哈茨木霉協(xié)同秸稈對馬鈴薯黑痣病及根際土壤微生態(tài)的影響

郭成瑾 沈瑞清 張麗榮 王喜剛 張樹武 徐秉良

(1甘肅農(nóng)業(yè)大學(xué)植物保護學(xué)院/甘肅省農(nóng)作物病蟲害生物防治工程實驗室,甘肅 蘭州 730070；2寧夏農(nóng)林科學(xué)院植物保護研究所/寧夏植物病蟲害防治重點實驗室,寧夏 銀川 750002)

木霉屬(Trichoderma)真菌廣泛分布于自然界,可通過競爭、重寄生和誘導(dǎo)抗性等多種途徑對植物病原菌產(chǎn)生抑制作用[1]。在人為可控條件下,木霉菌對多種植物病害具有良好的控制效果。然而,在實際應(yīng)用中卻存在著防治效果不穩(wěn)定的現(xiàn)象。這主要是因為土壤普遍對真菌存在抑制作用,降低了木霉菌孢子的萌發(fā)率,影響了木霉菌在土壤中的定殖和生防效果[2]。研究表明,通過添加外源營養(yǎng)物質(zhì),可在一定程度上減輕土壤對木霉菌的抑制作用[3]。

我國秸稈資源豐富,秸稈中蘊含著豐富的營養(yǎng)物質(zhì),如氮、磷、鉀等[4]。研究表明,秸稈還田能夠提高土壤有機質(zhì)含量、土壤酶活性,以及土壤微生物群落數(shù)量,增加作物產(chǎn)量[5-6]。木霉菌利用農(nóng)作物秸稈作為載體,不僅能促進木霉菌產(chǎn)孢[7],而且可加速秸稈腐熟[8],進而產(chǎn)生更多的營養(yǎng)物質(zhì),促進植物生長,提高植物抗性[9]。

馬鈴薯黑痣病是寧夏回族自治區(qū)(以下簡稱“寧夏”)馬鈴薯主產(chǎn)區(qū)重要的土傳病害之一,其防治措施主要依靠化學(xué)防治,但化學(xué)農(nóng)藥對土傳病害防治效果卻不理想,容易造成農(nóng)藥殘留,破壞土壤環(huán)境,同時又會使病原菌產(chǎn)生抗藥性[10]。研究表明,馬鈴薯土傳病害的發(fā)生與植物根際土壤微生物生態(tài)失衡密切相關(guān),主要表現(xiàn)在土壤微生物區(qū)系由“細菌型”向“真菌型”轉(zhuǎn)變[11],土壤中致病菌數(shù)量增加[12],土壤微生物群落多樣性發(fā)生改變等[13]。農(nóng)作物秸桿配施生防菌不僅可以改善作物根際土壤微生物群落結(jié)構(gòu),還能減少病原菌數(shù)量,提高病害防治效果[14-15]。本研究以分離自極端干旱沙漠地區(qū)的哈茨木霉(Trichodermaharzianum)M-33 菌株為對象,通過測定其對立枯絲核菌(Rhizoctonia solani)的拮抗作用,研究添加秸稈后哈茨木霉M-33 菌株對馬鈴薯黑痣病的防治效果,及其對馬鈴薯植株生長和馬鈴薯根際土壤微生物區(qū)系的影響,探討哈茨木霉M-33 菌株防病促生作用及其機理,以期為哈茨木霉M-33菌株的實際應(yīng)用提供理論支撐。

1 材料與方法

1.1 試驗材料

供試菌株：哈茨木霉M-33(保藏編號為CCTCC NO：M2018537),立枯絲核菌。供試菌株均保存于寧夏農(nóng)林科學(xué)院植物保護研究所病理室。哈茨木霉M-33培養(yǎng)液采用LM 液體培養(yǎng)基,28℃、120 r·min-1培養(yǎng)5～7 d,孢子濃度達到1×108個·mL-1時備用。

供試秸稈：小麥秸稈,取自寧夏銀川市平吉堡。

供試馬鈴薯：品種為大西洋,由六盤山薯業(yè)提供。選擇表面帶有明顯立枯絲核菌的種薯,病級為3 級。

供試土壤：壤土,pH 值8.2,有機質(zhì)含量15.8 g·kg-1,取自寧夏西吉縣新營鄉(xiāng)。土壤中添加育苗基質(zhì)(70 g·kg-1)、有機肥(58 g·kg-1)充分混勻后,裝入花盆中待用。

供試培養(yǎng)基：LM 液體培養(yǎng)基(蜂蜜20 g、酵母粉5 g、FeSO4·7H2O 0.1 g、MgSO4·7H2O 1.25 g、KH2PO44 g、NaNO37 g、蒸餾水1 000 mL)。木霉選擇性培養(yǎng)基(葡萄糖10 g、蛋白胨5 g、MgSO40.5 g、KH2PO41 g、瓊脂粉10 g、蒸餾水1 000 mL),將各種成分溶解在水里,加熱沸騰后加入1%孟加拉紅3.3 mL,然后分裝滅菌；使用前待培養(yǎng)基冷卻至40～45℃,加入1%鏈霉素0.3 mL,40%五氯硝基苯可濕性粉劑0.1 g。

1.2 試驗設(shè)計

本試驗于2017年在寧夏農(nóng)林科學(xué)院植物保護研究所日光溫室中進行。試驗設(shè)置協(xié)同處理(哈茨木霉M-33 培養(yǎng)液加入小麥秸稈,T33W)、哈茨木霉M-33培養(yǎng)液(T33)、LM 液體培養(yǎng)基加入小麥秸稈(W)、40%五氯硝基苯可濕性粉劑(PN)、對照(CK)共5 個處理。每盆播種3 塊薯塊,每個處理9 盆,3 次重復(fù)。T33W 處理方法：將盆土中部挖直徑20 cm、深度15 cm的播種坑,將20 mL 哈茨木霉M-33 培養(yǎng)液澆入50 g滅菌小麥秸稈中,配制成混合物,約含哈茨木霉M-33有效活菌數(shù)3.4×105個·g-1,每盆穴施13.5 g 混合物；T33 處理方法：將1 mL 哈茨木霉M-33 培養(yǎng)液加入100 mL LM 液體培養(yǎng)基中混勻進行穴施,哈茨木霉M-33 有效活菌數(shù)為1×106個·g-1；W 處理方法：將100 mL LM 液體培養(yǎng)基澆入13.5 g 小麥秸稈中混勻進行穴施。PN 處理方法：40%五氯硝基苯可濕性粉劑按1∶20 比例與土混勻后穴施；CK 不做任何處理。所有處理完畢后,將帶菌薯塊播入坑中,覆土,于日光溫室內(nèi)培養(yǎng)。白天溫度控制在25～28℃,夜間溫度控制在18～20℃,每隔3 d 澆水1 次。

1.3 試驗方法

1.3.1 哈茨木霉M-33 對立枯絲核菌拮抗作用機制

作者簡介：莊順火，男，漢族，福建南靖人，南靖縣船場中心梧宅小學(xué)教師，小學(xué)語文一級教師，大專學(xué)歷，研究方向：小學(xué)語文教育。

采用平皿對峙培養(yǎng)法,測量立枯絲核菌對照半徑(Rc)和處理立枯絲核菌菌落朝哈茨木霉M-33 菌落方向擴展的半徑(Rp),計算抑菌率：

用滅菌刀片切取PDA 上兩菌接觸部位菌絲塊,經(jīng)過多次固定、漂洗、脫水、干燥后,采用離子濺射鍍膜法制備電鏡測試樣本,最后放于SU8100 掃描電子顯微鏡(HITACHI 公司,日本)下觀察采圖。

1.3.2 馬鈴薯黑痣病防治效果測定 于馬鈴薯播種時調(diào)查播種數(shù),播種后30 d 調(diào)查各處理出苗數(shù),計算出苗率：

于收獲期調(diào)查薯塊黑痣病發(fā)病情況,每個處理按照馬鈴薯黑痣病分級標準[16]記錄薯塊病級數(shù),計算病情指數(shù)：

1.3.3 馬鈴薯生長指標測定 于成株期測定馬鈴薯的株高、莖粗和分枝數(shù)。株高用直尺量取主莖從地表到心葉的高度,莖粗用游標卡尺在離地面1 cm 處采用十字交叉法的方式量取,分枝數(shù)用目測法。

1.3.4 根際土壤可培養(yǎng)微生物及木霉菌數(shù)量測定 于收獲期拔出馬鈴薯植株,將附于根系上的土壤抖落,裝入自封袋,4℃保存。采用稀釋平板法測定馬鈴薯根際土壤微生物數(shù)量,采用稀釋平板涂布法測定木霉菌數(shù)量。細菌培養(yǎng)采用牛肉膏蛋白胨瓊脂培養(yǎng)基；真菌培養(yǎng)采用改良馬丁氏孟加拉紅培養(yǎng)基；放線菌培養(yǎng)采用改良高氏1號培養(yǎng)基；木霉菌培養(yǎng)采用木霉選擇性培養(yǎng)基。以1 g 鮮土所含微生物菌落形成單位數(shù)量(CFU·g-1)表示菌落數(shù)量結(jié)果。

1.3.5 根際土壤微生物區(qū)系變化分析 采集土樣方法同上,5 個處理,3 次重復(fù),共計15 個樣品,-80℃保存。依托北京諾禾致源生物信息有限公司Illumina Hiseq 平臺,對各處理土壤DNA 的真菌內(nèi)轉(zhuǎn)錄間隔區(qū)(ITS)的ITS2 區(qū)和細菌16S rRNA 基因的V4 區(qū)進行擴增測序。

使用QIIME 軟件對下機后的原始序列進行拼接、過濾等處理得到有效數(shù)據(jù)。在UPARSE 中分析后,利用USEARCH Pipline 生成OTU 表格并選取代表性序列,去除質(zhì)控分數(shù)低于0.5、長度低于200 bp 的序列和單序列。使用RDP 數(shù)據(jù)庫對獲得的OTU 有效序列分類注釋,真菌和細菌分類分別對應(yīng)UNITE Fungal ITS數(shù)據(jù)庫和RDP 16S rRNA 數(shù)據(jù)庫。將上述獲得的OTU 表轉(zhuǎn)化成合適格式后,使用mothur 軟件進行多樣性分析,α-多樣性分析包括菌群多樣性指數(shù)(Shannon-Wiener 多樣性指數(shù))和菌群豐富度指數(shù)(Chao1 指數(shù)),β - 多樣性分析為主坐標分析(principal co-ordinates analysis,PCoA)。同時,根據(jù)所有樣本在屬水平的物種注釋及豐度信息,選取豐度排名前20 的屬,根據(jù)其在每個樣本中的豐度信息,制表列出并分析。

1.4 數(shù)據(jù)處理

采用Microsoft Office Excel 2013 軟件進行數(shù)據(jù)統(tǒng)計,DPS 3.1 軟件進行數(shù)據(jù)分析,Duncan 新復(fù)極差法進行方差分析(P＜0.05)。

2 結(jié)果與分析

2.1 哈茨木霉M－33 對立枯絲核菌拮抗作用機制研究

平皿對峙法測定結(jié)果表明,接種2 d 后,哈茨木霉M-33 菌絲與立枯絲核菌菌絲發(fā)生明顯的接觸；接種4 d后,哈茨木霉M-33 占領(lǐng)全部營養(yǎng)空間,并在立枯絲核菌菌落上產(chǎn)生大量孢子(圖1-c)。立枯絲核菌處理平均半徑為16.67 mm,立枯絲核菌對照平均半徑為43.33 mm,抑制率為61.53%。這說明哈茨木霉M-33對立枯絲核菌具有空間競爭作用。

圖1 哈茨木霉M－33 與立枯絲核菌的純培養(yǎng)和對峙培養(yǎng)Fig.1 The single culture and dual culture on T.harzianum M－33 and R.solani

掃描電鏡觀察發(fā)現(xiàn),哈茨木霉M-33 的菌絲緊貼于立枯絲核菌菌絲上,使立枯絲核菌菌絲表面扭曲、變形(圖2-A)；哈茨木霉M-33 菌絲纏繞攀附在立枯絲核菌菌絲上(圖2-B)；哈茨木霉M-33 菌絲侵入立枯絲核菌菌絲內(nèi)部,入侵口凹陷,立枯絲核菌菌絲萎縮、塌陷(圖2-C)；立枯絲核菌菌絲斷裂、崩解(圖2-D)。上述結(jié)果表明,哈茨木霉M-33 對立枯絲核菌具有重寄生作用。

2.2 不同處理對馬鈴薯黑痣病防治效果評價

由表1可知,T33W 出苗率最高,分別較T33、W、PN、CK 提高了7.41、14.81、22.22 和37.04 個百分點,T33W、T33、W、PN 均顯著高于CK。T33W 薯塊病情指數(shù)最低,為5.21,防治效果為70.26%,其次為PN,病情指數(shù)為5.64,防治效果為67.81%；T33W 與PN 之間的防治效果差異不顯著,但顯著高于其他處理,T33W 對馬鈴薯黑痣病的防治效果達到且超過了化學(xué)藥劑PN 水平。

圖2 哈茨木霉M－33 與立枯絲核菌互作掃描電鏡照片F(xiàn)ig.2 Stereoscan photographs of interaction between T.harzianum M－33 and R.solani

表1 不同處理對馬鈴薯出苗率的影響及黑痣病的防治效果Table 1 Effect of different treatments on emergence rate and potato black scurf control

2.3 不同處理對馬鈴薯生長指標的影響

由表2可知,不同處理馬鈴薯株高、莖粗、分枝數(shù)均表現(xiàn)為T33W＞T33＞W(wǎng)＞PN＞CK,其中T33W 的株高、莖粗和分枝數(shù)分別較CK 提高了186.67%、57.69%和218.85%,T33 分別較CK 提高了106.27%、26.92%和168.85%。T33W、T33、W 和PN 4 個處理的馬鈴薯株高均顯著高于CK；除PN 的莖粗和分枝數(shù)與CK 不顯著外,其他處理均顯著高于CK。上述結(jié)果表明,哈茨木霉M-33 處理能夠促進馬鈴薯植株的生長。

表2 不同處理對馬鈴薯生長指標的影響Table 2 Effect of different treatments on growth index of potato

2.4 不同處理對馬鈴薯根際土壤可培養(yǎng)微生物數(shù)量與木霉菌數(shù)量的影響

由表3可知,與CK 相比,其他處理均顯著降低了土壤真菌數(shù)量,其中T33W 和T33 土壤真菌數(shù)量下降最明顯,分別較CK 降低了29.54%和43.73%；同時,與CK 相比,其他處理均提高了土壤細菌、放線菌和木霉菌數(shù)量,其中T33W 和W 細菌數(shù)量升高最明顯,分別較CK 提高了75.36%和44.80%；T33W 放線菌和木霉菌數(shù)量升高最明顯,分別較CK 提高了60.58%和1 407.27%。由此可見,T33W 能夠降低土壤中真菌數(shù)量,提高細菌和放線菌數(shù)量,促進木霉菌增殖。

表3 不同處理對馬鈴薯根際土壤可培養(yǎng)微生物數(shù)量和木霉菌數(shù)量的影響Table 3 Effect of different treatments on culturable microbe quantities and amount of Trichoderma with potato rhizosphere soil

2.5 不同處理對馬鈴薯根際土壤微生物區(qū)系變化的影響

2.5.1 馬鈴薯根際土壤微生物群落多樣性分析 表4為在3%差異度水平下,不同處理馬鈴薯根際土壤微生物的α-多樣性。真菌群落多樣性分析表明,T33W的Shannon-Wiener 指數(shù)最高,較CK 提高了12.59%,各處理間差異不顯著；T33 和W 的Chao1 指數(shù)分別為773.44 和775.93,顯著高于其他處理,表明T33W 的根際土壤真菌群落多樣性高,真菌種類相對較多,分布均勻。細菌群落多樣性分析表明,T33W 的Shannon-Wiener 指數(shù)最高,較CK 提高了1.00%,而其他處理均低于CK,各處理間差異不顯著；W 和PN 的Chao1 指數(shù)高于CK,T33W 和T33 的Chao1 指數(shù)低于CK,各處理間差異均不顯著,表明各處理根際土壤細菌群落多樣性差異均不顯著。

表4 不同處理對馬鈴薯根際土壤微生物群落多樣性的影響Table 4 Effect of different treatments on community diversity index of potato rhizosphere soil microorganisms

2.5.2 馬鈴薯根際土壤微生物群落結(jié)構(gòu)相似性分析

基于Weighted Unifrac 距離的PCoA 分析了不同處理微生物群落結(jié)構(gòu)相似性。真菌群落結(jié)構(gòu)分析表明(圖3-A),PC1 和PC2 解釋率分別為23.14%和21.57%,T33W、CK 和W 分別位于第二、第三和第四象限內(nèi),三者之間距離較遠,而T33 和PN 集中在坐標軸中心位置,二者距離較近。說明T33W、CK 和W 之間真菌群落結(jié)構(gòu)組成差異較大,而T33 和PN 之間真菌群落結(jié)構(gòu)組成相似。細菌群落結(jié)構(gòu)分析表明(圖3-B),PC1 和PC2 解釋率分別為30.01%和19.34%,PN在第三象限內(nèi),與其他處理相距較遠,T33W、T33、W和CK 集中在坐標軸中心位置,相距較近。說明T33W、T33、W 和CK 之間細菌群落結(jié)構(gòu)組成相似,與PN 細菌群落結(jié)構(gòu)組成差異較大。

圖3 不同處理對馬鈴薯根際土壤微生物群落結(jié)構(gòu)的影響Fig.3 Effect of different treatments on microbial community structure of potato rhizosphere soil microorganisms

2.5.3 馬鈴薯根際土壤微生物群落結(jié)構(gòu)組成分析 由表5可知,優(yōu)勢真菌屬在各處理中相對豐度均大于1%的僅有2 屬,即鐮刀菌屬和假裸囊菌屬,且在T33W中相對豐度最低,在PN 中相對豐度最高。各優(yōu)勢真菌屬相對豐度在不同處理中存在差異,其中,木霉屬(18.75%)和漆斑菌屬(4.96%)在T33W 中相對豐度最高；Rectifusarium(5.31%)、鏈格孢屬(1.76%)、頭束霉屬(1.43%)、小不整球殼屬(1.44%)和枝頂孢屬(1.05%)在T33 中相對豐度最高；枝葡萄孢屬(3.44%)、毛殼屬(3.21%)和沙氏殼屬(1.69%)在W 中相對豐度最高；鐮刀菌屬(50.39%)、假裸囊菌屬(6.65%)、馬杜拉分枝菌屬(2.17%)、枝孢屬(1.16%)和赤霉屬(1.13%)在PN 中相對豐度最高；杯梗孢屬(5.52%)、曲霉屬(2.28%)、Chordomyces(1.07%)、殼二孢屬(1.23%)和青霉屬(0.97%)在CK 中相對豐度最高。

表5 不同處理下馬鈴薯根際土壤真菌群落的優(yōu)勢屬及相對豐度Table 5 The dominant genus and relative abundance of fungal community from potato rhizosphere soil in different treatments

由表6可知,優(yōu)勢細菌屬在各處理中相對豐度均大于1%的有6 屬,分別為鞘氨醇單胞菌屬、多米孢桿菌屬、芽孢桿菌屬、溶桿菌屬、斯科曼氏球菌屬和未確定酸桿菌門。各優(yōu)勢細菌屬相對豐度在不同處理中存在差異,其中,未確定酸桿菌門(1.88%)、類諾卡氏屬(1.19%)、大理石雕菌屬(0.80%)和土壤紅色桿菌屬(1.21%)在T33W 中相對豐度最高；鞘氨醇單胞菌屬(3.75%)、溶桿菌屬(2.40%)、交替赤桿菌屬(0.61%)和藤黃色單胞菌屬(0.87%)在T33 中相對豐度最高；斯科曼氏球菌屬(2.00%)、鏈霉菌屬(0.65%)、芽單胞桿菌屬(0.73%)在W 中相對豐度最高；多米孢桿菌屬(3.35%)、亞硝化螺菌屬(2.58%)、Woeseia(1.03%)、特呂珀菌屬(1.14%)、膨脹芽孢桿菌屬(0.69%)和Salinimicrobium(1.49%)在PN 中相對豐度最高；芽孢桿菌屬(3.03%)、交替赤桿菌屬(0.61%)、微枝形桿菌屬(0.86%)和未確定α-變形桿菌綱(0.68%)在CK 中相對豐度最高。

表6 不同處理下馬鈴薯根際土壤細菌群落的優(yōu)勢屬及相對豐度Table 6 The dominant genus and abundance of bacteria community from potato rhizosphere soil in different treatments

3 討論

本研究結(jié)果表明,哈茨木霉M-33 對立枯絲核菌具有較強的拮抗作用,主要拮抗機制為空間競爭作用和重寄生作用,這與谷祖敏等[17]的研究結(jié)果相符。倪方方等[18]發(fā)現(xiàn)哈茨木霉分泌的細胞壁水解酶有利于木霉菌菌絲侵入病原菌菌絲內(nèi)部,從而引起病原菌菌絲出現(xiàn)明顯的斷裂,本研究也發(fā)現(xiàn)了類似現(xiàn)象,推測哈茨木霉M-33 可能具有溶菌作用。

本研究結(jié)果表明,哈茨木霉M-33 和小麥秸稈協(xié)同處理時,木霉菌仍保持了較高的數(shù)量,顯著高于其他處理,說明有機添加物能為生防木霉菌提供營養(yǎng),促進木霉菌孢子萌發(fā)[19]。盆栽試驗結(jié)果表明,哈茨木霉M-33 處理后,可顯著提高馬鈴薯出苗率,降低馬鈴薯黑痣病病情指數(shù),其中協(xié)同處理防治效果達到化學(xué)藥劑防效水平,這與喬俊卿等[20]、肖榮鳳等[21]的研究結(jié)果一致。此外,本研究還發(fā)現(xiàn),單施哈茨木霉M-33 和單施小麥秸稈對馬鈴薯植株都具有一定的促生效果,二者協(xié)同處理對馬鈴薯促生效果更顯著,這可能因為有機物的添加增強了生防木霉菌在植物根部競爭能力,可快速占領(lǐng)生態(tài)位,定殖于植物根表面,引起植物新陳代謝實質(zhì)性變化,增加養(yǎng)分利用率,增強植物抗病性,進而促進植物生長[22-23]。

大量研究表明,土壤健康與微生物有關(guān)[24],施用木霉菌肥能夠增加連作土壤中細菌和放線菌數(shù)量,降低真菌數(shù)量[25]。本研究中協(xié)同處理也表現(xiàn)了相似的趨勢,這可能是小麥秸稈的添加促進了哈茨木霉M-33 菌株增殖,增強了哈茨木霉M-33 對土壤中病原菌的拮抗作用,從而抑制了病原真菌的繁殖,降低了馬鈴薯根際土壤真菌的數(shù)量。而馬鈴薯根際土壤中細菌和放線菌數(shù)量的增加,可能與秸稈還田顯著提高作物根際土壤中微生物數(shù)量有關(guān)[26]。協(xié)同處理后,根際土壤由“真菌型”向“細菌型”轉(zhuǎn)變,保持了土壤微生物區(qū)系平衡,從而減輕了病害的發(fā)生。

Bonanomi 等[27]研究表明,土壤真菌群落多樣性與土壤抑制土傳病害能力呈正相關(guān)。本研究中馬鈴薯黑痣病防效顯著的協(xié)同處理結(jié)果印證了這一觀點,處理后根際土壤真菌多樣性增加,表明根際土壤真菌多樣性變化可能響應(yīng)馬鈴薯黑痣病的發(fā)生。本研究基于OUT 組成的PCoA 分析也表明,協(xié)同處理后根際土壤真菌群落結(jié)構(gòu)組成與其他處理不同,而根際土壤細菌群落結(jié)構(gòu)組成與其他處理表現(xiàn)出較高的相似性,以上結(jié)論都證實了哈茨木霉M-33 與小麥秸稈協(xié)同處理能夠改變根際土壤真菌群落,對細菌群落影響不大,胡洪濤等[28]也報道了類似的結(jié)果。但也有報道表明,施用木霉菌會使真菌多樣性指數(shù)明顯降低[29],或者對土壤微生物多樣性無影響[30],這可能與木霉種類、土壤微環(huán)境、采樣時間以及作物種類等不同有關(guān)。

本研究首次從宏基因組水平上分析了哈茨木霉M-33 與小麥秸稈協(xié)同處理對根際土壤微生物群落影響。在屬水平上,協(xié)同處理顯著降低了鐮刀菌屬的相對豐度,而鐮刀菌是引起馬鈴薯土傳病害的重要致病菌,也是造成馬鈴薯連作的主要因素,鐮刀菌相對豐度的下降可能與哈茨木霉M-33 對其具有拮抗作用相關(guān)。同時,協(xié)同處理增加了木霉屬和漆斑菌屬的相對豐度。這可能是小麥秸稈的添加促進了哈茨木霉M-33 在馬鈴薯根際土壤中的增殖,并吸引了能夠產(chǎn)生有益酶類、降解植物病原菌菌核的漆斑孢屬真菌[31]的聚集。同時,研究發(fā)現(xiàn)協(xié)同處理促進了具有分解纖維素降解能力的酸桿菌門細菌[32]相對豐度增加,其在抑病型土壤中豐度高于導(dǎo)病型土壤,表現(xiàn)出較大的抑病潛力[33]。

4 結(jié)論

哈茨木霉M-33 對病原菌的拮抗機制表現(xiàn)為空間競爭和重寄生作用,其與小麥秸稈協(xié)同能顯著提高對馬鈴薯黑痣病防治效果,而且具有促進馬鈴薯生長,顯著增加土壤中細菌、放線菌和木霉菌數(shù)量,降低真菌數(shù)量的作用。此外,哈茨木霉M-33 能有效改善土壤中微生物群落結(jié)構(gòu),減少土壤中致病真菌豐度。本研究為開發(fā)環(huán)境友好型的生防木霉菌劑提供了理論和實踐依據(jù)。