美托洛爾對大鼠心肌梗死后Th1平衡以及鉀通道Kv2.1和KIR2.1表達的調(diào)控①

黃 侃 史慧穎 王淑男 霍艷萍 劉燦君 那靜濤

(齊齊哈爾醫(yī)學院附屬第三醫(yī)院心血管二科,齊齊哈爾 161000)

心肌梗死(myocardial infarction，MI)是導致心血管疾病患者死亡的重要原因，調(diào)查顯示近年來MI發(fā)病率和死亡率逐年升高[1]。MI常引發(fā)左心室重塑造成心室舒張、收縮功能受損，嚴重威脅患者生命健康[2]。近期研究發(fā)現(xiàn)鉀離子通道在心肌細胞電生理穩(wěn)態(tài)中發(fā)揮重要調(diào)控作用，急性心肌缺血后，細胞外鉀離子濃度升高，細胞中鉀離子缺失或鈉內(nèi)流，造成外向鉀離子電流減少，導致心肌細胞動作電位時程(action potential duration,APD)延長，引發(fā)心律失常等[3]。KIR2.1、Kv2.1分別為快速激活延遲整流鉀電流、緩慢激活延遲電流的主要形成蛋白，動物研究顯示MI發(fā)生后，KIR2.1、Kv2.1水平出現(xiàn)不同程度的降低，因此抑制鉀離子電流通道開放是治療MI的重要研究方向[4]。過往研究顯示急性MI與免疫應答有關，MI發(fā)生后，脾臟淋巴液輔助T細胞1(Th1)型炎癥因子水平升高，Th2型炎癥因子水平降低，Th1/Th2細胞免疫失衡[5]。體外研究發(fā)現(xiàn)，調(diào)控Th1/Th2平衡向Th1移動，可減弱鉀通道KIR2.1的表達[6]，然而在體內(nèi)研究中尚未見報道。本研究通過制備MI大鼠模型，并給予美托洛爾(Metoprolol)干預，以期探究對MI大鼠心肌保護的作用，并初步探究其對MI大鼠免疫平衡以及鉀離子通道蛋白的影響，為臨床應用提供一定的參考。

1 材料與方法

1.1材料

1.1.1實驗動物 SPF級雄性SD大鼠購自河南省實驗動物中心，體質(zhì)量220～260 g，8周齡，合格證號：SYXK(豫)2016-0002。本研究經(jīng)本院動物倫理委員會批準，嚴格按照《關于善待實驗動物的指導性意見》進行飼養(yǎng)，適性飼養(yǎng)1周后用于模型制備。

1.1.2試劑與儀器 美托洛爾片購自阿斯利康制藥有限公司，批號：170429；RPMI1640培養(yǎng)液購自美國Gibco公司，貨號：ZQ-211；蛋白裂解液、血清干擾素γ(IFN-γ)、IL-2、IL-4、IL-10檢測試劑盒購自碧云天生物技術(shù)研究所，貨號：P0013、PI508、PI575、PI5365、PI522；氯化三苯硝基四氮唑紅(Triphenylnitrotetrazolium chloride，TTC)溶液、IL-4(APC標記)、IFN-γ(DAPI標記)購自美國Sigma公司，貨號：42135、MABF150B、F8648；CD3抗體(FITC標記)、CD4抗體(PE標記)購自美國R&D公司，貨號：HTCC30、MCD8C-1005；鼠抗T盒子轉(zhuǎn)錄因子(T-box expressed in T cells，T-bet)、GATA結(jié)合蛋白3(GATA binding protein 3，GATA-3)、Kv2.1、KIR2.1、β-actin一抗購自英國Abcam公司，貨號：ab91109、ab113519、ab192761、ab85492、ab124964；HRP二抗購自美國CST公司，貨號：4134；SZ51倒置顯微鏡購自日本Olympus；GelDocEZ凝膠成像系統(tǒng)購自美國Bio-Rad公司。

1.2方法

1.2.1MI大鼠模型制備 根據(jù)文獻[7]制備MI大鼠模型，腹腔注射30 mg/kg戊巴比妥鈉充分麻醉大鼠，左側(cè)第三肋間切開左胸，于左冠狀動脈前降支根部1～2 mm處用6-0無菌線進行結(jié)扎。當左心室顏色由紅色變?yōu)榘咨碾妶D檢測顯示ST段明顯抬高時，表示結(jié)扎成功[8]。結(jié)扎完成后迅速放回心臟，縫合切口，恢復大鼠自主呼吸。設置假手術(shù)組(Sham，n=12)僅栓線不進行冠動脈結(jié)扎，其余操作與MI組相同。術(shù)后每天注射10萬單位青霉素，預防感染，持續(xù)3 d。排除制備過程中死亡、未達標準的大鼠，MI造模成功大鼠共48只。

1.2.2動物分組與給藥 將48只MI造模成功的大鼠隨機分成4組，每組12只：模型組(MI)、美托洛爾低劑量組(L-metoprolol)、美托洛爾中劑量組(M-metoprolol)、美托洛爾高劑量組(H-metoprolol)。造模后第3天，對各組大鼠進行藥物干預。美托洛爾各組：灌胃美托洛爾片水溶液，參考文獻[9]，劑量分別選擇為4、8、16 mg/kg，1次/日，灌胃容積為10 ml/kg，連續(xù)給藥4周。Sham組和MI組均灌胃10 ml/kg生理鹽水，連續(xù)處理4周。

1.2.3超聲檢測大鼠左心室功能 末次給藥后，麻醉大鼠，取仰臥位，用彩色多普勒超聲檢測儀，調(diào)至二維模式，于左心室長軸切面檢測，主要檢測指標包括，左心室收縮末期內(nèi)徑(left ventricular end systolic diameter，LVESD)、左心室舒張末期內(nèi)徑(left ventricular end diastolic diameter,LVEDD),至少連續(xù)檢測3個完整心動周期，求取平均值，計算左心室射血分數(shù)(left ventricular ejection fraction，LVEF)、左心室短軸縮短率(fractional shortening，F(xiàn)S)、心搏量(stroke volume,SV)。

1.2.4大鼠血液動力學檢測 末次給藥后所有大鼠麻醉后，切開頸部，迅速分離左股動脈及右頸動脈，將導管經(jīng)右頸總動脈插進入左心室，對左心室收縮壓(left ventricular systolic pressure，LVSP)、平均動脈壓(mean arterial pressure，MAP)、左心室舒張末壓(left ventricular end-diastolic pressure，LVEDP)、左心室內(nèi)壓上長及下降最大速率(+dp/dtmax/-dp/dtmax)進行檢測。

1.2.5TTC染色評估大鼠梗死面積 末次給藥后，各組隨機選取6只大鼠，注射30 mg/kg戊巴比妥鈉充分麻醉大鼠，處死后獲取心臟，充分清洗后橫向切成5片，置于1%TTC染液中染色15 min，正常心肌染色為紫紅色，梗死區(qū)域呈淡白色，拍照，使用Image J軟件掃描分析梗塞區(qū)域體積，計算梗死面積百分比(%)=梗死區(qū)體積/總體積×100%。

1.2.6樣本采集 將各組剩余6只大鼠，麻醉后放血處死，采集血液1 ml，3 000 r/min離心5 min收集血清；獲取心肌組織，清洗后，將心肌組織剪碎，置于液氮中保存；獲取脾臟組織用于制備淋巴液及蛋白檢測。

1.2.7血清IFN-γ、IL-2、IL-4、IL-10水平檢測 采用酶聯(lián)免疫法檢測血清中IFN-γ、IL-2、IL-4、IL-10水平，具體參照試劑盒說明書進行操作。

1.2.8流式細胞術(shù)檢測淋巴液Th1/Th2細胞比率 將脾臟組織清洗后剪碎加入淋巴細胞分離液，用200目尼龍網(wǎng)過濾，加入RPMI1640培養(yǎng)液后，4 000 r/min 離心30 min，吸取分離液中層淋巴細胞，加入緩沖液洗滌，收集淋巴細胞，用RPMI1640培養(yǎng)液重懸細胞，將細胞密度調(diào)至1×106個/ml。添加CD3抗體(FITC標記)、CD4抗體(PE標記)進行細胞標記，避光溫育15 min，添加固定劑室溫避光溫育15 min，添加生理鹽水清洗后加入破膜劑室溫下固定15 min，分別添加IL-4(APC標記)、IFN-γ(DAPI標記)抗體避光溫育25 min，離心后棄上清，置于流式細胞儀中檢測Th1、Th2細胞比例變化。

1.2.9蛋白免疫印跡法檢測T-bet、GATA-3、Kv2.1、KIR2.1蛋白表達 冷凍心肌組織、脾臟組織，研磨后加入蛋白裂解液，參照蛋白抽提試劑盒提取總蛋白，測定蛋白后進行SDS-PAGE分離蛋白，半干轉(zhuǎn)印至PVDF膜上，采用5%脫脂奶粉封閉；采用T-bet、GATA-3、Kv2.1、KIR2.1一抗(1∶500)4℃孵育過夜；采用HRP標記二抗(1∶5 000)孵育1 h。經(jīng)化學發(fā)光后檢測，保存圖像后用Image J軟件定量分析蛋白相對表達量。

2 結(jié)果

2.1美托洛爾對心肌梗死大鼠心室功能的影響 與Sham組相比，MI組LVEDD、LVESD顯著升高，LVEF、SV、FS顯著降低(P<0.05)；與MI組相比，美托洛爾各組LVEDD、LVESD顯著降低，LVEF、SV、FS顯著升高(P<0.05)。見表1。

2.2美托洛爾對心肌梗死大鼠血流動力學的影響 與Sham組相比，MI組大鼠MAP、LVSP、+dp/dtmax降低，LVEDP、-dp/dtmax顯著升高，差異均有統(tǒng)計學意義(P<0.05)。與MI組相比，美托洛爾各組大鼠MAP、LVSP、+dp/dtmax升高，LVEDP、dp/dtmax降低，差異均有統(tǒng)計學意義(P<0.05)。見表2。

2.3美托洛爾對心肌梗死大鼠梗死面積的影響 與Sham組相比，MI組大鼠心肌梗死面積比例升高，差異均有統(tǒng)計學意義(P<0.05)。與MI組相比，美托洛爾各組大鼠心肌梗死面積比例降低，差異均有統(tǒng)計學意義(P<0.05)。見圖1、表3。

GroupsLVEDD(mm)LVESD(mm)LVEF(%)SV(ml)FS(%)Sham5.49±0.413.21±0.3883.54±5.370.36±0.0546.06±4.64MI7.79±0.361)5.69±0.371)66.29±4.621)0.17±0.031)23.57±2.86L-metoprolol6.37±0.292)5.25±0.292)74.87±4.392)0.23±0.042)29.39±4.352)M-metoprolol5.87±0.372)4.73±0.262)79.16±4.672)0.26±0.062)33.58±3.492)H-metoprolol5.24±0.392)4.58±0.352)81.89±5.632)0.31±0.052)41.72±3.412)

Note:Compared with Sham group,in MI group,the LVEDD and LVESD increased significantly,while LVEF,SV and FS decreased significantly，1)P<0.05;compared with MI group,in metoprolol group，the LVEDD and LVESD decreased，2)P<0.05.

GroupsMAP(mmHg)LVSP(mmHg)LVEDP(mmHg)+dp/dtmax(103 mmHg/s)-dp/dtmax(103 mmHg/s)Sham121.06±12.58135.24±13.85 6.81±0.873.89±0.29 -3.98±0.25 MI92.67±9.291)108.96±10.151)13.01±2.171)2.76±0.311)-2.65±0.241)L-metoprolol105.16±10.182)122.54±12.932)11.91±1.152)3.13±0.252)-2.94±0.282)M-metoprolol110.19±8.762)129.33±11.132)8.08±1.242)3.34±0.242)-3.28±0.272)H-metoprolol116.55±9.322)133.68±11.862)7.42±1.062)3.55±0.332)-3.54±0.342)

Note:Compared with Sham group,MAP,LVSP,+dp/dtmax decreased,LVEDP,-dp/dtmax increased，1)P<0.05;compared with MI group,in metoprolol group,MAP,LVSP,+dp/dtmax increased,LVEDP,-dp/dtmax decreased,2)P<0.05.

圖1 TTC染色評估各組大鼠心肌梗死面積 Fig.1 Myocardial infarct size by TTC staining in rats of different groupsNote: Compared with Sham group,in MI group,the volume ratio of myocardial infarction increased;compared with MI group,in metoprolol group，the volume ratio of myocardial infarction decreased.

GroupsMyocardial infarction size(%)Sham3.65±0.81MI39.82±3.681)L-metoprolol27.36±3.032)M-metoprolol22.42±3.222)H-metoprolol20.18±3.092)

Note:Compared with Sham group,in MI group,the volume ratio of myocardial infarction increased,1)P<0.05;compared with MI group,in metoprolol group，the volume ratio of myocardial infarction decreased,2)P<0.05.

GroupsIFN-γ(pg/ml)IL-2(pg/ml)IL-4(pg/ml)IL-10(pg/ml)Sham42.27±8.36 40.18±8.26 0.56±0.07 81.29±8.54 MI116.86±15.191)75.91±12.131)0.24±0.031)40.10±6.131)L-metoprolol83.93±14.212)65.87±13.192)0.33±0.052)55.65±7.342)M-metoprolol72.06±12.172)58.03±9.152)0.39±0.052)62.19±6.472)H-metoprolol63.12±10.232)51.53±10.192)0.45±0.062)70.12±7.522)

Note:Compared with Sham group,in MI group,the levels of serum IFN-γ and IL-2 increased,the levels of IL-4 and IL-10 decreased，1)P<0.05;compared with MI group,in metoprolol group，the levels of serum IFN-γ and IL-2 decreased,the levels of IL-4 and IL-10 increased,2)P<0.05.

2.4美托洛爾對心肌梗死大鼠Th1、Th2型細胞因子的影響 與Sham組相比，MI組大鼠血清IFN-γ、IL-2水平升高，IL-4、IL-10水平降低，差異均有統(tǒng)計學意義(P<0.05)。與MI組相比，美托洛爾各組血清IFN-γ、IL-2水平降低，IL-4、IL-10水平升高，差異均有統(tǒng)計學意義(P<0.05)。見表4。

2.5美托洛爾對心肌梗死大鼠Th1、Th2型細胞比率的影響 與Sham組相比，MI組Th1細胞比率升高，Th2細胞比率降低，Th1/Th2比值升高，差異均有統(tǒng)計學意義(P<0.05)。與MI組相比，美托洛爾各組Th1細胞比率降低，Th2細胞比率升高，Th1/Th2比值降低，差異均有統(tǒng)計學意義(P<0.05)。見圖2、表5。

2.6美托洛爾對Th1/Th2細胞轉(zhuǎn)錄因子表達的影響 與Sham組相比，MI組脾臟、心肌組織中T-bet蛋白表達升高， GATA-3蛋白表達降低，差異均有統(tǒng)計學意義(P<0.05)。與MI組相比，美托洛爾各組脾臟、心肌組織中T-bet蛋白表達降低，GATA-3蛋白表達升高，差異均有統(tǒng)計學意義(P<0.05)。見圖4、5，表6。

圖2 流式細胞術(shù)檢測淋巴液中Th1細胞比率Fig.2 Th1 cell ratio in lymph by flow cytometryNote: Compared with Sham group,in MI group,Th1 cell ratio increased;compared with MI group,in metoprolol group,Th1 cell ratio decreased.

圖3 流式細胞術(shù)檢測淋巴液中Th2細胞比率Fig.3 Th2 cell ratio in lymph by flow cytometryNote: Compared with Sham group,in MI group,Th2 cell ratio decreased;compared with MI group,in metoprolol group,Th2 cell ratio increased.

GroupsTh1(%)Th2(%)Th1/Th2Sham1.15±0.260.78±0.081.47±0.37MI4.86±0.291)0.13±0.021)37.38±8.481)L-metoprolol3.06±0.242)0.25±0.052)12.24±2.542)M-metoprolol2.53±0.212)0.35±0.042)7.23±1.412)H-metoprolol2.28±0.192)0.63±0.102)3.64±0.872)

Note:Compared with Sham group,in MI group,Th1 cell ratio increased,Th2 cell ratio decreased,1)P<0.05;compared with MI group,in metoprolol group,Th1 cell ratio decreased,Th2 cell ratio increased,2)P<0.05.

2.7美托洛爾對MI大鼠鉀通道Kv2.1和KIR2.1蛋白表達的影響 與Sham組相比，MI組心肌組織中Kv2.1、KIR2.1蛋白表達降低，差異均有統(tǒng)計學意義(P<0.05)。與MI組相比，美托洛爾各組Kv2.1、KIR2.1蛋白表達升高，差異均有統(tǒng)計學意義(P<0.05)。見圖6，表7。

圖4 免疫印跡法檢測心肌組織T-bet、Gata-3蛋白表達Fig.4 T-bet,Gata-3 protein expression in myocardial tissue by Western blotNote: 1.Sham group;2.MI group;3.L-metoprolol group;4.M-metoprolol group;5.H-metoprolol group.

圖5 免疫印跡法檢測脾臟組織T-bet、GATA-3蛋白表達Fig.5 T-bet,GATA-3 protein expression in spleen tissue by Western blotNote: 1.Sham group;2.MI group;3.L-metoprolol group;4.M-metoprolol group;5.H-metoprolol group.

GroupsSpleen tissueGATA-3/β-actinT-bet/β-actinMycardial tissueGATA-3/β-actinT-bet/β-actinSham1.34±0.180.37±0.040.87±0.130.22±0.03MI0.23±0.041)1.15±0.271)0.15±0.031)0.94±0.111)L-metoprolol0.35±0.062)0.87±0.082)0.25±0.042)0.75±0.092)M-metoprolol0.81±0.052)0.49±0.062)0.35±0.032)0.53±0.102)H-metoprolol1.02±0.082)0.27±0.042)0.57±0.062)0.42±0.052)

Note:Compared with Sham group,in MI group,the expression of T-bet protein increased,the expression of GATA-3 protein decreased,1)P<0.05;compared with MI group,in metoprolol group,the expression of T-bet protein decreased,the expression of GATA-3 protein increased,2)P<0.05.

圖6 免疫印跡法檢測心肌組織Kv2.1、KIR2.1表達Fig.6 Kv2.1 and KIR2.1 expression in myocardial tissue by Western blotNote: 1.Sham group;2.MI group;3.L-metoprolol group;4.M-metoprolol group;5.H-metoprolol group.

表7 各組心肌組織Kv2.1、KIR2.1蛋白表達比較(n=6，

GroupsKv2.1/β-actinKIR2.1/β-actinSham11.43±0.160.86±0.08MI0.27±0.041)0.15±0.031)L-metoprolol0.38±0.052)0.31±0.062)M-metoprolol0.65±0.082)0.45±0.072)H-metoprolol0.81±0.112)0.71±0.112)

Note:Compared with Sham group,in MI group,the expression of Kv2.1,KIR2.1 decreased,1)P<0.05;compared with MI group,in metoprolol group,the expression of Kv2.1,KIR2.1 increased，2)P<0.05.

3 討論

本研究采用結(jié)扎左冠狀動脈前降支法制備MI大鼠模型，發(fā)現(xiàn)MI組大鼠心肌梗死面積顯著增加，表明大鼠心肌組織受損。過往研究顯示心肌缺血過后會進一步引發(fā)心功能受損，造成左心室重構(gòu)和心衰[2]。本研究發(fā)現(xiàn)MI大鼠心臟舒張功能受損，舒張時間和心臟血液灌注時間縮短，心肌供血減少，表明心肌梗死大鼠心室功能損傷、血液動力學異常。以上提示左冠狀動脈前降支結(jié)扎法能夠成功復制心肌梗死模型，引發(fā)大鼠心肌損傷。

美托洛爾(Metoprolol)為β1受體阻滯劑，可改善心肌供血，降低心肌氧耗，保護心臟功能，在冠心病、心力衰竭、心肌梗死等心臟疾病治療中應用較多[10]。臨床研究顯示，Metoprolol對心力衰竭治療效果較好，可提高患者心功能，降低機體炎癥反應和心肌重塑風險[11]。動物研究顯示Metoprolol可緩解大鼠心肌細胞凋亡，進而抑制心室重塑，保護心臟功能[12]。本研究通過給予MI大鼠Metoprolol干預后發(fā)現(xiàn)，與MI組相比，Metoprolol各組大鼠心肌梗死面積顯著降低，且大鼠心臟過度收縮得到緩解，心室舒張壓降低，表明Metoprolol可恢復心肌缺血后心室結(jié)構(gòu)的改變，進而改善大鼠心功能及血流動力學。以上結(jié)果均提示Metoprolol能夠改善MI大鼠心功能，發(fā)揮心肌損傷保護作用。

近期研究發(fā)現(xiàn)MI患者血清中存在大量的炎癥胞如巨噬細胞、T淋巴細胞以及高水平的Th1型炎癥細胞因子，如IFN-γ、IL-2，低水平Th2型炎癥細胞因子如IL-4、IL-6、IL-10等[13]。過往研究證實MI患者冠脈阻塞區(qū)域炎癥反應升高，其中Th1細胞介導的免疫反應被激活且IFN-γ、IL-2炎癥因子水平升高，患者Th1/Th2淋巴細胞失衡[14]。Yang等[15]研究發(fā)現(xiàn)MI以及動脈粥樣硬化患者中Th1細胞被激活后，血清中IFN-γ、IL-2炎癥因子水平升高，會進一步導致斑塊的不穩(wěn)定性，加重病情。本研究發(fā)現(xiàn)MI組大鼠脾臟淋巴液中Th1細胞比率升高，Th2細胞比率降低，血清IFN-γ、IL-2水平升高，IL-4、IL-10水平降低，提示MI大鼠體內(nèi)促炎癥反應較強烈，Th1/Th2淋巴細胞失衡。給予Metoprolol干預后Th1細胞比率降低，Th2細胞比率升高，血清IFN-γ、IL-2水平降低，IL-4、IL-10水平升高，呈劑量依賴性，提示Metoprolol可通過調(diào)控Th1/Th2細胞平衡，降低機體過度炎癥反應，保護MI大鼠。T-bet和GATA-3分別是Th1、Th2細胞特異轉(zhuǎn)錄因子，通過檢測T-bet和GATA-3水平能夠反映Th1/Th2細胞比例變化情況[16]。本研究對脾臟、心肌組織中的T-bet和GATA-3蛋白進行檢測，發(fā)現(xiàn)MI大鼠脾臟、心肌組織T-bet蛋白表達均顯著升高，GATA-3蛋白表達均顯著降低，經(jīng)Metoprolol干預后脾臟、心肌組織T-bet蛋白表達均顯著降低，GATA-3蛋白表達均顯著升高，脾臟組織中的Th細胞分泌特異性因子也可進入心肌組織，脾臟Th1/Th2細胞轉(zhuǎn)錄因子T-bet、GATA-3蛋白表達變化會影響心肌組織中T-bet、GATA-3蛋白表達變化，推測Metoprolol通過上調(diào)GATA-3轉(zhuǎn)錄因子，下調(diào)T-bet轉(zhuǎn)錄因子，恢復Th1/Th2平衡，進而緩解大鼠心肌損傷。

鉀離子通道在心肌細胞電生理調(diào)控中起著重要作用，心肌細胞鉀離子通道包括三種亞型，緩慢激活延遲整流鉀電流Iks、快速激活延遲整流鉀電流IKr、超快速激活延遲整流鉀電流IKur，其中IKs、IKr在其中占有重要作用[17]。Kv2.1屬于Shab家族，在整個心臟均有分布，是Iks的重要通道蛋白。過往研究發(fā)現(xiàn)心力衰竭大鼠Kv2.1蛋白表達顯著降低，推測這可能為造成心肌細胞電生理不穩(wěn)定的重要分子機制[18]。KIR2.1屬于KIR2x家族重要組成成員，在維持細胞靜息電位及鉀離子電位平衡調(diào)節(jié)中發(fā)揮重要作用，研究顯示其在心肌細胞IK中占80%[19]。Zhai等[20]研究顯示KIR2.1被抑制后能夠誘發(fā)心律失常，且發(fā)生心肌缺血及MI后，心肌組織中KIR2.1水平下降。本研究發(fā)現(xiàn)MI組大鼠心肌組織中Kv2.1、KIR2.1蛋白表達明顯降低，而給予Metoprolol后，心肌組織中Kv2.1、KIR2.1蛋白表達明顯升高，提示Metoprolol可通過上調(diào)Kv2.1、KIR2.1蛋白，調(diào)節(jié)心肌細胞鉀離子電位平衡，進而保護MI大鼠心肌。最近研究發(fā)現(xiàn)調(diào)控Th1/Th2平衡向Th1移動，則可減弱鉀通道KIR2.1的表達[5]，結(jié)合以上研究推測Metoprolol可能通過調(diào)節(jié)Th1/Th2平衡，影響鉀通道蛋白Kv2.1、KIR2.1的表達，進而維持心肌細胞鉀離子電位平衡，發(fā)揮對MI大鼠心肌保護的作用。

綜上所述，Metoprolol可能通過影響MI大鼠Th1/Th2細胞免疫平衡，進而上調(diào)鉀通蛋白Kv2.1、KIR2.1表達，減少MI大鼠梗死面積，保護心功能，然而本研究僅在體內(nèi)進行研究，Metoprolol是否可在體外通過影響Th1/Th2細胞免疫平衡調(diào)節(jié)鉀通道蛋白表達，還有待后續(xù)深入探究。