廣西莪術(shù)高油種質(zhì)GC-MS分析

靳雅惠

(西安外事學(xué)院，陜西 西安 710077)

廣西莪術(shù)(Curcuma kwuangsiensis S. G.LeeetC.F.Liang)是《中國(guó)藥典》莪術(shù)的來(lái)源之一[1]。據(jù)文獻(xiàn)報(bào)道，莪術(shù)的化學(xué)成分有莪術(shù)烯、新莪術(shù)二酮等[2]，具有行氣、抗炎、抗腫瘤等功效[3]，在揮發(fā)油的提取技術(shù)、藥理研究、炮制品揮發(fā)油成分分析等方面，近年來(lái)有較多的報(bào)道[4～6]，在選育優(yōu)良品種相關(guān)研究上甚少報(bào)道。為了了解廣西莪術(shù)高油種質(zhì)的揮發(fā)油含量與成分之間的聯(lián)系，本實(shí)驗(yàn)在對(duì)揮發(fā)油含量、顏色等方面進(jìn)行考察的基礎(chǔ)上，采用GC-MS法測(cè)定其揮發(fā)油的成分及各成分含量，為廣西莪術(shù)優(yōu)良種質(zhì)篩選提供參考。

1 材料及儀器

1.1 材料

該研究使用的藥材，由廣西中醫(yī)藥大學(xué)王建教授鑒定均為廣西莪術(shù)(Curcuma kwuangsiensis S. G.Lee et C.F.Liang)?？挤N分析將揮發(fā)油含量大于0.9 ml·100.0g-1的廣西莪術(shù)定為廣西莪術(shù)高油類型，本實(shí)驗(yàn)選擇廣西莪術(shù)高油種質(zhì)15份作為實(shí)驗(yàn)材料。

1.2 儀器

揮發(fā)油提取器；電熱套；Agilent7890N/5975NGC-MS聯(lián)用儀；超聲儀；離心機(jī)

2 方法

2.1 揮發(fā)油提取

將盛有100 g藥材的圓底燒瓶放入電熱套，安裝揮發(fā)油提取器和冷凝管，加熱至回流時(shí)，調(diào)整溫度在110℃左右，持續(xù)提取6 h，冷卻，記錄揮發(fā)油含量及顏色。于離心管中密封揮發(fā)油，放入冰箱防止揮發(fā)。15份廣西莪術(shù)高油種質(zhì)的揮發(fā)油提取及觀察結(jié)果如表1所示。

2.2 供試品制備

用色譜甲醇溶解0.10 mL揮發(fā)油，置于1.5 mL離心管中，采用無(wú)水硫酸鈉除水，超聲5 min,離心10 min,即得。

3 GC-MS測(cè)定

測(cè)定條件: 色譜柱：HP-5MS彈性石英毛細(xì)管柱。GC-MS程序設(shè)定如圖1所示。

表1 15份廣西莪術(shù)高油種質(zhì)揮發(fā)油的出油率及顏色

4 結(jié)果與分析

4.1 GC-MS檢測(cè)結(jié)果

揮發(fā)油中各化合物的百分含量的確定，首先是設(shè)定化合物檢索參數(shù)(匹配度SI>90)，再利用NIST08標(biāo)準(zhǔn)質(zhì)譜圖庫(kù)和人工解析，通過(guò)峰面積歸一化法得到。按照此方法解析15份種質(zhì)色譜圖，結(jié)果如表2所示，共確定化合物31種，以萜類及倍半萜衍生物為主，各種質(zhì)揮發(fā)油所含的化合物種類和相對(duì)含量差異明顯。15份廣西莪術(shù)種質(zhì)所含化合物種類在10-20種之間，平均為14.4種，其中B2、D8、A28等所含化合物種類較少，C29、C108、C39等所含化合物種類較多。廣西莪術(shù)高油種質(zhì)中，共同成分包括α-蒎烯、桉樹(shù)腦等，在共同成分中，桉樹(shù)腦的含量較其他均高出了許多；同時(shí)廣西莪術(shù)高油種質(zhì)也有各自的特有成分，如C-39所含的異松油烯、D-5所含的雙戊烯、B-97所含的α-芹子烯和α-葎草烯。部分廣西莪術(shù)高油種質(zhì)的揮發(fā)油色譜圖如圖2所示。莪術(shù)油具有消腫抗腫瘤[7]、抗炎[8]等藥理作用，發(fā)揮抗腫瘤的作用的主要成分為β-欖香烯、莪二酮、新莪術(shù)二酮等。根據(jù)表2可知，15種不同的廣西莪術(shù)高油類型中均含有β-欖香烯；只有3個(gè)種質(zhì)(D-5、C-29、B-97)檢出了莪術(shù)二酮；有7個(gè)種質(zhì)的揮發(fā)油(C-108、A-28、D-16、B-97、D-8、D-11、D-3)檢出了新莪術(shù)二酮；有9個(gè)種質(zhì)的揮發(fā)油(D-2、D-5、C-108、D-15、C-29、D-16、D-7、D-11、D-3)檢出了莪二酮。

表2 不同種質(zhì)廣西莪術(shù)高揮發(fā)油含量類型的成分比較及其質(zhì)量分?jǐn)?shù)

續(xù)表2 不同種質(zhì)廣西莪術(shù)高揮發(fā)油含量類型的成分比較及其質(zhì)量分?jǐn)?shù)

5 討論

15份廣西莪術(shù)高油種質(zhì)揮發(fā)油的顏色較接近，從淡紫褐色到紫褐色，區(qū)分度較小，這可能是由于本研究選用的種質(zhì)本身為高油種質(zhì)，揮發(fā)油含量較其他種質(zhì)相比均高出許多，在高油范圍內(nèi)，顏色幾乎不再發(fā)生變化，提示我們?cè)谶M(jìn)行高油優(yōu)良種質(zhì)篩選時(shí)，不能以差異較小的揮發(fā)油顏色作為依據(jù)。

廣西莪術(shù)揮發(fā)油含量及成分由于藥材種質(zhì)不同而區(qū)別較大，相同成分與特有成分共存。值得關(guān)注的是，材料D7揮發(fā)油含量較高，為1.2%，然而其揮發(fā)油的有效成分含量卻較低，僅有44.12%，這說(shuō)明揮發(fā)油含量與有效成分含量并不存在一定的相關(guān)性，即揮發(fā)油含量的高低并不能完全反應(yīng)藥材的優(yōu)劣，同理，有效成分含量的高低也不能完全說(shuō)明藥材的優(yōu)劣，因?yàn)閾]發(fā)油含量的高低影響有效成分總量的多少。因此，為了篩選優(yōu)良種質(zhì)，必須結(jié)合揮發(fā)油含量及有效成分含量?jī)煞矫婵疾?。綜合以上考察指標(biāo)，以各種質(zhì)藥材有效成分含量和揮發(fā)油含量的乘積排序，最終確定廣西莪術(shù)高油優(yōu)良種質(zhì)有D11、B97、A28。該結(jié)果可以在廣西莪術(shù)育種等方面提供參考。