基于NALP3炎性體的痛風(fēng)寧對(duì)急性痛風(fēng)性關(guān)節(jié)炎大鼠抗炎作用量效和時(shí)效研究

王建輝　李保林　蔡唐彥　郭潔梅　朱亞菊　滕方舟　張藝強(qiáng)　肖艷　毛驍　蘇友新

摘要：目的? 觀察痛風(fēng)寧對(duì)急性痛風(fēng)性關(guān)節(jié)炎（AGA）大鼠NALP3炎性體及相關(guān)炎癥因子的影響，探討其抗炎作用的量效與時(shí)效關(guān)系。方法? 將240只SD大鼠隨機(jī)分為造模組200只和正常組40只。右后踝關(guān)節(jié)腔內(nèi)注射尿酸鹽混懸液制作大鼠AGA模型，成模大鼠隨機(jī)分為模型組、秋水仙堿組及痛風(fēng)寧低、中、高劑量組，每組40只。正常組和模型組大鼠給予等量生理鹽水灌胃，其余組大鼠給予相應(yīng)藥物灌胃干預(yù)。首次干預(yù)后6、12、24、48 h各組隨機(jī)取10只大鼠處死，收集右后踝關(guān)節(jié)液與滑膜組織，采用ELISA、Western blot和RT-qPCR分別檢測(cè)白細(xì)胞介素-1β（IL-1β）、前列腺素E₂（PGE₂）含量及NALP3、ASC、Caspase-1蛋白和mRNA表達(dá)。結(jié)果? 與正常組比較，模型組大鼠各時(shí)間點(diǎn)IL-1β、PGE₂含量及NALP3、ASC、Caspase-1蛋白和mRNA表達(dá)明顯升高（P<0.01）;與模型組比較，痛風(fēng)寧中、高劑量組及秋水仙堿組大鼠各時(shí)間點(diǎn)IL-1β、PGE₂含量及NALP3、ASC、Caspase-1蛋白和mRNA表達(dá)均明顯降低（P<0.01，P<0.05）;與秋水仙堿組比較，痛風(fēng)寧中、高劑量組大鼠各時(shí)間點(diǎn)IL-1β、PGE₂含量及NALP3、ASC、Caspase-1蛋白和mRNA表達(dá)無(wú)明顯差異（P>0.05），痛風(fēng)寧低劑量組大鼠明顯升高（P<0.01，P<0.05）。結(jié)論? 中劑量痛風(fēng)寧在下調(diào)模型大鼠NALP3、ASC、Caspase-1蛋白和mRNA表達(dá)及降低IL-1β、PGE₂含量方面作用相對(duì)較佳，且首次干預(yù)后48 h抗炎作用相對(duì)明顯。

關(guān)鍵詞：痛風(fēng)寧;NALP3炎性體;急性痛風(fēng)性關(guān)節(jié)炎;量效;時(shí)效;大鼠

中圖分類號(hào)：R285.5 ???文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼：A??? 文章編號(hào)：1005-5304（2020）01-0051-06

DOI：10.3969/j.issn.1005-5304.201906101

Study on Tongfengning on Dosage Effect and Time Effect of Anti-inflammatory in Model Rats with Acute Gouty Arthritis Based on NALP3 Inflammasome

WANG Jianhui¹， LI Baolin¹， CAI Tangyan²， GUO Jiemei^1，2， ZHU Yaju¹， TENG Fangzhou¹，ZHANG Yiqiang¹， XIAO Yan¹， MAO Xiao¹， SU Youxin^1，2

1. Fujian University of Traditional Chinese Medicine， Fuzhou 350122， China;

2. Fuijiang Health College， Fuzhou 350101， China

Abstract： Objective To observe the effects of Tongfengning on NALP3 inflammasome and related inflammatory factors in acute gouty arthritis （AGA） rats; To explore the dosage effect and time effect of its anti-inflammatory effect. Methods Totally 240 SD rats were randomly divided into model rats （n=200） and normal rats （the normal group， n=40）. The AGA model was made by intraperitoneal injection of urate suspension into the right posterior ankle joint of the rats. Model rats were randomly divided into model group， colchicine group and Tongfengning low-， medium- and high-dosage groups， with 40 rats in each group. Normal group and model group were given the same amount of normal saline for gavage， and other groups were given the corresponding medicine for gavage intervention. At 6 h， 12 h， 24 h， and 48 h after the first intervention， 10 rats in each group were sacrificed at each time point， and the right posterior ankle joint fluid and synovial tissue were collected. ELISA， Western blot， and RT-qPCR were used to detect the contents of interleukin-1β （IL-1β） and prostaglandin E₂ （PGE₂）， and expressions of NALP3， ASC， Caspase-1 protein and mRNA. Results Compared with the normal group， the contents of IL-1β and PGE₂， and the expressions of NALP3， ASC， Caspase-1 protein and mRNA increased in the model group at each time point （P<0.01）; Compared

with the model group， the contents of IL-1β and PGE₂， and the expressions of NALP3， ASC， Caspase-1 protein and mRNA significantly decreased in Tongfengning medium- and high-dosage groups at each time point （P<0.01， P<0.01）; Compared with the colchicine group， the contents of IL-1β and PGE₂， and the expressions of NALP3， ASC， Caspase-1 protein and mRNA were not significantly different in the Tongfengning medium- and high-dosage groups at each time point （P>0.05）， while they increased significantly in Tongfengning? low-dosage group （P<0.01， P<0.05）. Conclusion The medium dosage of Tongfengning is relatively better in down-regulating the expressions of NALP3， ASC， Caspase-1 protein and mRNA and decreasing the contents of IL-1β and PGE₂， and its anti-inflammatory effects were relatively obvious 48 h after the first intervention.

Key words： Tongfengning; NALP3 inflammasome; acute gouty arthritis; dosage effect; time effect; rats

痛風(fēng)是由于尿酸生成增多和/或尿酸排泄減少導(dǎo)致尿酸鹽（MSU）沉積所致的晶體相關(guān)性關(guān)節(jié)病^[1]。臨床所見痛風(fēng)多為急性痛風(fēng)性關(guān)節(jié)炎（acute gouty arthritis，AGA）的狀態(tài)，發(fā)病急驟，多于深夜發(fā)作，受累關(guān)節(jié)及周圍組織紅、腫、熱、痛和功能受限均明顯，尤其是疼痛呈撕裂樣、刀割樣或咬噬樣，且進(jìn)行性加劇^[2]，嚴(yán)重影響患者身心健康。痛風(fēng)寧是本課題組在痛風(fēng)“內(nèi)濕致痹”發(fā)病觀^[3]指導(dǎo)下組方并經(jīng)臨床使用多年的效驗(yàn)方，該方能明顯降低關(guān)節(jié)液中炎癥因子含量，減輕AGA動(dòng)物模型關(guān)節(jié)炎癥反應(yīng)^[4-7]。前期研究發(fā)現(xiàn)，痛風(fēng)寧可能通過(guò)下調(diào)核苷酸結(jié)合寡聚化結(jié)構(gòu)域樣受體蛋白3（NALP3）炎性體中NALP3蛋白、凋亡相關(guān)斑點(diǎn)樣蛋白（ASC）和Caspase-1的表達(dá)，進(jìn)而抑制下游炎癥因子的生成以減輕AGA炎癥反應(yīng)^[8]，但其抗炎作用的量效與時(shí)效尚未完全闡明。本研究通過(guò)觀察不同劑量痛風(fēng)寧干預(yù)AGA大鼠模型不同時(shí)間點(diǎn)NALP3、ASC、Caspase-1蛋白和mRNA表達(dá)，以及下游炎癥因子白細(xì)胞介素-1β（IL-1β）、前列腺素E₂（PGE₂）含量的變化，進(jìn)一步探討痛風(fēng)寧抗炎作用的量效與時(shí)效關(guān)系，為該方臨床應(yīng)用提供依據(jù)。

1? 實(shí)驗(yàn)材料

1.1? 動(dòng)物

3月齡健康雄性SD大鼠240只，SPF級(jí)，體質(zhì)量（200±20）g，上海斯萊克實(shí)驗(yàn)動(dòng)物有限責(zé)任公司提供，動(dòng)物許可證號(hào)SCXK（滬）2012-0002。飼養(yǎng)于福建中醫(yī)藥大學(xué)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物中心SPF級(jí)動(dòng)物房，溫度（22±2）℃，相對(duì)濕度60%±10%，12 h/12 h明暗周期，自由攝食飲水。

1.2? 藥物及制備

痛風(fēng)寧（土茯苓∶萆薢∶丹參∶川牛膝∶秦艽∶腫節(jié)風(fēng)∶澤瀉∶金錢草∶蒼術(shù)∶黃柏=10∶5∶5∶4∶3∶5∶5∶7∶3∶2），飲片購(gòu)自福建中醫(yī)藥大學(xué)附屬國(guó)醫(yī)堂醫(yī)院，藥物經(jīng)煎煮、過(guò)濾、濃縮成含原藥材1 g/mL痛風(fēng)寧藥液，置于4 ℃冰箱保存?zhèn)溆?。秋水仙堿片，西雙版納藥業(yè)有限責(zé)任公司，0.5 mg/片，批號(hào)170302，用蒸餾水配制成0.04 mg/mL秋水仙堿混懸液，備用。

1.3? 主要試劑與儀器

MSU晶體（美國(guó)Sigma公司，批號(hào)BCBV0453），以無(wú)菌生理鹽水為溶劑，MSU晶體與聚山梨酯-80（吐溫80）以1500 mg∶6 mL配成25 mg/mL MSU混懸液，滅菌后4 ℃?zhèn)溆?大鼠IL-1β、PGE₂ ELISA試劑盒（上海西唐科技有限公司，批號(hào)1710262、1710251），兔抗大鼠NALP3單克隆抗體（武漢博士德，批號(hào)84111P141），小鼠抗大鼠ASC單克隆抗體、兔抗大鼠Caspase-1單克隆抗體（上海圣克魯斯，SC-514414、22915-1-AP），β-actin小鼠單克隆抗體、HRP羊抗兔IgG、HRP羊抗鼠IgG（美國(guó)Proteintech公司，批號(hào)66009-1-IG、SA00001-2、SA00001-1），BCA蛋白濃度測(cè)定試劑盒（增強(qiáng)型）、Trizol（北京碧云天，批號(hào)040617170707、2017072402），超敏ECL化學(xué)發(fā)光試劑盒（美國(guó)Thermo公司，批號(hào)101316170228），ChamQ SYBR qPCR Master Mix、RNA Isolater Total RNA Extraction Reagent（南京Vezyme公司，L/N7E160F7、R12301）。RH-B-1-S25型磁力攪拌器（德國(guó)IKA公司），ELX800型全自動(dòng)酶標(biāo)儀（美國(guó)Bio-Tek公司），PowerPac^TM型電泳儀、Yrdimes S-D Blotter型半干轉(zhuǎn)印系統(tǒng)、ChemiDocXRS化學(xué)發(fā)光成像系統(tǒng)（美國(guó)Bio-Rad公司），ABI 7500型Real-Time PCR儀（美國(guó)ABI公司），PE 9600型PCR擴(kuò)增儀。

2? 實(shí)驗(yàn)方法

2.1? 分組、造模和給藥

實(shí)驗(yàn)大鼠適應(yīng)性喂養(yǎng)7 d，采用隨機(jī)數(shù)字表法分為造模組200只和正常組40只。造模組參照Coderre等^[9]方法造模，向大鼠右后踝關(guān)節(jié)腔內(nèi)注射25 mg/mL MSU混懸液0.2 mL。于造模后4 h進(jìn)行模型鑒定^[10]，成模大鼠隨機(jī)分為模型組、秋水仙堿組和痛風(fēng)寧低、中、高劑量組，每組40只。正常組大鼠注射等量生理鹽水。參照人與大鼠體表面積換算法^[11]，按成人每日服用痛風(fēng)寧劑量為中劑量，得痛風(fēng)寧低、中、高劑量組大鼠每日給藥量分別為7.65、15.3、30.6 mL/kg，按成人秋水仙堿每日最大治療藥量6 mg，得秋水仙堿組每日大鼠給藥量為0.6 mg/kg，正常組和模型組給予等量生理鹽水灌胃，每日2次，連續(xù)2 d。

2.2? 一般觀察

觀察大鼠精神、飲食、行為、毛發(fā)、大便等。

2.3? 標(biāo)本采集

首次干預(yù)后6、12、24、48 h，各組隨機(jī)選取10只大鼠，腹腔注射10%水合氯醛（3 mL/kg）麻醉，備皮，消毒。于冰上切開大鼠右后肢踝關(guān)節(jié)囊，生理鹽水沖洗，收集關(guān)節(jié)沖洗液于無(wú)菌EP管，離心，取上清液，-20 ℃冰箱保存。再取踝關(guān)節(jié)滑膜組織，置于無(wú)酶EP管，-80 ℃冰箱保存。取材完畢后，脫頸處死。

2.4? 白細(xì)胞介素-1β、前列腺素E₂含量檢測(cè)

按ELISA試劑盒說(shuō)明書進(jìn)行操作，酶標(biāo)儀測(cè)定450 nm波長(zhǎng)處各反應(yīng)孔OD值，計(jì)算關(guān)節(jié)液中IL-1β、PGE₂含量。

2.5? NALP3、ASC、Caspase-1蛋白表達(dá)檢測(cè)

液氮中充分研磨滑膜組織，稱重，裝入EP管，按1 mg∶5 μL比例加入裂解液，冰上震蕩勻漿后，離心，取上清液。按BCA法操作測(cè)定總蛋白濃度。配好分離膠與濃縮膠，蛋白上樣按每孔30 μg計(jì)算上樣量，Marker上樣量為3 μL，上樣完成后進(jìn)行凝膠電泳（20 V、10 min，60 V、20 min，100 V、80 min）。切取目的蛋白條帶，轉(zhuǎn)膜至PVDF膜。隨后將PVDF膜置于TBST中漂洗5 min，再置于封閉液中室溫封閉2 h;一抗4 ℃搖床孵育過(guò)夜（一抗稀釋比例：NALP3 1∶200;ASC 1∶200;Caspase-1 1∶5000;β-actin 1∶5000），TBST漂洗3次×10 min;二抗室溫孵育1 h，TBST 漂洗3次×10 min。PVDF膜進(jìn)行化學(xué)發(fā)光顯影，并應(yīng)用Image-Pro Plus軟件分析條帶灰度值，計(jì)算目的蛋白相應(yīng)表達(dá)量。

2.6? NALP3、ASC、Caspase-1 mRNA表達(dá)檢測(cè)

液氮中充分研磨滑膜組織，按Trizol法提取組織總RNA。分光光度計(jì)測(cè)定樣品OD_{260 nm}/OD_{280 nm}值，計(jì)算每管RNA濃度。按試劑盒說(shuō)明書進(jìn)行反轉(zhuǎn)錄-聚合酶鏈反應(yīng)合成cDNA，依次加入相應(yīng)體積RNA溶液（按3 μg上樣量計(jì)算），再用ddH₂O定容至18 μL，然后加入4×gDNA 6 μL至24 μL，混勻后離心，置于PCR儀（42 ℃、2 min），再加5×qRt Super Mix Ⅱ 6 μL至30 μL，蕩勻后離心，置于PCR儀（50 ℃、15 min，85 ℃、2 min）進(jìn)行反轉(zhuǎn)錄。隨后進(jìn)行RT-qPCR反應(yīng)，擴(kuò)增目的基因產(chǎn)物，條件：95 ℃、30 s預(yù)變性，95 ℃、10 s變性，60 ℃、30 s退火延伸，40個(gè)循環(huán)。計(jì)算ΔCt值，以2^-ΔΔCt分析各基因相對(duì)表達(dá)量。從Gene bank查找目的基因CDS序列，利用Primer 5.0設(shè)計(jì)引物，并委托上海鉑尚生物技術(shù)有限公司合成，以β-actin為內(nèi)參，引物序列見表1。

3? 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法

采用SPSS20.0統(tǒng)計(jì)軟件進(jìn)行分析。計(jì)量資料以±s表示，若服從正態(tài)分布，多重組間比較采用方差分析，兩兩比較采用LSD檢驗(yàn);若不服從正態(tài)分布，則采用非參數(shù)Kruskal-Wallis檢驗(yàn)。P<0.05表示差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

4? 結(jié)果

4.1? 一般狀況

正常組大鼠精神、飲食與大便等均無(wú)異常，活潑好動(dòng)，皮毛光澤;模型組大鼠精神和飲食均欠佳，皮毛無(wú)光澤，慵懶不好動(dòng);痛風(fēng)寧低劑量組大鼠精神略有疲倦，飲食削減，皮毛欠光澤，活動(dòng)減少，大便正常;痛風(fēng)寧中、高劑量組大鼠精神與活動(dòng)尚可，飲食、大便正常，皮毛欠光澤;秋水仙堿組大鼠出現(xiàn)精神不佳，飲食銳減，皮毛干枯，慵懶不好動(dòng)，大便稀溏等。

4.2? 痛風(fēng)寧對(duì)大鼠關(guān)節(jié)液白細(xì)胞介素-1β、前列腺素E₂含量的影響

與正常組比較，模型組大鼠各時(shí)點(diǎn)IL-1β、PGE₂含量均明顯增加（P<0.01）;與模型組比較，痛風(fēng)寧中、高劑量組及秋水仙堿組大鼠各時(shí)間點(diǎn)IL-1β、PGE₂含量明顯降低，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.01，P<0.05）;與秋水仙堿組比，痛風(fēng)寧中、高劑量組大鼠各時(shí)間點(diǎn)IL-1β、PGE₂含量無(wú)明顯差異，痛風(fēng)寧低劑量組大鼠則明顯升高（P<0.01，P<0.05）。見表2、表3。

4.3? 痛風(fēng)寧對(duì)大鼠關(guān)節(jié)滑膜組織NALP3、ASC、Caspase-1蛋白表達(dá)的影響

與正常組比較，模型組大鼠各時(shí)點(diǎn)NALP3、ASC、Caspase-1蛋白表達(dá)均明顯升高（P<0.01）;與模型組比較，痛風(fēng)寧中、高劑量組和秋水仙堿組大鼠各時(shí)間點(diǎn)NALP3、ASC、Caspase-1蛋白表達(dá)明顯降低（P<0.01，P<0.05）;與秋水仙堿組比較，痛風(fēng)寧中、高劑量組大鼠各時(shí)間點(diǎn)NALP3、ASC、Caspase-1蛋白表達(dá)無(wú)明顯差異，痛風(fēng)寧低劑量組大鼠則明顯升高（P<0.01，P<0.05）。見表4～表6、圖1。

4.4? 痛風(fēng)寧對(duì)大鼠關(guān)節(jié)滑膜組織NALP3、ASC、Caspase-1 mRNA表達(dá)的影響

與正常組比較，模型組大鼠各時(shí)間點(diǎn)NALP3、ASC、Caspase-1 mRNA表達(dá)均明顯升高（P<0.01）;與模型組比較，痛風(fēng)寧中、高劑量組和秋水仙堿組大鼠各時(shí)間點(diǎn)NALP3、ASC、Caspase-1 mRNA表達(dá)明顯降低（P<0.01，P<0.05）;與秋水仙堿組比較，痛風(fēng)寧中、高劑量組大鼠各時(shí)間點(diǎn)NALP3、ASC、Caspase-1 mRNA表達(dá)無(wú)明顯差異，痛風(fēng)寧低劑量組表達(dá)明顯升高（P<0.01，P<0.05）。見表7～表9。

5? 討論

中醫(yī)歷代醫(yī)家對(duì)痛風(fēng)急性發(fā)作期和慢性關(guān)節(jié)炎期的臨床表現(xiàn)頗有論述，常將其歸為“痹證”“歷節(jié)風(fēng)”等范疇。但目前關(guān)于痛風(fēng)病因病機(jī)的認(rèn)識(shí)尚未一致，經(jīng)課題組前期梳理總結(jié)，認(rèn)為內(nèi)生濕濁為痛風(fēng)發(fā)病關(guān)鍵，“內(nèi)濕”滋生稽留，郁久化熱，致氣血運(yùn)行不暢則留瘀，濕濁瘀熱積滯，痹阻筋脈肢節(jié)，發(fā)為痛風(fēng)。故針對(duì)痛風(fēng)“內(nèi)濕致痹”的病機(jī)特點(diǎn)，創(chuàng)制具有清熱利濕、消腫止痛功效的痛風(fēng)寧。方中黃柏長(zhǎng)于清下焦?jié)駸幔n術(shù)長(zhǎng)于燥濕健脾，二藥共奏清熱燥濕之功，加之川牛膝引藥下行，導(dǎo)濕外出，兼以活血通經(jīng)，三藥合用謂之三妙丸，常用于濕熱下注之痹證;土茯苓、萆薢、澤瀉、金錢草皆有所長(zhǎng)，共行利濕泄?jié)?、清熱解毒、通利關(guān)節(jié)之功;丹參、秦艽、腫節(jié)風(fēng)皆屬入血之品，共行清熱涼血、活血祛瘀、消腫止痛之功。諸藥合用以達(dá)標(biāo)本兼治之效。

研究表明，固有免疫中NOD樣受體成員NALP3可感受到病原菌入侵及機(jī)體損傷信號(hào)，形成炎性體，引起免疫防御反應(yīng)^[12-13]。當(dāng)細(xì)胞內(nèi)無(wú)活性NALP3蛋白在識(shí)別MSU被激活后，募集ASC、Caspase-1蛋白形成NALP3炎性體，繼而活化的Caspase-1切割I(lǐng)L-1β前體生成IL-1β，并分泌到胞外，同時(shí)IL-1β激活COX-2，促進(jìn)PGE₂合成，引發(fā)關(guān)節(jié)局部紅、腫、熱、痛等，導(dǎo)致AGA發(fā)生^[14-16]?？梢姡琋ALP3炎性體信號(hào)通路在痛風(fēng)急性發(fā)作過(guò)程中發(fā)揮關(guān)鍵作用。

本研究發(fā)現(xiàn)，模型組大鼠IL-1β、PGE₂含量增加及NALP3、ASC、Caspase-1蛋白和mRNA表達(dá)升高，且隨時(shí)間呈升高趨勢(shì)，而且痛風(fēng)炎癥反應(yīng)在一定時(shí)間內(nèi)隨時(shí)間加重，這與AGA部分特征類似;痛風(fēng)寧各劑量組及秋水仙堿組均可抑制NALP3炎性體相關(guān)蛋白合成，降低下游炎癥因子IL-1β、PGE₂含量，表明痛風(fēng)寧與秋水仙堿對(duì)該通路具有明顯抑制作用，或存在多靶點(diǎn)效應(yīng)，可同時(shí)干預(yù)信號(hào)通路上下游?，F(xiàn)代藥理研究表明，土茯苓有效成分總黃酮能減輕關(guān)節(jié)局部炎癥反應(yīng)，消除關(guān)節(jié)腫脹，且其抗痛風(fēng)關(guān)節(jié)炎作用與NALP3炎性體關(guān)系密切^[17]。黃柏生物堿與蒼術(shù)糖苷類成分能抑制關(guān)節(jié)液中炎癥因子IL-1β和IL-6水平，減輕關(guān)節(jié)炎癥損傷，治療痛風(fēng)效果良好^[18]。同時(shí)，各劑量組在首次干預(yù)后48 h下調(diào)NALP3、ASC、Caspase-1蛋白和mRNA表達(dá)幅度以及減少IL-1β、PGE₂含量明顯優(yōu)于其余3個(gè)時(shí)點(diǎn)，說(shuō)明痛風(fēng)寧首次干預(yù)后48 h抗炎作用相對(duì)明顯。另外，各時(shí)點(diǎn)痛風(fēng)寧中、高劑量對(duì)IL-1β、PGE₂含量抑制與秋水仙堿比較無(wú)明顯差異，但低劑量抑制作用不佳;高劑量抗炎作用稍優(yōu)于中劑量，可能因?yàn)楦邉┝克幬餄舛容^高，其抗炎效應(yīng)短時(shí)間內(nèi)快速發(fā)揮，隨著時(shí)間推移，藥物濃度達(dá)到飽和，抗炎效應(yīng)達(dá)到峰值，這與我們觀察到痛風(fēng)寧中、高劑量在12、24、48 h抗炎效應(yīng)相當(dāng)?shù)默F(xiàn)象一致。中藥復(fù)方中不同成分的藥理作用不同，如果單純?cè)黾觿┝靠赡軙?huì)出現(xiàn)藥理作用相互抵消，劑量過(guò)大或可出現(xiàn)嚴(yán)重毒副作用。鑒于用藥安全和療效，我們提出中劑量為痛風(fēng)寧相對(duì)理想劑量，更適用于臨床。

綜上，中劑量痛風(fēng)寧在下調(diào)NALP3、ASC、Caspase-1蛋白和mRNA的表達(dá)，以及降低IL-1β、PGE₂炎癥因子含量方面的作用相對(duì)較佳，且首次干預(yù)后48 h時(shí)抗炎作用相對(duì)明顯。

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（收稿日期：2019-06-08）

（修回日期：2019-07-17;編輯：華強(qiáng)）

基金項(xiàng)目：國(guó)家自然科學(xué)基金（81473495）

通訊作者：蘇友新，E-mail：suyouxin777@hotmail.com