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    休閑豆干輻照滅菌研究

    2020-04-28 09:59:32徐遠芳李文革張祺玲周毅吉
    關(guān)鍵詞:豆干吸收劑量過氧化

    徐遠芳 李文革 彭 玲 張祺玲 周毅吉 郭 峰 王 芊

    (湖南省農(nóng)業(yè)科學(xué)院核農(nóng)學(xué)與航天育種研究所/湖南省農(nóng)業(yè)生物輻照工程技術(shù)研究中心/生物輻照技術(shù)湖南省工程研究中心 長沙410125)

    隨著生活水平的不斷提高,我國休閑食品行業(yè)快速發(fā)展,以休閑豆干為代表的休閑豆制品深受消費者的喜愛,成為我國大豆食品行業(yè)發(fā)展最快的一類產(chǎn)品,尤其在湖南、四川和重慶三地盛行,其中湖南邵陽和平江均是重要生產(chǎn)基地[1-2]。由于休閑豆干富含蛋白質(zhì)和脂肪,且水分含量高,在儲藏期間易滋生微生物引起腐敗變質(zhì)[3-5]。 此外,許多休閑豆干生產(chǎn)企業(yè)的工業(yè)化和標(biāo)準(zhǔn)化程度低、衛(wèi)生質(zhì)量差、產(chǎn)品保質(zhì)期短、品質(zhì)不穩(wěn)定,嚴重制約了休閑豆干產(chǎn)業(yè)的發(fā)展[6-8]。

    為延長休閑豆干的貯藏期,主要采用的保鮮方法有高溫法、超高壓法、微波法、輻照法、添加防腐劑等[9-15]。在實際生產(chǎn)中,則大多采用巴氏殺菌和高溫反壓殺菌法,但經(jīng)過高溫處理后休閑豆干的品質(zhì)會受到很大的影響,其質(zhì)地變硬、彈性下降、咀嚼性增加、風(fēng)味減弱[16]。輻照作為一種“冷殺菌”方法,克服了熱力殺菌的不足,具有殺菌效果好、營養(yǎng)損失小,對食品品質(zhì)影響不大,能有效延長食品的保質(zhì)期,被譽為21 世紀食品綠色加工技術(shù)。目前輻照技術(shù)在湖南休閑豆干加工產(chǎn)業(yè)中的應(yīng)用還較少,作為休閑豆干的主要生產(chǎn)基地,省內(nèi)相關(guān)企業(yè)主要采用高溫高壓方法滅菌。

    本試驗以休閑豆干為研究材料,分別采用不同吸收劑量(0 kGy、3.1 kGy、5.9 kGy、8.6 kGy、11.4 kGy)的60Co γ 射線輻照處理休閑豆干,以豆干中微生物存活數(shù)(菌落總數(shù)、霉菌數(shù))、一般營養(yǎng)成分(水分、蛋白質(zhì)、脂肪、灰分和氨基酸)、理化性質(zhì)(酸價、過氧化值)、質(zhì)構(gòu)特性(硬度、內(nèi)聚性、膠著性、咀嚼性和彈性)以及感官品質(zhì)(色澤、氣味與滋味、口感和可接受性)為評價指標(biāo),考察60Co γ射線輻照對休閑豆干的殺菌效果及品質(zhì)的影響,旨在為輻照技術(shù)在休閑豆制品加工產(chǎn)業(yè)中的推廣應(yīng)用提供參考依據(jù)。

    1 材料與方法

    1.1 材料與儀器

    1.1.1 材料與試劑

    休閑豆干:湘氏休閑豆干,由長沙市國家級瀏陽經(jīng)濟開發(fā)區(qū)內(nèi)某豆制品生產(chǎn)企業(yè)提供。營養(yǎng)瓊脂、孟加拉紅:北京奧博星生物技術(shù)有限責(zé)任公司;氯化鈉、石油醚、濃硫酸、硫酸鉀、鹽酸:分析純,國藥集團化學(xué)試劑有限公司;正己烷:色譜純,國藥集團化學(xué)試劑有限公司;重鉻酸銀和重鉻酸鉀(銀)劑量計(實驗室自制)等。

    1.1.2 主要儀器設(shè)備

    真空充氮包裝機:DZ-400/2S,諸城潤生食品機械;生化培養(yǎng)箱:SPX-250B,天津泰斯特儀器有限公司;霉菌培養(yǎng)箱:MJ,上海一恒科學(xué)儀器有限公司;超凈工作臺:BCM-1000,蘇州凈化設(shè)備有限公司;立式壓力蒸汽滅菌鍋:LDZX-50KBS,上海申安醫(yī)療器械廠;全自動氨基酸分析儀: L-8900, 日 本 日 立 公 司; 電 子 天 平:AUW220D,日本島津公司;質(zhì)構(gòu)分析儀:TAXT2i,英國StableMicrosystem 公司;自動電位滴定儀:Metrohm809,瑞士萬通公司;電熱恒溫鼓風(fēng)干燥箱:DHG-9246A,上海精宏實驗設(shè)備有限公司;全自動凱氏定氮儀及消化儀:FOSS2300,丹麥福斯分析儀器公司。

    1.2 方法

    1.2.1 樣品準(zhǔn)備

    從豆制品生產(chǎn)車間取當(dāng)天生產(chǎn)的滅菌前休閑豆干,用透明PE 袋分裝,每袋約25 g,共15 份,用于休閑豆干微生物試驗;每袋約50 g,共60份,用于休閑豆干理化指標(biāo)測定及感官品質(zhì)評定試驗。分裝后的樣品用真空包裝機抽真空包裝并立即進行輻照。

    1.2.2 輻照處理

    輻照處理在湖南省農(nóng)業(yè)科學(xué)院核農(nóng)學(xué)與航天育種研究所瀏陽輻照中心進行,放射源為60Co,單板源,活度為3.14×1016Bq,采用動態(tài)方式進行輻照。輻照過程中貨箱前后自動換面,上下自動換層。為保證吸收劑量的均勻度,將樣品放置于平均劑量率約8.33 Gy/min的固定區(qū)域,貨箱每運行1圈的時間約為5 h,平均吸收劑量約2.5 kGy,每輻照1圈即取出相應(yīng)的樣品,并手動將其余樣品放置在原區(qū)域繼續(xù)輻照。輻照過程采用重鉻酸銀和重鉻酸鉀(銀)劑量計進行劑量跟蹤,每個劑量設(shè)3個平行樣,劑量計經(jīng)中國計量科學(xué)研究院國家劑量保證服務(wù)(NDAS)比對標(biāo)定。實驗的設(shè)計劑量分別為0 kGy、2.5 kGy、5 kGy、7.5 kGy、10 kGy,實測劑量分別為0 kGy、3.1 kGy、5.9 kGy、8.6 kGy、11.4 kGy。樣品輻照完成后貯藏于4 ℃冰箱中待檢測,所有樣品檢測均重復(fù)3次以上。

    1.2.3 測定方法

    參照GB 4789.2—2016方法測定休閑豆干菌落總數(shù)[17];參照GB 4789.15—2016 方法測定休閑豆干霉菌數(shù)[18]。

    按GB 5009.3—2016方法測定休閑豆干水分的含量[19];按GB 5009.5—2016方法測定蛋白質(zhì)的含量[20];按GB 5009.6—2016 方法測定脂肪的含量[21];按GB 5009.4—2016 方法測定灰分的含量[22];按GB 5009.124—2016的方法測定氨基酸的含量[23];按GB 5009.229—2016 方法測定酸價[24];按GB 5009.227—2016方法測定過氧化值[25]。

    質(zhì)構(gòu)測定參數(shù):探頭為P/50,測試速度為1.0mm/s,壓縮形變量為20%。每個樣品重復(fù)測試9次,取平均值[26]。

    1.2.4 感官品質(zhì)評定

    輻照完成后,取適量不同吸收劑量輻照處理后的休閑豆干置于清潔、干燥的白色瓷盤中,在自然光條件下,采用目測、鼻嗅和口嘗評定方法,記錄各個樣品的色澤、氣味與滋味、口感等。

    1.3 數(shù)據(jù)分析

    運用SPSS 22.0 統(tǒng)計分析軟件進行方差分析,采用一般線性模型中的Tukey 檢驗在5%顯著水平上比較各項指標(biāo)的平均值有無顯著差異,數(shù)據(jù)以±s表示,并用Excel繪圖。

    2 結(jié)果與分析

    2.1 60Co γ 射線輻照對休閑豆干微生物存活數(shù)的影響

    經(jīng)不同吸收劑量輻照處理后休閑豆干的微生物存活數(shù)見表1。由表1可知,60Co γ射線輻照對休閑豆干微生物具有較好的抑制效果,吸收劑量越大,抑制作用越強。初始菌落總數(shù)為2.9×105CFU/g、霉菌數(shù)為3.0×105CFU/g的休閑豆干,經(jīng)3.1 kGy吸收劑量輻照處理可殺死其中90%以上的污染微生物,8.6 kGy 即可使其菌落總數(shù)和霉菌數(shù)均降至10 CFU/g以下。

    休閑豆干菌落總數(shù)和霉菌數(shù)的對數(shù)值(lgN)與吸收劑量(D)的關(guān)系曲線見圖1。根據(jù)擬合方程y=-0.549 1x+5.388 8(R2=0.993 2)和y=-0. 491 9x+5.462 7(R2=0.996 2),推算出60Co γ 射線輻照對休閑豆干中菌落總數(shù)和霉菌數(shù)的吸收劑量D10值分別為1.82 kGy 和2.03 kGy。D10值是指使某種微生物的數(shù)量下降為原來的10%所需要的吸收劑量,是影響輻照滅菌效果的重要參數(shù)。不同種類豆制品的輻照殺菌效果一致,但D10值有所差異[27-28]。一方面與豆制品的含水量等理化條件有關(guān),另一方面是由于其雜菌菌群組成結(jié)構(gòu)不同,不同菌種間 輻射抗性有差異[29]。

    表1 60Co γ射線輻照對休閑豆干中微生物存活數(shù)的影響Table 1 Effects of 60Co γ ray irradiation on microbial survival of leisure dried bean curd

    2.2 60Co γ 射線輻照對休閑豆干一般營養(yǎng)成分的影響

    每種食品加工技術(shù)都會不同程度地影響產(chǎn)品的品質(zhì),輻照技術(shù)作為一種“冷加工”技術(shù)也不例外[30]。圖2 為不同吸收劑量輻照后休閑豆干一般營養(yǎng)成分含量的變化情況。

    由圖2,與對照組樣品(0 kGy)相比,輻照樣品中水分、蛋白質(zhì)和灰分的含量沒有發(fā)生明顯的變化(p>0.05),而輻照樣品的脂肪含量則顯著下降(p<0.05),但與吸收劑量沒有明顯的相關(guān)性。輻照是傳遞能量的過程,大豆蛋白質(zhì)經(jīng)一定劑量的輻照后會發(fā)生變性,因此,通過適宜吸收劑量的輻照處理可改善大豆蛋白質(zhì)的組織結(jié)構(gòu)及功能特性[31-32]。γ 射線具有很強的氧化性,容易引起脂類物質(zhì)的氧化效應(yīng),因此,60Co γ射線輻照處理后休閑豆干的脂肪含量減少與脂肪的氧化反應(yīng)有關(guān)[33]。

    2.3 60Co γ 射線輻照對休閑豆干氨基酸各組分含量的影響

    經(jīng)不同吸收劑量的60Co γ射線輻照后,休閑豆干氨基酸各組分的含量變化情況見圖3。

    由圖3可以看出,休閑豆干氨基酸的種類和含量豐富,共檢測出7種必需氨基酸和8種非必需氨基酸。經(jīng)5.9 kGy 和11.4 kGy 吸收劑量輻照處理后,休閑豆干氨基酸各組分的含量均有所增加,但與對照組樣品相比沒有明顯的差異(p>0.05)。結(jié)果表明,11.4 kGy 以內(nèi)劑量的60Co γ 射線輻照不會對休閑豆干氨基酸各組分產(chǎn)生明顯的破壞效果,且60Co γ 射線輻照有改善休閑豆干營養(yǎng)品質(zhì)的作用。但有研究發(fā)現(xiàn),γ射線輻照處理會引起支鏈氨基酸、含硫氨基酸、帶醇羥基氨基酸的輻解反應(yīng)[34]。

    2.4 60Co γ 射線輻照對休閑豆干理化性質(zhì)的影響

    酸價和過氧化值均是反映食品中油脂氧化程度的重要指標(biāo),油脂氧化是典型的自由基鏈?zhǔn)椒磻?yīng),輻照會加快油脂中自由基的生成速率,從而加速油脂的氧化過程,吸收劑量越大,氧化程度越高[35]。圖4表示經(jīng)不同吸收劑量的60Co γ射線輻照后,休閑豆干酸價和過氧化值的變化情況。

    由圖4可以看出,休閑豆干的酸價隨著吸收劑量的增加先升后降,5.9 kGy 時,休閑豆干的酸價最高,顯著高于對照組樣品(p<0.05);11.4 kGy時,則顯著低于對照組樣品(p<0.05)。經(jīng)不同吸收劑量輻照后,各輻照樣品的過氧化值均顯著低于對照組樣品(p<0.05),且隨著吸收劑量的增加有下降的趨勢,休閑豆干的過氧化值對吸收劑量的線性擬合方程式為y=-0.006 5x+0.056 3,R2=0.989 9,說明休閑豆干的過氧化值與吸收劑量有明顯的線性相關(guān)性。這與已有的研究結(jié)論不一致,可能是由于休閑豆干成分以蛋白質(zhì)為主,油脂含量不高,其本身過氧化值較低,沒有客觀反映出輻照對脂肪的氧化效應(yīng)。結(jié)果表明,經(jīng)不同吸收劑量的60Co γ射線輻照后,休閑豆干的酸價與對照組樣品相比有所差異,但酸價的變化與吸收劑量沒有明顯的相關(guān)關(guān)系。休閑豆干的過氧化值隨著吸收劑量增加有下降的趨勢,且各輻照樣品的過氧化值均顯著低于對照組樣品(p<0.05)。

    2.5 60Co γ 射線輻照對休閑豆干質(zhì)構(gòu)特性的影響

    休閑豆干具有質(zhì)地柔軟、韌勁足、口感細膩、味美可口、風(fēng)味獨特等特點,這些感官品質(zhì)與休閑豆干的質(zhì)構(gòu)特性密切相關(guān),其中,硬度、咀嚼性、凝聚性等為評價豆干品質(zhì)的關(guān)鍵質(zhì)構(gòu)指標(biāo)[36-37]。圖5 為經(jīng)不同吸收劑量的60Co γ 射線輻照后休閑豆干質(zhì)構(gòu)特性的變化情況。可以看出,在不同吸收劑量輻照條件下,休閑豆干的5種質(zhì)構(gòu)指標(biāo)的變化表現(xiàn)有所差異,其中硬度、咀嚼性和膠著性值隨著吸收劑量的增加呈現(xiàn)升降交替波動的趨勢,而咀嚼性和彈性值的變化則不明顯。但與對照組樣品相比,各輻照處理后的樣品硬度、內(nèi)聚性、膠著性、咀嚼性和彈性值等5種質(zhì)構(gòu)指標(biāo)均沒有發(fā)生明顯變化(p>0.05)。說明11.4 kGy 以內(nèi)吸收劑量的60Co γ射線輻照不會對休閑豆干的質(zhì)構(gòu)特性產(chǎn)生明顯的影響。

    2.6 60Co γ 射線輻照對休閑豆干感官品質(zhì)的影響

    休閑豆干的感官品質(zhì)主要從色澤、氣味與滋味、口感和可接受性等4個方面進行評定。不同吸收劑量輻照處理后休閑豆干的感官評定結(jié)果見表2。未輻照處理的休閑豆干外觀呈棕黃色,長條形,表面附著有紅色辣椒油,有麻辣味和豆香味,質(zhì)地密實,咀嚼時有韌性。經(jīng)3.1~5.9 kGy 吸收劑量輻照處理后,對休閑豆干的色澤、氣味與滋味、口感和可接受性無明顯影響。輻照吸收劑量為8.6 kGy時,辣椒油紅色變淡,有輕微的輻照味,但不影響其可接受性。經(jīng)11.4 kGy劑量輻照后,辣椒紅油褪色明顯,輻照味增強,可接受性降低。表明采用8.6 kGy 以下的吸收劑量輻照處理不會對休閑豆干感官品質(zhì)產(chǎn)生明顯的不良影響。

    表2 60Co γ射線輻照對休閑豆干感官品質(zhì)的影響Table 2 Effects of 60Co γ ray irradiation on sensory quality of leisure dried bean curd

    3 結(jié)論

    60Co γ 射線輻照對休閑豆干具有較好的殺菌效果,隨著吸收劑量的增加,抑制作用逐漸增強,8.6 kGy 吸收劑量輻照處理即可使休閑豆干的菌落總數(shù)和霉菌數(shù)均降至10 CFU/g 以下。除脂肪外,60Co γ射線輻照對休閑豆干一般營養(yǎng)成分的含量沒有明顯影響。60Co γ射線輻照處理后休閑豆干的酸價和過氧化值無顯著升高,說明60Co γ射線輻照不會明顯加速休閑豆干的氧化反應(yīng)。60Co γ射線輻照也不會對休閑豆干的質(zhì)構(gòu)產(chǎn)生明顯的破壞效果,小于8.6 kGy 吸收劑量的輻照處理對其感官品質(zhì)無明顯的不良影響。在實際應(yīng)用中,采用8.6 kGy 以下適宜吸收劑量的60Co γ射線輻照處理休閑豆干以達到殺菌的效果,同時不會明顯影響其營養(yǎng)品質(zhì)和感官品質(zhì)。

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