云南大葉種茶樹種質(zhì)資源主要成分多樣性分析

陳春林　田易萍　朱興正　鄧少春　徐丕忠　包云秀　陳林波　董輝

摘要：茶葉的生化成分是決定茶葉品質(zhì)的物質(zhì)基礎(chǔ)。本研究以18份云南大葉種茶樹資源為供試材料，通過制作蒸青樣檢測芽葉的四項常規(guī)成分和兒茶素組分。結(jié)果顯示，水浸出物變化幅度為48.8%～50.9%，全部為高水浸出物茶種資源;氨基酸總量變化幅度為2.7%～4.9%，高氨基酸總量（>3.0%）的有12份，占總資源的66.67%;咖啡堿變化幅度為3.4%～5.1%，高咖啡堿含量（>4.0%）的有6份，占總資源的33.33%;茶多酚變化幅度為20.8%～30.9%，高茶多酚含量（>30.0%）的有1份，占總資源的5.56%。EC含量變幅為0.71%～3.32%，非酯型兒茶素變幅為2.65%～8.12%;酯型兒茶素變幅為8.92%～16.88%，兒茶素總量變幅為12.03%～22.22%，變異系數(shù)分別為45.87%、24.28%、12.86%、12.67%，說明18份茶種資源具有較好的遺傳多樣性。酚氨比可作為茶樹品種適制性的評價指標(biāo)，其中12份種質(zhì)適制綠茶（酚氨比<8.00），占總資源數(shù)的66.67%;6份適合紅綠茶兼制，占總資源數(shù)的33.33%。

關(guān)鍵詞：云南大葉種茶;生化成分;多樣性;適制性

中圖分類號：S571.101文獻標(biāo)識號：A文章編號：1001-4942（2019）11-0053-04

Analysis of Main Component Diversity of

Yunnan Big-Leaf Tea Germplasm Resources

Chen Chunlin， Tian Yiping， Zhu Xingzheng，

Deng Shaochun， Xu Pizhong， Bao Yunxiu， Chen Linbo， Dong Hui

（Tea Research Institute of Yunnan Academy of Agricultural Sciences/Yunnan Provincial

Engineering Research Center of Tea Germplasm Resources Innovation and Supporting Cultivation

Technology/Yunnan Provincial Key Laboratory of Tea Science， Menghai 666201， China）

Abstract The biochemical components of tea are the material basis determining the quality. With 18 Yunnan big-leaf tea resources as experiment materials， four routine components and catechinic acid ingredients in bud leaves were determined by making steam tea samples. The results showed that the aqueous extract ranged from 48.8% to 50.9%， and all were the tea resources with high aqueous extract. The amino acid varied from 2.7% to 4.9%， among which， 12 germplasms had high content （>3.0%） occupying 66.67% of the total resources. The caffeine ranged from 3.4% to 5.1%， and 6 germplasms had high content （>4.0%） with a proportion of 33.33% of the total germplasms. The tea polyphenol varied from 20.8% to 30.9%， and one germplasm had high content （>30.0%）， occupying 5.56% of the total germplasms. The variation amplitude of EC content， non-ester catechins， ester catechins and total catechins were 0.71%～3.32%， 2.65%～8.12%， 8.92%～16.88% and 12.03%～22.22%， respectively， with the variable coefficients as 45.87%， 24.28%， 12.86% and 12.67% respectively.? The 18 germplasms showed better genetic diversity. The phenol-amino ratio could be as the biochemical index for manufacture suitability. Based on it， 12 germplasms were suitable for processing green tea （with the phenol-amino ratio lower than 8.00%） occupying 66.67% of the total germplasms， while 6 resources were suitable for both black and green tea occupying 33.33% of the total.

Keywords Yunnan big-leaf tea; Biochemical component; Diversity; Manufacture suitability

茶樹（Camellia sinensis）屬山茶科（Theaceae）山茶屬（Camellia），被認(rèn)為起源于我國云南地區(qū)，至今已有3 000多年的栽培歷史，已成為全世界三大飲料作物之一[1，2]。云南地處熱帶向亞熱帶過渡區(qū)域，雨量充沛，氣溫較高，地形地貌錯綜復(fù)雜，孕育和保留了豐富的茶樹種質(zhì)資源[3]，這些茶種資源成為開展種質(zhì)創(chuàng)新、育種和新產(chǎn)品研發(fā)的重要物質(zhì)基礎(chǔ)[4]。

正確選用優(yōu)異種質(zhì)資源是提高茶樹育種成功率的關(guān)鍵。目前挖掘優(yōu)異種質(zhì)資源主要還是依靠生化成分分析，生化成分是決定茶葉品質(zhì)的物質(zhì)基礎(chǔ)，研究各茶種資源間生化成分的差異，對茶樹特異性資源的發(fā)掘、利用乃至育種等都特別重要[5，6]。茶樹品種也是決定制成茶類生化成分與品質(zhì)穩(wěn)定的基礎(chǔ)，即使在同一加工環(huán)境下，不同品種的茶樹，其所制成茶類的生化成分與品質(zhì)也各不相同[7]。陸錦時等[8]研究得出不同茶樹品種新梢中主要生化成分與紅茶品質(zhì)顯著相關(guān)，尤其鮮葉中的茶多酚與制成紅茶品質(zhì)的相關(guān)性最為顯著，相關(guān)系數(shù)為0.92;水浸出物、咖啡堿、氨基酸等成分在綠茶、紅茶制作工藝中也發(fā)揮著不同程度的顯著作用;酚氨比是茶鮮葉中茶多酚與氨基酸的含量比值[9]，該值的大小決定茶樹品種的適制性：酚氨比<8.00適制綠茶，酚氨比在8.00～15.00之間適合紅綠茶兼制，酚氨比>15.00適制紅茶[10]。

1 材料與方法

1.1 試驗材料

18份云南大葉種茶種質(zhì)材料，見表1。

1.2 試驗方法

1.2.1 蒸青樣制作 于2018年5月采摘新梢一芽二葉制備蒸青樣，粉碎后待測。

1.2.2 生化成分測定 水浸出物、茶多酚、游離氨基酸總量采用GB/T8305—2013的方法測定;茶多酚、游離氨基酸、咖啡堿分別采用GB/T 8313—2008、GB/T 8314—2013、GB/T 8312—2013的方法測定;兒茶素總量、沒食子酸（GA）、表沒食子兒茶素（EGC）、D，L-兒茶素（D，L-C）、表沒食子基兒茶素沒食子酸酯（EGCG）、表兒茶素（EC）、表兒茶素沒食子酸酯（ECG）采用GB/T 8313—2008的方法測定。運用Waters E2695液相色譜進行檢測。

2 結(jié)果與分析

2.1 云南大葉種茶芽葉主要生化成分分析

由表1可知，18份種質(zhì)材料春季芽葉的水浸出物含量均較高，變幅為48.8%～50.9%，平均為49.78%，最高的是云茶123-9，最低的是云茶035-15，均具有高水浸出物含量（>45.0%）。水浸出物是茶湯滋味的主要呈味物質(zhì)，其含量高低是茶葉品質(zhì)好壞的反映，含量高的種質(zhì)理論上具有較好的加工品質(zhì)[11]。

茶多酚含量變化幅度為20.8%～30.9%，平均為25.40%，云茶0510-10最高，云茶035-38最低;高茶多酚含量（>30.0%）的有1份，占5.56%。茶多酚是茶葉內(nèi)含成分和功能性成分的主體，是綠茶滋味濃度和苦澀味的代表物質(zhì)，也是影響紅茶色、香味等品質(zhì)的關(guān)鍵因素，是決定茶湯品質(zhì)濃度的主要物質(zhì)[12]。

氨基酸總量變幅為2.7%～4.9%，平均為3.46%，最高的為云茶0520-16，最低的為云茶123-9和云茶091-36。氨基酸總量>3.0%的有12份，占66.67%。氨基酸與茶葉嫩度和香氣形成有密切關(guān)系，對茶湯的滋味、香氣和色澤形成具有重要作用[13]。

咖啡堿變幅為3.4%～5.1%，平均為3.98%，最高的為云茶123-9，最低的為0520-16。高咖啡堿含量（>4.0%）的種質(zhì)共6份，占33.33%。

酚氨比是決定茶樹品種適制性的重要生化指標(biāo)。18份種質(zhì)的酚氨比變幅為4.71～11.04，其中，12份種質(zhì)適制綠茶（酚氨比<8.00），占比66.67%;6份可兼制綠茶與紅茶（酚氨比在8.00～15.00），占比33.33%;沒有適制紅茶的種質(zhì)。

水浸出物、咖啡堿、氨基酸總量、茶多酚四項指標(biāo)中，氨基酸總量的變異系數(shù)最大，為15.02%;水浸出物的最小，為2.87%;咖啡堿和茶多酚的變異系數(shù)相當(dāng)。表明，這18份種質(zhì)的氨基酸含量具有較豐富的多樣性，遺傳改良潛力大，而水浸出物的改良潛力較小。

2.2 云南大葉種茶芽葉兒茶素組分分析

由表2可見，D，L-C含量變幅為0～5.07%，最低的為云茶122-19，最高的為云茶0523-9，平均為1.39%;EC含量變幅為0.71%～3.32%，最高的為云茶0510-10，最低的為0523-9，平均為1.33%;非酯型兒茶素變幅為2.65%～8.12%，最高的為云茶0510-10，最低的為云茶091-36;酯型兒茶素變幅為8.92%～16.88%，最高的為云茶091-33，最低的為云茶014-2，平均為13.84%;兒茶素總量變幅為12.03%～22.22%，最高的為云茶0510-10，最低的為云茶014-2，平均為18.70%。D，L-C的變異系數(shù)最高，達到79.14%;其次為EC、ECG、EGC，變異系數(shù)為40.47%～45.87%;酯型兒茶素和兒茶素總量的變異系數(shù)較低，分別為12.86%和12.67%，可以看出，這18份種質(zhì)資源的兒茶素組分多樣性較高。

3 討論與結(jié)論

芽葉中的生化成分是形成茶葉品質(zhì)的物質(zhì)基礎(chǔ)，在品種選育過程中，往往通過生化成分的檢測來確定茶種資源的適制性。本研究結(jié)果顯示，18份云南大葉種茶種質(zhì)中，有12份適制綠茶，分別為：云茶0523-9、云茶124-8、云茶035-15、云茶035-38、云茶035-21、云茶031-27、云茶014-2、云茶0520-16、云茶059-11、云茶0523-8、云茶059-13、云茶0510-11;其余6份茶種適合兼制紅綠茶。

14個生化指標(biāo)的變異系數(shù)為2.87%～79.14%，D，L-C的最大，水浸出物的最小，GA、EC、EGC、ECG、EGCG、酚氨比和非酯型兒茶素的變異系數(shù)也較高，均超過20.00%。本研究結(jié)果與楊興榮[14]、折改梅[15]等的研究結(jié)果較為一致。

GA（沒食子酸）是茶多酚的重要組成單元，18份茶種資源的GA含量在0.46%～1.39%，與前人報道的GA在茶樹體內(nèi)普遍偏低[15]一致。

本研究中，水浸出物、茶多酚、氨基酸、咖啡堿四項常規(guī)指標(biāo)的變異系數(shù)都未超過20.00%。但前人對野生古茶的研究顯示氨基酸和茶多酚均超過20.00%，尤其茶多酚的變異系數(shù)可達到32.33%[14]，這可能與野生古茶遺傳多樣性豐富有關(guān)。

參 考 文 獻：

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收稿日期：2019-07-01

基金項目：國家自然科學(xué)基金項目“茶樹雜交F1代的GWAS分析及重要品質(zhì)性狀基因的挖掘”（31860226）;云南省科技廳重大專項“云南特色茶資源發(fā)掘利用及新品種選育推廣”（2018ZJ009）

作者簡介：陳春林（1989—），男，云南祿豐人，助理研究員，主要從事茶樹品種選育工作。E-mail：805261945@qq.com

通訊作者：朱興正（1975—），男，云南鎮(zhèn)雄人，碩士，高級實驗師，主要從事茶樹品種選育工作。E-mail： 28389364@qq.com