中山地區(qū)6 822例兒童急性呼吸道感染7種常見(jiàn)呼吸道病毒檢出情況分析

黃 軍，楊海霞，童輝純

南方醫(yī)科大學(xué)附屬中山市博愛(ài)醫(yī)院檢驗(yàn)科，廣東中山 528403

急性呼吸道感染(ARTI)是導(dǎo)致不同年齡段兒童死亡的主要因素之一，絕大部分2歲以下的兒童都經(jīng)歷過(guò)呼吸道感染，1/4的兒童都曾有反復(fù)或持續(xù)的呼吸道感染[1-2]。兒童ARTI對(duì)全球公共衛(wèi)生是一個(gè)極大的挑戰(zhàn)。隨著抗菌藥物的廣泛使用，細(xì)菌性感染有所下降，病毒成為兒童尤其是嬰幼兒ARTI的常見(jiàn)病原體。呼吸道合胞病毒(RSV)，腺病毒(ADV)，A、B型流感病毒(Flu A,Flu B)，副流感病毒(PIV)是比較常見(jiàn)的病毒類型。大量研究表明，各種ARTI病毒的檢出率與患兒年齡、檢測(cè)季節(jié)、氣候條件等因素有關(guān)[3-6]。為了解中山地區(qū) 2017年3月至2018年2月兒童ARTI病原體情況，筆者收集了6 822例患兒鼻咽深部分泌物標(biāo)本，對(duì)常見(jiàn)的7種呼吸道病毒進(jìn)行檢測(cè)和分析，為臨床對(duì)疾病的診治及疾控部門對(duì)疾病的防控提供依據(jù)。

1 資料與方法

1.1一般資料 以2017年3月至2018年2月在南方醫(yī)科大學(xué)附屬中山市博愛(ài)醫(yī)院因ARTI住院的兒童為研究對(duì)象，出院時(shí)未診斷為ARTI的病例要剔除。ARTI的診斷標(biāo)準(zhǔn)參照諸福棠《實(shí)用兒科學(xué)》第7版[7]。符合入選標(biāo)準(zhǔn)的因ARTI住院的兒童病例共6 822例，其中男4 162例，女2 660例，男女比例為1.56∶1，年齡為1 d到14歲?；純褐泻粑栏腥? 558例，肺炎或支氣管肺炎3 242例，支氣管炎1 004例，哮喘18例。

1.2方法 標(biāo)本采集由專業(yè)人員完成，在患兒入院的當(dāng)天或次日早晨用植絨拭子采集鼻咽部脫落細(xì)胞，方法是將植絨拭子插入鼻咽部，來(lái)回旋轉(zhuǎn)2～3次，迅速抽出拭子，放入含1～2 mL生理鹽水的試管中，要求在24 h內(nèi)送檢標(biāo)本，如果不能及時(shí)檢測(cè)，應(yīng)放置于4 ℃冰箱。D3UltraTMDFA直接熒光檢測(cè)呼吸道病毒試劑盒由美國(guó)Diagnostic Hybrids公司提供，批號(hào)為119553。該試劑盒采用直接免疫熒光法對(duì)7種呼吸道病毒進(jìn)行檢測(cè)。將浸在生理鹽水內(nèi)的鼻咽拭子標(biāo)本劇烈漩渦震蕩10～15 s，(400～600)×g離心5～10 min，加入1×PBS漩渦震蕩并(400～600)×g離心5～10 min，棄去上清液，加入0.5～1.0 mL的1×PBS，并反復(fù)吹吸懸浮細(xì)胞層。每孔加入25 μL標(biāo)本懸浮液，風(fēng)干后加入冷丙酮固定5～10 min。加入鼠球蛋白熒光試劑，標(biāo)本片放入孵箱，37 ℃孵育15～30 min，浸入洗滌液反復(fù)清洗，再用去離子水沖洗。將多余的液體吸干，在固定有細(xì)胞的每孔加入一滴封固液，然后蓋上蓋玻片。在激發(fā)光490 nm，發(fā)射峰520 nm參數(shù)下，使用日本奧林巴斯熒光顯微鏡觀察已染色并封固的標(biāo)本玻片。當(dāng)顯微鏡放大倍數(shù)為200倍時(shí)，在視野中找到≥2個(gè)帶綠色熒光的陽(yáng)性細(xì)胞，則判定標(biāo)本為陽(yáng)性。

1.3統(tǒng)計(jì)學(xué)處理 采用SPSS20.0進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析，計(jì)數(shù)資料以率(%)表示，組間比較使用χ2檢驗(yàn)，以P<0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié) 果

2.1不同呼吸道病毒的構(gòu)成比 6 822例患兒標(biāo)本中，共有1 664例檢測(cè)出病毒陽(yáng)性，陽(yáng)性檢出率為24.39%。在7種呼吸道病毒中，RSV感染病例為1 034例，在7種病毒中占的比例最高，為62.14%，其次為Flu A[222例(13.34%)]和PIV3[127例(7.63%)]，ADV 125例(7.51%)，F(xiàn)lu B 121例(7.27%)，PIV1 25例(1.50%)，其中有1例為混合感染，PIV2在全年的感染病例只有11例(0.66%)，是最少引起ARTI的病原體。

2.2不同季節(jié)患兒ARTI病毒的檢出情況 春、夏、秋、冬四季患兒ARTI病毒陽(yáng)性總數(shù)和陽(yáng)性率分別為536例(21.33%)、523例(32.24%)、316例(23.07%)、289例(21.94%)。病毒陽(yáng)性例數(shù)最多在春、夏兩季，構(gòu)成比為63.64%；病毒陽(yáng)性檢出率最高在夏季，為32.34%。在春、夏、秋季中，RSV為主要病原體，RSV陽(yáng)性例數(shù)和檢出率分別為382例(15.20%)、305例(18.80%)、260例(18.98%)。冬季主要流行的是Flu B，陽(yáng)性例數(shù)有115例，檢出率為8.73%。除了PIV1和PIV2，其他幾種呼吸道病毒在4個(gè)季節(jié)的檢出率差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。見(jiàn)表1。

2.3不同年齡組患兒ARTI病毒的檢出情況 本研究把6 822例患兒分為4個(gè)年齡組，發(fā)現(xiàn)在1歲以下年齡組中，呼吸道病毒感染的病例最多，有895例，陽(yáng)性檢出率也是最高，達(dá)到30.17%，遠(yuǎn)高于其他幾個(gè)年齡組的檢出率。隨著年齡增加，感染的病例逐漸減少，陽(yáng)性檢出率也逐漸降低。1歲以下組和1～3歲組患兒以RSV感染為主，4～6歲組與7～14歲組均以Flu A、Flu B感染為主。各年齡組間總陽(yáng)性檢出率比較差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(χ2=104.08，P<0.001)，除了PIV1和PIV2兩種病毒，其余5種病毒陽(yáng)性檢出率在不同年齡組間差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。見(jiàn)表2。

2.4不同性別患兒ARTI病毒的檢出情況 在6 822例患兒中，病毒檢測(cè)陽(yáng)性的男性患兒1 037例(24.92%)，女性患兒627例(23.57%)。男性患兒Flu B陽(yáng)性檢出率高于女性患兒(P<0.05)。然而，男、女性患兒的病毒總陽(yáng)性檢出率差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(χ2=1.59，P>0.05)。見(jiàn)表3。

表1 不同季節(jié)常見(jiàn)的7種呼吸道病毒檢出情況比較[n(%)]

注：春季3-5月，夏季6-8月，秋季9-11月，冬季12-2月。

表2 不同年齡組患兒呼吸道病毒陽(yáng)性檢出情況比較[n(%)]

2.5不同種類的ARTI疾病中病毒病原譜比較 在6 822例ARTI患兒中，疾病種類包括肺炎、支氣管肺炎、支氣管炎、毛細(xì)支氣管炎、上呼吸道感染、哮喘。陽(yáng)性例數(shù)最多的臨床診斷是肺炎、支氣管肺炎，有1 022例陽(yáng)性病例，陽(yáng)性檢出率為31.52%；其次為支氣管炎、毛細(xì)支氣管炎，陽(yáng)性檢出率為23.51%。哮喘患者的檢出例數(shù)和陽(yáng)性檢出率均最低。每種疾病的病毒感染譜有相同點(diǎn)，但也各有特點(diǎn)。RSV陽(yáng)性檢出率在各種疾病診斷中均最高。在肺炎、支氣管肺炎中陽(yáng)性檢出率居第2位的是Flu A，在支氣管炎、毛細(xì)支氣管炎患者中陽(yáng)性檢出率居第2位的是PIV3，而在上呼吸道感染患者中陽(yáng)性檢出率居第2位的則是ADV?？偛《娟?yáng)性檢出率在各疾病中差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(χ2=194.92，P<0.001)。除了PIV1和PIV2外，其他5種病毒的陽(yáng)性檢出率在不同疾病組間差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。見(jiàn)表4。

表3 不同性別患兒呼吸道病毒陽(yáng)性檢出情況比較[n(%)]

表4 不同種類的ARTI疾病中病毒病原譜比較[n(%)]

續(xù)表4 不同種類的ARTI疾病中病毒病原譜比較[n(%)]

3 討 論

ARTI是兒童期的常見(jiàn)感染性疾病，80%的ARTI是由病毒感染引起[8]。雖然目前已知呼吸道病毒有10余種，240多個(gè)血清型，但根據(jù)以往大量的文獻(xiàn)報(bào)道，檢出率較高的仍然是常見(jiàn)的7種呼吸道病毒。

在本研究中，RSV的檢出率最高，與江西、上海等大部分地區(qū)的研究結(jié)果一致[9-11]。RSV在不同地域和氣候條件下都是主要的兒童ARTI病原體，這和成人的ARTI病原譜特征不同[12]。但劉英茹等[13]報(bào)道西安地區(qū)嬰幼兒ARTI主要病原體是Flu，地區(qū)間的病毒流行差異可能與氣候特點(diǎn)以及病毒株的變異有關(guān)。Flu陽(yáng)性檢出率排第2位，以Flu A為主，與以前的研究一致[14-15]，但也有別于國(guó)內(nèi)一些地區(qū)的監(jiān)測(cè)結(jié)果[16-19]。PIV1、PIV2的陽(yáng)性檢出率均明顯低于其他5種呼吸道病毒，提示PIV1和PIV2不是引起兒童ARTI的重要病原體，因此在診療ARTI時(shí)可以優(yōu)先考慮其他5種病毒，這與以前的報(bào)道一致[20]。

呼吸道病毒感染具有明顯的季節(jié)性，以春、夏季多見(jiàn)。而有研究顯示廣東中山地區(qū)[21]和江西地區(qū)[9]的呼吸道病毒流行特點(diǎn)為冬春季高發(fā)流行。RSV感染與季節(jié)明顯相關(guān)。中山地區(qū)屬于亞熱帶氣候，春、夏季時(shí)間長(zhǎng)，雨量大，溫度、濕度高，容易發(fā)生RSV感染。冬季主要流行的是Flu B，與該病毒的冬、春季節(jié)高發(fā)特點(diǎn)一致。

各年齡組的病毒檢測(cè)率各有差異，以3歲以下患兒為主，1歲以下患兒檢出率最高[22-24]，其陽(yáng)性檢出率明顯高于3歲以上的患兒。隨著年齡增長(zhǎng)，ARTI病毒陽(yáng)性檢出率逐漸降低。低齡兒童較容易感染呼吸道病毒與其較低的免疫功能有關(guān)，1歲以下患兒自身免疫功能發(fā)育還沒(méi)完善，唯有從母乳中獲取少量的免疫球蛋白，因此不能很好地抵御外界病原體的侵襲。因此，3歲以下兒童應(yīng)該成為呼吸道病毒感染防控的重點(diǎn)人群。

在本研究中，男、女性患兒的總病毒陽(yáng)性檢出率差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)。李梨平等[25]報(bào)道長(zhǎng)沙地區(qū)Flu A在男女性患兒中陽(yáng)性檢出率差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)，女性比男性更容易感染Flu A。在本研究中，男性患兒Flu B的陽(yáng)性檢出率比女性高(P<0.05)，而Flu A則在不同性別中差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)。此區(qū)別可能是由于Flu較易產(chǎn)生變異所引起，還可能與男女免疫力差異有關(guān)。

在6 822例ARTI患兒中，陽(yáng)性例數(shù)最多的疾病種類是肺炎、支氣管肺炎，哮喘患兒的檢出例數(shù)和陽(yáng)性檢出率均最低。不同疾病有不同的病原譜特征，如在肺炎、支氣管肺炎中，主要以RSV和Flu A感染為主，支氣管炎、毛細(xì)支氣管炎的患兒主要以RSV和PIV3感染為主，而上呼吸道感染患兒則以RSV和Flu感染為主，這為臨床診治ARTI提供了借鑒依據(jù)。

綜上所述，中山地區(qū)2017年3月至2018年2月兒童ARTI的主要病毒病原體為RSV，其次為Flu。病毒感染高發(fā)期主要在春、夏季；呼吸道病毒感染主要集中在3歲以下患兒，其中1歲以下患兒感染率最高；肺炎、支氣管肺炎中病毒陽(yáng)性率最高；RSV所致疾病以肺炎、支氣管肺炎為主，F(xiàn)lu以上呼吸道感染、肺炎為主。病毒流行的季節(jié)、年齡、疾病分布等特點(diǎn)為臨床診治提供了線索，也為中山地區(qū)ARTI的防控工作提供了參考依據(jù)。