餓螞蝗對動(dòng)物消炎止痛的作用研究

袁冬磊 謝瑩 王穎

摘 要：為了研究喂食不同濃度餓螞蝗水煮液對炎癥模型大鼠的痛覺調(diào)節(jié)作用，通過在大鼠足底注射鹿角菜致炎，對炎癥大鼠喂食濃度分別為5.5 mg/mL、11 mg/mL、22 mg/mL的餓螞蝗水煮液，采用行為測痛的方法記錄與觀察在5 min、10 min、15 min、20 min、30 min、45 min和60 min時(shí)間點(diǎn)上的大鼠后爪縮爪反應(yīng)潛伏期（Hindpaw Withdrawal Latency，HWL），與喂食生理鹽水作為比較，觀察餓螞蝗水煮液對炎癥模型大鼠痛覺調(diào)節(jié)活動(dòng)的影響。結(jié)論：在將餓螞蝗水煮液喂食給炎癥大鼠之后，與注射同等劑量的生理鹽水相比，HWL明顯延長。餓螞蝗水煮液明顯延長了炎癥模型大鼠的HWL，表明餓螞蝗水煮液對炎癥大鼠具有一定的消炎止痛作用，即餓螞蝗水煮液參與了炎癥模型大鼠的痛覺調(diào)節(jié)。

關(guān)鍵詞：餓螞蝗水煮液;致炎大鼠;消炎止痛

文章編號：1004-7026（2019）19-0106-05? ? ? ? 中國圖書分類號：R285 ? ? ? ? 文獻(xiàn)標(biāo)志碼：A

餓螞蝗又名山螞蝗、胃痛草，為豆科薔薇目雙子葉被子植物，主要生長于海拔600～2 300 m的山坡草或林緣。餓螞蝗植物資源豐富，分布于廣西、貴州、云南等地，其性涼、味苦，據(jù)《中華本草》記載有活血止痛、解毒消腫等功效?，F(xiàn)代研究表明，餓螞蝗的成分主要有有機(jī)酸、黃酮類、酚類以及三萜類，至今尚未發(fā)現(xiàn)有餓螞蝗對動(dòng)物發(fā)揮消炎止痛作用的相關(guān)研究[1-2]。

為了對餓螞蝗所發(fā)揮的消炎止痛效果進(jìn)行深入研究，試驗(yàn)選用鹿角菜來使大鼠致炎，通過喂食餓螞蝗水煮液的方法，利用壓板及熱板測痛儀對大鼠開展痛覺測驗(yàn)，以此來研究餓螞蝗所發(fā)揮的消炎止痛作用，以期為其鎮(zhèn)痛作用機(jī)制的研究提供初步方向。

1? 試驗(yàn)材料

1.1? 試驗(yàn)動(dòng)物

試驗(yàn)使用雄性Wistar大鼠8只，體重控制在200～210 g之間。在試驗(yàn)的過程中，大鼠必須分籠喂養(yǎng)，自由進(jìn)水進(jìn)食，維持充足的光照，其溫度應(yīng)當(dāng)維持在（22±2）℃，確保穩(wěn)定的生活條件。試驗(yàn)過程中必須盡可能降低大鼠的使用頻率，盡量避免大鼠受到其他因素的影響。

1.2? 試驗(yàn)試劑

餓螞蝗：購買于義善堂大藥房。

生理鹽水：長春豪邦藥業(yè)有限公司制造。

鹿角菜：SIGMA公司制品。

1.3? 試驗(yàn)儀器

灌胃針：深圳瑞沃德公司。

智能熱板儀（YLS-6B）和電子壓痛儀（YLS-3E）：安徽省淮北正華生物儀器設(shè)備有限公司。

2? 研究方法

2.1? 炎癥大鼠模型建立

通過將鹿角菜注射在大鼠的右側(cè)足底（鹿角菜必須現(xiàn)用現(xiàn)配，避免變質(zhì)），創(chuàng)建起致炎大鼠模型。注射時(shí)間應(yīng)當(dāng)保持在行為測試之前的3 h，在注射之后的3～4 h，大鼠的后爪將會紅腫發(fā)炎，皮溫將會顯著提升，這時(shí)可以開始進(jìn)行判斷炎癥輕重的痛覺測試。在進(jìn)行相關(guān)試驗(yàn)之前，需要對大鼠開展壓板及熱板的測試訓(xùn)練，其核心目的在于促使大鼠充分熟悉測試環(huán)境，從而盡可能減少因不熟悉環(huán)境而產(chǎn)生的誤差。訓(xùn)練維持一周，4輪/d，3次/輪。

2.2? 餓螞蝗水煮液母液及不同濃度水煮液的制備

將餓螞蝗進(jìn)行稱量，并置于瓷缸中，加水煮沸取水煮液的母液，之后利用該母液來配制5.5 mg/mL、11 mg/mL、22 mg/mL的餓螞蝗水煮液。

2.3? 行為痛覺測試

熱板測試：利用智能熱板儀來開展測試，該儀器的溫度應(yīng)當(dāng)維持在（52±0.3）℃。用左手抓住大鼠，右手抓出大鼠待測腿的髖關(guān)節(jié)處，確保大鼠的腿完全伸直，使其測試爪可以與熱板面接觸。同時(shí)觸動(dòng)踏板開關(guān)，并計(jì)時(shí)，后爪將會自主縮回并離開熱板表面，再次觸動(dòng)開關(guān)以停止，將這個(gè)時(shí)期作為后爪縮回反應(yīng)潛伏期的HWL。在試驗(yàn)過程中應(yīng)盡量確保運(yùn)用熱板的相同位置，以避免誤差的產(chǎn)生。

壓力測試：采用電子壓痛儀來開展測試。用左手抓住大鼠，右手抓出大鼠待測腿的髖關(guān)節(jié)處，避免大鼠的腿出現(xiàn)彎曲，將其爪子與試驗(yàn)板面進(jìn)行接觸，同時(shí)觸動(dòng)相應(yīng)的踏板開關(guān)，將相應(yīng)的玻璃落到大鼠的后爪之上，其壓力將會以30 g/s的速度增加，采用相同的方法檢測大鼠機(jī)械刺激的HWL。

經(jīng)過訓(xùn)練之后，大鼠對熱刺激所產(chǎn)生的HWL將不會超出5 s，對于機(jī)械性刺激所形成的HWL不能超出6 s。在喂食藥物之前先需要檢測3組HWL，并將此作為基礎(chǔ)值。在藥物注射之后各個(gè)時(shí)間點(diǎn)的HWL都應(yīng)當(dāng)與基礎(chǔ)值進(jìn)行對比反映。

2.4? 數(shù)據(jù)統(tǒng)計(jì)分析方法

試驗(yàn)數(shù)據(jù)以均值±標(biāo)準(zhǔn)誤（x±s）的形式表示，組間比較采用獨(dú)立樣本t檢驗(yàn)統(tǒng)計(jì)數(shù)據(jù)并處理，*p<0.05，**p<0.01，***p<0.001均表示統(tǒng)計(jì)結(jié)果具有顯著性。

3? 結(jié)果與分析

試驗(yàn)給致炎大鼠喂食濃度分別為5.5 mg/mL、11 mg/mL和22 mg/mL的餓螞蝗水煮液3 mL，采用壓板及熱板測試，并對餓螞蝗水煮液對熱刺激和機(jī)械刺激所造成的HWL進(jìn)行記錄。

分別將生理鹽水和餓螞蝗水煮液（5.5 mg/mL）喂食給炎癥模型大鼠，并將兩者進(jìn)行對比，大鼠對機(jī)械及熱刺激所產(chǎn)生的HWL變化詳見表1。與生理鹽水組對比，餓螞蝗水煮液喂食組大鼠左、右爪因受到機(jī)械刺激所產(chǎn)生的HWL的差異具備顯著性（p<0.01;p<0.01），左爪熱刺激不存在顯著性（p>0.05），右抓有顯著差異（p<0.05）。

分別將生理鹽水和餓螞蝗水煮液（11 mg/mL）喂食給炎癥模型大鼠，并將兩者進(jìn)行對比，大鼠對機(jī)械及熱刺激所產(chǎn)生的HWL的變化詳見表2。與生理鹽水組相比，餓螞蝗水煮液喂食組大鼠左、右爪機(jī)械刺激所產(chǎn)生的HWL存在較顯著的差異性（p<0.01;p<0.01），左、右爪熱刺激均存在顯著的差異性（p<0.05;p<0.01）。

分別將生理鹽水和餓螞蝗水煮液（22 mg/mL）喂食給炎癥模型大鼠，并將兩者進(jìn)行對比，大鼠對機(jī)械及熱刺激所產(chǎn)生的HWL的變化詳見表3。與生理鹽水組相對比，餓螞蝗水煮液喂食組大鼠左、右爪機(jī)械刺激所產(chǎn)生的HWL的差異具有顯著性（p<0.01;p<0.01），左爪熱刺激為顯著（p<0.01），右爪熱刺激為極顯著（p<0.001），這表明大鼠的HWL得到了極大的延長。

結(jié)果表明，餓螞蝗水煮液對炎癥模型大鼠具有一定的消炎鎮(zhèn)痛效果，并且5～10 min之內(nèi)的效果為最佳，詳見圖1，同時(shí)對藥物劑量存在一定的依賴性。

4? 結(jié)論與討論

通過試驗(yàn)觀察，炎癥模型大鼠灌5.5 mg/mL餓螞蝗水煮液后的左、右爪熱刺激的HWL都存在顯著性差異（p<0.05;p<0.05），炎癥模型大鼠的右爪熱刺激存在顯著性差異（p<0.05）。喂食生理鹽水和喂食餓螞蝗水煮液（11 mg/mL）的炎癥模型大鼠進(jìn)行對比，炎癥模型大鼠灌11 mg/mL餓螞蝗水煮液之后，其左右爪機(jī)械刺激的HWL都存在顯著性差異（p<0.01;p<0.01），左、右爪熱刺激存在顯著性差異（p<0.05;p<0.01）。給炎癥模型大鼠喂食22 mg/mL餓螞蝗水煮液與灌生理鹽水作對照，炎癥模型大鼠灌22 mg/mL餓螞蝗水煮液之后的左、右爪機(jī)械刺激的HWL都存在顯著性差異（p<0.01;p<0.01），左爪熱刺激為顯著（p<0.01），右爪熱刺激為極顯著（p<0.001），這就表明大鼠的HWL得到了極大延長。

試驗(yàn)結(jié)果表明，餓螞蝗水煮液對炎癥模型大鼠具有一定的消炎鎮(zhèn)痛效果，并且5 min之內(nèi)的效果為最佳，同時(shí)對藥物劑量存在一定的依賴性。此外，已有相關(guān)學(xué)者研究對動(dòng)物消炎止痛的相關(guān)藥物應(yīng)用于畜牧生產(chǎn)中。

餓螞蝗成分包括黃酮類、生物堿類、萜類、多酚類及揮發(fā)油類等[3-6]。其中黃酮可以抑制炎性生物酶的滲出，可以增進(jìn)傷口愈合和止痛，已有研究證實(shí)，黃酮類化合物對炎癥性疼痛具有緩解作用其作用機(jī)制為抑制環(huán)氧化酶和脂氧化酶的活性而起到抗炎鎮(zhèn)痛作用[7]。所以，餓螞蝗鎮(zhèn)痛作用的機(jī)制有可能是餓螞蝗所含有的黃酮類化合物的消炎鎮(zhèn)痛作用，或者還有可能存在其他因素起鎮(zhèn)痛作用尚待研究[8-14]。

炎癥是一種較為常見的病癥，會導(dǎo)致一系列的動(dòng)物健康問題，進(jìn)而影響?zhàn)B殖業(yè)的產(chǎn)量。因此，積極研發(fā)全新對于動(dòng)物的抗炎鎮(zhèn)痛藥物具有較大的意義。試驗(yàn)通過采用向致炎大鼠喂食餓螞蝗的方法，利用壓板及熱板測痛儀來對大鼠開展痛覺測驗(yàn)，以此來研究餓螞蝗所發(fā)揮的抗炎鎮(zhèn)痛作用[15]。試驗(yàn)為餓螞蝗抗炎鎮(zhèn)痛作用機(jī)制的研究提供初步方向，并為畜牧業(yè)餓螞蝗治療炎癥動(dòng)物而提供理論依據(jù)[16-18]。