ?To study the effect of smoking on helper T cells 17/ regulatory T cells （Th17 / Treg） cell expression in stable chronic obstructive pulmonary disease （COPD） patients and its correlation with serum inflammatory factors. Methods? ?A total of 50 stable COPD patients were selected as the observation group， which were divided into smoking group （15 cases）， smoking cessation group （20 cases） and non-smoking group （15 cases） by smoking status. Another 50 healthy volunteers were selected as the control group. The pulmonary function indexes and laboratory indexes [forced expiratory volume in 1st second （FEV1）， FEV1 / force vital capacity （FVC）， Th17 / Treg， tumor necrosis factor-α （TNF-α）， interleukin-6 （IL-6）， interleukin-8 （IL-8）] were detected and compared between the two groups. The levels of FEV1， FEV1 / FVC， Th17 / Treg， TNF-α， IL-6 and IL-8 in smoking group， smoking cessation group and non-smoking group were compared. Pearson correlation coefficient was used to analyze the correlation between FEV1， FEV1 / FVC and Th17 / Treg， TNF-α， IL-6， IL-8， Th17 /

1. 2. 2 排除標(biāo)準(zhǔn) ①臨床資料不完善;②COPD急性發(fā)作期;③嚴(yán)重心肝腎功能障礙或伴有惡性腫瘤;④伴

有其他肺部疾病， 如肺結(jié)核、肺炎等。

1. 3 方法 ①資料收集：收集兩組基礎(chǔ)資料（性別、年齡、FEV1、FEV1/FVC）及實(shí)驗(yàn)室指標(biāo)（Th17/Treg、TNF-α、IL-6、IL-8）。②FEV1、FEV1/FVC檢查：分別在患者及志愿者入院2～3 d后使用德國(guó)JAEGER公司生產(chǎn)的MS-IOS型肺功能儀檢測(cè)FEV1、FEV1/FVC。③血清檢查：分別在患者及志愿者入院2～3 d后抽取清晨空腹靜脈血， 離心后送檢;制備外周血單個(gè)細(xì)胞核后使用流式細(xì)胞術(shù)檢測(cè)Th17/Treg;TNF-α、IL-6、IL-8使用酶聯(lián)免疫吸附測(cè)定法（ELISA）檢測(cè)， 檢測(cè)儀器為HY-perionMR酶標(biāo)儀（美國(guó)）， 試劑盒由深圳晶美生物工程有限公司生產(chǎn)。

1. 4 觀察指標(biāo) ①對(duì)比兩組肺功能指標(biāo)及實(shí)驗(yàn)室指標(biāo)， 包括FEV1、FEV1/FVC、Th17/Treg、TNF-α、IL-6、IL-8。②對(duì)比吸煙、戒煙、非吸煙COPD患者肺功能指標(biāo)及實(shí)驗(yàn)室指標(biāo)， 包括FEV1、FEV1/FVC、Th17/Treg、TNF-α、IL-6、IL-8。③相關(guān)性分析：以Pearson相關(guān)系數(shù)分析FEV1、FEV1/FVC與Th17/Treg、TNF-α、IL-6、IL-8及Th17/Treg與TNF-α、IL-6、IL-8的相關(guān)性。

1. 5 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法 采用SPSS19.0統(tǒng)計(jì)學(xué)軟件對(duì)數(shù)據(jù)進(jìn)行處理。計(jì)量資料以均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差（ x-±s）表示， 兩組比較采用t檢驗(yàn)， 多組比較采用方差分析;計(jì)數(shù)資料以率（%）表示， 采用χ2檢驗(yàn);相關(guān)性分析以Pearson系數(shù)檢驗(yàn)。P<0.05表示差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2. 1 兩組肺功能指標(biāo)及實(shí)驗(yàn)室指標(biāo)對(duì)比 觀察組FEV1、FEV1/FVC均低于對(duì)照組， 差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05）;觀察組Th17/Treg、TNF-α、IL-6、IL-8均高于對(duì)照組， 差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05）。見(jiàn)表1。

2. 2 吸煙組、戒煙組、非吸煙組患者肺功能指標(biāo)及實(shí)驗(yàn)室指標(biāo)對(duì)比 吸煙組、戒煙組、非吸煙組患者的FEV1、FEV1/FVC水平呈升高趨勢(shì)， 組間比較差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05）;吸煙組、戒煙組、非吸煙組患者的Th17/Treg、TNF-α、IL-6、IL-8水平呈下降趨勢(shì)， 組間比較差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05）。見(jiàn)表2。

2. 3 FEV1、FEV1/FVC與Th17/Treg、TNF-α、IL-6、IL-8相關(guān)性分析 經(jīng)相關(guān)性分析， FEV1、FEV1/FVC與Th17/Treg、TNF-α、IL-6、IL-8呈負(fù)相關(guān)（P<0.05）。見(jiàn)表3。

2. 4 Th17/Treg與TNF-α、IL-6、IL-8相關(guān)性分析

經(jīng)相關(guān)性分析， Th17/Treg與TNF-α、IL-6、IL-8呈正相關(guān)（P<0.05）。見(jiàn)表4。

3 討論

COPD是以持續(xù)性、進(jìn)行性氣流受限為特征的一種疾病， 罹患群體多為40歲以上人群， 發(fā)病后常見(jiàn)有慢性咳嗽、咳痰、喘息等一系列癥狀， 不利于患者健康， 嚴(yán)重者甚至可導(dǎo)致患者死亡[7]。目前臨床上對(duì)COPD的具體發(fā)病機(jī)制尚未明確， 但眾多臨床醫(yī)師普遍認(rèn)為與環(huán)境及個(gè)體因素密切相關(guān)， 如吸煙及粉塵、化學(xué)物質(zhì)吸入等[8]。本次研究對(duì)COPD吸煙患者Th17/Treg、TNF-α、IL-6、IL-8水平進(jìn)行觀察， 嘗試探討吸煙對(duì)Th17/Treg、TNF-α、IL-6、IL-8水平的影響， 旨在為該疾病的臨床治療工作提供幫助。

本次研究結(jié)果顯示， 觀察組FEV1、FEV1/FVC水平均顯著低于對(duì)照組， Th17/Treg、TNF-α、IL-6、IL-8水平均顯著高于對(duì)照組， 差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05）;表明穩(wěn)定期COPD患者發(fā)病后肺功能下降， 此時(shí)患者Th17/Treg、TNF-α、IL-6、IL-8水平呈現(xiàn)出高表達(dá)。COPD是一種呼吸系統(tǒng)受損疾病， 可導(dǎo)致肺功能下降， 本次研究中， 穩(wěn)定期COPD患者FEV1、FEV1/FVC明顯低于健康者， 與既往相關(guān)研究結(jié)果相符[9， 10]。

COPD發(fā)病后會(huì)引起免疫功能低下及全身炎癥反應(yīng)， 導(dǎo)致TNF-α、IL-6、IL-8水平上升。Th17是新發(fā)現(xiàn)的亞

群， 與炎癥反應(yīng)密切相關(guān)， 能夠清除機(jī)體病原微生物， Terg也是新發(fā)現(xiàn)的T淋巴細(xì)胞亞群， 具有免疫抑制作用， 能夠抑制炎癥反應(yīng)， 避免過(guò)度的炎癥反應(yīng)對(duì)機(jī)體產(chǎn)生損傷， 而Th17/Treg處于平衡時(shí)不僅能夠清除機(jī)體病原微生物， 還能避免炎癥反應(yīng)對(duì)機(jī)體產(chǎn)生損傷， 對(duì)維持機(jī)體免疫平衡具有重要意義[11， 12]。本次研究中， 觀察組Th17/Treg水平明顯上升， 分析原因可能與患者體內(nèi)炎癥因子異常表達(dá)有關(guān)， Th17/Treg平衡受到破壞， 導(dǎo)致Th17/Treg水平提高。與張占強(qiáng)等[13]研究結(jié)果基本相符。

本次研究結(jié)果中， 吸煙組、戒煙組、非吸煙組患者的FEV1、FEV1/FVC水平呈升高趨勢(shì)， 組間比較差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05）;吸煙組、戒煙組、非吸煙組患者的Th17/Treg、TNF-α、IL-6、IL-8水平呈下降趨勢(shì)， 組間比較差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05）。表明吸煙可導(dǎo)致患者肺功能降低， Th17/Treg、TNF-α、IL-6、IL-8水平高表達(dá)?？赡芘c香煙中的某些物質(zhì)促進(jìn)炎癥表達(dá)及影響肺部微生態(tài)有關(guān)[14， 15]， Th17與炎癥反應(yīng)密切相關(guān)， 當(dāng)Th17釋放更多的炎癥因子時(shí)Treg無(wú)法抑制過(guò)度的炎癥反應(yīng)， 導(dǎo)致Th17/Treg平衡被打破， 因此患者體內(nèi)Th17/Treg、TNF-α、IL-6、IL-8異常升高。

為明確吸煙與COPD患者Th17/Treg、TNF-α、IL-6、IL-8間的關(guān)系， 本文就FEV1、FEV1/FVC與Th17/Treg、TNF-α、IL-6、IL-8相關(guān)性及Th17/Treg與TNF-α、IL-6、IL-8相關(guān)性進(jìn)行分析， 證實(shí)FEV1、FEV1/FVC與Th17/Treg、TNF-α、IL-6、IL-8呈負(fù)相關(guān)（P<0.05）， Th17/Treg與TNF-α、IL-6、IL-8呈正相關(guān)（P<0.05）， 表明Th17/Treg、TNF-α、IL-6、IL-8水平的上升與吸煙密切相關(guān)， 與上述研究結(jié)果一致。因此， 穩(wěn)定期COPD患者應(yīng)當(dāng)重視吸煙對(duì)COPD的影響， 應(yīng)及早戒煙。

綜上所述， 穩(wěn)定期COPD患者Th17/Treg、TNF-α、

IL-6、IL-8水平呈現(xiàn)出高表達(dá)， 且Th17/Treg、TNF-α、

IL-6、IL-8與FEV1、FEV1/FVC呈現(xiàn)出負(fù)相關(guān)， 患者吸煙可導(dǎo)致炎癥反應(yīng)加重， 不利于疾病的治療。

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[收稿日期：2020-02-17]