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    溶血、脂血標(biāo)本對(duì)血站血篩核酸檢測(cè)結(jié)果的影響分析

    2020-03-02 07:43:40郭兆誠(chéng)
    健康大視野 2020年4期
    關(guān)鍵詞:溶血脂血

    郭兆誠(chéng)

    【摘 要】目的:研究溶血、脂肪血對(duì)血站血篩HBVDNA、HCVRNA、HIVRNA核酸檢測(cè)(NAT)結(jié)果的影響。方法:應(yīng)用蘇州華益美核酸檢測(cè)系統(tǒng)及配套專用試劑,分別于5倍本核酸檢測(cè)系統(tǒng)檢測(cè)下限(LOD)濃度的HBVDNA21.0IU/ml、HCVRNA62.5IU/ml、HIVRNA211.5IU/ml樣本,采用坼分單檢模式進(jìn)行NAT;對(duì)含終濃度為5倍LOD的HBVDNA、HCVRNA、HIVRNA樣本的4組溶血樣本的檢測(cè)結(jié)果。結(jié)果:溶血樣本[血紅蛋白Hb濃度分別為0mg/dl(對(duì)照)、0mg/dl、250mg/dl、500mg/dl、/1000mg/dl],脂肪血樣本[甘油三酯TG濃度分別為0.76mmol/L(對(duì)照)、17mmol/L、28mmol/L、34mmol/L]的HBVDNA、HCVRNA、HIVRNA檢測(cè)循環(huán)閾值(Ct值)差異均無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05);Hb≤1000mg/dl以及TG≤34mmol/L時(shí),對(duì)血站血篩NATHBVDNA、HCVRNA、HIVRNA沒(méi)有顯著性影響。

    【關(guān)鍵詞】溶血;脂血;核酸檢測(cè)

    【中圖分類號(hào)】R450【文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼】A【文章編號(hào)】1005-0019(2020)04--01

    核酸檢測(cè)技術(shù)能縮短病毒感染標(biāo)志物檢測(cè)的“窗口期”以及檢出因病毒變異、隱匿性感染等而漏檢的污染血液,降低了經(jīng)輸血傳播疾病的風(fēng)險(xiǎn)[1],但在實(shí)際核酸檢測(cè)工作中,標(biāo)本的溶血、脂肪血等樣本質(zhì)量因素可能會(huì)直接影響核酸檢測(cè)結(jié)果的準(zhǔn)確性[2-3]。鑒于此本文旨在探討分析溶血、脂血標(biāo)本對(duì)于血液核酸檢測(cè)的影響。

    1 材料和方法

    制備溶血血漿樣本4份,2ml/份 (血紅蛋白Hb濃度分別為0mg/dl(對(duì)照)、250mg/dl、500mg/dl、/1000mg/dl);脂血樣本4份,2ml/份(甘油三酯TG濃度分別為0.76mmol/L(對(duì)照)、17mmol/L、25mmol/L、34mmol/L),然后加入 HBV DNA、HCV RNA、HIV RNA標(biāo)準(zhǔn)品,使得檢測(cè)的終濃度分別為檢測(cè)下限的5倍。HBVDNA、HCV RNA、HIV RNA 分別準(zhǔn)備16份(每種Hb濃度單陽(yáng)3份,混三陽(yáng)1份,共4種濃度)+16份(每種TG濃度單陽(yáng)3份,混三陽(yáng)1份,共4種濃度)樣本。

    2 儀器和試劑:

    蘇州華益美核酸檢測(cè)系統(tǒng),PCR-熒光法;ABI PCR7500;蘇州華益美乙型肝炎病毒丙型肝炎病毒人類免疫缺陷病毒(1+2型)核酸檢測(cè)試劑盒(有效期內(nèi)使用);

    3 核酸檢測(cè):

    每份樣本上機(jī)雙孔平行坼分單檢模式檢測(cè)。

    4 統(tǒng)計(jì)學(xué)分析:

    采用SPSS17.0軟件進(jìn)行t檢驗(yàn),計(jì)量資料以均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差標(biāo)識(shí),P<0.05認(rèn)為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

    5 結(jié)果

    5.1 溶血標(biāo)本與對(duì)照組溶血組與對(duì)照組重負(fù)檢測(cè)的Ct值比較,差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)。見(jiàn)表1-表3。

    5.2 脂血組與對(duì)照組重負(fù)檢測(cè)的Ct值比較,差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05),見(jiàn)表2。

    6 討論

    本研究結(jié)果顯示,使用蘇州華益美核酸血篩系統(tǒng)檢測(cè) HBV DNA,HCV RNA,HIV RNA,溶血組與對(duì)照組、脂血組與對(duì)照組比較的差異無(wú)統(tǒng)計(jì)意義,提示血液標(biāo)本中血紅蛋白Hb濃度≤正常參考值范圍上限的250倍,甘油三酯TG的濃度≤正常參考值范圍上限的20 倍時(shí),不會(huì)因?yàn)槿苎?、脂血因素?dǎo)致核酸結(jié)果出現(xiàn)假陽(yáng)性或者假陰性。盡管華益美核酸血篩系統(tǒng)試劑使用說(shuō)明書注明溶血樣本血紅蛋白Hb濃度≤500mg/dl,脂肪血樣本甘油三酯TG濃度≤28mmol/L對(duì)檢測(cè)結(jié)果無(wú)影響,但是實(shí)際檢測(cè)工作中,當(dāng)脂血漿表面時(shí),我們都會(huì)將乳糜層去除后再進(jìn)行檢測(cè),盡量減少脂肪顆粒對(duì)檢測(cè)造成影響。

    雖本研究提升溶血、脂血標(biāo)本對(duì)于蘇州華益美核酸血篩系統(tǒng)的檢測(cè)結(jié)果無(wú)明顯影響,但還示需要按照相關(guān)標(biāo)準(zhǔn)規(guī)范采集記一系列相關(guān)處理。

    參考文獻(xiàn)

    張妍,朱海峰,孫波,等.核酸檢測(cè)技術(shù)在血液篩查中的應(yīng)用及分析[J].中國(guó)輸血雜志,2012(12):1298-1300.

    陳曉華,趙田.影響 FQ-PCR 檢測(cè) HCV RNA 結(jié)果的標(biāo)本因素[J].中國(guó)誤診學(xué)雜志,2010 (4):345-346.

    何成濤,馬貴明,趙靜.血站核酸檢測(cè)工作的質(zhì)量控制[J].臨床血液學(xué)雜志,2015,1074-1076.

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