云南垂穗石松脂溶性化學(xué)成分研究

楊舜伊 史小波 陳業(yè)高

摘要?[目的]分析云南垂穗石松的脂溶性化學(xué)成分，為合理利用云南垂穗石松資源提供科學(xué)依據(jù)。[方法]采用GC-MS分析云南垂穗石松全草脂溶性化學(xué)成分。[結(jié)果]鑒定出34種化學(xué)成分，相對(duì)含量超過(guò)5%的化學(xué)成分為葵酸（25.518%）、油酸（18.481%）、十六烷酸（17.096%）、葵酸乙酯（9.092%）、十六烷酸乙酯（7.279%）。云南垂穗石松脂溶性化學(xué)成分主要為酯類、脂肪酸類和倍半萜類物質(zhì)，34種脂溶性成分均首次從該植物中分離得到，占脂溶性成分總量的95.2%。[結(jié)論]該研究為合理利用云南垂穗石松資源提供了科學(xué)依據(jù)。

關(guān)鍵詞?垂穗石松;脂溶性成分;GC-MS

中圖分類號(hào)?R?284.1文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼?A文章編號(hào)?0517-6611（2020）01-0211-02

doi：10.3969/j.issn.0517-6611.2020.01.063

開放科學(xué)（資源服務(wù)）標(biāo)識(shí)碼（OSID）：

Study on Liposoluble Chemical Constituents from Palhinhaea cernua in Yunnan

YANG Shun?yi1，SHI Xiao?bo2，CHEN Ye?gao3

（1.Kunming Vocational and Technical College of Industry，Kunming，Yunnan 650302;2.Technology Center of Yunnan Hongyun Honghe Tobacco Group Co.， Ltd.， Kunming， Yunnan 650202;3.Yunnan Normal University， Kunming， Yunnan 650092）

Abstract?[Objective] The research aimed to analyze the liposoluble chemical constituents of Palhinhaea cernua in Yunnan， and provide a scientific basis for rational utilization of Palhinhaea cernua in Yunnan. [Method]The liposoluble chemical constituents of the whole grass of Palhinhaea cernua in Yunnan were analyzed by GC?MS.[Results] Thirty?four compounds were obtained from Palhinhaea cernua in Yunnan. The chemical components with a relative content of more than 5% were n?decanoic acid （25.518%）， oleic acid （18.481%）， n?hexadecanoic acid （17.096%）， decanoic acid ethyl ester （9.092%）， hexadecanoic acid ethyl ester （7.279%）. The liposoluble chemical constituents of Palhinhaea cernua in Yunnan were mainly esters， fatty acids and sesquiterpenoids. 34 kinds of liposoluble components were isolated from this plant for the first time， accounting for 95.2% of the total liposoluble components.[Conclusion]This study provides a scientific basis for the reasonable utilization of Palhinhaea cernua in Yunnan.

Key words?Palhinhaea cernua in Yunnan;Liposoluble constituents;Gas chromatography?Mass spectrometry （GC-MS）

垂穗石松[Palhinhaea cernua（L.）Vasc.et Franco]為石松科（Lycopodium）垂穗石松屬（Palhinhaea）植物，又名過(guò)山龍、水杉、燈籠石松、燈籠草、鋪地蜈蚣、蜈蚣草、舒筋草、伸筋草等，產(chǎn)于華東、華南、西南等地，亞洲其他熱帶及亞熱帶地區(qū)、大洋洲、中南美洲也有分布[1-2]。垂穗石松為傳統(tǒng)藥物，是中藥伸筋草的來(lái)源植物之一，其全草入藥，具有驅(qū)風(fēng)解毒、收斂止血、舒筋通絡(luò)、鎮(zhèn)咳利尿等功效，用于治療關(guān)節(jié)痛、四肢麻木、肝炎、痢疾、風(fēng)疹、便血、小兒驚厥、夜間盜汗、水火燙傷、跌打損傷和無(wú)名腫毒等癥[3]?，F(xiàn)代研究表明，垂穗石松水煎劑對(duì)實(shí)驗(yàn)性發(fā)熱家兔有解熱作用，對(duì)大鼠及家兔的離體腸管有興奮作用[4]，其提取物具有抗幽門螺旋桿菌作用[5]，注射液具有抗矽肺作用[6]。前人研究表明，垂穗石松主要含有生物堿、三萜、黃酮等活性成分[7-12]，目前，對(duì)垂穗石松脂溶性成分研究鮮見報(bào)道。為了解云南產(chǎn)垂穗石松的化學(xué)成分及開發(fā)前景，筆者采用溶劑提取及硅膠柱層析的方法，提取云南垂穗石松的脂溶性成分，采用GC-MS分離、鑒定其含有的化學(xué)成分，并利用面積歸一化法確定各成分相對(duì)含量，為進(jìn)一步研究和開發(fā)云南垂穗石松資源提供科學(xué)依據(jù)。

1?材料與方法

1.1?材料

1.1.1?試驗(yàn)材料。垂穗石松[Palhinhaea cernua（L.）Vasc.et Franco]全草采自云南西雙版納。

1.1.2?主要試劑。乙醇、氯仿、丙酮、石油醚、甲醇，均為市售工業(yè)純，重蒸后使用。

1.1.3?主要儀器。GC PE-Clarus600/MS PE-Clarus600T（美國(guó)珀金埃爾默公司）。

1.2?方法

1.2.1?GC-MS條件。

1.2.1.1?氣相色譜條件。色譜柱：HP-5（5% PhMe Silicone crosslinked）（30 m×250 μm）;柱溫：原始柱溫50 ℃，保持5 min 后以5 ℃/min 升溫至230 ℃，保持15 min;再以10 ℃/min 升溫至250 ℃，保留20 min;汽化室溫度：250 ℃;載氣：高純氦（純度≥99.999%）;載氣流量：1.0 mL/min;進(jìn)樣量1 μL，分流進(jìn)樣（分流比：25∶1）。溶劑延遲 2.5 min。

1.2.1.2

質(zhì)譜條件。傳輸線溫度：250 ℃;電離方式：電子轟擊源（EI）;電離電壓：70 eV;離子源溫度：200 ℃;掃描范圍：45～500 Da。

1.2.2?脂溶性成分的提取。

將垂穗石松全草干燥后打成粗粉，用工業(yè)乙醇浸提6次，將所得浸提物濃縮干燥，進(jìn)行硅膠柱層析，用石油醚、氯仿、丙酮、甲醇進(jìn)行洗脫，將石油醚部分進(jìn)行干燥，即得到脂溶性成分。

2?結(jié)果與分析

取云南垂穗石松脂溶性成分1 μL，用氣相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用儀進(jìn)行脂溶性成分分析鑒定，GC-MS圖譜如圖1所示，通過(guò)HPMSD化學(xué)工作站檢索NIST2008譜庫(kù)，所得圖譜經(jīng)計(jì)算機(jī)峰純度檢測(cè)，結(jié)合保留時(shí)間，分別確認(rèn)了脂溶性成分各化學(xué)成分，各成分的相對(duì)百分含量按峰面積歸一化法計(jì)算，得到各化學(xué)成分在脂溶性成分中的質(zhì)量分?jǐn)?shù)，詳見表1。

對(duì)云南垂穗石松全草脂溶性成分進(jìn)行GC-MS分析測(cè)定，從中鑒定出34種化合物，占脂溶性成分總量的95.2%。由表1中的分析結(jié)果可知，其脂溶性化學(xué)成分主要為葵酸（25.518%）、油酸（18.481%）、十六烷酸（17.096%）、葵酸乙酯（9.092%）、十六烷酸乙酯（7.279%）等。

3?小結(jié)與討論

該研究首次對(duì)云南垂穗石松全草脂溶性化學(xué)成分進(jìn)行研究，所鑒定出的組分都是首次從垂穗石松植物中得到，其主要成分為酯類、脂肪酸類和倍半萜類物質(zhì)。研究表明，十六烷酸對(duì)谷氨酸損傷PC12細(xì)胞凋亡具有保護(hù)作用，該保護(hù)與抑制谷氨酸受體蛋白NMDA、Bax蛋白表達(dá)的增加、上調(diào)Bcl-2蛋白表達(dá)等有關(guān)[13];油酸具有降低高血脂癥患者血脂水平以及預(yù)防心血管疾病的作用[14]。通過(guò)對(duì)云南垂穗石松脂溶性成分的研究，為它的化學(xué)成分進(jìn)一步研究和資源利用奠定了基礎(chǔ)。

參考文獻(xiàn)

[1] 中國(guó)科學(xué)院《中國(guó)植物志》編輯委員會(huì).中國(guó)植物志：第6卷 第3分冊(cè)[M].北京：科學(xué)出版社，2004：69-73.

[2] 馬麗莎.四川石松科植物資源及其利用[J].四川林業(yè)科技，2003，24（2）：63-66.

[3] 楊純瑜.國(guó)產(chǎn)石杉科，石松科藥用植物的分類、分布和藥用價(jià)值[J].植物分類學(xué)報(bào)，1982，20（4）：445-452.

[4] 戴克敏，潘德濟(jì)，程彰華，等.伸筋草類藥用植物資源的初步研究[J].植物資源與環(huán)境，1992，1（1）：36-43.

[5] NDIP R N，MALANGE TARKANG A E，MBULLAH S M，et al.In vitro anti?Helicobacter pylori activity of extracts of selected medicinal plants from North West Cameroon[J].J Ethnopharmacology，2007，114（3）：452-457.

[6] HE L Z，HUANG Z H，WANG H R，et al.Shenjincao（Palhinhaea cernua）injection for treatment of experimental silicosis of rats[J].J Pharmacy Pharmacology，1998， 50（3）：351-354.

[7] 張娟娟，郭志堅(jiān)，潘德濟(jì)，等.垂穗石松的化學(xué)成分研究[J].中草藥，1997，28（3）：139-140.

[8] JIAO R H，GE H M，SHI D H，et al.An apigenin?derived xanthine oxidase inhibitor from Palhinhaea cernua[J].J Nat Prod，2006，69（7）：1089-1091.

[9] MORITA H，HIRASAWA Y，SHINZATO T，et al.New phlegmarane?type，cernuane?type，and quinolizidine alkaloids from two species of Lycopodium[J].Tetrahedron，2004，60（33）：7015-7023.

[10] TSUDA Y，F(xiàn)UJIMOTO T，ISOBE K，et al.Chemotaxonomical studies on the triterpenoids of Lycopodium plants[J].Yakugaku zasshi，1974，94（8）：970-990.

[11] AYER W A，JENKINS J K，PIERS K，et al.The alkaloids of Lycopodium cernuumL.II.The stereochemistry of cernuine and lycocernuine[J].Canadian J Chem，1967， 45（5）：445-450.

[12] ZHANG Z Z，ELSOHLY H N，JACOB M R，et al.Natural products inhibiting Candida albicans secreted aspartic proteases from Lycopodium cernuum[J].J Nat Prod，2002，65（7）：979-985.

[13] 李靜，汪寧，王艷，等.十六烷酸對(duì)谷氨酸致PC12細(xì)胞凋亡的保護(hù)作用[J].中國(guó)藥學(xué)雜志，2015，50（13）：1117-1122.

[14] LIENER I E.Toxic constituents of plant foodstuffs [M].New York：Academic Press，1980.