UF-500i全自動(dòng)尿沉渣分析儀檢測(cè)系統(tǒng)的性能驗(yàn)證

董 磊，劉 娟，馬紅雨，全首禎，朱美財(cái)

(1.空軍總醫(yī)院臨床檢驗(yàn)中心，北京 100142;2.空軍總醫(yī)院輸血科，北京 100142)

隨著全自動(dòng)尿沉渣分析儀的廣泛應(yīng)用，尿液有形成分的檢驗(yàn)工作效率有了很大的提高，對(duì)樣本的篩查作用尤為明顯。目前許多臨床實(shí)驗(yàn)室擁有多臺(tái)全自動(dòng)尿沉渣分析儀，各儀器都有其獨(dú)立的檢測(cè)系統(tǒng)。檢測(cè)系統(tǒng)為完成一個(gè)項(xiàng)目檢測(cè)所涉及的儀器、試劑、校準(zhǔn)品、操作程序、質(zhì)量控制及保養(yǎng)計(jì)劃等的組合，為了保證檢驗(yàn)結(jié)果的準(zhǔn)確性，根據(jù)ISO15189[1]和衛(wèi)生部《醫(yī)療機(jī)構(gòu)臨床實(shí)驗(yàn)室管理辦法》[2]的要求，本研究對(duì)UF-500i全自動(dòng)尿沉渣分析儀的部分檢測(cè)項(xiàng)目的精密度、攜帶污染率、線性范圍及儀器間的結(jié)果對(duì)比進(jìn)行了系統(tǒng)評(píng)估，對(duì)該檢測(cè)系統(tǒng)進(jìn)行性能驗(yàn)證。

材料和方法

一、實(shí)驗(yàn)儀器及試劑

實(shí)驗(yàn)儀器為日本Sysmex公司UF-500i及UF-1000i型全自動(dòng)尿沉渣分析儀，配套試劑均由Sysmex公司提供[ELUENT PACK-SED(A1044)，ELUENT PACK-BAC(A1027)，SHEATH(G1107)，SEARCH-SED(A1019)，SEARCH-BAC(A1009)]。

二、儀器校準(zhǔn)及質(zhì)控

儀器按廠家要求進(jìn)行校準(zhǔn)并按室內(nèi)質(zhì)控的要求完成室內(nèi)質(zhì)控。

三、精密度試驗(yàn)[3]

1.批內(nèi)精密度測(cè)定 隨機(jī)選取新鮮臨床尿液樣本對(duì)WBC、RBC、EC和BACT 4個(gè)項(xiàng)目重復(fù)測(cè)定20次，計(jì)算出均值、標(biāo)準(zhǔn)差和變異系數(shù)。

2.批間精密度測(cè)定 采用兩個(gè)水平的定值質(zhì)控每天測(cè)定1次，連續(xù)測(cè)定20 d，計(jì)算出均值、標(biāo)準(zhǔn)差和變異系數(shù)。

四、攜帶污染率試驗(yàn)

取各檢測(cè)項(xiàng)目高值和低值標(biāo)本各1份，分別在儀器上連續(xù)測(cè)定高值3次(H1，H2，H3)，然后立即連續(xù)測(cè)定低值3次(L1，L2，L3)。根據(jù)下列公式計(jì)算儀器的攜帶污染率:儀器攜帶污染率(%)=(L1-L3)/(H3-L3)×100%

五、線性驗(yàn)證[4]

該試驗(yàn)選取各檢測(cè)項(xiàng)目高值正常新鮮尿液樣本，以鞘液作為稀釋液將該標(biāo)本進(jìn)行倍比稀釋，充分混勻后進(jìn)行檢測(cè)。每個(gè)樣本測(cè)定3次，3次檢測(cè)結(jié)果的平均值為實(shí)測(cè)值。理論值設(shè)為x，實(shí)測(cè)值設(shè)為y，列出回歸方程并計(jì)算相關(guān)系數(shù)。WBC線性范圍:18～4502個(gè)/μL;RBC線性范圍:5～2272個(gè)/μL;EC 線性范圍:2.5～142個(gè)/μL;BACT線性范圍:12～5692個(gè)/μL。

六、儀器間結(jié)果比對(duì)[5-6]

以參加衛(wèi)生部臨床檢驗(yàn)中心室間質(zhì)評(píng)的Sysmex UF-1000i全自動(dòng)尿沉渣分析儀作為參比儀器。選取40例住院患者樣本，剔除黃疸、乳糜等影響因素的樣本，基本涵蓋高、中、低值，均在儀器檢測(cè)的線性范圍內(nèi)，每個(gè)樣本一分為二。每日檢測(cè)8份樣本，每份樣本重復(fù)測(cè)定2次，取均值為最后結(jié)果，樣本排列的順序?yàn)?～8、8～1。連續(xù)測(cè)定5 d，共計(jì)40份檢測(cè)結(jié)果。以UF-1000i測(cè)定結(jié)果作為參考方法的測(cè)定值(x)，UF-500i測(cè)定結(jié)果作為比對(duì)方法的測(cè)定值(y)，用x與y的均值計(jì)算兩種儀器的相關(guān)系數(shù)(r)。如r≥0.975(或R2≥0.95)，則認(rèn)為樣本濃度合適，直線回歸統(tǒng)計(jì)的斜率及截距是可靠的;如 r＜0.975(或 R2＜0.95)，則認(rèn)為實(shí)驗(yàn)方法精密度較差或樣本濃度范圍不合適，直線回歸統(tǒng)計(jì)的斜率及截距不可靠，需改善實(shí)驗(yàn)方法的精密度或增加樣本的檢測(cè)數(shù)量重新進(jìn)行實(shí)驗(yàn)。

七、偏差估計(jì)和可接受性判斷[7-8]

選取有代表性的各檢測(cè)項(xiàng)目的高、中、低值(Xc)，計(jì)算系統(tǒng)誤差(即相對(duì)偏差)SE=(b-1)Xc+a，SE%=SE/Xc×100%，以SE%不大于廠家提供的允許總誤差(TEa)的1/2作為臨床可接受水平，符合儀器性能要求，即2臺(tái)儀器間具有可比性。根據(jù)廠家要求，當(dāng)測(cè)量值處于低值范圍內(nèi)時(shí)，相對(duì)偏差以SE計(jì)算;當(dāng)測(cè)量值處于高值范圍內(nèi)時(shí)，相對(duì)偏差以SE%計(jì)算，各檢測(cè)項(xiàng)目高、低值判斷界限分別為(個(gè)/μL):WBC(30)，RBC(25)，EC(15)，BACT(113)。

八、統(tǒng)計(jì)學(xué)方法

實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)采用SPSS15.0軟件進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)分析。

結(jié) 果

一、精密度驗(yàn)證結(jié)果

批內(nèi)精密度及批間精密度均在儀器要求的范圍之內(nèi)，結(jié)果見(jiàn)表1、表2。

表1 UF-500i全自動(dòng)尿沉渣分析儀批內(nèi)精密度測(cè)定結(jié)果

表2 UF-500i全自動(dòng)尿沉渣分析儀批間精密度測(cè)定結(jié)果

二、儀器攜帶污染率的評(píng)價(jià)

該儀器WBC、RBC、EC及BACT的攜帶污染率分別為 0.04%、0.07%、0.10% 及 0.16%，結(jié)果見(jiàn)表3。

表3 UF-500i全自動(dòng)尿沉渣分析儀攜帶污染率測(cè)定結(jié)果

三、線性驗(yàn)證結(jié)果

將所選取的高值樣本按一定比例稀釋后得出回歸方程 y=b x+a，b均在0.97 ～1.03 范圍內(nèi)，r均＞0.975，說(shuō)明該儀器的檢測(cè)結(jié)果達(dá)到線性要求，結(jié)果見(jiàn)表4。

表4 UF-500i全自動(dòng)尿沉渣分析儀線性分析結(jié)果

四、儀器間比對(duì)結(jié)果

以參加衛(wèi)生部臨床檢驗(yàn)中心室間質(zhì)評(píng)的Sysmex UF-1000i全自動(dòng)尿沉渣分析儀作為參比儀器，將UF-500i與其比對(duì)進(jìn)行相關(guān)性分析，r均＞0.975，2臺(tái)儀器檢測(cè)項(xiàng)目的散點(diǎn)圖如圖1所示。

圖1 2臺(tái)儀器檢測(cè)項(xiàng)目的散點(diǎn)圖

表5 UF-500i及UF-1000i檢測(cè)偏差結(jié)果

五、不同檢測(cè)系統(tǒng)檢測(cè)結(jié)果的相對(duì)偏差結(jié)果

表5顯示在自行選取的各檢測(cè)項(xiàng)目高、中、低值醫(yī)學(xué)水平的相對(duì)偏差均＜儀器廠家提供的1/2 TEa，2臺(tái)儀器的檢測(cè)結(jié)果基本一致。

討 論

UF-500i為采用流式熒光技術(shù)和電阻抗原理的全自動(dòng)尿液有形成分分析儀，通過(guò)對(duì)尿液樣本中的顆粒進(jìn)行染色及對(duì)激光光源照射顆粒產(chǎn)生的信號(hào)進(jìn)行分析，可提供尿液樣本中每個(gè)顆粒的信息[9]。為了保證檢驗(yàn)結(jié)果的準(zhǔn)確性，參照ISO15189和衛(wèi)生部《醫(yī)療機(jī)構(gòu)臨床實(shí)驗(yàn)室管理辦法的要求》，本研究對(duì)科室新引進(jìn)的UF-500i全自動(dòng)尿沉渣分析儀的檢測(cè)系統(tǒng)進(jìn)行了部分檢測(cè)參數(shù)的性能驗(yàn)證，以證實(shí)該檢測(cè)系統(tǒng)的穩(wěn)定性及可靠性。

精密度是指在一定條件下進(jìn)行多次測(cè)定時(shí)，所得測(cè)定結(jié)果之間的符合程度[10]。本研究顯示UF-500i檢測(cè)系統(tǒng)的批內(nèi)變異分別為:WBC(5.81%)、RBC(7.72%)、EC(28.97%)、BACT(8.52%);批間變異分別為:WBC(2.65%，7.88%)、RBC(4.02%，9.17%)、EC(13.92%，12.13%)、BACT(5.26%，7.57%)，均符合儀器廠家的要求，檢測(cè)結(jié)果顯示該檢測(cè)系統(tǒng)具有較好的重復(fù)性，能夠保證檢測(cè)結(jié)果的穩(wěn)定可靠。潘瑩等[11]研究表明 UF-1000i其 WBC、RBC、EC 及BACT的低值批內(nèi)精密度不符合儀器要求，原因可能是由于當(dāng)待測(cè)物濃度較低時(shí)，檢測(cè)結(jié)果的細(xì)微變化即可造成精密度的較大波動(dòng)，但其檢測(cè)結(jié)果的偏差仍在可接受的范圍內(nèi)，而本研究批內(nèi)精密度所選取的待檢樣本的濃度較為適中，均符合儀器精密度要求，其中EC的濃度偏低，批內(nèi)變異處于儀器要求范圍的上限。

在攜帶污染率試驗(yàn)中，該儀器在測(cè)定BACT高值樣本時(shí)對(duì)低值樣本的檢測(cè)結(jié)果有明顯攜帶污染，提示在檢測(cè)細(xì)菌高值樣本后應(yīng)及時(shí)對(duì)管路進(jìn)行清洗，以免細(xì)菌在儀器管路內(nèi)繁殖增生影響后續(xù)樣本的檢測(cè)。由線性分析實(shí)驗(yàn)得到的回歸方程中，各檢測(cè)項(xiàng)目的b值均介于0.97～1.03范圍內(nèi)，r值均＞0.975，顯示了各檢測(cè)項(xiàng)目良好的線性檢測(cè)范圍，符合儀器的線性要求。

在儀器間比對(duì)試驗(yàn)中，Sysmex UF-1000i全自動(dòng)尿沉渣分析儀性能及各項(xiàng)參數(shù)較為穩(wěn)定，參加了衛(wèi)生部臨床檢驗(yàn)中心室間質(zhì)評(píng)且結(jié)果良好，故設(shè)為參比儀器，UF-500i設(shè)為比對(duì)儀器。在進(jìn)行比對(duì)試驗(yàn)時(shí)，2臺(tái)儀器的檢測(cè)應(yīng)該同步進(jìn)行，以免由于細(xì)菌繁殖增生或紅RBC裂等影響檢測(cè)結(jié)果。研究結(jié)果顯示，r值均＞0.975，表明實(shí)驗(yàn)選取的統(tǒng)計(jì)數(shù)據(jù)分布合理，回歸方程的斜率和截距可靠，2臺(tái)儀器具有良好的相關(guān)性。由于相關(guān)系數(shù)僅能說(shuō)明具有線性關(guān)系的2個(gè)變量間的密切程度和方向，并不能說(shuō)明兩變量間是相等或等效的，因此，利用相關(guān)系數(shù)不能準(zhǔn)確說(shuō)明2個(gè)檢測(cè)系統(tǒng)的檢測(cè)結(jié)果是一致的，而應(yīng)該采用相對(duì)偏差來(lái)對(duì)不同檢測(cè)系統(tǒng)的檢測(cè)結(jié)果進(jìn)行一致性評(píng)價(jià)。在計(jì)算不同儀器間檢測(cè)結(jié)果的相對(duì)偏差時(shí)，理論上應(yīng)將各檢測(cè)項(xiàng)目醫(yī)學(xué)決定水平(Xc)代入方程SE=|(b－1)Xc+a|來(lái)計(jì)算不同儀器間的系統(tǒng)誤差(SE)，進(jìn)而與廠家規(guī)定的允許總誤差比較，評(píng)價(jià)不同儀器間是否具有可比性[12]。由于迄今未見(jiàn)尿有形成分分析儀檢測(cè)數(shù)據(jù)的Xc水平公布，故本研究選取有代表性的各檢測(cè)項(xiàng)目的高、中、低值(Xc)來(lái)計(jì)算系統(tǒng)誤差。根據(jù)廠家對(duì)儀器的要求，當(dāng)待檢物濃度較低時(shí)，比對(duì)儀器與參比儀器檢測(cè)值的細(xì)微變化即有可能造成SE%的較大變化，故此時(shí)以SE來(lái)評(píng)價(jià)不同檢測(cè)系統(tǒng)的相對(duì)偏差;而當(dāng)待檢物處于高值范圍時(shí)，相對(duì)偏差以SE%來(lái)計(jì)算。結(jié)果顯示，2臺(tái)儀器的檢測(cè)結(jié)果的偏差均在允許誤差范圍內(nèi)，符合儀器的要求，表明UF-1000i及UF-500i 2種檢測(cè)系統(tǒng)具有良好的可比性，2臺(tái)儀器的檢測(cè)結(jié)果基本一致。

本研究通過(guò)對(duì)UF-500i全自動(dòng)尿有形成分分析儀的性能驗(yàn)證，對(duì)該檢測(cè)系統(tǒng)的精密度、攜帶污染率、線性范圍及儀器間的結(jié)果對(duì)比進(jìn)行了評(píng)價(jià)，對(duì)該儀器的檢測(cè)性能有了明確的了解，對(duì)其準(zhǔn)確性的判斷有了評(píng)估依據(jù)，保證了實(shí)驗(yàn)室檢測(cè)結(jié)果的準(zhǔn)確性及可靠性，滿足了臨床的需要，能夠更好地為臨床服務(wù)。

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