血清G-17、PG I、PG II、Hcy在胃黏膜癌變進(jìn)展中的表達(dá)及臨床意義

南壽山, 靳 榮, 賈惠娟, 王玨磊, 趙春美, 王柏清

南壽山, 王玨磊, 趙春美, 王柏清, 天津市第五中心醫(yī)院消化科 天津市 300450

靳榮, 天津市第五中心醫(yī)院婦產(chǎn)科 天津市 300450

賈惠娟, 天津市第五中心醫(yī)院胃鏡室 天津市 300450

核心提要： 本研究通過分析血清G-17、PG I、PG II、Hcy在胃癌中的變化, 得出對(duì)上述指標(biāo)進(jìn)行檢測(cè)可用于早期胃癌篩查的結(jié)論, 為臨床早期確診提供幫助.

0 引言

胃癌為高發(fā)消化系統(tǒng)疾病, 發(fā)病率、致死率均居惡性腫瘤前列[1].該病早期無特異性癥狀, 部分患者在確診時(shí)已處于進(jìn)展期, 錯(cuò)失最佳治療時(shí)機(jī), 預(yù)后不良.因此,早期確診并對(duì)應(yīng)治療是延長患者生存期限、改善預(yù)后的關(guān)鍵.目前胃鏡篩查是胃癌診斷的可靠方式, 但具有侵入性, 且費(fèi)用較高, 患者接受度低.故探究更為安全、經(jīng)濟(jì)的診斷方式是臨床亟待解決的問題.胃泌素-17(gastrin-17, G-17)、胃蛋白酶原(pepsinogen, PG)均由胃黏膜分泌, 其含量可反映出胃部變化, 已有研究證實(shí)胃黏膜病變時(shí)其濃度將隨之變化[2].同型半胱氨酸(homocysteine, Hcy)為蛋氨酸代謝途徑的中間產(chǎn)物, 國內(nèi)外學(xué)者認(rèn)為其在結(jié)腸癌、肝癌、肺癌等惡性腫瘤中表達(dá)異常[3-5], 且高水平Hcy可增加胃癌患病風(fēng)險(xiǎn).鑒于此, 本研究將測(cè)定早期胃癌中血清G-17、胃蛋白酶原Ⅰ(pepsinogen I, PG I)、胃蛋白酶原Ⅱ(pepsinogen II, PG II)、Hcy表達(dá)水平, 并探究其單獨(dú)與聯(lián)合檢測(cè)對(duì)該病的診斷價(jià)值.報(bào)道如下.

1 材料和方法

1.1 材料 回顧性分析2014-08/2018-08期間本院230例高度懷疑為胃癌的患者的臨床資料, 均接受胃鏡及病理診斷, 根據(jù)診斷結(jié)果將患者分為胃良性病變組(136例), 早期胃癌組(53例), 進(jìn)展期胃癌組(41例).另回顧性分析同期118例健康受試者的臨床資料, 將其設(shè)置為健康組.4組性別、年齡、體質(zhì)量指數(shù)(body mass index, BMI)臨床資料比較差異均無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＞0.05)(表1).納入標(biāo)準(zhǔn)：(1)230例高度懷疑為胃癌的患者均表現(xiàn)為上腹部疼痛、噯氣、反酸等上消化道癥狀, 有胃息肉、萎縮性胃炎等病史; (2)健康組無消化道、胃痛病史, 幽門螺桿菌感染史, 經(jīng)體檢各項(xiàng)指標(biāo)正常; (3)近1 mo未使用過質(zhì)子泵抑制劑、H+拮抗劑及胃黏膜保護(hù)藥物、抗凝藥物; (4)胃癌患者經(jīng)病理診斷證實(shí),并經(jīng)3位具有相關(guān)資質(zhì)病理專家審核; (5)早期胃癌符合《早期胃癌內(nèi)鏡鑒別診斷手冊(cè)》中診斷標(biāo)準(zhǔn),癌組織限于胃黏膜層及黏膜下層; (6)進(jìn)展期胃癌癌組織浸潤到黏膜下層, 進(jìn)入肌層或已穿過肌層達(dá)漿膜,經(jīng)內(nèi)鏡檢查確診.排除標(biāo)準(zhǔn)：(1)入組前2 wk內(nèi)服用質(zhì)子泵抑制劑、H+受體拮抗劑等對(duì)本研究造成影響的藥物; (2)肝、腎、心等器官功能異常; (3)胃部手術(shù)史(包括內(nèi)鏡下手術(shù)及外科手術(shù));(4)精神分裂、抑郁癥、妄想癥等精神疾病; (5)臨床資料缺失.本研究開展前獲本院倫理委員會(huì)批準(zhǔn)(批號(hào)：TJWZXYXEC-2019-03).

1.2 方法 血清G-17、PG I、PG II、Hcy檢測(cè)：在所有受試者空腹?fàn)顟B(tài)下采集其5 mL左右靜脈血, 2800 r/s離心15 min, 取上清置于-80 ℃環(huán)境中待用.血清G-17、PG I、PG II采用雙抗體夾心酶聯(lián)免疫法檢測(cè), 嚴(yán)格按照試劑盒要求操作, 酶聯(lián)免疫試劑盒購自上海滬鼎生物科技有限公司, 采用THERMO Multiskan FC全自動(dòng)酶標(biāo)儀(美國Thermo Scientific)測(cè)定吸光光度值, 根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算樣本濃度.血清G-17、PG I、PG II參考值分別為：1.00-15.00 pmol/L、60.00-240.00 ng/mL、0-20.00 ng/mL;血清Hcy采用循環(huán)酶法檢測(cè), Hcy診斷試劑盒購自武漢默沙克生物科技有限公司, 采用AU5800全自動(dòng)生化分析儀(美國Beckman Coulter)測(cè)定樣本濃度.血清Hcy參考值為：5-15 μmol/L.聯(lián)合檢測(cè)：血清G-17、PG I、PG II、Hcy四者水平均異常視為陽性.

臨床資料調(diào)查：將進(jìn)展期胃癌與早期胃癌患者設(shè)置為胃癌組, 將胃良性病變患者與健康受試者分為非胃癌組, 收集2組臨床資料, 包括性別、年齡、BMI、家族史、抽煙(每天＞1支, 且連續(xù)6 mo以上)、飲酒(每周＞1次,且連續(xù)6 mo以上)、飲食不規(guī)律(三餐不按時(shí), 用餐時(shí)間不固定)、喜食燙食(入口食物超過60 ℃, 且連續(xù)6 mo以上)、高鹽飲食(攝入食鹽＞6 g/d)、高血壓、糖尿病, 血清G-17、PG I、PG II、Hcy.對(duì)上述可能導(dǎo)致胃癌的因素進(jìn)行賦值, 性別(女 = 0、男 = 1)、家族史(否 = 0、是 =1)、抽煙(否 = 0、是 = 1)、飲酒(否 = 0、是 = 1)、飲食不規(guī)律(女 = 0、男 = 1)、喜食燙食(否 = 0、是 = 1)、高鹽飲食(否 = 0、是 = 1)、高血壓(否 = 0、是 = 1)、糖尿病(否 = 0、是 = 1),以年齡、BMI、血清G-17、血清PG I、血清PG II、血清Hcy為連續(xù)變量, 以是否發(fā)生胃癌(否= 0、是 = 1)為因變量進(jìn)行Logistic回歸分析.

觀察指標(biāo)：(1)進(jìn)展期胃癌組、早期胃癌組、胃良性病變組、健康組基線資料比較; (2)進(jìn)展期胃癌組、早期胃癌組、胃良性病變組、健康組血清G-17、PG I、PG II、Hcy水平比較; (3)胃癌組、非胃癌組可能影響因素的差異對(duì)比; (4)Logistic回歸分析法分析導(dǎo)致胃癌的危險(xiǎn)因素; (5)血清G-17、PG I、PG II、Hcy單獨(dú)與聯(lián)合檢測(cè)診斷早期胃癌的價(jià)值; (6)血清G-17、PG I、PG II、Hcy單獨(dú)與聯(lián)合檢測(cè)診斷進(jìn)展期胃癌的價(jià)值.

表1 4組性別、年齡、BMI資料比較

統(tǒng)計(jì)學(xué)處理數(shù)據(jù)的處理與分析采用SPSS 26.0, 計(jì)量資料均采用mean±SD表示, 兩兩樣本比較采用獨(dú)立樣本t檢驗(yàn); 多樣本計(jì)量資料比較用單因素方差分析, 進(jìn)一步兩兩比較采用SNK-q檢驗(yàn); 計(jì)數(shù)資料均采用n(%)表示及χ2檢驗(yàn); 經(jīng)Logistic回歸分析法計(jì)算導(dǎo)致胃癌的危險(xiǎn)因素比值比(odd ratio, OR)及95%可信區(qū)間(credibility interval, CI).P＜0.05有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義; 建立受試者工作特征曲線(receiver operating curve, ROC)分析血清因子對(duì)早期胃癌、進(jìn)展期胃癌的診斷價(jià)值, 并計(jì)算曲線下面積(area under curve, AUC), AUC＞0.5提示該模型對(duì)早期胃癌有診斷價(jià)值, 且該值越大, 診斷價(jià)值越高.采用Z檢驗(yàn)比較AUC,P＜0.05差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義.

2 結(jié)果

2.1 進(jìn)展期胃癌組、早期胃癌組、胃良性病變組、健康組基線資料比較 4組性別、年齡、BMI資料比較差異均無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＞0.05)(表1).

2.2 進(jìn)展期胃癌組、早期胃癌組、胃良性病變組、健康組血清G-17、PG I、PG II、Hcy水平比較 4組血清G-17、PG I、PG II、Hcy水平比較差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.05); 進(jìn)展期胃癌組、早期胃癌組、胃良性病變組、健康組血清G-17、PG II、Hcy呈降低趨勢(shì)(P＜0.05),血清PG I呈升高趨勢(shì)(P＜0.05), 組間比較差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.05)(表2).胃良性病變組中低級(jí)別上皮內(nèi)瘤變(low grade intraepithelial neoplasia, LGIN)42例, 經(jīng)4年隨訪發(fā)現(xiàn)其中28例病變消失, 血清G-17、PG II、Hcy水平呈降低趨勢(shì)最終平穩(wěn); 10例發(fā)展為高級(jí)別上皮內(nèi)瘤變(high grade intraepithelial neoplasia, HGIN), 4例發(fā)生癌變,血清G-17、PG II、Hcy水平均呈上升趨勢(shì).

2.3 胃癌組、非胃癌組可能影響因素的差異對(duì)比 胃癌組、非胃癌組年齡、性別、BMI、家族史、抽煙、飲酒、飲食不規(guī)律、高血壓、糖尿病臨床資料比較差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＞0.05); 胃癌組喜食燙食占比、高鹽飲食占比, 血清G-17、PG II、Hcy水平均顯著高于非胃癌組, 血清PG I顯著低于非胃癌組(P＜0.05)(表3).

2.4Logistic回歸分析法分析導(dǎo)致胃癌的危險(xiǎn)因素 經(jīng)Logistic回歸分析, 喜食燙食、高鹽飲食, 血清G-17、PG I、PG II、Hcy均為導(dǎo)致胃癌的危險(xiǎn)因素(P＜0.05)(表4).

2.5 血清G-17、PG I、PG II、Hcy單獨(dú)與聯(lián)合檢測(cè)診斷早期胃癌的價(jià)值 ROC結(jié)果顯示, 血清G-17、PG I、PG II、Hcy單獨(dú)檢測(cè)診斷早期胃癌的最佳截?cái)帱c(diǎn)分別為13.46 pmol/L、60.98 ng/mL、27.56 ng/mL、23.01 μmol/L,單獨(dú)檢測(cè)與聯(lián)合檢測(cè)的AUC分別為0.71、0.70、0.71、0.78、0.83.四者單獨(dú)檢測(cè)的AUC與聯(lián)合檢測(cè)差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.01)(表5、圖1).

2.6 血清G-17、PG I、PG II、Hcy單獨(dú)與聯(lián)合檢測(cè)診斷進(jìn)展期胃癌的價(jià)值 ROC結(jié)果顯示, 血清G-17、PG I、PG II、Hcy單獨(dú)診斷進(jìn)展期胃癌的最佳截?cái)帱c(diǎn)分別為18.53 pmol/L、47.56 ng/mL、28.41 ng/mL、27.63 μmol/L,單獨(dú)檢測(cè)與聯(lián)合檢測(cè)的AUC分別為0.71、0.68、0.73、0.75、0.80.四者單獨(dú)檢測(cè)的AUC與聯(lián)合檢測(cè)差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.01)(表6、圖2).

3 討論

胃癌起源于胃黏膜上皮, 惡性程度較高, 且具侵襲性與轉(zhuǎn)移性, 患者面臨著很高的死亡風(fēng)險(xiǎn)[6].早期胃癌階段癌細(xì)胞僅存在于黏膜及黏膜下層, 經(jīng)手術(shù)切除后5年生存率可達(dá)90%, 隨著癌細(xì)胞侵襲至肌層間質(zhì)發(fā)展至進(jìn)展期, 實(shí)行化療及胃大部分切除術(shù)等綜合治療后, 5年生存率僅為30%-50%[7].由此可見, 確診時(shí)機(jī)與胃癌預(yù)后關(guān)系密切.目前胃癌診斷主要依靠內(nèi)鏡篩查, 但該診斷方式存在操作難度高、過程痛苦等劣勢(shì), 大規(guī)模普查受限[8].因此, 臨床研究人員逐漸將研究重點(diǎn)轉(zhuǎn)向血清學(xué)腫瘤標(biāo)志物水平的檢測(cè), 為早期胃癌篩查提供新的途徑.

本研究中, 進(jìn)展期胃癌組、早期胃癌組、胃良性病變組、健康組血清G-17、PG II、Hcy呈降低趨勢(shì), 血清PG I呈升高趨勢(shì), 提示早期胃癌血清G-17、PG II、Hcy水平異常升高, PG I水平異常降低.G-17是十二指腸、胃竇、胃腸黏膜中G細(xì)胞分泌的酰胺化腸胃激素[9], 主要生理功能為促進(jìn)胃酸分泌、維持消化道解剖結(jié)構(gòu), 并可為黏膜提供營養(yǎng), 促進(jìn)其生長, 調(diào)節(jié)胃腸功能.胃黏膜萎縮性病變將減少G細(xì)胞數(shù)量, 血清G-17水平降低.近年來有研究顯示[10,11], G-17與胃癌的發(fā)生、發(fā)展關(guān)系密切, 并可顯著影響癌細(xì)胞的生長、惡性轉(zhuǎn)化.PG為胃蛋白酶前體, 在適宜酸性條件下可被激活, 轉(zhuǎn)化為胃蛋白酶, 分解蛋白質(zhì)為機(jī)體提供營養(yǎng), 其水平是胃黏膜形態(tài)與功能的反映[12].當(dāng)胃黏膜與胃基底出現(xiàn)病變時(shí), 部分胃腺、主細(xì)胞、胃竇G細(xì)胞數(shù)量顯著減少, 相關(guān)功能喪失, PG基因突變, PG I分泌量明顯減少, PG II分泌量增加, 且與病情嚴(yán)重程度相關(guān)[13,14].PG II與PG I變化趨勢(shì)不同的原因可能為分泌PG II的細(xì)胞及腺體分布廣泛, 且推測(cè)與胃黏膜腸上皮化生及異型增生有關(guān).Hcy屬含硫氨基酸, 通常由蛋氨酸去甲基后合成.由于惡性腫瘤分裂、增殖速度快, 葉酸與維生素B12消耗量大, 加上胃癌患者吸收、消化功能異常, 葉酸吸收率降低, 蛋氨酸循環(huán)速度受到影響, 導(dǎo)致血液中Hcy聚集[15].另有研究認(rèn)為[16], Hcy代謝產(chǎn)物硫內(nèi)酯毒性與細(xì)胞癌變密不可分, 提示Hcy在惡性腫瘤進(jìn)程中的重要作用.

表2 4組血清G-17、PG I、PG II、Hcy水平比較(mean±SD)

表3 胃癌組、非胃癌組可能影響因素的差異對(duì)比

表4 Logistic回歸分析法分析導(dǎo)致胃癌的危險(xiǎn)因素

表5 血清G-17、PG I、PG II、Hcy單獨(dú)與聯(lián)合檢測(cè)診斷早期胃癌的價(jià)值

表6 血清G-17、PG I、PG II、Hcy單獨(dú)與聯(lián)合檢測(cè)診斷進(jìn)展期胃癌的價(jià)值

圖1 血清G-17、PG I、PG II、Hcy單獨(dú)與聯(lián)合檢測(cè)診斷早期胃癌的ROC曲線.G-17：胃泌素-17; PG I：胃蛋白酶原I; PG II：胃蛋白酶原II;Hcy：同型半胱氨酸.

圖2 血清G-17、PG I、PG II、Hcy單獨(dú)與聯(lián)合檢測(cè)診斷進(jìn)展期胃癌的ROC曲線.G-17：胃泌素-17; PG I：胃蛋白酶原I; PG II：胃蛋白酶原II;Hcy：同型半胱氨酸.

本研究采用Logistic回歸分析法證實(shí)喜食燙食、高鹽飲食, 血清G-17、PG I、PG II、Hcy均為導(dǎo)致胃癌的危險(xiǎn)因素, 通過建立ROC曲線顯示血清G-17、PG I、PG II、Hcy單獨(dú)及聯(lián)合檢測(cè)診斷早期胃癌的AUC分別為0.71、0.70、0.71、0.78、0.83, 診斷進(jìn)展期胃癌的AUC分別為0.71、0.68、0.73、0.75、0.80, 表明四者聯(lián)合檢測(cè)價(jià)值優(yōu)于單獨(dú)檢測(cè).血清G-17、PG I、PG II、Hcy在進(jìn)展期胃癌、早期胃癌及胃良性病變患者中均發(fā)生異常變化, 且多種惡性腫瘤, 高血壓、腦梗死、慢性心衰等疾病中血清Hcy均異常升高, 故四者并非胃癌的特異性表達(dá)物質(zhì),單獨(dú)診斷價(jià)值較低,故建議行四者聯(lián)合檢測(cè), 為早期胃癌診斷提供更有價(jià)值的參考.綜上所述, 早期胃癌患者血清G-17、PG II、Hcy水平異常升高, 血清PG I水平異常降低, 四者聯(lián)合檢測(cè)可為早期胃癌的診斷提供參考.

文章亮點(diǎn)

實(shí)驗(yàn)背景

胃癌為發(fā)病率高、致死率高的消化道惡性腫瘤, 早期無特異性癥狀, 難以被發(fā)現(xiàn), 導(dǎo)致治療時(shí)機(jī)延誤.當(dāng)前臨床上病理檢查與胃鏡篩查應(yīng)用廣泛, 但具有較多缺點(diǎn).為更好地篩查早期胃癌, 本研究特分析血清相關(guān)腫瘤標(biāo)志物在早期胃癌中的表達(dá)水平及臨床價(jià)值.

實(shí)驗(yàn)動(dòng)機(jī)

探究血清胃泌素-17(G-17)、胃蛋白酶原Ⅰ(PG I)、胃蛋白酶原Ⅱ(PG II)、同型半胱氨酸(Hcy)在早期胃癌中的表達(dá)水平及對(duì)其診斷價(jià)值, 為臨床該病篩查提供依據(jù).

實(shí)驗(yàn)?zāi)繕?biāo)

早期胃癌患者血清G-17、PG I、PG II、Hcy水平異常,可作為早期胃癌診斷的有效指標(biāo), 從而早期確診并及時(shí)治療, 改善預(yù)后.

實(shí)驗(yàn)方法

采用雙抗體夾心酶聯(lián)免疫法測(cè)定受試者血清G-17、PG I、PG II水平, 采用循環(huán)酶法測(cè)定血清Hcy水平, 比較進(jìn)展期胃癌組、早期胃癌組、胃良性病變組、健康組各指標(biāo)水平變化, 建立ROC曲線比較各指標(biāo)單獨(dú)及聯(lián)合檢測(cè)診斷早期胃癌的價(jià)值.

實(shí)驗(yàn)結(jié)果

早期胃癌患者血清G-17、PG I、PG II、Hcy水平異常,聯(lián)合檢測(cè)可作為早期胃癌篩查的有效手段.

實(shí)驗(yàn)結(jié)論

早期胃癌患者血清G-17、PG II、Hcy水平異常較高, 血清PG I水平異常較低,并通過ROC曲線得出四者聯(lián)合檢測(cè)對(duì)早期胃癌的診斷價(jià)值高于四者單獨(dú)檢測(cè)的結(jié)論,相較于目前臨床上對(duì)兩個(gè)或三個(gè)因子單獨(dú)診斷早期胃癌所開展的研究而言更加全面,可進(jìn)一步提升早期胃癌診斷的準(zhǔn)確性.此外, 本研究發(fā)現(xiàn)胃癌患者血清PG II水平異常, 與部分學(xué)者觀點(diǎn)存在分歧,進(jìn)而推測(cè)PG II水平對(duì)早期胃癌有一定診斷價(jià)值, 而非僅依靠PG I/PG II診斷該病.

展望前景

探究其他血清腫瘤標(biāo)志物與早期胃癌的關(guān)系, 以期獲取更為靈敏、精確的檢測(cè)標(biāo)志物.