沙門氏菌的檢測技術與方法

劉穎

摘 要：作為一種能夠感染人畜的常見病原菌，沙門氏菌會導致動物的傷寒、霍亂病癥，同時還會使人類換上壞血病、胃腸炎癥等，對人畜的健康都有著巨大的危害，而因其引發(fā)的食品安全事件更是在近年來經(jīng)常出現(xiàn)。為此為了保證食品安全就需要對食品當中的沙門氏菌進行快速準確的檢驗，目前生物學、化學、物理學等領域在其檢驗方面得到了長足的發(fā)展，因此沙門氏菌的檢驗已經(jīng)由傳統(tǒng)的檢驗方式演化成為更加高效的方式，其技術的發(fā)展不僅為未來沙門氏菌的檢測提供了實用價值，在發(fā)展方向也能夠起到引領作用，為此本文將對其進行總結并詳細描述，以此來完成未來發(fā)展的展望。

關鍵詞：沙門氏菌;檢測技術;檢測方法

1.沙門氏菌檢測技術與方法現(xiàn)狀

1.1傳統(tǒng)方法

在傳統(tǒng)的方法當中會將培養(yǎng)法標準作為基礎，對沙門氏菌的生長及繁殖特性進行參考完成相關檢定方案的測定，其具體的步驟首先是完成樣品的取樣，此后分別進行增菌及繁殖并通過分離培養(yǎng)的方式來對可疑菌落進行識別，在識別可疑菌落后對其進行采樣并落實生化實驗及血清學的鑒定。通過這樣的步驟能夠保證檢測結果的準確性，且其檢測結果也已經(jīng)經(jīng)過了無數(shù)次的驗證。目前十分廣泛地應用在食品及藥品的沙門氏菌檢驗當中，在需要進行沙門氏菌法定仲裁時也是多使用此方式。但是在進行疫情及疾病的防護時往往對時效有著較為嚴苛的要求，希望能夠在最短的時間內(nèi)得出檢測結果，此時傳統(tǒng)方式的4-7天顯然不符合要求，為此對同樣準確且高效的檢驗方法進行研究很有必要[1]。

1.2免疫分析方法

沙門氏菌的免疫分析檢測技術建立在免疫學的理論之上，其主要是利用抗體與抗原之間反應的特異性并使用免疫放大技術來完成沙門氏菌的鑒別。通常情況下免疫分析方法能夠劃分成為標記免疫分析方法及非標機免疫分析方法兩種形式，眼前得到實際應用的方法分別由酶聯(lián)免疫吸附、免疫熒光法及同位素標記法作為操作基礎，而使用的具體技術則有免疫傳感器技術、乳膠凝集技術及免疫印跡技術等。

1.3分子生物學方法

分子生物學檢測技術應用在沙門氏菌的檢驗當中時其原理是對特異性的核算序列進行比較，以此完成不同物種、同物種不同個體的差異分析。目前較為常見的檢測技術由熒光定量PCR技術、基因芯片技術、聚合酶鏈式反應技術等，同時還有將測序技術作為根本的檢測方式，上述技術在靈敏度、特異性及精準度上都有著一定的優(yōu)勢，因此在現(xiàn)實工作當中已經(jīng)得到了一定的應用，但是其在操作人員及使用儀器上都有著一定的門檻，因此始終無法在基層得到普及[2]。

2.新型技術應用與展望

2.1納米技術應用

使用納米技術對沙門氏菌進行測定的傳感器為微流體納米生物傳感器，其在原理方面是通過量子點檢測的方式來統(tǒng)計沙門氏菌細胞的數(shù)量，同時將其固定在量子點的表面，分離、富集方式則是通過磁性顆粒及控制芯片來完成的。而在使用熒光儀對其進行觀測時則能夠找出納米顆粒當中的熒光信號點數(shù)量，其熒光相應數(shù)量會隨著細胞濃度的增加而不斷上升。在目前進行的實驗當中使用的是雞肉及經(jīng)過連續(xù)稀釋的沙門氏菌硼酸鹽緩沖液作為研究對象，能夠發(fā)現(xiàn)在二者之中的沙門氏菌檢測限度均為103cfu/ml。同時也是通過這一實驗發(fā)現(xiàn)納米技術與生物傳感器能進行較好的結合，且在生物傳感器未來的發(fā)展上也是具有較為清晰的路線的。納米生物技術制成的傳感器不僅有著很高的靈敏度，其在體積上也是更加輕便便于攜帶的，因此在食品、環(huán)境的檢測當中有很大的利用價值[3]。

2.2生物傳感器技術

使用光學顯微成像系統(tǒng)與免疫傳感器相結合的技術能夠快速的對食品當中存在的沙門氏菌進行檢驗，在實際的實驗當中對103cfu/25g的雞肉樣品進行檢驗既能夠完成樣品沙門氏菌的檢驗，由此能夠發(fā)現(xiàn)此檢測方式的靈敏度相對較高。同時在生物傳感器技術當中其能夠發(fā)揮出的優(yōu)點還體現(xiàn)在計數(shù)準確及便于觀察方面，在將其與光學顯微成像技術進行結合后能夠發(fā)現(xiàn)其優(yōu)勢更是體現(xiàn)在敏銳及實用方面。例如在實驗過程當中已經(jīng)能夠建立基于 3-吡咯羧基多聚物適配體的阻抗傳感器，其傳感器類型屬于非標機傳感器，且在鼠傷寒沙門氏菌的檢驗當中被證明有效。其原理是通過適配體及靶標物之間的3-吡咯羧基多聚物內(nèi)部效應及相關的電學屬性相互作用來對阻抗進行測定的，在具體的濃度范圍上數(shù)值為102-108cfu/ml，同時此檢測方式兼具經(jīng)濟性及效率[4]。

2.3研究結論及展望

目前對于沙門氏菌研究的關注度正在不斷提升，為此其在檢測技術及檢測方法上都得到了長遠的進步，作為常用檢測方法的傳統(tǒng)檢測法、免疫學檢測法及分子生物學檢測法更是得到了廣泛的應用，目前國際官方分析化學家協(xié)會、美國食品藥品監(jiān)督局、國際標準化組織等仍然是將生物培養(yǎng)法作為檢測沙門氏菌的黃金標準，該方法在成本及硬件條件要求上相對較低，同時其也是各種檢測方法的基礎，但是其也存在著一定的弊端，例如無法按照時效完成食品安全性的評價，因此在未來的發(fā)展當中必然會隨著時間的推移被淘汰，由此可知對沙門氏菌的檢測技術進行進一步的研究是很有必要的[5]。

結語：

不同的檢測方法都會有自身的優(yōu)點及不足，當前新式的沙門氏菌檢測方法是通過結合兩種或以上的方式共同使用以達到取長補短的目的，而隨著科學技術的發(fā)展大量的新型材料應用其中，例如本文提及的納米材料就是很好的范例。而在技術層面上例如傳感器技術與傳統(tǒng)技術的結合也幫助沙門氏菌檢測技術得到了很大程度上的提升。新技術雖然有一定存在的價值，但是其在成本及技術需求上也是始終居高不下，這樣的問題使得其僅僅能夠在實驗室或大型食品企業(yè)當中完成。但是在不久的將來相信會有更多的新興技術以更強的靈敏度及精準度出現(xiàn)在實際應用當中，且在造價方面也會更加低廉使得大量的食品企業(yè)都能夠得以普及，幫助完成沙門氏菌并的控制與預防。

參考文獻：

[1]覃湘婕，孫寧與，李春堯，楊榮，吳永寶.食品中沙門氏菌檢測方法研究進展[J].中國釀造，2020，39（09）：18-24.

[2]李杰，丁承超，翟續(xù)昭，王廣彬，劉武康，曾海娟，王淑娟，孫靜娟，董慶利，劉箐.沙門氏菌檢測技術研究進展[J].微生物學雜志，2017，37（04）：126-132.

[3]胡麗君. 沙門氏菌全基因組測序分析及其DNA等溫擴增檢測方法的建立和應用研究[D].東北農(nóng)業(yè)大學，2017.

[4]段諾. 食源性致病菌適配體的篩選及分析應用研究[D].江南大學，2013.

[5]馮可. 鮮切果蔬食源性病原微生物快速檢測技術的研究[D].大連理工大學，2017.

（鹽城市大豐區(qū)綜合檢驗檢測中心? 江蘇? 鹽城? 224000）