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    雷貝拉唑鈉細(xì)菌內(nèi)毒素檢驗(yàn)方法的建立

    2019-12-04 04:15:51雷小平陳青連
    上海醫(yī)藥 2019年21期

    雷小平 陳青連

    摘 要 目的:建立控制雷貝拉唑鈉中細(xì)菌內(nèi)毒素限度的方法。方法:按照《中國(guó)藥典》2015年版建立雷貝拉唑鈉細(xì)菌內(nèi)毒素凝膠法檢驗(yàn)方法。結(jié)果:使用靈敏度為0.06 EU/ml的鱟試劑進(jìn)行試驗(yàn),得到雷貝拉唑鈉最高不干擾濃度為0.24 mg/ml。結(jié)論:對(duì)雷貝拉唑鈉可采用凝膠法進(jìn)行細(xì)菌內(nèi)毒素檢驗(yàn),其限度定為1 EU/mg,供試品檢測(cè)濃度為0.06 mg/ml,使用鱟試劑的靈敏度為0.06 EU/ml。

    關(guān)鍵詞 雷貝拉唑鈉 細(xì)菌內(nèi)毒素 凝膠法

    中圖分類(lèi)號(hào):R927.12; R975.6 文獻(xiàn)標(biāo)志碼:A 文章編號(hào):1006-1533(2019)21-0075-05

    Establishment of a method suitable for the bacterial endotoxin test in rabeprazole sodium

    LEI Xiaoping*, CHEN Qinglian**

    (Hangzhou Ausia Biological Tech Co., Ltd., Hangzhou 310018, China)

    ABSTRACT Objective: To establish a method for the control of the limit of bacterial endotoxin in rabeprazole sodium. Methods: The gel-clot method for the bacterial endotoxin test in rabeprazole sodium was established according to Chinese Pharmacopoeia (2015 ed.). Results: The test was carried out with tachypleus amebocyte lysate with sensitivity of 0.06 EU/ml. The maximum non-interference concentration of rabeprazole sodium was 0.24 mg/ml. Conclusion: Gel-clot method can be used to test bacterial endotoxin in rabeprazole sodium. The limit is 1 EU/mg. The detection concentration of the sample is 0.06 mg/ml and the sensitivity of tachypleus amebocyte lysate reagent is 0.06 EU/ml.

    KEy WORDS rabeprazole sodium; bacterial endotoxin; gel-clot method

    雷貝拉唑鈉是一種新型的質(zhì)子泵抑制劑,可于治療酸相關(guān)性疾病,如消化性潰瘍、胃食管反流性疾病、卓-艾氏綜合征等,具有選擇性強(qiáng)烈抑制幽門(mén)螺桿菌(Hp)作用,在臨床使用中有顯著性?xún)?yōu)勢(shì)[1-3]。注射用雷貝拉唑鈉在生產(chǎn)中控制熱原具有其必要性[4],通常采用加活性炭的方式[5-6]。但《已上市化學(xué)仿制藥(注射劑)一致性評(píng)價(jià)技術(shù)要求(征求意見(jiàn)稿)》中要求注射劑生產(chǎn)中不建議使用活性炭,為了有效去除熱原(細(xì)菌內(nèi)毒素),需加強(qiáng)對(duì)原輔包、生產(chǎn)設(shè)備等的控制[7-9]。采用的方法有家兔法測(cè)定熱原或凝膠法[10]和光度測(cè)定法測(cè)定細(xì)菌內(nèi)毒素。由于家兔法更耗時(shí)、檢驗(yàn)成本更高,故通常采用制定細(xì)菌內(nèi)毒素限度的方式進(jìn)行控制。當(dāng)兩種檢測(cè)方法測(cè)定細(xì)菌內(nèi)毒素結(jié)果有爭(zhēng)議時(shí),以凝膠法結(jié)果為準(zhǔn)。故為了控制原料雷貝拉唑鈉中的細(xì)菌內(nèi)毒素,本研究特制訂其凝膠檢驗(yàn)方法。

    1 材料和方法

    1.1 儀器

    N10試管恒溫儀(杭州奧盛儀器有限公司);XH-D渦旋混合器(上海允延儀器有限公司);ML204T天平[梅特勒托利多儀器(上海)有限公司];DHG-9246A電熱恒溫鼓風(fēng)干燥箱(上海精宏實(shí)驗(yàn)設(shè)備有限公司)。

    1.2 試藥

    雷貝拉唑鈉(珠海潤(rùn)都制藥股份有限公司,批號(hào):88817110102、88814080102);雷貝拉唑鈉(Metrochem API Private Limited,批號(hào):RBS/1508298);細(xì)菌內(nèi)毒素工作標(biāo)準(zhǔn)品(湛江安度斯生物有限公司,批號(hào):1708160、180101、1806131,效價(jià):10 EU/支) ;鱟試劑(湛江安度斯生物有限公司,規(guī)格:0.1 ml/支,標(biāo)示靈敏度:0.25 EU/ml,批號(hào):1703013;標(biāo)示靈敏度:0.125 EU/ml,批號(hào):1804161;標(biāo)示靈敏度:0.06 EU/ml,批號(hào):1803051); 鱟試劑(福州新北生化工業(yè)有限公司,規(guī)格:0.1 ml/支,標(biāo)示靈敏度:0.25 EU/ml,批號(hào):17031712;標(biāo)示靈敏度:0.125 EU/ml,批號(hào):18041812;標(biāo)示靈敏度:0.06 EU/ml,批號(hào):17091312);稀釋劑Ⅱ(湛江安度斯生物有限公司,批號(hào):1801220;規(guī)格:4.0 ml /支);細(xì)菌內(nèi)毒素檢查用水(湛江安度斯生物有限公司,批號(hào):1608010、1804280;規(guī)格:5 ml /支)。

    1.3 方法

    取供試品,加細(xì)菌內(nèi)毒素檢查用水稀釋至濃度為2C的供試品儲(chǔ)備液與C的供試品溶液;用細(xì)菌內(nèi)毒素檢查用水將細(xì)菌內(nèi)毒素工作標(biāo)準(zhǔn)品溶解稀釋制成濃度為4λ的細(xì)菌內(nèi)毒素工作標(biāo)準(zhǔn)品溶液與濃度為2λ的陽(yáng)性對(duì)照溶液(B);取0.5 ml濃度為4λ的細(xì)菌內(nèi)毒素工作標(biāo)準(zhǔn)品溶液和0.5 ml濃度為2C的供試品儲(chǔ)備液混勻,作為供試品陽(yáng)性對(duì)照溶液;以細(xì)菌內(nèi)毒素檢查用水作為陰性對(duì)照溶液。取鱟試劑,用0.1 ml細(xì)菌內(nèi)毒素檢查用水復(fù)溶后,分別加入0.1 ml供試品溶液、陽(yáng)性對(duì)照溶液、供試品陽(yáng)性對(duì)照溶液、陰性對(duì)照溶液,各平行兩管,輕輕混勻后,放入(37±1)℃試管恒溫儀中,保溫(60±2)min。

    2 結(jié)果

    2.1 細(xì)菌內(nèi)毒素限值的確定

    根據(jù)其制劑注射用雷貝拉唑鈉原研說(shuō)明書(shū)中的用法用量:按靜脈輸注給藥,注射用雷貝拉唑鈉規(guī)格為20 mg,使用量為每日1瓶,滴注時(shí)間在15~30 min內(nèi)。計(jì)算確定雷貝拉唑鈉內(nèi)毒素的限值(L)為15 EU/mg[11]。

    本品為注射用雷貝拉唑鈉原料,為保證其制劑的質(zhì)量及用藥安全,該原料細(xì)菌內(nèi)毒素限值須嚴(yán)于其制劑臨床用藥計(jì)算的最大限制(15 EU/mg),考慮該制劑生產(chǎn)工藝、生產(chǎn)用水及其它輔料的帶入,故我們將雷貝拉唑鈉內(nèi)毒素限值(L)1 EU/mg定為企業(yè)標(biāo)準(zhǔn)。

    2.2 最低有效稀釋濃度的確定

    計(jì)算公式為C=λ/L。式中,C為最低有效稀釋濃度;λ為在凝膠法中鱟試劑的標(biāo)示靈敏度;L為供試品的細(xì)菌內(nèi)毒素限值,以EU/mg表示,為1 EU/mg;當(dāng)λ為 0.25 EU/ml,C=0.25 mg/ml;λ為0.125 EU/ml,C=0.125 mg/ml;λ為0.06 EU/ml,C=0.06 mg/ml。

    2.3 鱟試劑靈敏度復(fù)核試驗(yàn)

    將各靈敏度(λ)的鱟試劑用細(xì)菌內(nèi)毒素檢查用水0.1 ml復(fù)溶,分別加入2λ、λ、0.5λ和0.25λ四個(gè)濃度的細(xì)菌內(nèi)毒素標(biāo)準(zhǔn)溶液0.1 ml,每一個(gè)濃度平行做4管,另取2管加入0.1 ml細(xì)菌內(nèi)毒素檢查用水作為陰性對(duì)照。當(dāng)最高濃度為2λ管均為陽(yáng)性,最低濃度0.25λ管均為陰性,陰性對(duì)照管均為陰性,試驗(yàn)方為有效。當(dāng)λc[λc= lg-1(∑X/4)]在0.5λ~2λ之間時(shí),結(jié)果均符合企業(yè)標(biāo)準(zhǔn)(表1)。

    2.4 方法篩選

    2.4.1 選擇靈敏度0.25 EU/ml的鱟試劑

    取雷貝拉唑鈉,用細(xì)菌內(nèi)毒素檢查用水配制成濃度分別為2、1、0.5和0.25 mg/ml的溶液,并配制含2λ細(xì)菌內(nèi)毒素的各濃度供試品陽(yáng)性對(duì)照溶液(PPC溶液)。取兩個(gè)廠(chǎng)家靈敏度為0.25 EU/ml復(fù)溶后的鱟試劑進(jìn)行檢測(cè)。實(shí)驗(yàn)結(jié)果見(jiàn)表2,其最高不干擾濃度為0.25 mg/ml。由于最高不干擾濃度與其最低有效稀釋濃度一致,故以該濃度檢測(cè)時(shí)存在風(fēng)險(xiǎn)。

    2.4.2 調(diào)節(jié)溶液pH

    由于細(xì)菌內(nèi)毒素檢測(cè)時(shí),溶液的pH 在6.0~8.0 的范圍內(nèi)為宜[8]。雷貝拉唑鈉用細(xì)菌內(nèi)毒素檢查用水配制成濃度0.25~2 mg/ml的溶液時(shí),pH為9.4~10.1,故使用稀釋劑Ⅱ稀釋至濃度為0.25~2 mg/ml,其相應(yīng)pH為6.8~7.0,滿(mǎn)足pH要求。用細(xì)菌內(nèi)毒素檢查用水溶解雷貝拉唑鈉后,以稀釋劑Ⅱ作為稀釋劑,按2.4.1重復(fù)試驗(yàn)后發(fā)現(xiàn)改變稀釋劑后對(duì)試驗(yàn)結(jié)果無(wú)改善,且稀釋劑Ⅱ?qū)棕惱蜮c溶解性較差,故仍使用細(xì)菌內(nèi)毒素檢查用水為宜(表2)。

    2.4.3 改變鱟試劑靈敏度

    由于使用靈敏度0.25 EU/ml的鱟試劑檢驗(yàn)時(shí),其最低有效稀釋濃度為0.25 mg/ml,與其最高不干擾濃度一致,檢測(cè)存在風(fēng)險(xiǎn)。故通過(guò)減小所使用的鱟試劑靈敏度,減小其最低有效稀釋濃度。為保證所選用鱟試劑的可行性,通過(guò)檢驗(yàn)各靈敏度鱟試劑對(duì)應(yīng)的最低有效稀釋濃度的2倍(2C)濃度下對(duì)內(nèi)毒素是否凝結(jié),選定適宜靈敏度鱟試劑。實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明,使用靈敏度0.25 EU/ml鱟試劑時(shí),濃度0.5 mg/ml對(duì)內(nèi)毒素凝結(jié)有干擾;使用靈敏度0.125 EU/ml時(shí),濃度0.25 mg/ml有干擾;使用靈敏度0.06 EU/ml時(shí),濃度0.125 mg/ml無(wú)干擾,故選擇靈敏度0.06 EU/ml鱟試劑進(jìn)行方法學(xué)驗(yàn)證。

    2.5 干擾預(yù)實(shí)驗(yàn)

    取雷貝拉唑鈉,用細(xì)菌內(nèi)毒素檢查用水配制成濃度分別為0.48、0.24、0.12 和0.06 mg/ml的溶液,并配制各濃度供試品陽(yáng)性對(duì)照溶液(PPC溶液)。取兩個(gè)廠(chǎng)家復(fù)溶后的鱟試劑(靈敏度0.06 EU/ml)進(jìn)行檢測(cè)干擾預(yù)實(shí)驗(yàn),其最高不干擾濃度為0.24 mg/ml(表3)。

    2.6 正式干擾試驗(yàn)

    用細(xì)菌內(nèi)毒素檢查用水配制0.24 mg/ml的供試品溶液,濃度為2λ、λ、0.5λ和0.25λ的內(nèi)毒素工作標(biāo)準(zhǔn)品溶液,及含0.24 mg/ml供試品的各濃度供試品陽(yáng)性對(duì)照溶液(PPC溶液)。取兩個(gè)廠(chǎng)家復(fù)溶后的鱟試劑(靈敏度0.06 EU/ml)進(jìn)行檢測(cè),其中供試品陽(yáng)性對(duì)照溶液平行4管,其余各平行2管。供試品溶液及陰性對(duì)照平行管為陰性,陽(yáng)性對(duì)照結(jié)果符合鱟試劑靈敏度復(fù)核試驗(yàn)要求,故實(shí)驗(yàn)有效;PPC溶液結(jié)果符合鱟試劑靈敏度復(fù)核試驗(yàn)要求,故供試品濃度為0.24 mg/ml時(shí),對(duì)檢測(cè)無(wú)干擾(表4)。

    2.7 雷貝拉唑鈉樣品中內(nèi)毒素的檢測(cè)

    取供試品,加細(xì)菌內(nèi)毒素檢查用水配制成濃度為0.06 mg/ml的供試品溶液,用標(biāo)示靈敏度為0.06 EU/ml的鱟試劑檢測(cè),結(jié)果符合規(guī)定(表5)。

    3 討論

    方法篩選過(guò)程中發(fā)現(xiàn)使用靈敏度為0.25 EU/ml的鱟試劑檢測(cè)時(shí),其最高不干擾濃度為0.25 mg/ml,與其最低有效稀釋濃度一致,故采用最低有效稀釋濃度檢測(cè)時(shí),存在PPC管呈陰性的風(fēng)險(xiǎn)。由于其溶液pH不在6.0~8.0這一適宜pH范圍內(nèi),考慮使用稀釋劑Ⅱ作為稀釋劑,將pH調(diào)節(jié)至該范圍內(nèi),但干擾情況未得到改善,且發(fā)現(xiàn)使用該稀釋劑雷貝拉唑鈉溶解度變差,故仍以細(xì)菌內(nèi)毒素檢查用水為溶劑為宜。為減小供試品溶液檢測(cè)濃度,考慮使用小靈敏度的鱟試劑檢驗(yàn),為保證其2C濃度下無(wú)干擾,故選擇靈敏度為0.06 EU/ml的鱟試劑。

    通過(guò)鱟試劑靈敏度復(fù)核試驗(yàn)得到兩個(gè)廠(chǎng)家鱟試劑均符合要求,采用兩個(gè)廠(chǎng)家鱟試劑進(jìn)行干擾預(yù)實(shí)驗(yàn)得到最高不干擾濃度為0.24 mg/ml,并使用該濃度進(jìn)行正式干擾試驗(yàn),得到雷貝拉唑鈉濃度0.24 mg/ml時(shí),對(duì)檢測(cè)無(wú)干擾。

    采用凝膠法測(cè)定細(xì)菌內(nèi)毒素操作簡(jiǎn)單,檢驗(yàn)周期短,對(duì)檢驗(yàn)的要求較低。雷貝拉唑鈉使用標(biāo)示靈敏度為0.06 EU/ml的鱟試劑,采用凝膠法檢測(cè),供試品濃度不大于0.24 mg/ml時(shí),對(duì)檢測(cè)無(wú)干擾。故可采用凝膠法替代家兔法進(jìn)行細(xì)菌內(nèi)毒素檢驗(yàn)。

    參考文獻(xiàn)

    [1] 陸祝選. 雷貝拉唑鈉聯(lián)合用藥治療消化性潰瘍43例臨床觀(guān)察[J]. 中醫(yī)內(nèi)科學(xué), 2009, 4(3): 372-373.

    [2] 張麗. 注射用雷貝拉唑鈉治療非食管胃靜脈曲張上消化道出血的臨床效果分析[J]. 臨床藥學(xué), 2017, 12(7): 87-89.

    [3] 李兆申, 湛先保, 鄒多武. 國(guó)產(chǎn)雷貝拉唑鈉治療十二指腸球部潰瘍的多中心隨機(jī)對(duì)照臨床研究[J]. 上海醫(yī)藥, 2008, 29(2): 83-84.

    [4] 邱楓, 何曉靜, 孫亞欣. 注射用雷貝拉唑鈉在健康人體中的藥動(dòng)學(xué)及安全性研究[J]. 華西藥學(xué)雜志, 2014, 29(2): 176-179.

    [5] 謝建康, 梁文權(quán). 注射用雷貝拉唑鈉的制備及安全性評(píng)價(jià)[J]. 中國(guó)現(xiàn)代應(yīng)用藥學(xué)雜志, 2009, 26(5): 385-387.

    [6] 林金海, 陳曉佳, 丁友玲. 對(duì)活性炭(供注射用)吸附液體中細(xì)菌內(nèi)毒素能力的研究[J]. 上海醫(yī)藥, 2018, 39(21): 12-15.

    [7] 高新貞, 呂文麗, 劉枕. 磷酸氟達(dá)拉濱原料藥細(xì)菌內(nèi)毒素檢查方法的建立[J]. 中國(guó)藥品標(biāo)準(zhǔn), 2018, 19(1): 28-31.

    [8] 陳群英, 鄭馬慶. 藥用輔料苯甲醇細(xì)菌內(nèi)毒素檢查方法學(xué)研究[J]. 山東化工, 2018, 47(7): 68-72.

    [9] 李燕浙. 原料藥生產(chǎn)中的細(xì)菌內(nèi)毒素控制[J]. 化工管理, 2017(8): 270.

    [10] 沈銀忠. 細(xì)菌內(nèi)毒素檢測(cè)方法及其臨床應(yīng)用[J]. 上海醫(yī)藥, 2018, 39(21): 3-6.

    [11] 國(guó)家藥典委員會(huì). 中華人民共和國(guó)藥典(2015年版)四部[M]. 北京: 中國(guó)醫(yī)藥科技出版社, 2015: 154-157.

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