子午流注學(xué)說與細(xì)胞生物周期

高雅麗，趙子申，崔乃強(qiáng)

子午流注歷史十分悠久，其理論基礎(chǔ)在兩千多年前的中醫(yī)經(jīng)典《黃帝內(nèi)經(jīng)》中就已經(jīng)奠定[1]。其后迭經(jīng)歷代醫(yī)家的補(bǔ)充、發(fā)揮和發(fā)展而不斷完善，從而形成極富特色的傳統(tǒng)時(shí)間醫(yī)學(xué)體系。換句話說，子午流注就是中國(guó)傳統(tǒng)時(shí)間醫(yī)學(xué)。子午流注醫(yī)學(xué)在中華民族傳統(tǒng)醫(yī)藥寶庫中是最具特色的寶貴文化科學(xué)資源和重要組成部分。子午流注相對(duì)于“生物鐘”（即現(xiàn)代時(shí)間醫(yī)學(xué)，時(shí)間治療學(xué)、時(shí)間藥理學(xué)、時(shí)間毒理學(xué)等就是在生物鐘基礎(chǔ)上建立和發(fā)展起來的）來說，外國(guó)學(xué)者稱其為“中國(guó)鐘”[2]。

細(xì)胞生物周期也稱為細(xì)胞分裂周期，是指細(xì)胞從一次分裂完成到下一次分裂結(jié)束所經(jīng)歷的全過程，這個(gè)過程所需要的時(shí)間稱為細(xì)胞周期時(shí)間。細(xì)胞周期的精確調(diào)控對(duì)生物的生存、繁殖、發(fā)育和遺傳均很重要。細(xì)胞周期調(diào)控機(jī)制的異常和多種人類疾病相關(guān)，當(dāng)細(xì)胞周期失調(diào)時(shí)，細(xì)胞將無限增殖，引發(fā)腫瘤發(fā)生。惡性腫瘤最基本的生物學(xué)特征是腫瘤細(xì)胞失控性增殖，而細(xì)胞失控性增殖的生物學(xué)基礎(chǔ)是細(xì)胞周期調(diào)控紊亂。細(xì)胞周期調(diào)控是一個(gè)精細(xì)的生物學(xué)過程，涉及多個(gè)基因和蛋白的參與，進(jìn)而形成了復(fù)雜的信號(hào)分子網(wǎng)絡(luò)系統(tǒng)。因此，了解細(xì)胞周期及其相關(guān)基因的表達(dá)可以從基礎(chǔ)生物學(xué)研究的角度深入發(fā)掘腫瘤的本質(zhì)，闡明癌癥的發(fā)生機(jī)制。

近年來，隨著時(shí)間醫(yī)學(xué)和生物時(shí)鐘以及微觀細(xì)胞生物學(xué)等研究的深入，子午流注學(xué)說與生命科學(xué)相結(jié)合，在疾病發(fā)生、發(fā)展、轉(zhuǎn)歸和治療過程中的重要作用受到越來越多的關(guān)注，臨床上運(yùn)用子午流注理論結(jié)合細(xì)胞生物周期指導(dǎo)治療疾病的研究逐年增多，現(xiàn)就子午流注學(xué)說以及細(xì)胞生物周期理論進(jìn)行簡(jiǎn)述。

1 子午流注的含義

子午是對(duì)立的兩個(gè)詞，曾被古人用作表示水火、南北等。但從時(shí)間上來說，子午是兩個(gè)極點(diǎn)。古人計(jì)時(shí)將一日分為十二個(gè)時(shí)辰，以十二地支作為代表，其中第一支和第七支分別用子午表示[3]。它們分別表示兩種相反相成、對(duì)立統(tǒng)一的范疇或概念，是我國(guó)古代用來記時(shí)、標(biāo)位以及記述事物生長(zhǎng)等運(yùn)動(dòng)變化過程或狀態(tài)的符號(hào)?！傲鳌薄白ⅰ眱勺帜吮硎具\(yùn)動(dòng)變化的概念。顧名思義，子午流注就是時(shí)空和運(yùn)動(dòng)的統(tǒng)一，是中國(guó)古代人天合一理論在傳統(tǒng)生命科學(xué)，特別是中醫(yī)學(xué)中應(yīng)用和發(fā)展的產(chǎn)物，是我們智慧的祖先在長(zhǎng)期與疾病斗爭(zhēng)的偉大實(shí)踐中的成果。子午流注具體應(yīng)用就是根據(jù)人天合一的整體觀念和節(jié)奏觀念，高屋建瓴，因勢(shì)利導(dǎo)，因地、因時(shí)、因病、因人制宜，把握病機(jī)，從而合理調(diào)整患者氣血神志，調(diào)理臟腑氣血陰陽，激發(fā)其正氣和心身活力，恢復(fù)和改善人體健康狀態(tài)[4]。現(xiàn)在對(duì)子午流注的理解有廣義和狹義之分。狹義地說，子午流注就是所謂的中醫(yī)時(shí)間針灸醫(yī)學(xué)，是中醫(yī)針灸醫(yī)學(xué)不可或缺的重要組成部分。廣義地說，子午流注就是時(shí)空和運(yùn)動(dòng)的統(tǒng)一，是中國(guó)古代人天合一理論在傳統(tǒng)生命科學(xué)，特別是中醫(yī)學(xué)中應(yīng)用和發(fā)展的產(chǎn)物，是我們智慧的祖先在長(zhǎng)期與疾病斗爭(zhēng)的偉大實(shí)踐中的成果。

2 子午流注理論的應(yīng)用

曾奕[5]觀察了子午流注納甲法對(duì)肩周炎的作用，采用納甲法選穴配合肩部常規(guī)取穴與局部和遠(yuǎn)端循經(jīng)選穴進(jìn)行療效比較，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。姜華等[6]觀察了子午流注納甲法治療急性缺血性腦血管病的臨床療效及對(duì)血液流變學(xué)、白細(xì)胞介素6(IL-6)、血栓素B2(TXB2)、6-酮-前列腺素FIα(6-keto-PGFIα)水平的影響，發(fā)現(xiàn)納甲法能改善急性缺血性腦血管病患者的血液流變學(xué)指標(biāo)，降低IL-6水平，恢復(fù)TXB2與6-keto-PGFIα的動(dòng)態(tài)平衡，促進(jìn)腦神經(jīng)功能的恢復(fù)。張曉琴等[7]應(yīng)用耳穴貼壓結(jié)合子午流注時(shí)辰療法有效緩解胃癌患者術(shù)后疼痛的程度，較少術(shù)后止痛藥物的使用量，從而提高患者的舒適度及對(duì)疼痛控制的滿意度。在防治疾病方面，子午流注可以充分發(fā)揮其獨(dú)到的優(yōu)勢(shì)，突顯其特色，起到不可替代的作用和角色。

3 細(xì)胞生物周期理論研究

細(xì)胞周期是指細(xì)胞從一次分裂完成開始到下一次分裂結(jié)束所經(jīng)歷的全過程，分為間期與分裂期兩個(gè)階段。生命是從一代向下一代傳遞的連續(xù)過程，因此是一個(gè)不斷更新、不斷從頭開始的過程。細(xì)胞的生命開始于產(chǎn)生它的母細(xì)胞的分裂，結(jié)束于它的子細(xì)胞的形成，或是細(xì)胞的自身死亡。通常將子細(xì)胞形成作為一次細(xì)胞分裂結(jié)束的標(biāo)志，細(xì)胞周期是指從一次細(xì)胞分裂形成子細(xì)胞開始到下一次細(xì)胞分裂形成子細(xì)胞為止所經(jīng)歷的過程。在這一過程中，遺傳物質(zhì)被均等的分配到兩個(gè)子細(xì)胞中。由受精卵發(fā)育而成的，體細(xì)胞中含有兩個(gè)染色體組的個(gè)體稱為二倍體，體細(xì)胞中含有三個(gè)或三個(gè)以上染色體組的個(gè)體叫做多倍體。細(xì)胞分裂多倍體是自然中細(xì)胞分裂的不完全，造成多倍體的產(chǎn)生，給生物的進(jìn)化提供了一條途徑，多倍體的產(chǎn)生增加了基因庫的多樣性，為生物的進(jìn)化提供了另外的可能。目前關(guān)于細(xì)胞多倍體有三種假說：一種假說認(rèn)為細(xì)胞多倍化與細(xì)胞成熟和終末分化有關(guān)；二種假說認(rèn)為細(xì)胞多倍化與細(xì)胞的功能有關(guān)；三種假說則認(rèn)為細(xì)胞多倍化賦予了細(xì)胞抵抗氧化應(yīng)激以及基因毒性損傷的能力。在肝癌發(fā)生過程中，多倍體比例明顯降低，并且多倍體細(xì)胞對(duì)藥物更加敏感，因此誘導(dǎo)細(xì)胞發(fā)生多倍化是治療腫瘤的潛在策略。然而，細(xì)胞多倍化還存在著許多問題，如細(xì)胞多倍化以及倍體逆轉(zhuǎn)的調(diào)控機(jī)制仍有待研究，什么樣的疾病與多倍化發(fā)生相關(guān)，如何調(diào)控細(xì)胞多倍化來緩解病理發(fā)生的進(jìn)程等?？茖W(xué)家們對(duì)細(xì)胞的許多基礎(chǔ)性的觀察可以追溯到19世紀(jì)，美國(guó)國(guó)立衛(wèi)生研究院(NIH)于2004年在生物醫(yī)學(xué)發(fā)展規(guī)劃中提出，細(xì)胞信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)網(wǎng)絡(luò)將作為今后十年的主要研究?jī)?nèi)容，并且其中的細(xì)胞周期調(diào)控是研究的重點(diǎn)。

4 生物鐘基因與生物節(jié)律

有研究表明生物體細(xì)胞的增殖、生長(zhǎng)、代謝等遵循一定的生物節(jié)律[8]。哺乳動(dòng)物（包括人類）的所有生理活動(dòng)均有一定的節(jié)律，例如：神經(jīng)系統(tǒng)、心血管系統(tǒng)、泌尿系統(tǒng)、內(nèi)分泌系統(tǒng)、新陳代謝、免疫系統(tǒng)均有一定的節(jié)律[9]。人類的生物節(jié)律都是以24 小時(shí)為周期，由位于視交叉核上的內(nèi)在分子維持和體現(xiàn)[10]，外界的日常刺激（光和溫度）可以調(diào)節(jié)節(jié)律分子使其發(fā)生同步化[11]。當(dāng)前研究表明哺乳動(dòng)物體內(nèi)參與生物節(jié)律的基因總共12種，包括Pert、Clock、Perl、Rd、Bmal1、Cryl、Cry2、REV-ERBa、NPAS2、Tau和Dec1、Dec2。晝夜節(jié)律基因的表達(dá)異常會(huì)導(dǎo)致各種疾病，如代謝綜合征、肥胖、糖尿病、自身免疫性疾病，甚至癌癥[12]。已有研究證實(shí)[13]，編碼核因子-κB（NF-κB）信號(hào)通路相關(guān)蛋白的基因?qū)儆跁r(shí)鐘控制基因家族，且以節(jié)律基因BMAL1/CLOCK為代表的節(jié)律調(diào)控環(huán)路可調(diào)節(jié)NF-κB的活化。

5 惡性腫瘤的節(jié)律特征及臨床應(yīng)用

5.1 惡性腫瘤的節(jié)律特征 腫瘤細(xì)胞是永生性細(xì)胞，腫瘤的發(fā)生不僅與細(xì)胞的異常增殖和分化有關(guān)，也與細(xì)胞凋亡的異常有關(guān)。1972年Kerr等人在提出凋亡概念的同時(shí)預(yù)測(cè)：惡性腫瘤中的自發(fā)凋亡可能會(huì)涉及到導(dǎo)致腫瘤消退的治療作用。正常人體組織、細(xì)胞的生長(zhǎng)受到精確的調(diào)控。而腫瘤細(xì)胞具有無限生長(zhǎng)的特性。通過研究證實(shí)，腫瘤細(xì)胞的無限生長(zhǎng)是腫瘤細(xì)胞凋亡受抑制的結(jié)果，因而凋亡障礙同腫瘤的發(fā)生、發(fā)展具有密切的關(guān)系。凋亡是體內(nèi)細(xì)胞平衡的一個(gè)關(guān)鍵要素，通過消除不健康的細(xì)胞而達(dá)到平衡。隨著當(dāng)前醫(yī)療技術(shù)以及分子研究的進(jìn)步發(fā)現(xiàn)，生物節(jié)律的變化對(duì)惡性腫瘤的發(fā)生及治療均有一定的作用[14]。與胃癌發(fā)展密切相關(guān)的TLR4可能與晝夜節(jié)律有關(guān)[15]。己有的研究結(jié)果表明，肝細(xì)胞癌中BMAL1的表達(dá)能夠誘導(dǎo)NPAS2介導(dǎo)的腫瘤細(xì)胞的存活[16]。在頭頸部鱗狀細(xì)胞癌中，生物節(jié)律基因BMAL1的表達(dá)明顯增加[17]。表達(dá)上調(diào)的BMAL1轉(zhuǎn)錄調(diào)控cydin D1表達(dá)，促進(jìn)胃癌細(xì)胞的異常增殖和腫瘤生長(zhǎng)[18]。

5.2 腫瘤時(shí)辰化療 當(dāng)前的研究已經(jīng)表明生物組織及腫瘤細(xì)胞的活動(dòng)具有節(jié)律性，通過改變癌癥治療的時(shí)間點(diǎn)，獲得更有效的治療已經(jīng)得到臨床的實(shí)踐。腫瘤時(shí)辰化療在增加療效的同時(shí)也減少了毒副作用。Levi等[19]研究發(fā)現(xiàn)，根據(jù)時(shí)辰治療在特定的時(shí)間給予抗腫瘤藥物，與其他時(shí)間給藥或持續(xù)給藥相比，可使骨髓抑制、胃腸道副反應(yīng)減少5倍。席明名等[20]研究發(fā)現(xiàn)時(shí)辰化療可以顯著降低卵巢癌患者化療過程中的胃腸道不良反應(yīng)及腎毒性的發(fā)生率，提高患者對(duì)化療的依從性和耐受性。鑒于癌細(xì)胞在夜間增殖較快，將化療等治療方法安排在夜間可以提高療效[21]。在一天中特定的時(shí)間點(diǎn)給藥，或直接靶向于晝夜節(jié)律基因和破壞藥物的酶進(jìn)行治療，能夠提高癌癥的治療效果[22]。

5.3 腫瘤時(shí)辰放療 基于時(shí)辰化療取得的一些成功經(jīng)驗(yàn)，越來越多的人開始投入到時(shí)辰放療的研究。Johnson等[23]對(duì)878例行放射治療的乳腺癌患者進(jìn)行研究發(fā)現(xiàn)，在上午行放射治療的患者，其不良反應(yīng)發(fā)生率明顯增加，并且該研究發(fā)現(xiàn)當(dāng)患者的Per3的4個(gè)等位基因有純合子和/或NOC的A等位基因有純合子時(shí)，這種影響最為強(qiáng)烈。Lu等[24]對(duì)行新輔助放化療的直腸癌患者的病理組織進(jìn)行研究發(fā)現(xiàn)，經(jīng)過治療達(dá)到完全緩解的患者，其節(jié)律基因例如：Clock、Cry2、Per2及下游靶基因c-Myc 均處于高表達(dá)狀態(tài)。Chang等[25]研究發(fā)現(xiàn)在21:00-23:00期間行放射治療的宮頸癌患者，急性血液學(xué)毒性的發(fā)生率明顯升高。Squire等[26]研究發(fā)現(xiàn)在12:00以后行放射治療的直腸癌患者，病理完全緩解率明顯增加。Chan等[27]研究發(fā)現(xiàn)在11:00-14:00行放射治療的女性骨轉(zhuǎn)移患者，疼痛緩解更為顯著。

6 子午流注學(xué)說與細(xì)胞生物周期的關(guān)系

雖然千百余年來的臨床已證明了時(shí)間醫(yī)學(xué)不朽的生命力，但隨著它的迅速發(fā)展，我們也發(fā)現(xiàn)子午流注學(xué)說中某些內(nèi)容帶有機(jī)械推演的特征，所以今后需要用現(xiàn)代的科學(xué)方法去整理、提高和驗(yàn)證，使其更加完善。最典型的是腫瘤治療時(shí)間的臨床應(yīng)用，就是結(jié)合成功的例子在臨床應(yīng)用的時(shí)間生物學(xué)和細(xì)胞生物學(xué)。目前，腫瘤的治療包括手術(shù)、放療、化療等，但放化療毒副反應(yīng)，嚴(yán)重影響放化療的完成。因此，在正常細(xì)胞中或者不同的時(shí)間階段的惡性腫瘤細(xì)胞的代謝活動(dòng)中發(fā)現(xiàn)顯著的晝夜節(jié)律，有效地發(fā)揮最佳時(shí)機(jī)放化療的優(yōu)勢(shì)意義重大。許多研究結(jié)果表明，時(shí)辰化療、時(shí)辰放療可減輕腫瘤患者的不良反應(yīng)，提高療效、延長(zhǎng)生存期、提高生活質(zhì)量，有望成為臨床治療的新方法。

關(guān)于細(xì)胞周期調(diào)控與疾病的研究已經(jīng)成為生命科學(xué)研究的熱點(diǎn)。眾所周知，疾病的發(fā)生發(fā)展伴隨著多種信號(hào)通路的異常，傳統(tǒng)的子午流注學(xué)說在疾病的治療方面起著不可替代的作用，但是關(guān)于子午流注學(xué)說在疾病治療方面的具體機(jī)制仍不十分清楚。而關(guān)于細(xì)胞周期與生命的關(guān)聯(lián)研究尚處于初級(jí)階段，當(dāng)前科學(xué)家們正在從不同的角度研究細(xì)胞周期與癌基因、抑癌基因、生長(zhǎng)因子以及細(xì)胞增殖分化的關(guān)系。相信通過努力，我們最終能找到控制細(xì)胞周期的神奇“開關(guān)”，在腫瘤治療中也可利用細(xì)胞周期的原理對(duì)癥下藥。