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    妊娠期糖尿病患者脂肪細(xì)胞因子與TLR4/MyD88信號通路相關(guān)蛋白的關(guān)系研究及臨床意義①

    2019-12-27 06:07:34郭志利姚玉英姚克青于洪斌苗莉娜尹曉琳
    中國免疫學(xué)雜志 2019年23期
    關(guān)鍵詞:細(xì)胞因子脂肪通路

    郭志利 姚玉英 姚克青 張 梅 于洪斌 苗莉娜 王 茹 尹曉琳

    (石家莊醫(yī)學(xué)高等??茖W(xué)校微生物學(xué)和免疫學(xué)教研室,石家莊 050599)

    目前,多數(shù)學(xué)者認(rèn)為妊娠期糖尿病的進(jìn)展同糖脂代謝異常變化緊密相關(guān)[1],同時臨床發(fā)現(xiàn)由脂肪組織釋放的一系列脂肪細(xì)胞因子可對機(jī)體代謝活動產(chǎn)生影響,誘發(fā)胰島素抵抗[2,3];妊娠期糖尿病進(jìn)展和慢性炎癥存在一定關(guān)系,其中外周血單核細(xì)胞Toll樣受體(TLR)可在多種免疫細(xì)胞表達(dá),而活化后的TLRs通路則能將髓樣分化因子88(MyD88)依賴性信號通路激活,使得機(jī)體過度釋放促炎因子。TLR4屬于TLRs家族中參與炎癥反應(yīng)的一種重要受體,其能夠在腫瘤、腸道等多種疾病的炎癥反應(yīng)中發(fā)揮作用,在早期一項有關(guān)2型糖尿病小鼠試驗?zāi)P偷难芯堪l(fā)現(xiàn),其在小鼠體內(nèi)高水平表達(dá)[4]。目前,臨床尚無有關(guān)脂肪細(xì)胞因子與TLR4/MyD88信號通路在妊娠期糖尿病關(guān)系的研究。本研究旨在探討妊娠期糖尿病患者脂肪細(xì)胞因子與TLR4/MyD88信號通路的關(guān)系,現(xiàn)報道如下。

    1 資料與方法

    1.1一般資料 選取2015年2月至2017年12月于中國人民解放軍白求恩國際和平醫(yī)院診斷治療的妊娠期糖尿病患者,共計79例為研究對象,所有入組患者均符合國際糖尿病與妊娠關(guān)系研究協(xié)會制定的有關(guān)該病的診斷標(biāo)準(zhǔn)[5]。年齡20~30歲,平均年齡(28.11±1.31)歲;平均體質(zhì)量指數(shù)(27.32±3.20)kg/m2;孕周24~28周,平均孕周(27.29±0.58)周。

    1.2標(biāo)本采集與檢測方法 采集所有入組人員晨起空腹肘部靜脈血5 ml,3 500 r/min離心5 min,分離血清后保存血液標(biāo)本于-20℃環(huán)境以備檢測。采用流式細(xì)胞儀[富魯達(dá)(上海)儀器科技有限公司]測定并分析兩組入組人員TLR4/MyD88信號通路相關(guān)蛋白[TLR4、MyD88、腫瘤壞死因子受體相關(guān)因子6(TRAF-6)、核因子κB(NF-κB)、白細(xì)胞介素1β(IL-1β)]水平變化,其中抗體分別為TLR4抗體、MyD88抗體、TRAF-6抗體、NF-κB抗體、IL-1β抗體。采用積分光密度(IOD)值確定上述指標(biāo)陽性表達(dá)的強(qiáng)弱,N_101B型雙目生物顯微鏡(寧波永新光學(xué)股份有限公司)進(jìn)行圖像采集,Image Pro Plus4.5 圖像分析軟件進(jìn)行圖像分析。

    1.3統(tǒng)計學(xué)方法 使用SPSS20.0軟件對研究數(shù)據(jù)進(jìn)行統(tǒng)計學(xué)分析,采用Pearson法分析觀察組患者脂肪細(xì)胞因子與TLR4/MyD88信號通路相關(guān)蛋白(TLR4、MyD88、TRAF-6、NF-κB、IL-1β)相關(guān)性;同時采用回歸分析TLR4/MyD88信號通路相關(guān)蛋白與糖代謝情況的關(guān)系。以P<0.05為差異有統(tǒng)計學(xué)意義。

    2 結(jié)果

    2.1觀察組患者糖代謝情況對脂肪細(xì)胞因子和TLR4/MyD88信號通路相關(guān)蛋白表達(dá)相關(guān)性分析 經(jīng)Pearson法分析,結(jié)果顯示內(nèi)脂素與MyD88、TLR4、TRAF-6、NF-κB以及IL-1β水平均呈正相關(guān)(r=0.348、0.479、0.137、0.069、0.225,P<0.05);脂聯(lián)素與MyD88、TLR4、TRAF-6、NF-κB以及IL-1β水平分別呈負(fù)相關(guān)(r=-0.317、-1.21、-0.24、-1.88、-1.33,P<0.05);IL-6與MyD88、TLR4以及IL-1β水平分別呈正相關(guān)(r=0.712、0.612、0.254,P<0.05),與TRAF-6、NF-κB水平分別呈現(xiàn)負(fù)相關(guān)(r=-0.553、-0.015,P<0.05);TNF-α與MyD88、TLR4、TRAF-6、NF-κB以及IL-1β水平均呈正相關(guān)(r=0.564、0.598、0.284、0.447、0.601,P<0.05),F(xiàn)BG、PBG、HOMA-IR分別與MyD88、TLR4、TRAF-6、NF-κB以及IL-1β水平均呈正相關(guān)(P<0.05)。

    2.2觀察組患者TLR4/MyD88信號通路相關(guān)蛋白與糖代謝回歸分析 TLR4、MyD88、TRAF-6、NF-κB、IL-1β均與FBG、PBG以及HOMA-IR相關(guān)聯(lián)(P<0.05)。見表1。

    3 討論

    MyD88屬于一種可溶性蛋白,亦屬于機(jī)體細(xì)胞內(nèi)含有TLR結(jié)構(gòu)域的銜接蛋白之一,其能夠在炎癥反應(yīng)中發(fā)揮明顯作用,并可較好傳輸機(jī)體炎癥通路中的信號,同時能夠在先天性或獲得性免疫應(yīng)答反應(yīng)中起關(guān)鍵作用,且TLR信號通路的傳導(dǎo)亦離不開該蛋白因子的參與。當(dāng)相關(guān)因子處于非激活狀態(tài)時,MyD88-Toll相關(guān)蛋白復(fù)合物可較好同MyD88下游激酶IRAK相結(jié)合。目前,臨床研究發(fā)現(xiàn),TLR2、TLR4、TLR7、TLR8以及TLR9的信號轉(zhuǎn)導(dǎo)均離不開上述途徑,其中TLR4在TLRs家族中發(fā)揮重要作用,并能在其介導(dǎo)的炎癥信號通路中起到明顯的開關(guān)作用,而MyD88屬于TLR4介導(dǎo)的炎癥通路中的下游效應(yīng)分子,聯(lián)合機(jī)體內(nèi)其他信號通路共同作用,使得IL-6、TNF-α等炎癥相關(guān)基因發(fā)生轉(zhuǎn)錄,并形成炎癥反應(yīng)級聯(lián)放大[6]。TLR4信號可傳遞至MyD88,并且通過MyD88依賴信號轉(zhuǎn)導(dǎo)途徑更加刺激內(nèi)皮細(xì)胞中的NF-κB和絲裂原活化的蛋白激酶信號轉(zhuǎn)導(dǎo)級聯(lián),導(dǎo)致進(jìn)入胞核內(nèi)的活化NF-κB啟動核內(nèi)相關(guān)基因轉(zhuǎn)錄,最終引發(fā)脂肪細(xì)胞因子水平異常表達(dá)。有研究指出[7],TLR4/MyD88同卵巢癌的發(fā)生發(fā)展密切相關(guān),該通路能夠參與機(jī)體局部慢性炎癥反應(yīng),導(dǎo)致該通路中的促炎、抗炎因子水平失衡,進(jìn)一步導(dǎo)致疾病進(jìn)展。本研究經(jīng)Pearson法分析,結(jié)果顯示脂肪細(xì)胞因子和TLR4/MyD88信號通路相關(guān)蛋白表達(dá)具有相關(guān)性。說明TLR4/MyD88通路參與妊娠期糖尿病的發(fā)生發(fā)展過程,且脂肪細(xì)胞因子與該通路中的相關(guān)蛋白水平變化具有密切關(guān)系。但本研究納入樣本數(shù)量少,有關(guān)TLR4/MyD88通路在妊娠期糖尿病中的確切影響機(jī)制有待后續(xù)大規(guī)模多中心的深入研究。

    表1 TLR4/MyD88信號通路相關(guān)蛋白與糖代謝回歸分析Tab.1 Regression analysis of protein and sugar in TLR4/MyD88 signal pathway

    綜上所述,妊娠期糖尿病的進(jìn)展不僅與機(jī)體分泌的脂肪細(xì)胞因子存在一定關(guān)聯(lián),亦同MyD88/TLR4通路關(guān)系密切,而明確病因有助于臨床治療效果的提高。

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