• <tr id="yyy80"></tr>
  • <sup id="yyy80"></sup>
  • <tfoot id="yyy80"><noscript id="yyy80"></noscript></tfoot>
  • 99热精品在线国产_美女午夜性视频免费_国产精品国产高清国产av_av欧美777_自拍偷自拍亚洲精品老妇_亚洲熟女精品中文字幕_www日本黄色视频网_国产精品野战在线观看 ?

    水解驢胎盤提取物對UV誘導(dǎo)皮膚細(xì)胞損傷的保護(hù)作用

    2022-07-06 15:01:19廖峰樊雨梅唐潔劉苓熊麗丹
    安徽農(nóng)業(yè)科學(xué) 2022年12期
    關(guān)鍵詞:保護(hù)作用

    廖峰 樊雨梅 唐潔 劉苓 熊麗丹

    摘要 [目的]探究水解驢胎盤提取物防護(hù)光損傷的效果與作用機(jī)制,旨在填補(bǔ)水解驢胎盤提取物在防護(hù)UV光損傷方面的研究空白,實(shí)現(xiàn)驢胎盤的高值化利用。[方法]采用CCK-8方法探究水解驢胎盤提取物對HS68和HaCaT細(xì)胞增殖率的影響,利用UVA和UVB分別誘導(dǎo)HS68和HaCaT細(xì)胞建立體外光損傷模型,研究水解驢胎盤提取物對UV損傷HS68和HaCaT細(xì)胞的保護(hù)作用。[結(jié)果]0.10%~10.00%(V/V)的水解驢胎盤提取物可顯著促進(jìn)HS68和HaCaT細(xì)胞生長;1.00%和0.50%(V/V)水解驢胎盤提取物可顯著減弱UVB對HaCaT細(xì)胞的損傷,顯著減少細(xì)胞內(nèi)ROS的產(chǎn)生和MDA的分泌,顯著增加細(xì)胞內(nèi)SOD活性;1.00%(V/V)水解驢胎盤提取物可顯著降低UVA輻射HS68細(xì)胞造成的MMP-1、MMP-3和MMP-9 mRNA表達(dá)上升,但不能改善COL Ⅰ和COL Ⅲ mRNA表達(dá)的減少。[結(jié)論]水解驢胎盤提取物能夠防護(hù)UVA和UVB造成的皮膚光損傷,可能與提高抗氧化酶活性、降低脂質(zhì)過氧化程度、抑制金屬蛋白酶的異常分泌有關(guān)。

    關(guān)鍵詞 水解驢胎盤提取物;UVA;UVB;皮膚細(xì)胞;抗光損傷;保護(hù)作用

    中圖分類號 S 879.9? 文獻(xiàn)標(biāo)識碼 A

    文章編號 0517-6611(2022)12-0153-05

    doi:10.3969/j.issn.0517-6611.2022.12.039

    開放科學(xué)(資源服務(wù))標(biāo)識碼(OSID):

    Protective Effects of Hydrolyzed Donkey Placenta Extract on UV-induced Skin Cells Damage

    LIAO Feng1,F(xiàn)AN Yu-mei1,TANG Jie2,3 et al

    (1.National Engineering Research Center for Gelatin-based Traditional Chinese Medicine,Dong-E-E-Jiao Co.,Ltd.,Liaocheng,Shandong 252201;2.Cosmetics Safety and Efficacy Evaluation Center,West China Hospital,Sichuan University,Chengdu,Sichuan 610041;3.Sichuan Engineering Technology Research Center of Cosmetic,Chengdu,Sichuan 610041)

    Abstract [Objective]To explore the effect and mechanism of the hydrolyzed donkey placenta extract in protecting against light damage,aiming to fill the gap in the research of hydrolyzed donkey placental extract in protecting against UV light damage,and realize the high-value utilization of donkey placenta.[Method]The effects of hydrolyzed donkey placenta extract on the proliferation of HS68 and HaCaT cells were studied by CCK-8 method.The photodamage models of HS68 and HaCaT cells induced by UVA and UVB were established.The protective effects of hydrolyzed donkey placenta extract on HS68 and HaCaT cells damaged by UV were studied.[Result]0.10% -10.00%(V/V) of hydrolyzed donkey placenta extract could significantly promote the growth of HS68 and HaCaT cells; 1.00% and 0.50% (V/V) of hydrolyzed donkey placenta extract could significantly attenuate UVB damage to HaCaT cells,significantly reduce intracellular ROS production and MDA secretion,and significantly increase intracellular SOD enzyme activity.1.00% (V/V) of hydrolyzed donkey placenta extract could significantly reduce the increase of MMP-1,MMP-3 and MMP-9 mRNA expression induced by UVA radiation in HS68 cells,but could not improve the decrease of COL Ⅰ and COL Ⅲ mRNA expression.[Conclusion]The hydrolyzed donkey placenta extract can protect the skin from photodamage caused by UVA and UVB,which may be related to increasing the activity of antioxidant enzymes,reducing the degree of lipid peroxidation,and inhibiting the abnormal secretion of metalloproteinases.06B1975A-ED6D-4890-8ABF-B47D9EA968F3

    Key words Hydrolyzed donkey placenta extract;UVA;UVB;Skin cells;Anti-photodamage;Protective effect

    胎盤作為妊娠期母體的臨時性器官,富含免疫球蛋白、膠原蛋白、激素、生長因子、細(xì)胞因子、氨基酸、糖胺聚糖、酶和微量元素等活性成分[1-2],這些活性成分與胎盤提取物的生物活性有著密切的關(guān)系[3-4]?,F(xiàn)代藥理研究表明,胎盤提取物具有抗炎[5]、抗氧化[6]、抗皺[7]、抗過敏[8]、改善黑色素代謝異常[9]、改善皮膚干燥和促進(jìn)膠原合成[10]等作用,已被用于多種皮膚病的治療且效果明顯,包括接觸性皮炎[8]、脫發(fā)[11]、痤瘡瘢痕[12]和傷口愈合[3]等。鑒于胎盤提取物的良好效果,胎盤提取物廣泛應(yīng)用于臨床和美容領(lǐng)域。許多國家開發(fā)了胎盤提取物相關(guān)護(hù)膚產(chǎn)品,如護(hù)膚霜、乳液等[3]。已有研究證實(shí),口服豬胎盤提取物能夠有效改善皮膚干燥、皮膚屏障功能、彈性和皺紋[13-14]。進(jìn)一步證實(shí),口服豬胎盤提取物[14]和使用豬胎盤提取物凝膠[15]可有效改善中波紫外線(UVB)造成的氧化損傷、經(jīng)皮失水量的增加與皺紋形成。有研究證實(shí),豬胎盤提取物能夠明顯提高UVB光損傷角質(zhì)形成細(xì)胞的活性、降低細(xì)胞活性氧自由基(ROS)水平、增加超氧化物歧化酶(SOD)的表達(dá)[15-16]。然而,長波紫外線(UVA)穿透能力較強(qiáng),能直達(dá)皮膚真皮層,也是導(dǎo)致光老化的主要原因,目前對于胎盤提取物防護(hù)UVA的研究較少。因此,胎盤提取物作為護(hù)膚產(chǎn)品的抗光損傷效果和作用機(jī)制尚未被全面研究。

    化妝品中禁止使用人胎盤和牛胎盤,所以豬胎盤、羊胎盤的使用較為廣泛。水解驢胎盤提取物作為一種具有開發(fā)前景的護(hù)膚品原料,相關(guān)應(yīng)用報道較少。而且,目前有關(guān)驢的疫病國內(nèi)外鮮見相關(guān)文獻(xiàn)報道[17],可見相比于豬羊,驢胎盤相對安全。因此,筆者利用UVA和UVB分別誘導(dǎo)HS68細(xì)胞和HaCaT細(xì)胞損傷建立體外光損傷模型,探討水解驢胎盤提取物(hydrolyzed donkey placenta extract,HDPE)對UV損傷皮膚細(xì)胞的保護(hù)作用,旨在為水解驢胎盤提取物改善UV造成的光損傷提供了一定的研究基礎(chǔ),填補(bǔ)水解驢胎盤提取物在防護(hù)UV光損傷方面的研究空白,實(shí)現(xiàn)驢胎盤的高值化利用。

    1 材料與方法

    1.1 試驗(yàn)材料

    1.1.1 試劑。DMEM培養(yǎng)基、胎牛血清(FBS),美國Gibco公司;八肽膽囊收縮素(CCK-8),日本同仁化學(xué)研究所;總SOD活性檢測試劑盒,南京建成生物研究所;脂質(zhì)氧化MDA檢測試劑盒,上海碧云天生物技術(shù)有限公司;Trizol RNA提取試劑,賽默飛世爾科技;反轉(zhuǎn)錄試劑盒(HiScript Ⅱ Q Select RT SuperMix for qPCR,+gDNA wiper)、實(shí)時熒光定量PCR試劑盒(AceQ qPCR SYBR Green Master Mix),南京諾唯贊生物科技有限公司;引物由成都擎科梓熙生物技術(shù)有限公司合成。

    1.1.2 試材。永生化人角質(zhì)形成細(xì)胞(HaCaT),中國科學(xué)院昆明細(xì)胞庫;人成纖維細(xì)胞(HS68),美國ATCC細(xì)胞庫;驢胎盤由東阿阿膠股份有限公司提供。

    1.1.3 儀器。酶標(biāo)儀、CFX-connect熒光定量PCR儀,美國Bio-Bad公司;倒置熒光顯微鏡,日本Olympus公司;ND-2000超微量核酸蛋白測定儀,美國Nano Drop公司;SS-04A型UVA儀、SS-04B型UVB儀,上海適瑪公司。

    1.2 試驗(yàn)方法

    1.2.1 HDPE的制備。取新鮮驢胎盤樣品,先用生理鹽水沖洗干凈,并用手術(shù)器械去除筋膜和臍帶。然后用自來水清洗數(shù)次,直至去除淤血。脫水絞碎后,1∶1加入蒸餾水,再加入MgCl2,加熱到70 ℃后保持30 min。經(jīng)木瓜蛋白酶和胰蛋白酶酶解,滅酶后過濾,上清液經(jīng)0.22 μm濾膜過濾后,即為水解驢胎盤提取物。

    1.2.2 HDPE對細(xì)胞存活率的影響。HaCaT細(xì)胞、HS68細(xì)胞用含10%胎牛血清的DMEM培養(yǎng)基于37 ℃、5% CO2的培養(yǎng)箱內(nèi)培養(yǎng)。將培養(yǎng)皿中生長至80%左右的HaCaT細(xì)胞、HS68細(xì)胞回收至離心管中,通過細(xì)胞計數(shù)儀計數(shù),按照2.0×104~8.0×104 cells/孔接種至24孔細(xì)胞培養(yǎng)板中,培養(yǎng)24 h。試驗(yàn)分為HDPE處理組(25.00%、10.00%、1.00%、0.10%、0.01%,V/V)和空白對照組。在37 ℃培養(yǎng)箱中繼續(xù)培養(yǎng)24 h。培養(yǎng)板內(nèi)加入適量CCK-8 后培養(yǎng)4 h,測定450 nm吸光度,計算細(xì)胞在HDPE各體積分?jǐn)?shù)作用下的存活率。

    1.2.3 細(xì)胞分組處理。培養(yǎng)皿中生長至80%左右的HaCaT細(xì)胞,按照3.0×105~4.0×105 cells/孔接種至6孔細(xì)胞培養(yǎng)板中,培養(yǎng)24 h。試驗(yàn)分為空白對照組、模型對照組和HDPE處理組(1.00%、0.50%和0.10%,V/V)。根據(jù)試驗(yàn)分組設(shè)定,分別將配制好的待測物添加至HaCaT細(xì)胞內(nèi),在37 ℃培養(yǎng)箱中培養(yǎng)過夜24 h。倒掉培養(yǎng)液,每孔添加2 mL磷酸鹽緩沖液(PBS),放置于UVB輻照儀下,輻照能量30 mJ/cm2??瞻讓φ战M不照射UVB。棄去PBS,換成不含血清的培養(yǎng)基,培養(yǎng)6 h后,Trizol處理細(xì)胞并收集細(xì)胞用于mRNA表達(dá)檢測。

    將融合至約80%的HS68細(xì)胞按照3.0×105~4.0×105 cells/孔接種于6孔板中,置于37 ℃、5% CO2恒溫培養(yǎng)箱中培養(yǎng)24 h。棄培養(yǎng)基,加入PBS,經(jīng)5 J/cm2 UVA輻射后,分為UVA對照組(加DMEM培養(yǎng)基)和HDPE處理組(1.00%、0.50%、0.10%,V/V)。培養(yǎng)6 h后,Trizol處理細(xì)胞并收集細(xì)胞用于mRNA表達(dá)檢測。06B1975A-ED6D-4890-8ABF-B47D9EA968F3

    1.2.4 UV輻照后水解驢胎盤提取物對細(xì)胞存活率的影響。同“1.2.2”的方法測定UV 輻照后水解驢胎盤提取物對細(xì)胞存活率的影響。

    1.2.5 細(xì)胞氧化水平的測定。細(xì)胞內(nèi)超氧化物歧化酶(SOD)、脂質(zhì)氧化產(chǎn)物丙二醛(MDA)的測定按照試劑盒的說明進(jìn)行檢測。

    1.2.6 細(xì)胞內(nèi)膠原蛋白mRNA表達(dá)的測定。

    Trizol處理細(xì)胞后,提取總RNA,根據(jù)試劑盒反轉(zhuǎn)錄cDNA,以 cDNA 為模板擴(kuò)增MMP-1、MMP-3、MMP-9、COL Ⅰ、COL Ⅲ,在預(yù)試驗(yàn)探索出的反應(yīng)條件下進(jìn)行RT-PCR 反應(yīng)?;蛞镄蛄幸姳?。統(tǒng)計Ct值,計算相對表達(dá)情況進(jìn)行結(jié)果分析。

    1.3 統(tǒng)計分析

    應(yīng)用SPSS 17.0統(tǒng)計軟件進(jìn)行數(shù)據(jù)分析,試驗(yàn)重復(fù)3次,數(shù)據(jù)結(jié)果以均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差(±S)表示。多組數(shù)據(jù)差異比較采用方差分析,兩組間差異比較采用t檢驗(yàn)。

    2 結(jié)果與分析

    2.1 HDPE對UVB所誘導(dǎo)的HaCaT細(xì)胞損傷的保護(hù)作用

    2.1.1 HDPE對HaCaT細(xì)胞存活率的影響。

    采用CCK-8測定HDPE對HaCaT細(xì)胞存活率的影響,結(jié)果如圖1所示。水解驢胎盤提取物對HaCaT細(xì)胞存活率的影響受處理濃度調(diào)控,當(dāng)給藥濃度在25.00%時,驢胎盤提取物對HaCaT細(xì)胞具有明顯的抑制效果(P<0.01);給藥濃度在0.10%~10.0%,驢胎盤提取物可顯著促進(jìn)HaCaT細(xì)胞生長(P<0.01)。由此可 見,10.00%及以下濃度為HDPE處理HaCaT細(xì)胞的安全濃度。

    2.1.2 HDPE對HaCaT細(xì)胞增殖的影響。

    HDPE以劑量依賴方式防護(hù)UVB輻射造成的HaCaT細(xì)胞損傷,見圖2。與空白對照組相比,UVB輻射模型組細(xì)胞存活率降低至86.11%,差異具有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.01),表明UVB輻射模型構(gòu)建成功。與模型組相比,提前加入1.00%、0.50%和0.10%的HDPE分別使細(xì)胞存活率提升23.06%、11.59%和6.53%,其中1.00%和0.50%差異顯著(P<0.01)。可見,1.00%、0.50%的HDPE能夠顯著改善UVB造成的HaCaT細(xì)胞損傷。

    2.1.3 HDPE對細(xì)胞SOD活性的影響。

    過量的UV輻射皮膚后,促使機(jī)體產(chǎn)生大量ROS,當(dāng)積聚在體內(nèi)的ROS超過機(jī)體正常清除自由基的能力時,會對機(jī)體產(chǎn)生破壞性的生物學(xué)效應(yīng)。SOD是生物體主要的抗氧化酶之一,能通過多種內(nèi)源性細(xì)胞防御系統(tǒng)清除產(chǎn)生的氧自由基,防止脂質(zhì)過氧化及其中間代謝產(chǎn)物對機(jī)體的損害。采用商品化試劑盒測定細(xì)胞內(nèi)SOD活性,結(jié)果如圖3所示。與模型組相比,1.00%和0.50% HDPE處理過的細(xì)胞SOD活性分別增高9.83%和8.75%,但差異不具有統(tǒng)計學(xué)意義(P>0.05)。

    2.1.4 HDPE對細(xì)胞MDA含量的影響。過量UVB照射皮膚,導(dǎo)致ROS大量積累,ROS不僅破壞細(xì)胞本身抗氧化酶,而且破壞細(xì)胞DNA、蛋白質(zhì),引起細(xì)胞脂質(zhì)過氧化,導(dǎo)致氧化產(chǎn)物MDA含量增加,影響線粒體呼吸鏈復(fù)合物及線粒體內(nèi)關(guān)鍵酶活性。MDA作為細(xì)胞脂質(zhì)過氧化的終產(chǎn)物,可反映膜脂質(zhì)過氧化的程度。采用商品化試劑盒測定細(xì)胞MDA含量,結(jié)果如圖4所示,與空白對照組比較,模型組細(xì)胞MDA含量顯著增加(P<0.05),表明HaCaT細(xì)胞正常的抗氧化能力受到損傷,細(xì)胞膜的結(jié)構(gòu)和功能遭到一定程度破壞。與模型組相比,1.00%、0.50%和0.10%的HDPE對細(xì)胞MDA含量增加有抑制作用,抑制率分別為105.00%、85.00%和16.87%,1.00%和0.50%組差異具有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.01),表明HDPE能一定程度抑制HaCaT細(xì)胞MDA含量,修復(fù)UVB輻射造成的細(xì)胞膜氧化損傷。

    2.2 HDPE對UVA所誘導(dǎo)的HS68細(xì)胞損傷的保護(hù)作用

    2.2.1 HDPE對HS68細(xì)胞存活率的影響。從圖5可以看出,HDPE濃度在10.00%~25.00%時,HDPE顯著抑制HS68細(xì)胞生長(P<0.01);HDPE濃度在0.01%~1.00%時,HDPE顯著促進(jìn)HS68細(xì)胞生長(P<0.01)。結(jié)果表明,1.00%及以下濃度是HDPE對HS68細(xì)胞的安全濃度。

    2.2.2 HDPE對膠原mRNA表達(dá)的影響。膠原是皮膚真皮層的主要成分,由Ⅰ型膠原(type Ⅰ collage,COL Ⅰ;85%~90%)、Ⅲ型膠原(type Ⅲ collage,COL Ⅲ;10%~15%)和其他類型膠原構(gòu)成,是皮膚強(qiáng)度和彈性的物質(zhì)基礎(chǔ)。UV輻射可通過誘導(dǎo) Ⅰ 型和 Ⅲ 型膠原的基因表達(dá)下調(diào),引發(fā)成熟膠原的降解和影響膠原蛋白的合成[18-19],導(dǎo)致皮膚彈性下降,產(chǎn)生松弛、皺紋等現(xiàn)象[20]。UVA照射導(dǎo)致HS68細(xì)胞COL Ⅰ和COL Ⅲ mRNA表達(dá)下降,但是HDPE在試驗(yàn)研究劑量范圍內(nèi)并不能改善此效果(圖6)。與模型組相比,加入HDPE后的HS68細(xì)胞的COL Ⅰ、COL Ⅲ的mRNA表達(dá)均顯著下降 (P<0.01)。說明試驗(yàn)劑量范圍內(nèi),HDPE不能修復(fù)UVA輻射造成的HS68細(xì)胞COL Ⅰ和COL Ⅲ mRNA表達(dá)的下降。

    2.2.3 HDPE對MMPs mRNA表達(dá)的影響。

    基質(zhì)金屬蛋白酶(matrix metalloproteinases,MMPs)在關(guān)節(jié)炎、皮膚老化、腫瘤侵襲和轉(zhuǎn)移等疾病病理過程中的組織破壞中起重要作用[21]。UV通過激活細(xì)胞信號轉(zhuǎn)導(dǎo)通路誘導(dǎo)表皮和真皮細(xì)胞MMP-1、MMP-3和MMP-9的表達(dá),降解真皮細(xì)胞外基質(zhì)的膠原蛋白和其他蛋白[22]。經(jīng)UV輻射后,皮膚角質(zhì)形成細(xì)胞與成纖維細(xì)胞合成分泌的MMP-1和MMP-3量及其mRNA水平顯著增加[23]。利用RT-PCR技術(shù)分析HDPE對UVA輻射HS68細(xì)胞MMP-1、MMP-3和MMP-9 mRNA表達(dá)的影響,結(jié)果發(fā)現(xiàn)(圖7),HDPE以劑量依賴方式影響MMP-1、MMP-3和MMP-9 mRNA的表達(dá)。與模型組相比,1.00%、0.50%和0.10%的HDPE均顯著降低MMP-1的表達(dá)(P<0.01),1.00%的HDPE均顯著降低MMP-3和MMP-9 mRNA的表達(dá)(P<0.01),但是0.50%和0.10%的HDPE顯著增加MMP-3和MMP-9 mRNA的表達(dá)(P<0.01)。試驗(yàn)結(jié)果表明,使用1.00%的HDPE可顯著緩解UVA輻射HS68細(xì)胞所致MMP-1、MMP-3和MMP-9 mRNA表達(dá)的增加,從而減少UVA對膠原蛋白的降解。06B1975A-ED6D-4890-8ABF-B47D9EA968F3

    3 討論

    紫外輻射、空氣污染、不良生活習(xí)慣等均能導(dǎo)致皮膚老化,而紫外輻射是造成皮膚光老化的最主要因素。紫外線包含UVA、UVB、UVC,其中UVC在通過臭氧層時大部分被吸收,到達(dá)地球表面的紫外線主要包含UVA和UVB。紫外輻射對皮膚產(chǎn)生的影響包括色素沉著、皮膚老化、皮膚癌癥易感性增加以及毛細(xì)血管擴(kuò)張等。UVA誘導(dǎo)產(chǎn)生ROS,過量ROS引起機(jī)體多種生物學(xué)效應(yīng),如脂質(zhì)過氧化、激活轉(zhuǎn)錄因子和產(chǎn)生DNA鏈斷裂等[24],導(dǎo)致MMPs累積、彈性蛋白變性、膠原蛋白降解,造成皮膚光老化。UVB可通過直接損傷DNA或誘導(dǎo)產(chǎn)生自由基等機(jī)制損害皮膚[24],是產(chǎn)生良性或惡性腫瘤的主要因素[25]。因此,尋找有效的抗光老化方法已成為研究熱點(diǎn)。多項研究表明,口服胎盤提取物具有顯著的抗氧化活性,能夠有效改善UVB造成皮膚損傷和老化,但胎盤提取物是否對UVA造成的光老化有保護(hù)作用鮮見報道。

    該試驗(yàn)研究發(fā)現(xiàn),1.00%、0.50%的水解驢胎盤提取物能夠明顯提高UVB光損傷HaCaT細(xì)胞活性,與Park等[15]的報道一致。1.00%、0.50%的水解驢胎盤提取物能夠提高SOD活性,降低MDA含量。Yamasaki等[16]研究證實(shí),豬胎盤提取物能夠增加UV輻射的黑色素瘤細(xì)胞SOD-1、SOD-3和過氧化酶的表達(dá),但是對SOD-2的表達(dá)沒有影響。然而,Yoshimoto等[26]研究發(fā)現(xiàn)豬胎盤提取物調(diào)節(jié)正常黑色素細(xì)胞的黑色素合成可能與SOD-2酶參與的線粒體呼吸有關(guān);去除滲出物和不溶性物質(zhì)(包括脂質(zhì))的豬胎盤提取物反而能夠促進(jìn)黑色素的合成和抑制SOD-2酶表達(dá)。因此,推測胎盤提取物所含功效成分不同,可能是導(dǎo)致研究結(jié)果有差異的原因之一。Park等[27]利用動物試驗(yàn)證實(shí),甘氨酰-L-亮氨酸、L-亮氨酰-甘氨酸是胎盤提取物保護(hù)皮膚免受UVB損傷的主要功效物質(zhì)。因此,需進(jìn)一步明確水解驢胎盤提取物防護(hù)光老化的主要功效成分與具體作用通路。

    1.00%的水解驢胎盤提取物可顯著緩解UVA輻射所致MMP-1、MMP-3和MMP-9 mRNA表達(dá)的增加。Hong等[14]也報道豬胎盤物能夠顯著降低MMP-2、MMP-9的表達(dá)量。多項研究結(jié)果表明,胎盤提取物能夠有效改善皮膚彈性與皺紋[7,13-14]。Ⅰ 型膠原和Ⅲ型膠原是皮膚強(qiáng)度和彈性的主要物質(zhì)基礎(chǔ),推測胎盤提取物能夠有效提升 Ⅰ 型膠原和Ⅲ型膠原的表達(dá)。該試驗(yàn)研究發(fā)現(xiàn),0.10%~1.00%的水解驢胎盤蛋白并不能改善UVA造成 Ⅰ 型膠原和Ⅲ型膠原表達(dá)的下降。因此,需進(jìn)一步全面研究水解驢胎盤提取物對UVA的防護(hù)作用,考慮是不是與水解驢胎盤提取物種的成分有關(guān)。

    綜上所述,該試驗(yàn)研究證實(shí)水解驢胎盤提取物對UVA和UVB導(dǎo)致的細(xì)胞光損傷均有保護(hù)作用,推測其機(jī)制與提高抗氧化酶活性、降低脂質(zhì)過氧化程度、抑制金屬蛋白酶的異常分泌有關(guān)。該試驗(yàn)對水解驢胎盤提取物抗皮膚光老化作用及其機(jī)制進(jìn)行了研究,填補(bǔ)水解驢胎盤提取物在防護(hù)UV光損傷方面的研究空白,旨在實(shí)現(xiàn)驢胎盤的高值化利用,增加農(nóng)民收入,提升農(nóng)民養(yǎng)驢積極性。

    參考文獻(xiàn)

    [1]

    TOGASHI S I,TAKAHASHI N,IWAMA M,et al.Antioxidative collagen-derived peptides in human-placenta extract[J].Placenta,2002,23(6):497-502.

    [2] 李小梅.豬胎盤肽凍干粉的制備及功效考察[D].揚(yáng)州:揚(yáng)州大學(xué),2016:10-13,42-53.

    [3] CHAKRABORTY P D,BHATTACHARYYA D.Isolation of fibronectin type III like peptide from human placental extract used as wound healer[J].Journal of chromatography B,2005,818(1):67-73.

    [4] DE D,CHAKRABORTY P D,BHATTACHARYYA D.Analysis of free and bound NADPH in aqueous extract of human placenta used as wound healer[J].Journal of chromatography B,2009,877(24):2435-2442.

    [5] TEBAKARI M,DAIGO Y,ISHIKAWA H,et al.Anti-inflammatory effect of the water-soluble portion of porcine placental extract in lipopolysaccharide-stimulated RAW264.7 murine macrophage cells[J].Biological & pharmaceutical bulletin,2018,41(8):1251-1256.

    [6] PARK S Y,PHARK S,LEE M,et al.Anti-oxidative and anti-inflammatory activities of placental extracts in benzo[a]pyrene-exposed rats[J].Placenta,2010,31(10):873-879.

    [7] YOSHIKAWA C,KOIKE K,TAKANO F,et al.Efficacy of porcine placental extract on wrinkle widths below the eye in climacteric women[J].Climacteric,2014,17(4):370-376.06B1975A-ED6D-4890-8ABF-B47D9EA968F3

    [8] JASH A,KWON H K,SAHOO A,et al.Topical application of porcine placenta extract inhibits the progression of experimental contact hypersensitivity[J].Journal of ethnopharmacology,2011,133(2):654-662.

    [9] PAL P,MALLICK S,MANDAL S K,et al.A human placental extract:in vivo and in vitro assessments of its melanocyte growth and pigment-inducing activities[J].International journal of dermatology,2002,41(11):760-767.

    [10] CHO H R,RYOU J H,LEE J W,et al.The effects of placental extract on fibroblast proliferation[J].Journal of cosmetic science,2008,59(3):195-202.

    [11] BARAT T,ABDOLLAHIMAJD F,DADKHAHFAR S,et al.Evaluation of the efficacy and safety of cow placenta extract lotion versus minoxidil 2% in the treatment of female pattern androgenetic alopecia[J].International journal of women′s dermatology,2020,6(4):318-321.

    [12] PHONCHAI R,NAIGOWIT P,UBONSAEN B,et al.Improvement of atrophic acne scar and skin complexity by combination of aqueous human placenta extract and mesenchymal stem cell mesotherapy[J].Journal of cosmetics,dermatological sciences and applications,2020,10(1):1-7.

    [13] NAGAE M,NAGATA M,TERAMOTO M,et al.Effect of porcine placenta extract supplement on skin condition in healthy adult women:A randomized,double-blind placebo-controlled study[J].Nutrients,2020,12(6):1-12.

    [14] HONG K B,PARK Y,KIM J H,et al.Effects of porcine placenta extract ingestion on ultraviolet B-induced skin damage in hairless mice[J].Korean journal for food science of animal resources,2015,35(3):413-420.

    [15] PARK Y,HAN B K,CHOI H S,et al.Effect of porcine placenta extract from subcritical water extraction on photodamage in human keratinocytes[J].Korean society for food science of animal recources,2015,35(2):164-170.

    [16] YAMASAKI M,HASEGAWA S,TAKAHASHI H,et al.Placental extracts induce the expression of antioxidant enzyme genes and suppress melanogenesis in B16 melanoma cells[J].Natural product research,2015,29(22):2103-2106.

    [17] 劉憲斌,王仁虎,姜桂苗,等.規(guī)模驢場主要傳染性疫病的流行特點(diǎn)及風(fēng)險分析[J].黑龍江畜牧獸醫(yī),2018(4):99-104.

    [18] GRIFFITHS C E,RUSSMAN A N,MAJMUDAR G,et al.Restoration of collagen formation in photodamaged human skin by tretinoin (retinoic acid)[J].New England journal of medicine,1993,329(8):530-535.

    [19] FISHER G J,DATTA S,WANG Z Q,et al.C-Jun-dependent inhibition of cutaneous procollagen transcription following ultraviolet irradiation is reversed by all-trans retinoic acid[J].The journal of clinical investigation,2000,106(5):663-670.06B1975A-ED6D-4890-8ABF-B47D9EA968F3

    [20] HELFRICH Y R,SACHS D L,VOORHEES J J.Overview of skin aging and photoaging[J].Dermatology nursing,2008,20(3):177-184.

    [21] FISHER G J,WANG Z Q,DATTA S C,et al.Pathophysiology of premature skin aging induced by ultraviolet light[J].The New England journal of medicine,1997,337(20):1419-1428.

    [22] RIGEL D S,WEISS R A,LIM H W,et al.Photoaging[M].New York:Marcel Dekker,Inc.,2004:5-9,27-28.

    [23] 夏濟(jì)平,宋秀祖,畢志剛.紫外線對皮膚角質(zhì)形成細(xì)胞和成纖維細(xì)胞產(chǎn)生MMP-1和MMP-3的影響 [J].中國麻風(fēng)皮膚病雜志,2006,22(1):11-13.

    [24] ICHIHASHI M,UEDA M,BUDIYANTO A,et al.UV-induced skin damage[J].Toxicology,2003,189(1/2):21-39.

    [25] TRUCHUELO M T,JIMNEZ N,MIGUEL-GOMEZ L,et al.Histological and immunohistochemical evaluation of the efficacy of a new cosmetic formulation in the treatment of skin photoaging[J].Dermatology research and practice,2017,2017:1-10.

    [26] YOSHIMOTO S,OHAGI Y,YOSHIDA M,et al.Placental extracts regulate melanin synthesis in normal human melanocytes with alterations of mitochondrial respiration[J].Experimental dermatology,2019,28(S1):50-54.

    [27] PARK J I,LEE J E,SHIN H J,et al.Oral administration of glycine and leucine dipeptides improves skin hydration and elasticity in uvb-irradiated hairless mice[J].Biomolecules & therapeutics,2017,25(5):528-534.06B1975A-ED6D-4890-8ABF-B47D9EA968F3

    猜你喜歡
    保護(hù)作用
    荊芥揮發(fā)油對內(nèi)毒素中毒模型小鼠的保護(hù)作用
    葛根素對鎘致大鼠生長性能和血液學(xué)指標(biāo)損傷的保護(hù)作用
    三種不同包衣材料對五種益生菌保存期的研究
    明黨參根皮中五種香豆素對H2O2誘導(dǎo)的HUVEC的保護(hù)作用研究
    價值工程(2016年36期)2017-01-11 23:19:46
    銀杏內(nèi)酯對小鼠急性酒精性肝損傷的保護(hù)作用
    顯露喉返神經(jīng)在高風(fēng)險甲狀腺手術(shù)中對喉返神經(jīng)保護(hù)作用
    丁苯酞治療急性缺血性腦卒中的療效及對患者的保護(hù)作用分析
    阿托伐他汀鈣對冠心病心功能不全患者腎功能的保護(hù)作用
    注射用七葉皂苷鈉對腦神經(jīng)功能的保護(hù)作用
    魔芋精粉對大鼠酒精性肝損傷保護(hù)作用的研究
    国产伦在线观看视频一区| 水蜜桃什么品种好| 日韩,欧美,国产一区二区三区| 在现免费观看毛片| 2021少妇久久久久久久久久久| 久久精品国产自在天天线| 99久久人妻综合| 国产av国产精品国产| 国产av不卡久久| 亚洲av国产av综合av卡| 99视频精品全部免费 在线| 久久久久久久久久人人人人人人| 大又大粗又爽又黄少妇毛片口| 成年女人在线观看亚洲视频 | 青春草国产在线视频| 在线免费观看的www视频| 久久精品综合一区二区三区| 国产精品三级大全| 国产伦一二天堂av在线观看| 伦理电影大哥的女人| 国产亚洲av片在线观看秒播厂 | 国产高潮美女av| 国产精品综合久久久久久久免费| 黄片无遮挡物在线观看| 草草在线视频免费看| 国产成人精品婷婷| 成人午夜高清在线视频| 麻豆成人午夜福利视频| 蜜桃亚洲精品一区二区三区| 一级爰片在线观看| 欧美高清成人免费视频www| 精品国产露脸久久av麻豆 | 夫妻午夜视频| 中文精品一卡2卡3卡4更新| 国产成人精品婷婷| 女人久久www免费人成看片| 午夜福利高清视频| 又大又黄又爽视频免费| 免费电影在线观看免费观看| 国产精品av视频在线免费观看| av在线播放精品| 搡老乐熟女国产| 精品久久久久久久末码| 狂野欧美激情性xxxx在线观看| 别揉我奶头 嗯啊视频| 一级爰片在线观看| 成人午夜精彩视频在线观看| 亚洲人成网站在线观看播放| 丝瓜视频免费看黄片| 午夜福利成人在线免费观看| 国产精品久久视频播放| 一二三四中文在线观看免费高清| 国产精品人妻久久久影院| 精品一区二区免费观看| 日韩三级伦理在线观看| 亚洲av福利一区| 五月伊人婷婷丁香| 国产黄频视频在线观看| 亚洲真实伦在线观看| 亚洲精品日韩在线中文字幕| av在线观看视频网站免费| 在线观看一区二区三区| 免费高清在线观看视频在线观看| 26uuu在线亚洲综合色| 久久久久久久久大av| 亚洲一级一片aⅴ在线观看| 国产欧美另类精品又又久久亚洲欧美| 少妇被粗大猛烈的视频| 只有这里有精品99| 精品酒店卫生间| 亚洲av一区综合| 五月玫瑰六月丁香| 青春草亚洲视频在线观看| 综合色丁香网| 一二三四中文在线观看免费高清| 91久久精品国产一区二区成人| 久久久久久国产a免费观看| 国产国拍精品亚洲av在线观看| 国产av在哪里看| 欧美日韩亚洲高清精品| 女人久久www免费人成看片| 国产中年淑女户外野战色| 亚洲丝袜综合中文字幕| 天美传媒精品一区二区| 久久精品熟女亚洲av麻豆精品 | 国内精品一区二区在线观看| 精品一区在线观看国产| 免费av不卡在线播放| 狂野欧美白嫩少妇大欣赏| 天堂√8在线中文| 久久国产乱子免费精品| 不卡视频在线观看欧美| 中文字幕免费在线视频6| 精品人妻熟女av久视频| 国语对白做爰xxxⅹ性视频网站| 国产精品无大码| 麻豆av噜噜一区二区三区| 一级毛片 在线播放| 美女cb高潮喷水在线观看| 97热精品久久久久久| 91精品一卡2卡3卡4卡| 亚洲av不卡在线观看| 非洲黑人性xxxx精品又粗又长| 久久久久久久午夜电影| 哪个播放器可以免费观看大片| 亚洲人与动物交配视频| 亚洲av成人精品一二三区| 精品久久久久久久久av| 免费电影在线观看免费观看| 99九九线精品视频在线观看视频| 久久久色成人| 午夜爱爱视频在线播放| 色视频www国产| 亚洲精品成人av观看孕妇| 欧美3d第一页| 美女高潮的动态| 特大巨黑吊av在线直播| 亚洲人成网站在线播| 男人爽女人下面视频在线观看| 一区二区三区免费毛片| 一区二区三区四区激情视频| 我要看日韩黄色一级片| 久久99蜜桃精品久久| av播播在线观看一区| 成年av动漫网址| 搡女人真爽免费视频火全软件| 精品久久久噜噜| 免费观看av网站的网址| 听说在线观看完整版免费高清| 毛片一级片免费看久久久久| 色5月婷婷丁香| 亚洲精品影视一区二区三区av| 国产v大片淫在线免费观看| 国产免费一级a男人的天堂| 高清毛片免费看| 在线a可以看的网站| 国产久久久一区二区三区| 99久久中文字幕三级久久日本| 日韩av不卡免费在线播放| 精品一区二区三区视频在线| 啦啦啦韩国在线观看视频| 色综合色国产| 亚洲av.av天堂| 欧美一级a爱片免费观看看| 免费观看性生交大片5| 免费av不卡在线播放| 嘟嘟电影网在线观看| .国产精品久久| 一级毛片黄色毛片免费观看视频| 亚洲国产欧美在线一区| 精品久久久久久电影网| 在线观看人妻少妇| 性插视频无遮挡在线免费观看| 国产白丝娇喘喷水9色精品| 观看免费一级毛片| 午夜精品在线福利| 男人爽女人下面视频在线观看| 欧美成人午夜免费资源| 亚洲,欧美,日韩| 成年版毛片免费区| 亚洲真实伦在线观看| 91av网一区二区| 国产午夜精品久久久久久一区二区三区| 看十八女毛片水多多多| 伊人久久精品亚洲午夜| 欧美三级亚洲精品| 久久精品国产自在天天线| 欧美性猛交╳xxx乱大交人| 80岁老熟妇乱子伦牲交| 日日撸夜夜添| 亚洲精品久久久久久婷婷小说| 男人舔奶头视频| 亚洲激情五月婷婷啪啪| 国产精品国产三级专区第一集| 国产成人91sexporn| 99久久中文字幕三级久久日本| 黄片wwwwww| 精品久久久久久电影网| 99久久九九国产精品国产免费| 色网站视频免费| 最近中文字幕2019免费版| 男的添女的下面高潮视频| 男的添女的下面高潮视频| 亚洲乱码一区二区免费版| 九九久久精品国产亚洲av麻豆| 亚洲av国产av综合av卡| 大片免费播放器 马上看| 一区二区三区四区激情视频| 亚洲国产精品成人综合色| 国产精品嫩草影院av在线观看| 国产片特级美女逼逼视频| 男女国产视频网站| 亚洲精品色激情综合| 久久久国产一区二区| 最新中文字幕久久久久| 国产一区亚洲一区在线观看| 少妇的逼好多水| 国产一区亚洲一区在线观看| 最新中文字幕久久久久| 亚洲熟女精品中文字幕| 久久久欧美国产精品| 日韩成人伦理影院| 天天一区二区日本电影三级| 免费人成在线观看视频色| 欧美+日韩+精品| 人人妻人人澡人人爽人人夜夜 | 在线a可以看的网站| 国产黄色视频一区二区在线观看| 精品久久久久久久久亚洲| 精品午夜福利在线看| 一级毛片黄色毛片免费观看视频| 少妇高潮的动态图| 久久久久久久久久久免费av| 永久网站在线| 亚洲精品亚洲一区二区| 国产不卡一卡二| 国产黄a三级三级三级人| 97在线视频观看| 欧美另类一区| 久久久精品欧美日韩精品| 中文精品一卡2卡3卡4更新| 精品一区二区免费观看| 色网站视频免费| 国产免费一级a男人的天堂| 亚洲精品自拍成人| 天堂中文最新版在线下载 | 综合色av麻豆| a级毛片免费高清观看在线播放| 精品久久国产蜜桃| 久久久精品欧美日韩精品| 超碰av人人做人人爽久久| 亚洲欧洲日产国产| 乱人视频在线观看| 久久久久久国产a免费观看| 国产成年人精品一区二区| 国内揄拍国产精品人妻在线| 国产精品人妻久久久影院| 国产精品日韩av在线免费观看| 欧美性猛交╳xxx乱大交人| av一本久久久久| 男女边吃奶边做爰视频| 超碰av人人做人人爽久久| 国产精品久久视频播放| 午夜福利在线观看吧| 欧美成人a在线观看| 日韩亚洲欧美综合| 国产精品嫩草影院av在线观看| 亚洲精品日本国产第一区| 99热全是精品| 亚洲精品成人av观看孕妇| 欧美 日韩 精品 国产| 亚洲精品一区蜜桃| 又黄又爽又刺激的免费视频.| av在线老鸭窝| av专区在线播放| 日韩,欧美,国产一区二区三区| 亚洲真实伦在线观看| 黄色一级大片看看| 国产精品综合久久久久久久免费| 国产精品久久久久久精品电影| 国产午夜精品久久久久久一区二区三区| 汤姆久久久久久久影院中文字幕 | 午夜福利高清视频| 午夜福利在线观看免费完整高清在| 亚洲欧美一区二区三区黑人 | 91av网一区二区| 91午夜精品亚洲一区二区三区| 黄色日韩在线| 我的老师免费观看完整版| 国产 一区精品| 免费电影在线观看免费观看| 国产精品日韩av在线免费观看| 一级毛片我不卡| 国产单亲对白刺激| 中文字幕亚洲精品专区| 又粗又硬又长又爽又黄的视频| 搡老乐熟女国产| 久久久久九九精品影院| 国产v大片淫在线免费观看| 亚洲性久久影院| 精品不卡国产一区二区三区| 美女黄网站色视频| 天天躁日日操中文字幕| 亚洲成人久久爱视频| 亚洲精品乱码久久久v下载方式| 十八禁国产超污无遮挡网站| av免费在线看不卡| 欧美xxxx黑人xx丫x性爽| 国产精品久久久久久精品电影小说 | 一夜夜www| 一本久久精品| 久久久久久久国产电影| 亚洲第一区二区三区不卡| 夫妻午夜视频| av在线天堂中文字幕| 插阴视频在线观看视频| av在线老鸭窝| 亚洲成色77777| 国产一区二区三区av在线| 国产黄a三级三级三级人| 69人妻影院| 亚洲最大成人手机在线| 男人和女人高潮做爰伦理| 老女人水多毛片| 欧美最新免费一区二区三区| 亚洲精品视频女| 国产av不卡久久| 搡老妇女老女人老熟妇| 午夜爱爱视频在线播放| 老女人水多毛片| 黄色一级大片看看| 亚洲自拍偷在线| 精华霜和精华液先用哪个| 91久久精品电影网| eeuss影院久久| 日本免费a在线| 狂野欧美白嫩少妇大欣赏| 精品一区二区三卡| 亚洲无线观看免费| 亚洲欧美精品自产自拍| 日本wwww免费看| 欧美成人a在线观看| 九九爱精品视频在线观看| 特级一级黄色大片| 两个人的视频大全免费| 婷婷六月久久综合丁香| 深爱激情五月婷婷| 久热久热在线精品观看| 亚洲av中文字字幕乱码综合| 国产高清不卡午夜福利| 久久久午夜欧美精品| 亚州av有码| 美女内射精品一级片tv| 亚洲成人一二三区av| 亚洲无线观看免费| 精华霜和精华液先用哪个| 国产黄色小视频在线观看| 国产精品久久久久久精品电影小说 | 日本午夜av视频| 超碰av人人做人人爽久久| 国产单亲对白刺激| 日韩一区二区视频免费看| 亚洲经典国产精华液单| 日韩av在线免费看完整版不卡| 日韩中字成人| 免费观看无遮挡的男女| 内地一区二区视频在线| 久久精品国产亚洲av涩爱| 97人妻精品一区二区三区麻豆| 中国国产av一级| 非洲黑人性xxxx精品又粗又长| 国产 一区 欧美 日韩| 一个人看视频在线观看www免费| 国产一区二区三区av在线| 国产黄片视频在线免费观看| 麻豆乱淫一区二区| 18+在线观看网站| 亚洲精品日韩在线中文字幕| 一边亲一边摸免费视频| 国产精品美女特级片免费视频播放器| 久久久久久久久中文| av.在线天堂| 99久久中文字幕三级久久日本| 精品久久久精品久久久| 男女那种视频在线观看| 亚洲精品aⅴ在线观看| 国产精品人妻久久久影院| 精品欧美国产一区二区三| 国产一区有黄有色的免费视频 | 寂寞人妻少妇视频99o| 久久精品久久久久久噜噜老黄| 亚洲av一区综合| 日韩一区二区三区影片| 国产精品99久久久久久久久| av免费观看日本| 亚洲精品影视一区二区三区av| 国产在线一区二区三区精| 免费无遮挡裸体视频| 3wmmmm亚洲av在线观看| 一个人观看的视频www高清免费观看| 国产乱人偷精品视频| 日韩欧美 国产精品| 中文精品一卡2卡3卡4更新| 男人和女人高潮做爰伦理| 精品一区二区三卡| 中文字幕av成人在线电影| 久久久精品94久久精品| 午夜福利成人在线免费观看| 最近中文字幕2019免费版| 国产精品一及| 插阴视频在线观看视频| 日韩视频在线欧美| 日韩精品青青久久久久久| 日韩强制内射视频| 少妇熟女欧美另类| 特级一级黄色大片| 国产不卡一卡二| 男女视频在线观看网站免费| 精品一区二区三卡| 蜜臀久久99精品久久宅男| 亚洲国产欧美人成| 国产精品熟女久久久久浪| 亚洲丝袜综合中文字幕| 91av网一区二区| 午夜福利视频精品| 别揉我奶头 嗯啊视频| 老司机影院毛片| 国产成年人精品一区二区| 国产亚洲一区二区精品| 国产成人一区二区在线| 我的女老师完整版在线观看| 久久久久网色| 午夜免费观看性视频| 人人妻人人澡欧美一区二区| 少妇裸体淫交视频免费看高清| 亚洲天堂国产精品一区在线| 夜夜看夜夜爽夜夜摸| xxx大片免费视频| 久久人人爽人人片av| 一个人看视频在线观看www免费| 亚洲av成人精品一二三区| 欧美日韩国产mv在线观看视频 | 国产男女超爽视频在线观看| 一边亲一边摸免费视频| 91精品国产九色| 91在线精品国自产拍蜜月| 嘟嘟电影网在线观看| 国产白丝娇喘喷水9色精品| 少妇的逼好多水| 狠狠精品人妻久久久久久综合| 看免费成人av毛片| 亚洲自偷自拍三级| 亚洲成人一二三区av| 日本黄大片高清| 少妇裸体淫交视频免费看高清| 一级爰片在线观看| 自拍偷自拍亚洲精品老妇| 超碰97精品在线观看| 99久久九九国产精品国产免费| 亚洲内射少妇av| 午夜精品国产一区二区电影 | 久久99热6这里只有精品| 亚洲色图av天堂| av一本久久久久| 亚洲三级黄色毛片| 国产真实伦视频高清在线观看| 国产精品久久视频播放| 国产成人福利小说| 大片免费播放器 马上看| 国产亚洲精品av在线| 亚洲一级一片aⅴ在线观看| 国产69精品久久久久777片| 国产精品久久久久久久电影| 日本爱情动作片www.在线观看| 精品久久久久久成人av| 亚洲精品,欧美精品| 国产亚洲av嫩草精品影院| 国产亚洲av片在线观看秒播厂 | 亚洲av日韩在线播放| 色播亚洲综合网| 国产午夜精品论理片| 久久久久久久久久黄片| 欧美日韩亚洲高清精品| 日韩av在线免费看完整版不卡| 大香蕉97超碰在线| 大陆偷拍与自拍| 天美传媒精品一区二区| 成人美女网站在线观看视频| 亚洲精品成人久久久久久| 97热精品久久久久久| 欧美人与善性xxx| 色哟哟·www| 老师上课跳d突然被开到最大视频| 亚洲乱码一区二区免费版| 简卡轻食公司| 国产老妇女一区| 天美传媒精品一区二区| 国产激情偷乱视频一区二区| 亚洲精品日韩在线中文字幕| 18禁在线无遮挡免费观看视频| 18+在线观看网站| 爱豆传媒免费全集在线观看| 超碰97精品在线观看| 1000部很黄的大片| 18禁裸乳无遮挡免费网站照片| 精品少妇黑人巨大在线播放| 男女边吃奶边做爰视频| av线在线观看网站| 久久国产乱子免费精品| 成人av在线播放网站| 亚洲成色77777| 一夜夜www| 午夜免费观看性视频| 美女国产视频在线观看| 国产精品蜜桃在线观看| 2022亚洲国产成人精品| 好男人在线观看高清免费视频| 岛国毛片在线播放| 我要看日韩黄色一级片| 久久久久久久亚洲中文字幕| 久久精品国产自在天天线| 免费黄色在线免费观看| 日本黄大片高清| 久久6这里有精品| 中文资源天堂在线| 色综合站精品国产| 成人综合一区亚洲| 国产伦精品一区二区三区视频9| a级毛色黄片| 麻豆久久精品国产亚洲av| 色播亚洲综合网| 国产探花极品一区二区| 成人漫画全彩无遮挡| 欧美97在线视频| av免费在线看不卡| 中文字幕制服av| 只有这里有精品99| 国产精品嫩草影院av在线观看| 久久久久久久久久久免费av| 深爱激情五月婷婷| 久久久精品免费免费高清| 久久久久久伊人网av| 丝瓜视频免费看黄片| 日本与韩国留学比较| 亚洲国产精品成人久久小说| 欧美日韩一区二区视频在线观看视频在线 | 偷拍熟女少妇极品色| 夜夜爽夜夜爽视频| 国产成人91sexporn| 九九爱精品视频在线观看| 少妇被粗大猛烈的视频| 免费看日本二区| 亚洲精品视频女| 在线免费十八禁| 精品熟女少妇av免费看| 能在线免费看毛片的网站| 人人妻人人澡人人爽人人夜夜 | 亚洲婷婷狠狠爱综合网| 久久久久国产网址| 国产黄片视频在线免费观看| 国产精品不卡视频一区二区| 久久久国产一区二区| 日本一本二区三区精品| 久久精品久久久久久噜噜老黄| 麻豆精品久久久久久蜜桃| 神马国产精品三级电影在线观看| 熟女人妻精品中文字幕| 成年女人看的毛片在线观看| 亚洲四区av| 天堂中文最新版在线下载 | 亚洲精品日韩av片在线观看| 久久99热6这里只有精品| 午夜日本视频在线| 久久精品夜色国产| 中文天堂在线官网| 国产老妇伦熟女老妇高清| 日韩人妻高清精品专区| 男人和女人高潮做爰伦理| 我的老师免费观看完整版| 国产精品美女特级片免费视频播放器| 国产亚洲5aaaaa淫片| 亚洲不卡免费看| 黄片wwwwww| 亚洲人成网站高清观看| 亚洲av福利一区| 乱码一卡2卡4卡精品| 爱豆传媒免费全集在线观看| 韩国高清视频一区二区三区| 国产老妇女一区| 亚洲精品国产av成人精品| 亚洲av二区三区四区| 一区二区三区乱码不卡18| 亚洲第一区二区三区不卡| 中文乱码字字幕精品一区二区三区 | 精品国内亚洲2022精品成人| 国产一区二区亚洲精品在线观看| 天堂网av新在线| 我的女老师完整版在线观看| 国产在视频线在精品| av免费在线看不卡| 丝瓜视频免费看黄片| 亚洲美女视频黄频| 高清毛片免费看| 国产精品一及| 在线观看人妻少妇| 国产国拍精品亚洲av在线观看| 国产日韩欧美在线精品| 日本wwww免费看| 在线观看人妻少妇| 一级毛片 在线播放| 直男gayav资源| 国产欧美另类精品又又久久亚洲欧美| 观看免费一级毛片| 国产精品三级大全| 91狼人影院| 一二三四中文在线观看免费高清| 国产精品一区二区三区四区免费观看| 亚洲高清免费不卡视频| 午夜福利在线观看免费完整高清在| 国产精品一区www在线观看| 国产av在哪里看| 婷婷色av中文字幕| 26uuu在线亚洲综合色| 日本三级黄在线观看| 国产成人91sexporn| 成人美女网站在线观看视频| 又粗又硬又长又爽又黄的视频| 啦啦啦韩国在线观看视频| 激情五月婷婷亚洲| 日日摸夜夜添夜夜添av毛片| av又黄又爽大尺度在线免费看| 国产探花在线观看一区二区| 夫妻午夜视频| 国产午夜精品一二区理论片| 少妇的逼好多水|