血清高爾基體蛋白73對原發(fā)性肝癌的早期診斷價值探討

李繼榮

(巴中市人民醫(yī)院檢驗科，四川 巴中 636000)

原發(fā)性肝癌(PHC)是常見的惡性腫瘤之一。由于PHC發(fā)病之初比較隱匿，臨床診斷出PHC一般多為晚期，治療效果差。若能早期發(fā)現(xiàn)PHC并及時治療，可提高患者5年生存率。因此，早發(fā)現(xiàn)、早診斷PHC具有重要的臨床意義。目前，PHC的檢測與診斷的主要手段為肝超聲影像分析及血清學(xué)標(biāo)志物檢測，其中血清標(biāo)志物最常用的是甲胎蛋白(AFP)檢測。但AFP在早期PHC診斷中的靈敏度不高，且一些肝硬化、慢性肝炎等高危人群 AFP也可升高[1]。高爾基體蛋白73(golgiprotein73，GP73)是近年新發(fā)現(xiàn)的PHC特異性的血清標(biāo)志物，為了解GP73對PHC的早期診斷價值，我們檢測了PHC患者的GP73水平，同時探討血清GP73及AFP聯(lián)合檢測PHC的敏感性及特異性。

材料和方法

一、材料

1.標(biāo)本 選取巴中市人民醫(yī)院2009年1月至2011年12月住院、門診患者及健康體檢者，其中PHC患者50例，肝硬化患者40例，慢性肝炎患者35例，健康體檢者50名。肝病診斷標(biāo)誰和腫瘤診斷標(biāo)準(zhǔn)符合2000年中華醫(yī)學(xué)會傳染病和寄生蟲病學(xué)會、肝病學(xué)分會聯(lián)合修訂的“病毒性肝炎防治方案”中病毒性肝炎診斷標(biāo)準(zhǔn)及中華人民共和國衛(wèi)生部醫(yī)政司組織并由全國腫瘤防治辦公室與中國抗癌協(xié)會編的《新編常見惡性腫瘤診治規(guī)范》中有關(guān)原發(fā)性腫瘤疾病的診斷標(biāo)準(zhǔn)，影像學(xué)診斷主要為B超及CT。

2.儀器和試劑 GP73酶聯(lián)免疫吸附試驗(ELISA)試劑盒由北京熱景生物技術(shù)有限公司提供;AFP測定儀器為美國ABBOTT ARCHITECT i2000全自動化學(xué)發(fā)光儀及原裝配套試劑。

二、方法

清晨空腹抽取受檢者靜脈血3 mL，分離血清后－20℃冰箱保存待檢。GP73測定采用ELISA，判定值為≥150 ng/mL;AFP測定采用化學(xué)發(fā)光法，判定值為≥400 ng/mL。

三、統(tǒng)計學(xué)方法

用SPSS17.0軟件進(jìn)行統(tǒng)計學(xué)分析。GP73和AFP檢測數(shù)據(jù)呈偏態(tài)分布，用中位數(shù)(范圍)表示，各組間比較采用Mann-Whitney U檢驗。二元變量比較用χ2檢驗，P＜0.05表示差異有統(tǒng)計學(xué)意義。

結(jié) 果

一、各組GP73、AFP水平比較

PHC組、肝硬化組、慢性肝炎組及健康對照組GP73及AFP水平依次降低，各組間差異均有統(tǒng)計學(xué)意義(P＜0.05)。PHC組GP73和AFP陽性率均高于其他3組(P＜0.05)，見表1。

二、GP73和AFP單項及聯(lián)合檢測敏感性和特異性比較

血清GP73單項檢測PHC的敏感性及特異性均高于AFP(P＜0.05)。GP73與AFP聯(lián)合檢測時，可將敏感性和特異性均提高至92%，見表2。

表1 各組人群GP73和AFP檢測結(jié)果

表2 血清GP73和AFP單項及聯(lián)合檢測敏感性與特異性比較 (%)

討 論

目前PHC的診斷主要依靠影像學(xué)、血清AFP和病理學(xué)檢查，其中AFP檢測已廣泛應(yīng)用于PHC的診斷及術(shù)后、復(fù)發(fā)監(jiān)測，但敏感性和特異性均不夠理想。為此，需要尋找一種敏感性更高、特異性更強(qiáng)的PHC血清學(xué)標(biāo)志物[2]。GP73是Kladney等[3]于2000年首先從人類巨大細(xì)胞性肝炎患者肝細(xì)胞基因文庫中篩選出的一個cDNA克隆，編碼相對分子質(zhì)量為7.3×104糖蛋白，該蛋白的編碼基因位于第9號染色體上，全長3042 bp。GP73主要存在于膽管上皮細(xì)胞，是高爾基體順面膜囊上的一種整合蛋白。正常肝臟細(xì)胞幾乎不表達(dá)GP73，但在肝臟出現(xiàn)急性炎癥或較嚴(yán)重的肝纖維化時GP73合成增加，發(fā)展到肝硬化時其表達(dá)又進(jìn)一步提高，肝癌時表達(dá)達(dá)到高峰。費(fèi)迎明等[4]的研究顯示肝癌、肝硬化時GP73水平明顯增加。Gu等[5]發(fā)現(xiàn)PHC患者血清GP73水平明顯增高，遠(yuǎn)高于其他疾病患者及健康人。本研究結(jié)果也顯示PHC組、肝硬化組、慢性肝炎組及健康對照組GP73及AFP水平依次降低，各組間差異均有統(tǒng)計學(xué)意義(P＜0.05);PHC組GP73和AFP陽性率均高于其他3組(P＜0.05)。由此可見GP73的表達(dá)與肝癌發(fā)生過程是緊密相關(guān)的，顯示出GP73作為PHC新的敏感的血清標(biāo)志物的巨大潛質(zhì)。

血清GP73單項檢測的敏感性(82%)與特異性(86%)均高于 AFP(52%、66%)(P ＜0.05)。與文獻(xiàn)[6]報道基本一致。GP73與AFP聯(lián)合檢測時，可將敏感性與特異性均提高至92%，這與翁彭劍等[7]的結(jié)果基本相同。GP73和AFP具有互補(bǔ)性，為避免AFP單項檢測可能出現(xiàn)的漏檢，提高PHC早期診斷，建議采用GP73和AFP聯(lián)合檢測的方法。GP73也可用于PHC高危人群的普查及篩選。

綜上所述，血清GP73檢測對PHC的早期診斷有重要的臨床價值，很可能成為診斷肝癌的新標(biāo)志物。

[1]王 然，王曉東，李鳳煥，等.高爾基體蛋白GP73在肝癌診斷中的診斷意義[J].國際檢驗醫(yī)學(xué)雜志，2012，33(13):1572-1573.

[2]唐富英，袁明生，劉金秀，等.新的HCC血清標(biāo)志物GP73在HCC中的表達(dá)及臨床價值研究[J].熱帯醫(yī)學(xué)雜志，2012，34(8):975-976.

[3]Kladney RD，Bulla GA，Guo L，at al.GP73，a novel Golgi-localized protein upregulated by viral infection[J].Gene，2000，249(1-2):53-65.

[4]費(fèi)迎明，許文芳，周健康，等.高爾基體蛋白73(GP73)在原發(fā)性肝癌中的早期診斷價值研究[J].醫(yī)學(xué)研究雜志，2011，40(12):57-60.

[5]Gu Y，Chen W，Zhao Y，at al.Quantitative analysis of elevated serum Golgi protein-73 expression in patients with liver diseases[J].Ann Clin Biochem，2009，46(Pt 1):38-43.

[6]李 麗.巖藻糖基化修飾蛋白在原發(fā)性肝細(xì)胞癌中的研究進(jìn)展[J].檢驗醫(yī)學(xué)，2012，27(4):324-328.

[7]翁彭劍，高國生，魯姣英，等.檢測血清GP73對PHC診斷價值的探討[J].中國衛(wèi)生檢驗雜志，2011，21(8):1971-1973.