HISCL-5000高敏發(fā)光全自動(dòng)免疫分析儀檢測(cè)感染性指標(biāo)的臨床性能評(píng)價(jià)研究進(jìn)展

天津市薊州區(qū)人民醫(yī)院檢驗(yàn)科 （天津 301900）

內(nèi)容提要： 目前臨床主要的感染性指標(biāo)包括丙型肝炎病毒抗體、抗人類免疫缺陷病毒抗原抗體、乙肝表面抗原以及抗梅毒螺旋體抗體等。近幾年隨著血清標(biāo)志物檢測(cè)方法不斷進(jìn)步，化學(xué)發(fā)光法在臨床感染檢測(cè)中開始普遍應(yīng)用，該方法具有敏感度高，特異性強(qiáng)以及線性范圍較寬等優(yōu)點(diǎn)，相比酶聯(lián)免疫吸附實(shí)驗(yàn)具有明顯的優(yōu)勢(shì)。HISCL-5000高敏發(fā)光全自動(dòng)免疫分析儀便是基于高敏發(fā)光底物的一種化學(xué)發(fā)光免疫檢測(cè)儀器，由于其在臨床感染性指標(biāo)檢測(cè)中應(yīng)用廣泛，近些年人們關(guān)于其性能評(píng)價(jià)也開展了一系列研究，本文對(duì)其進(jìn)行綜述，以期為該儀器的進(jìn)一步推廣應(yīng)用提供支持。

乙型肝炎、丙型肝炎以及艾滋病等疾病的主要傳播方式包括血液性接觸以及母嬰等，除此之外，手術(shù)以及輸血等也會(huì)導(dǎo)致院內(nèi)感染[1]。因此在對(duì)患者進(jìn)行輸血之前開展感染性指標(biāo)檢測(cè)有助于了解患者的感染情況，有助于避免院內(nèi)感染的發(fā)生。HISCL-5000高敏發(fā)光全自動(dòng)免疫分析儀檢測(cè)屬于化學(xué)發(fā)光免疫法，近些年在臨床感染性指標(biāo)檢測(cè)中得到了廣泛應(yīng)用[2]。

1.HISCL-5000高敏發(fā)光酶免疫分析技術(shù)

化學(xué)發(fā)光免疫分析技術(shù)的主要原理為，原本處于基態(tài)的分子在吸收化學(xué)反應(yīng)能量之后會(huì)向激發(fā)態(tài)發(fā)生躍遷，而處于激發(fā)態(tài)的分子在重新回到基態(tài)時(shí)會(huì)以發(fā)射光子的形式釋放能量[3]。反應(yīng)體系中化學(xué)反應(yīng)的速率以及激發(fā)態(tài)物質(zhì)的發(fā)光效率從根本上決定了化學(xué)發(fā)光強(qiáng)度。所以在一定的化學(xué)反應(yīng)條件下可以基于化學(xué)發(fā)光強(qiáng)度來對(duì)反應(yīng)體系中物質(zhì)的濃度進(jìn)行測(cè)定[4]。HISCL-5000高敏發(fā)光酶免疫分析技術(shù)，可以有效分析單克隆抗體的特異性以及化學(xué)發(fā)光底物的高度敏感性[5]。此外，該技術(shù)還可以通過一套完善的沖洗工序來獲得優(yōu)于傳統(tǒng)儀器對(duì)未反應(yīng)物的沖洗效果，從而有效降低非特異性物質(zhì)和還原背景的影響，從而即使微量的物質(zhì)也能夠被有效檢測(cè)出來[6]。

2.HISCL-5000高敏發(fā)光酶免疫分析儀性能檢驗(yàn)

2.1 精密性檢驗(yàn)

精密性主要是指多次測(cè)量數(shù)據(jù)在一致性程度，通常采用標(biāo)準(zhǔn)差或者變異系數(shù)進(jìn)行表示[7]。精密性評(píng)價(jià)具體又分為批內(nèi)變異和批間變異兩種評(píng)價(jià)方法。批內(nèi)變異評(píng)價(jià)為設(shè)置高、中、低三個(gè)水平的濃度，對(duì)每個(gè)水平濃度反復(fù)測(cè)量20次，對(duì)數(shù)據(jù)的標(biāo)準(zhǔn)差和精密度進(jìn)行計(jì)算，如果精密度小于廠家設(shè)定的10%的判斷標(biāo)準(zhǔn)則符合要求。批間變異評(píng)價(jià)為設(shè)置高、中、低三個(gè)水平的濃度，每天對(duì)每個(gè)濃度水平測(cè)量2次，共測(cè)量10天20次。對(duì)數(shù)據(jù)的標(biāo)準(zhǔn)差和精密度進(jìn)行計(jì)算，如果精密度小于廠家設(shè)定的10%的判斷標(biāo)準(zhǔn)則符合要求。

2.2 一致率試驗(yàn)

應(yīng)用兩種不同的方法對(duì)血清標(biāo)準(zhǔn)的陰性一致率、陽性一致率和總一致率進(jìn)行計(jì)算[8]。如果兩種方法檢測(cè)結(jié)果不一致，首先應(yīng)該對(duì)樣本進(jìn)行復(fù)查，如果復(fù)查結(jié)果仍然不一致，則由項(xiàng)目確定試驗(yàn)進(jìn)行檢驗(yàn)。通常情況下乙肝表面抗原應(yīng)用中和實(shí)驗(yàn)進(jìn)行確認(rèn)檢驗(yàn)，抗丙型肝炎病毒抗體和抗梅毒螺旋體抗體應(yīng)用RIBA進(jìn)行確認(rèn)檢驗(yàn)，抗人類免疫缺陷病毒（HIV）抗原抗體應(yīng)用Western印跡進(jìn)行確認(rèn)檢驗(yàn)[9]。

2.3 比對(duì)試驗(yàn)

為了保障HISCL-5000高敏發(fā)光酶免疫分析結(jié)果的正確度，通常采用常規(guī)方法開展比對(duì)試驗(yàn)。每天取新鮮血液樣本進(jìn)行離心處理，取上層血清，然后分別應(yīng)用HISCL-5000高敏發(fā)光酶免疫分析和雅培i2000分析儀進(jìn)行檢驗(yàn)。在實(shí)驗(yàn)結(jié)束后分析是否存在離群點(diǎn)，如果數(shù)據(jù)中存在離群點(diǎn)則應(yīng)該分析產(chǎn)生的原因。將兩種儀器的檢測(cè)數(shù)據(jù)開展線性回歸分析，如果r＞0.975或者R2＞0.95則表示儀器符合準(zhǔn)確度要求[10]。

2.4 攜帶污染率

分別取高值患者和低值患者的血液樣本，經(jīng)過離心處理得到高值患者血清和低值患者血清。應(yīng)用兩種方法對(duì)高值患者血清連續(xù)開展3次測(cè)量，記錄測(cè)量結(jié)果為H1、H2和H3；再應(yīng)用同樣兩種方法對(duì)低值患者血清連續(xù)開展3次測(cè)量，記錄測(cè)量結(jié)果為L(zhǎng)1、L2和L3?；贗CSH26-A2文件相關(guān)標(biāo)準(zhǔn)，如果[(L1-L3)(/H3-L3)]＜1%，那么儀器攜帶污染率滿足要求。

3.HISCL-5000輸血前感染性指標(biāo)測(cè)定

HISCL-5000能夠?qū)σ腋伪砻婵乖M(jìn)行檢測(cè)，有助于正確評(píng)價(jià)抗體中是否具有中和乙型肝炎病毒的免疫力，對(duì)于乙肝的預(yù)防具有重要作用[11]。通常來說乙肝表面抗原含量超過100mIU/mL時(shí)認(rèn)為其具有抵御乙型肝炎病毒的作用[12]。丙型肝炎病毒抗體是丙型肝炎病毒感染后機(jī)體所產(chǎn)生的特異性抗體，是判斷患者是否感染丙型肝炎病毒的重要依據(jù)[13]。丙型肝炎病毒抗體的檢測(cè)對(duì)于篩查工作，特別是對(duì)獻(xiàn)血者的健康篩選具有重要意義。傳統(tǒng)臨床丙型肝炎病毒抗體檢測(cè)主要應(yīng)用酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)。近些年隨著HISCL-5000高敏發(fā)光酶免疫分析儀的不斷完善，其在丙型肝炎病毒抗體檢測(cè)中應(yīng)用日益普遍。梅毒是由蒼白梅毒螺旋體所導(dǎo)致的傳播性疾病，嚴(yán)重影響人們的身體健康和生活質(zhì)量，因此對(duì)于梅毒的篩查具有重要意義[14]。人體感染梅毒螺旋體后會(huì)產(chǎn)生兩種抗體：非特異度類脂質(zhì)抗體和特異度抗螺旋體抗體。傳統(tǒng)環(huán)狀卡片實(shí)驗(yàn)以及血凝實(shí)驗(yàn)等具有較高的假陽性率和假陰性率，酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)結(jié)果重復(fù)性較差，也容易出現(xiàn)假陽性和假陰性。HISCL-5000高敏發(fā)光酶免疫分析儀在抗梅毒螺旋體抗體檢測(cè)中具有良好的特異度和靈敏度[15]。此外HISCL-5000高敏發(fā)光酶免疫分析儀在抗人類免疫缺陷病毒抗原抗體檢測(cè)中可以同時(shí)檢測(cè)特異性抗體和P24抗原，并且具有較高的靈敏度。

4.結(jié)束語

在輸血前需要對(duì)丙型肝炎病毒、梅毒螺旋體、人類免疫缺陷病毒以及乙型肝炎病毒進(jìn)行檢測(cè)。目前隨著血清標(biāo)志物檢測(cè)方法的不斷發(fā)展，HISCL-5000高敏發(fā)光全自動(dòng)免疫分析儀在感染性指標(biāo)檢測(cè)中應(yīng)用日益廣泛，其相比傳統(tǒng)的檢測(cè)方法具有更高的靈敏性和特異性，并且操作簡(jiǎn)單方便。