高效液相色譜法同時(shí)測(cè)定辣椒中氯蟲苯甲酰胺和溴氰蟲酰胺的殘留

宋文芳

摘 要：本文建立了一種同時(shí)測(cè)定辣椒中氯蟲苯甲酰胺和溴氰蟲酰胺殘留的高效液相色譜方法。辣椒樣本采用丙酮提取，鹽析后取上清液，用GCB/PSA復(fù)合固相萃取柱進(jìn)行凈化，經(jīng)濃縮后用甲醇復(fù)溶，待測(cè)。結(jié)果表明，這2種被測(cè)物在0.60～14.40 mg·mL-1范圍內(nèi)線性關(guān)系良好，相關(guān)系數(shù)r（均）>0.999;這2種被測(cè)物在3個(gè)加標(biāo)水平下的平均回收率為62.2%～95.1%，日內(nèi)和日間精密度均≤14.9%。該法靈敏度高、準(zhǔn)確性好、成本較低，可用于辣椒中這2種農(nóng)藥殘留的同時(shí)檢測(cè)。

關(guān)鍵詞：氯蟲苯甲酰胺;溴氰蟲酰胺;高效液相色譜法;殘留

Abstract：A method was developed for the simultaneous determination of chlorantraniliprole and cyantraniliprole residues in capsicum by high performance liquid chromatography.The sample was extracted with acetone. The supernatant was purified by GCB/PSA solid phase extraction column after salting out. After concentration， it was reconstituted with methanol， waiting for the test. The calibration curves of the two compounds were linear in the range of 0.60～14.40 mg·mL-1（correlation coefficient （r） >0.999）. The recoveries were 62.2%～95.1% in the three spiked levels，and the intra-day and inter-day precisions were no more than 14.9%. The method is high sensitivity， good accuracy and low cost， and can be used for the simultaneous determination of chlorantraniliprole and cyantraniliprole residues in capsicum.

Key words：Chlorantraniliprole; Cyantraniliprole; Residue; HPLC

氯蟲苯甲酰胺是杜邦公司研發(fā)的第一代魚尼丁受體抑制劑類農(nóng)藥殺蟲劑，于2000年開發(fā)，2007年正式投放市場(chǎng)，對(duì)鱗翅目的夜蛾科、螟蛾科、蛀果蛾科等均有很好的控制效果[1]。溴氰蟲酰是由科研人員對(duì)氯蟲苯甲酰胺苯環(huán)上的各種極性基團(tuán)進(jìn)行改變調(diào)整，用氰基替代了氯基，活性和內(nèi)吸性都有所提高，除了能防治鱗翅目害蟲外，還可用于防治半翅目和鞘翅目害蟲，更具有殺蟲廣譜性[2]。

國(guó)內(nèi)有關(guān)氯蟲苯甲酰胺果蔬殘留量測(cè)定主要采用QuEChERS[3]或固相萃取法[4]這2種前處理技術(shù)聯(lián)用色譜-質(zhì)譜檢測(cè)技術(shù)[5]來(lái)進(jìn)行測(cè)定，而有關(guān)溴氰蟲酰胺果蔬殘留量測(cè)定大多是田間防效作用的研究[6-7]，對(duì)在農(nóng)作物中殘留量測(cè)定的報(bào)道較少。色譜-質(zhì)譜聯(lián)用儀價(jià)格和維護(hù)費(fèi)用高，方法較難推廣。本文擬采用固相萃取法聯(lián)用高效液相色譜法實(shí)現(xiàn)對(duì)辣椒中氯蟲苯甲酰胺和溴氰蟲酰胺這2種殺蟲劑的殘留進(jìn)行測(cè)定。

1 材料與方法

1.1 儀器與設(shè)備

P230高效液相色譜儀（依利特）;RE-2000A旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)器（上海亞榮）;HP-5011氮吹儀（上海濟(jì)成）;HX-12A固相萃取裝置（恒信科技）;AB204-S分析天平（美國(guó)梅特勒）。

1.2 標(biāo)準(zhǔn)溶液的配制

精密稱取氯蟲苯甲酰胺和溴氰蟲酰胺這2種標(biāo)準(zhǔn)品，用DMF溶解并稀釋成0.6 mg·mL-1的標(biāo)準(zhǔn)儲(chǔ)備液。將上述儲(chǔ)備液用甲醇稀釋，配制成氯蟲苯甲酰胺濃度為12.00 mg·mL-1、溴氰蟲酰胺濃度為3.00 mg·mL-1的混合標(biāo)準(zhǔn)溶液，置于0～4 ℃冰箱避光保存。

1.3 樣品前處理

辣椒10個(gè)，切成小片，放入搗碎機(jī)中搗碎，再用組織勻漿機(jī)打漿，稱取6 g勻漿樣品于50 mL塑料離心管中，加入20 mL丙酮溶液，于振蕩器上振蕩提取3 min。加入2 g氯化鈉，再振蕩提取1 min，取全部上清液于50 ℃水浴旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)濃縮至近干，用2 mL甲醇-水（體積比70∶30）復(fù)溶。

將上述樣品提取液加入事先活化的小柱，用8 mL甲醇-水（體積比70∶30）溶液進(jìn)行洗脫，收集流出液，再用4 mL甲醇-水（體積比70∶30）溶液分2次洗滌燒瓶，將洗滌液注入萃取小柱，收集并合并流出液，于50 ℃水浴旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)濃縮近干，用氮?dú)獯蹈?。用甲醇溶液定容? mL，過(guò)0.45 mm濾膜，待測(cè)。

1.4 分析條件

色譜柱：ODS-BP（4.6 mm×200 mm，5 mm）;柱溫：25 ℃;流動(dòng)相：甲醇-水（體積比60∶40）;檢測(cè)波長(zhǎng)：268 nm;流速：1.2 mL·min-1。

2 結(jié)果與分析

2.1 樣品前處理的優(yōu)化

2.1.1 固相萃取柱的選擇

本研究考察4種不同固相萃取柱，分別為500 mg/6 mL規(guī)格的C18、NH2、GCB和500 mg/500 mg/6 mL GCB/PSA固相復(fù)合萃取柱。結(jié)果表明，GCB/PSA復(fù)合固相萃取柱凈化效果最好，處理后基體中干擾組分明顯減少。因此，本文選用GCB/PSA復(fù)合固相萃取柱作為最終的SPE柱。

2.1.2 洗脫劑種類的選擇

本研究選取了丙酮-水、乙腈-水、甲醇-水和二甲基甲酰胺-水作為洗脫劑。通過(guò)對(duì)凈化后的加標(biāo)樣品溶液按1.4項(xiàng)下色譜條件進(jìn)行測(cè)定，考察這4種洗脫劑對(duì)SPE萃取效果的影響。結(jié)果表明，用甲醇-水作為洗脫劑時(shí)，這2種殺蟲劑的回收率較好。二甲基甲酰胺-水作為洗脫劑時(shí)，較多基體雜質(zhì)也被洗脫下來(lái)，凈化效果較差。因此，本研究采用甲醇-水（體積比70∶30）作為最終洗脫溶劑。

2.2 方法學(xué)考察

2.2.1 線性范圍、檢出限和定量限

在1.4項(xiàng)條件下，對(duì)氯蟲苯甲酰胺和溴氰蟲酰胺質(zhì)量濃度分別為0.72、3.60、6.00、12.00 mg·mL-1和14.40 mg·mL-1和0.60、3.00、4.80、6.00 mg·mL-1和7.20 mg·mL-1的標(biāo)準(zhǔn)溶液進(jìn)行測(cè)定（見表1）。結(jié)果表明，這2種化合物線性關(guān)系良好，相關(guān)系數(shù)（r）均>0.999，氯蟲苯甲酰胺和溴氰蟲酰胺的儀器檢出限（LOD）分別為4.2 mg·kg-1和2.8 mg·kg-1，定量限（LOQ）分別為13.3 mg·kg-1和7.7 mg·kg-1。

2.2.2 回收率

氯蟲苯甲酰胺在0.03、0.30、0.60 mg·kg-1這3個(gè)質(zhì)量濃度添加水平下，回收率為62.2%～92.5%（見表2），溴氰蟲酰胺在0.05、0.50、1.00 mg·kg-1這3個(gè)質(zhì)量濃度添加水平下，回收率為62.9%～95.1%（見表3）。表明本法在樣品前處理及測(cè)定中有較好的回收率，適用于辣椒樣本中這2種農(nóng)藥殘留量的測(cè)定。

2.2.3 日內(nèi)和日間精密度

在低、中、高3個(gè)濃度水平進(jìn)行加標(biāo)試驗(yàn)，每個(gè)濃度分別設(shè)定5個(gè)平行樣，連續(xù)測(cè)定3 d。氯蟲苯甲酰胺日內(nèi)精密度為4.1%～10.9%（n=5），日間精密度為3.9%～11.2%（n=3）。溴氰蟲酰胺日內(nèi)精密度為7.6%～12.4%（n=5），日間精密度為7.4%～14.9%（n=3）（見表4）。

2.2.4 實(shí)際樣品測(cè)定

在本地菜場(chǎng)購(gòu)買了8份辣椒，對(duì)其進(jìn)行測(cè)定，結(jié)果均未檢出?？梢?，目前市場(chǎng)上銷售的辣椒，這2種農(nóng)藥的殘留量均控制的比較好。

3 結(jié)論

本文建立了一種同時(shí)測(cè)定氯蟲苯甲酰胺和溴氰蟲酰胺這2種鄰甲酰胺基苯甲酰胺類農(nóng)藥在辣椒中殘留的高效液相色譜法。該法靈敏度高、準(zhǔn)確性好、成本較低，可用于辣椒中這2種農(nóng)藥殘留的同時(shí)檢測(cè)。

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