飼糧類型對育肥湖羊肌肉脂肪酸和氨基酸組成的影響

侯川川，馬蓮香，邱家凌，魯鑫濤，祝家明，周 琴，劉 兵，吳阿團，余東游*

（1.浙江大學(xué)動物科學(xué)學(xué)院，浙江杭州 310058；2.湖州市畜牧獸醫(yī)局，浙江湖州 330500）

隨著社會進步和消費意識轉(zhuǎn)變，人們對膳食結(jié)構(gòu)的要求越來越高。羊肉具有高蛋白、低脂肪、低膽固醇等特性，營養(yǎng)豐富，而且具有良好的口感和風(fēng)味，其需求量逐年增加[1]。但與養(yǎng)羊業(yè)發(fā)達的國家相比，我國在羊肉品質(zhì)方面還存在很大的提升空間。羊肉中脂肪酸組成是肉品質(zhì)的主要影響因素，因此研究羔羊脂肪酸的沉積對提高肉品質(zhì)具有重要意義[2]。湖羊肉質(zhì)細嫩、味道鮮美、膻味少，具有理想的產(chǎn)肉性能，已逐步成為我國南方發(fā)展肉羊產(chǎn)業(yè)的首選綿羊品種[3]。但目前為止，有關(guān)不同飼糧類型對湖羊肌肉中脂肪酸和氨基酸組成影響的研究鮮有報道。本試驗通過比較不同飼糧類型對湖羊肌肉脂肪酸和氨基酸組成的影響，探討實際生產(chǎn)中更適宜湖羊的飼糧類型，為湖羊肉品質(zhì)的提高提供理論依據(jù)。

1 材料與方法

1.1 試驗設(shè)計 本試驗于2016 年7—11 月在浙江省湖州怡輝生態(tài)農(nóng)業(yè)有限公司的湖羊養(yǎng)殖場進行。采用單因子隨機區(qū)組設(shè)計，選取采食正常、體重（24.65±2.80）kg的健康90 日齡公湖羊90 只，隨機分成3 組，分別飼喂傳統(tǒng)精粗飼糧+舔磚（CK 組）、全混合日糧（TMR 組）、粗料+精料顆粒料（CP 組），每組3 個重復(fù)，每個重復(fù)10 只羊。預(yù)試期10 d，正試期120 d，預(yù)試期開始時飼喂湖羊保育料，在10 d 內(nèi)逐漸換為參試飼糧。

1.2 試驗飼糧 試驗飼糧以玉米-豆腐渣為基礎(chǔ)精料，花生秸稈和黃豆秸稈為粗料，參照《肉羊飼養(yǎng)標準》（NY/T 816-2004）和中國飼料成分及營養(yǎng)價值表（2015 年第26 版）配制。受試湖羊預(yù)混料產(chǎn)品由湖州市農(nóng)業(yè)創(chuàng)新團隊與浙江威盟飼料科技有限公司聯(lián)合研制。試驗飼糧組成及營養(yǎng)成分見表1。

1.3 飼養(yǎng)管理 試驗湖羊采用網(wǎng)上分欄飼養(yǎng)，自然光照，30℃以下自然通風(fēng)，高于30℃自然通風(fēng)加縱向負壓通風(fēng)；每天06:30 和16:30 各喂料1 次，第1 次喂料量占40%、第2 次占60%；CK 和CP 組先飼喂粗料，再飼喂精料，飼養(yǎng)期間自由采食和飲水（鴨嘴式飲水器）；根據(jù)湖州地區(qū)商品代湖羊常規(guī)防疫制度進行免疫，定期驅(qū)蟲。

表1 試驗飼糧組成及營養(yǎng)成分（干物質(zhì)基礎(chǔ)）

1.4 測定指標及方法

1.4.1 血清和肝臟抗氧化指標 于試驗第120 天，從每個重復(fù)隨機選取體重相近的健康公湖羊2 只，共18 只進行空腹12 h 處理，采用頸靜脈采血，每只羊采血10 mL，置于10 mL 離心管中，3 000 r/min 離心15 min，取上清液分裝到1.5 mL 離心管中，-20℃冰箱保存用于測定血清抗氧化指標。

從每個重復(fù)隨機選取體重相近的健康公湖羊2 只，共18 只，禁食24 h 后屠宰，迅速摘取部分肝臟和背最長肌樣品置于液氮中冷凍保存，用于測定肝臟抗氧化指標和肌肉脂肪酸與氨基酸組成。

血清和肝臟中的總抗氧化能力（T-AOC）、過氧化氫酶（CAT）、總超氧化物歧化酶（T-SOD）及谷胱甘肽過氧化物酶（GSH-Px）的活性和丙二醛（MDA）的含量均采用南京建成生產(chǎn)的試劑盒測定，具體方法與操作嚴格按照說明書進行。

1.4.2 肌肉脂肪酸組成 肌肉脂肪酸組成參照柏美娟等[4]的方法測定，準確稱取肌肉樣品1.000 0 g 左右放入于10 mL 離心管中，加入苯與石油醚各1 mL，進行避光處理，靜置浸提24 h；再加入2 mL 0.4 mol/L 的KOH－甲醇溶液進行甲酯化，搖勻后靜置15 min；最后用雙蒸水定容至10 mL，10 000 r/min 離心10 min，取上清液100 μL 用Agilent 7890A 氣相色譜儀檢測脂肪酸含量。各脂肪酸含量以單個脂肪酸在總甲基化脂肪酸中所占的百分比表示。

1.4.3 肌肉氨基酸組成 肌肉氨基酸組成分析參照王玉琴等[5]的方法應(yīng)用L-8900 全自動氨基酸分析儀進行測定，具體方法：先將肉樣烘干至恒重，然后取5 mg 放入6 mol/L 的HCl 中110℃水解24 h，脫酸后用水定容至5 mL，最后用L-8900 全自動氨基酸分析儀進行檢測分析。

1.5 統(tǒng)計分析 試驗數(shù)據(jù)經(jīng)Excel 2003 整理后，用SPSS 19.0 統(tǒng)計軟件進行單因素方差分析（One-Way ANOVA），Duncan′s 法進行多重比較，以P＜0.05 為差異顯著。試驗結(jié)果用平均值和均值標準誤（SEM）表示。

2 結(jié)果

2.1 飼糧類型對育肥湖羊血清和肝臟抗氧化指標的影響由表2 可知，飼糧類型對育肥湖羊血清和肝臟的T-SOD、GSH-Px、CAT 活性和MDA 含量以及T-AOC 均無顯著影響。

2.2 飼糧類型對育肥湖羊背最長肌飽和脂肪酸組成的影響 由表3 可見，育肥湖羊背最長肌中檢測出9 種飽和脂肪酸（SFA），其中棕櫚酸和硬脂酸含量較高，其余種類含量較少。與CK 組相比，TMR 組湖羊背最長肌中棕櫚酸的比例降低了10.77%（P＜0.05），CP 組棕櫚酸的比例無顯著顯著；飼糧類型對其余8 種SFA 的比例沒有顯著影響。TMR 組總SFA 比例較CK 組降低了9.18%（P＜0.05），但CP 與CK 組無顯著差異?？偟膩碚f，TMR 可以降低育肥湖羊背最長肌中SFA 比例。

表2 飼糧類型對育肥湖羊血清和肝臟抗氧化指標的影響

表3 飼糧類型對育肥湖羊背最長肌SFA 組成的影響 %

2.3 飼糧類型對育肥湖羊背最長肌不飽和脂肪酸組成的影響 如表4 所示，育肥湖羊背最長肌中檢測出13 種不飽和脂肪酸（UFA），主要由單不飽和脂肪酸（MUFA）中的油酸和多不飽和脂肪酸（PUFA）中的亞油酸組成，其余UFA 所占比例較低。與CK 組相比，TMR 組湖羊背最長肌中油酸所占比例升高了4.78%（P＜0.05），但CK 組與CP 組差異不顯著；就總MUFA 比例而言，TMR 組較CK、CP 組分別升高了4.71% 和4.16%（P＜0.05），但CK 與CP 組差異不顯著。飼糧類型對各PUFA 含量沒有顯著影響?？偟膩碚f，TMR 可以提高育肥湖羊背最長肌中UFA 比例。

2.4 飼糧類型對育肥湖羊背最長肌氨基酸組成的影響由表5 可見，育肥湖羊背最長肌中檢測出18 種氨基酸，其中人體必需氨基酸（EAA）10 種，非必需氨基酸（NEAA）8 種。在EAA 中，賴氨酸含量最高，其在CK 組、TMR 組和CP 組湖羊中的含量分別為1.81%、1.90%和1.82%；其次是亮氨酸，在3 組湖羊中的含量分別為1.55%、1.63%和1.58%。在NEAA 中，含量最高的是谷氨酸，其在CK 組、TMR 組和CP 組湖羊中的含量分別為3.24%、3.29%和3.26%。

表4 飼糧類型對育肥湖羊背最長肌UFA 組成的影響 %

與CK 組相比，TMR 組湖羊肌肉中異亮氨酸的含量上升了10.34%（P＜0.05），但CP 與CK 組差異不顯著；TMR 組EAA 總含量顯著高于CK 組，升高了4.45%（P＜0.05）；TMR 組NEAA 總含量較CK 和CP 組分別升高了2.33% 和1.99%（P＜0.05）；與CK 和CP 組相比，TMR 組總氨基酸含量分別增加3.42% 和2.75%（P＜0.05）。上述結(jié)果提示，飼糧類型對育肥湖羊背最長肌氨基酸組成有影響，且TMR 的效果較顯著。

3 討 論

3.1 飼糧類型對湖羊血清和肝臟抗氧化指標的影響 在動物生長過程中，體內(nèi)都存在氧自由基，一般狀態(tài)下，氧自由基的產(chǎn)生、利用、清除處于一種動態(tài)平衡狀態(tài)，當(dāng)有本身或者外來因素影響時，這種動態(tài)平衡會被破壞，從而使動物體產(chǎn)生應(yīng)激反應(yīng)[6]。SOD 是保護細胞膜結(jié)構(gòu)與功能完整性的酶，它在生物機體內(nèi)有清除氧自由基的能力，其活性升高可以幫助組織細胞抵御過氧化損傷[7]。GSH-Px 可以清除細胞內(nèi)產(chǎn)生的過氧化氫，還原脂質(zhì)過氧化物，降低活性氧水平，從而減少細胞損傷[8]。T-AOC含量可體現(xiàn)動物機體對機體自由基的代謝狀態(tài)，是衡量動物體總抗氧化能力的最佳指標[9]。MDA 是脂質(zhì)過氧化物代謝的主要產(chǎn)物，可作為氧化應(yīng)激的一種生物標志物，其含量增多會破壞細胞膜的結(jié)構(gòu)和完整性[10]。本試驗發(fā)現(xiàn)，與CK 組相比，TMR 和CP 組湖羊機體抗氧化能力相關(guān)指標在數(shù)值上有所上升，說明飼糧類型對湖羊抗氧化能力的影響較小，且有關(guān)飼糧類型對反芻動物血清和肝臟的抗氧化能力的研究鮮有報道。

表5 飼糧類型對育肥湖羊背最長肌氨基酸組成的影響 %

3.2 飼糧類型對育肥湖羊背最長肌脂肪酸組成的影響 肌肉中脂肪酸組成是影響肉品質(zhì)的重要因素，其不僅能夠影響肉的嫩度和多汁性，還與肉的營養(yǎng)價值息息相關(guān)[11]。脂肪酸由MUFA、PUFA 和SFA 組成，是組成肉類脂肪的主要物質(zhì)，同時也與肉類特有的風(fēng)味密切相關(guān)[12]。張寧等[13]研究發(fā)現(xiàn)，提高UFA 并降低SFA 在總脂肪酸中所占百分比可提高羊肉品質(zhì)。機體攝入SFA 過多會增加心血管相關(guān)疾病的患病率[14]，而PUFA 具有多種特殊的生物活性，在調(diào)節(jié)脂質(zhì)代謝、調(diào)節(jié)免疫系統(tǒng)和預(yù)防心血管相關(guān)疾病等方面均具有重要的生理作用[15]。劉圈煒等[16]研究發(fā)現(xiàn)，羊肉的膻味與SFA 中的硬脂酸有關(guān)，在不影響肉品質(zhì)的前提下，可以通過調(diào)控膻味相關(guān)指標來改善羊肉的風(fēng)味。也有研究表明，羊肉風(fēng)味與UFA 中的油酸和亞麻酸關(guān)系密切[17]。

本試驗發(fā)現(xiàn)，湖羊飼喂TMR 可以顯著降低SFA、增加UFA 在總脂肪酸中所占比例，主要是SFA 中的棕櫚酸比例下降，UFA 中的油酸比例升高，可見TMR 可顯著改善羊肉的風(fēng)味，提高肉品質(zhì)。王德寶等[18]研究表明，與對照組相比，飼喂TMR 可以顯著提高杜蒙羊肌肉UFA 在總脂肪酸中所占的比例，有效改善肉品質(zhì)。原因可能是瘤胃微生物可以通過氫化作用合成部分脂肪酸，而全混合日糧能夠提高瘤胃微生物活性，促進脂肪酸合成；脂肪酸的組成還有可能與很多因素（如品種、營養(yǎng)水平、年齡和養(yǎng)殖模式等）相關(guān)[19]。

3.3 飼糧類型對育肥湖羊背最長肌氨基酸組成的影響蛋白質(zhì)在動物體內(nèi)的分解和吸收是通過氨基酸來實現(xiàn)的，蛋白質(zhì)中氨基酸的種類和含量又與肌肉的品質(zhì)和風(fēng)味密切相關(guān)[20]。王玉琴等[5]研究表明，氨基酸中的異亮氨酸、亮氨酸、甘氨酸、絲氨酸、谷氨酸、丙氨酸和脯氨酸是構(gòu)成肉香味的必需前體氨基酸，其中谷氨酸是構(gòu)成肉鮮味的主要物質(zhì)。Lorenzo 等[21]研究發(fā)現(xiàn)，EAA 含量制約著肌肉蛋白質(zhì)的品質(zhì)。有關(guān)飼糧類型對湖羊肌肉氨基酸組成影響的研究鮮有報道。本研究結(jié)果表明，湖羊飼喂TMR 可以增加EAA 和NEAA 總含量，改善肌肉營養(yǎng)價值，提高湖羊肉品質(zhì)，這可能與TMR組湖羊蛋白質(zhì)利用效率高有關(guān)，因而總氨基酸含量較高。

4 結(jié) 論

與傳統(tǒng)精粗飼糧相比，TMR 可顯著增加肌肉中UFA 和EAA 含量，降低SFA 比例，改善肉品質(zhì)，提升羊肉的營養(yǎng)食用價值，而顆粒料組效果不顯著。