暢雅芬,???/p>
(1.臨汾職業(yè)技術學院,山西 臨汾 041000;2.臨汾市第三人民醫(yī)院,山西 臨汾 041000)
哮喘的治療原則是平喘鎮(zhèn)咳,中成藥由于其療效佳、安全性好、使用方便等優(yōu)點,成為哮喘患者的首選。但其療程長,藥效發(fā)揮緩慢的劣勢,會促使部分生產廠家為謀求不當得利,向其中非法添加能快速鎮(zhèn)咳平喘的化學藥品,這會嚴重影響患者的身體健康[1]。我們隨機選取了市售強力止咳寧膠囊,通過向其中加入對照品的方法,分析能否通過HPLC法對添加的這4中化學藥物進行檢測。
研究主體為市售強力止咳寧膠囊,通過在該藥中加入一定量的鹽酸麻黃堿、醋酸潑尼松、磷酸可待因、地塞米松對照品進行HLPC檢測。
檢測儀器為電子天平、高效液相色譜儀、酸度計、超聲波清洗器。化學藥品為上述4種藥物的標準對照品,檢測藥物選擇強力止咳寧膠囊。藥物均行HPLC檢測。實驗條件如下:色譜柱為EclipseXDB-C18;磷酸可待因的流動相為磷酸二氫鉀-乙腈(55∶45),鹽酸麻黃堿為枸杞酸溶液-乙腈(77∶23),地塞米松和醋酸潑尼松分別為甲醇-水(70∶30與58∶42);流動相流速均為1.0mL/min,柱溫為室溫。磷酸可待因的檢測波長為220nm;鹽酸麻黃堿為257nm;地塞米松和醋酸潑尼松均為240nm。
對照品溶液配置:稱取鹽酸麻黃堿0.0156g,加水溶解稀釋定容;稱取醋酸潑尼松0.02011g、磷酸可待因0.0126g、地塞米松0.01302g,分別加入甲醇溶解稀釋定容。對照品溶液于室溫下保存,實驗時取相應量的對照品溶液配制成所需濃度。取強力止咳寧膠囊4粒,將內容物置于容量瓶中,加入上述4種對照溶液進行稀釋定容,過濾得檢測溶液。通過上述方法準備3次平行實驗。
使用線性回歸方程對HPLC檢測結果進行分析,對檢測溶液中4種化學藥品的檢出限和定量限進行線性分析,評估檢驗結果的精準度。
將對照品溶液注入LC2010C中,試驗3次后計算平均值,各組分質量濃度表示為橫坐標,峰面積表示為縱坐標,回歸性分析如表1所示。
表1 分析線性關系
對照品溶液配置0h/1h/3h/5h/7h/9h/11h/24h時測定其色譜峰面積的實際變化,對比發(fā)現,4種藥品在不同時間的檢驗結果無差異(P>0.05)。說明對照品溶液的穩(wěn)定性佳。4種物質的定量限和檢出限結果如表2。
表2 檢測液的定量限與檢出限結果
在中醫(yī)學的大力發(fā)展下,中成藥的應用范圍逐漸擴大,銷量持續(xù)升高;此外,相比于西藥的副作用大和治標不治本的特點,中藥標本兼治的屬性使其市場需求進一步擴大。但中成藥藥效平緩、療程長、成本高,經濟效益較低,企業(yè)為實現利益最大會在中成藥中加入顯效快的化學藥品,再以中成藥售出[2]。這種非法添加的摻假行為會影響中成藥的質量和用藥安全性,甚至會危及生命。現階段,我國缺乏統(tǒng)一的中成藥成分檢驗標準,且檢驗制度尚不健全。為保證中成藥質量,相關部門已開始完善檢驗標準,并將格列吡嗪、苯乙雙胍等化學藥品納入非法添加清單。但市場上仍存在較多的違禁藥品,通過定期抽檢難以準確檢出非法藥品,隱蔽性較強,需要探索出更為快捷且高效的檢測技術[3]。
HPLC法是基于液相色譜理論和新型實驗技術而產生的,屬于色譜分離分析法。液相色譜柱中固定相的粒度、形狀與性質等均會使檢測結果不同,固定相粒度范圍較窄,填充均勻,傳質阻力小,且形狀規(guī)則的特點,會促進檢測物的分離,便于靈敏、高效的檢測待檢物質。相較于氣相色譜法,HPLC法分析對象具有廣泛性,不需要氣化處理[4],使分析和檢測能夠在較低溫度下進行。其靈敏度高、分離效能好、檢測速度快、選擇性強和適用范圍廣,可同時發(fā)揮分離與分析作用等顯著優(yōu)勢,使HPLC可用于各類藥物制劑的檢查與含量測定等工作中。
中成藥的成分較多,可添加的化學藥品多樣,檢測難度大。對于平喘鎮(zhèn)咳中成藥而言,主要檢測的化學藥品是麻黃堿、醋酸潑尼松和磷酸可待因等。本次研究結果顯示,HPLC能夠將4種非法添加化學藥品檢出,且檢驗穩(wěn)定性較好,放置時間對檢驗結果的影響可以忽略不計(P<0.05)。說明HPLC法可檢出以上4種藥品,檢測價值較高,且實踐性較強,具有一定的應用價值[5]。但需注意的是:HPLC檢測有其局限性,其一,檢測期間的流動相需要選擇多種溶劑,成本偏高,檢測完成后若未合理處理檢測溶劑,會污染環(huán)境。其二,檢測過程并無通用的檢測器,其與氣相色譜存在差異,難以完全取代氣相色譜的檢測作用。其三,該項檢測對于易變性、受壓易分解的生化樣品不具有高敏感性,可能出現檢測誤差。因此,在檢測實踐中應結合具體情況合理選擇檢測方法,避免漏誤檢等情況。
總之,HPLC法可作為該類中成藥的首選化學藥品檢驗方法,其檢出效果好,穩(wěn)定性強,具有推廣價值。