五個(gè)茶樹菇品種比較試驗(yàn)

趙彩云，安 冬，常廣寧，常曉嬌，吳春華

（大連市現(xiàn)代農(nóng)業(yè)生產(chǎn)發(fā)展服務(wù)中心，遼寧大連116000）

茶樹菇屬擔(dān)子菌亞門，田頭菇屬，其營(yíng)養(yǎng)豐富，味道鮮美，蓋嫩柄脆，味純清香，口感好，是一種高蛋白、低脂肪的綠色食品[1]。茶樹菇含有18 種氨基酸和多種礦物質(zhì)，其中有8 種為人體必需氨基酸[2]，同時(shí)還具有較高的藥用價(jià)值，其性平、味甘、無毒，有利尿滲濕健脾止瀉之功效，可以抗衰老、降低膽固醇、提高免疫力，是很有推廣前景的珍稀食（藥）用菌之一[3]。為豐富茶樹菇品種資源，利用山東壽光引進(jìn)早熟2 號(hào)、茶樹菇1 號(hào)、茶樹菇6 號(hào)、白茶4 個(gè)品種以及從江蘇引進(jìn)茶樹菇F2 進(jìn)行品種比較試驗(yàn)，并對(duì)引進(jìn)的茶樹菇品種進(jìn)行菌絲生長(zhǎng)、產(chǎn)量、多糖含量等分析，以期為食用菌生產(chǎn)者在大連地區(qū)對(duì)茶樹菇栽培品種的選擇提供理論依據(jù)。

1 材料與方法

1.1 材料

1.1.1 供試菌株。茶樹菇1 號(hào)、早熟2 號(hào)、茶樹菇6號(hào)、白茶引自山東壽光食用菌研究所，茶樹菇F2 引自江蘇天達(dá)。

1.1.2 培養(yǎng)基配方。母種培養(yǎng)基，馬鈴薯去皮200 g，葡萄糖20 g，蛋白胨3 g，磷酸二氫鉀1 g，硫酸鎂1 g，瓊脂20 g，水1 000 mL；栽培種及栽培袋培養(yǎng)基，棉籽皮40%，雜木屑30%，玉米粉7%，麥麩20%，石膏1%，石灰2%，料水比1∶1.2.

1.2 方法

1.2.1 菌絲生長(zhǎng)速度測(cè)定。直徑0.5 cm 的打孔器沿著菌落邊緣取相同菌齡的菌塊，分別接種到平板PDA 培養(yǎng)基上，每皿接種1 塊，每個(gè)菌株重復(fù)3 次，在25℃條件下恒溫培養(yǎng)，測(cè)量菌絲生長(zhǎng)速度。接種的第2 天開始記錄，每3 d 觀察1 次菌絲生長(zhǎng)情況，菌絲培養(yǎng)7～10 d 時(shí)，觀察比較菌絲生長(zhǎng)勢(shì)，測(cè)定菌落直徑，計(jì)算菌絲生長(zhǎng)速度。

1.2.2 拮抗試驗(yàn)。菌齡一致的菌塊接種到同一PDA平板培養(yǎng)基中進(jìn)行拮抗試驗(yàn)。放置在25℃發(fā)菌室內(nèi)進(jìn)行避光培養(yǎng)，當(dāng)平板上菌絲相互接觸后繼續(xù)培養(yǎng)3～5 d，觀察菌絲接觸區(qū)，3 次重復(fù)。

1.2.3 栽培試驗(yàn)。接種5 個(gè)品種的原種共20 瓶，每個(gè)品種接4 瓶，長(zhǎng)滿后接種栽培袋200 袋，每個(gè)品種挑選20 袋進(jìn)行出菇產(chǎn)量測(cè)試。

1.2.4 栽培管理。菌絲長(zhǎng)滿后，移入出菇室。當(dāng)菌袋出現(xiàn)黃色水珠狀分泌物，表面有棕褐色的色斑，菌袋開始從營(yíng)養(yǎng)生長(zhǎng)轉(zhuǎn)入生殖生長(zhǎng)時(shí)，及時(shí)解除袋口的線繩，拉直袋口，朝地上噴水，保持菇房空間相對(duì)濕度85%～95%，并給予一定散射光和通風(fēng)換氣，促使茶樹菇子實(shí)體發(fā)生[4]。子實(shí)體生長(zhǎng)期間空氣濕度控制在85%左右，給予適當(dāng)散射光，適時(shí)通風(fēng)，保持出菇室內(nèi)空氣新鮮，及時(shí)采收。

1.2.5 提取液制備。將采收的5 個(gè)品種，共15 份材料烘干至恒重，磨碎后過篩，按12.5 mg/mL 濃度，80℃水浴4 h 后，4 000 r/min 離心15 min，取上清液備用。

1.2.6 多糖含量測(cè)定。取30 mL 提取液濃縮至體積1/10，加入95%乙醇至最終乙醇濃度為75%左右，于4℃下沉淀12 h 后，4 000 r/min 離心15 min，于50℃烘箱內(nèi)干燥，得茶樹菇粗多糖沉淀。將多糖沉淀溶解后定容（即為茶樹菇多糖溶液），以苯酚-硫酸比色法測(cè)定其溶液多糖含量并計(jì)算茶樹菇多糖含量（多糖含量=多糖質(zhì)量/樣品質(zhì)量×100%）[5]。

2 結(jié)果與分析

2.1 供試菌株間的拮抗反應(yīng)

拮抗試驗(yàn)是鑒定菌株間遺傳差異的傳統(tǒng)方法，菌絲之間的拮抗反應(yīng)是菌株間不同遺傳特性的重要表現(xiàn)。表明不同菌株分別屬于不同親和群。不同供試菌株間的拮抗反應(yīng)，表明菌株間親緣關(guān)系遠(yuǎn)近不同。

從圖1 可以看出，白茶與其他4 個(gè)品種有明顯的拮抗線，其余4 個(gè)品種之間不存在拮抗線，說明白茶與其他品種間親緣關(guān)系遠(yuǎn)。

2.2 供試菌株菌絲生長(zhǎng)情況比較

從表1 可以看出，各品種菌絲生長(zhǎng)速度有一定差異，其中早熟2 號(hào)菌絲生長(zhǎng)速度最快，為5.06 mm/d，白茶最慢。菌絲萌發(fā)與菌絲長(zhǎng)勢(shì)，除了茶樹菇6 號(hào)外，其余4 個(gè)品種間沒有明顯差異。

2.3 供試菌株產(chǎn)量對(duì)比

從表2 可以看出，5 個(gè)品種一潮菇產(chǎn)量在891.2～3 222.3 g，茶樹菇F2 單棒產(chǎn)菇最高，為161.12 g，其次為早熟2 號(hào)，單棒產(chǎn)菇達(dá)119.44 g，比其他3 個(gè)品種產(chǎn)量高，產(chǎn)量最低為白茶。

2.4 多糖含量測(cè)定

在國(guó)際上，食用菌多糖被稱為“生物反應(yīng)調(diào)節(jié)物”（簡(jiǎn)稱BRM），經(jīng)研究表明，多糖具有生物反應(yīng)調(diào)節(jié)物的特征，可做為免疫增強(qiáng)劑和免疫激活劑。因此多糖含量的多少可作為食用菌深加工及保健產(chǎn)品開發(fā)的一項(xiàng)指標(biāo)。從表3 可以看出，茶樹菇1 號(hào)、早熟2 號(hào)、茶樹菇F2、白茶4 個(gè)品種之間整株多糖含量接近，在2.52%～2.90%。整株多糖含量最高品種為白茶，其含量達(dá)2.90%，茶樹菇6 號(hào)整株多糖含量最低。早熟2 號(hào)菌蓋與菌柄的多糖含量差異較大，菌蓋多糖含量達(dá)3.35%，菌柄多糖含量為1.68%，相差1.67 個(gè)百分點(diǎn)，即菌蓋中多糖含量約為其菌柄中含量的2 倍。

表1 5 個(gè)品種在PDA 培養(yǎng)基上菌絲生長(zhǎng)狀況

表2 不同菌株的產(chǎn)量

表3 菌柄與菌蓋中多糖含量

3 結(jié)論與討論

白茶與其他4 個(gè)品種間拮抗明顯，早熟2 號(hào)菌絲生長(zhǎng)最快，產(chǎn)量最高為茶樹菇F2，單棒產(chǎn)菇達(dá)161.12 g。多糖含量最高品種為白茶，其含量達(dá)2.90%。