血清INF-γ、sIL-2R、IL-12在原發(fā)性肝癌中的表達(dá)及臨床意義

張高明，楊慧林，王 智，閻 雄，代鴻華△

(1.四川省鄰水縣中醫(yī)醫(yī)院外科，四川廣安 638500；2.重慶醫(yī)科大學(xué)附屬第一醫(yī)院綦江醫(yī)院肝膽外科，重慶 401420)

原發(fā)性肝癌為中國常見惡性腫瘤之一，以肝區(qū)疼痛、消化道反應(yīng)及肝大為主要臨床表現(xiàn)，具有惡性程度高、預(yù)后差、病情進(jìn)展快等特點(diǎn)，因此盡早診治是改善此類患者生存質(zhì)量的重要方式[1]。目前甲胎蛋白是臨床上診治原發(fā)性肝癌的最常用腫瘤標(biāo)志物，但其假陰性及假陽性結(jié)果較高，診斷及篩查價值并不高[2]。相關(guān)研究報道，細(xì)胞因子網(wǎng)絡(luò)和受體之間的調(diào)節(jié)失常與免疫性病變、腫瘤發(fā)生相關(guān)[3]。干擾素-γ(IFN-γ)、可溶性白細(xì)胞介素-2受體(sIL-2R)及白介素-12(IL-12)為多功能細(xì)胞因子，在抗腫瘤免疫及炎性反應(yīng)中有重要作用。近年來有研究表明，原發(fā)性肝癌患者血清中INF-γ、sIL-2R、IL-12可能參與或者誘導(dǎo)肝內(nèi)炎性反應(yīng)，導(dǎo)致肝細(xì)胞損傷，從而引起并加劇肝細(xì)胞壞死，最終導(dǎo)致肝組織壞死及纖維化[4-5]。但目前臨床上缺乏以上指標(biāo)聯(lián)合檢測的報道，本研究旨在分析血清INF-γ、sIL-2R、IL-12在原發(fā)性肝癌中的價值，為此類疾病的診斷及治療提供理論依據(jù)。

1 資料與方法

1.1一般資料 選擇重慶市綦江區(qū)人民醫(yī)院2015年4月至2017年10月收治的73例原發(fā)性肝癌患者，入選標(biāo)準(zhǔn)[6]：(1)均根據(jù)臨床病史、癥狀、實(shí)驗室指標(biāo)、影像學(xué)檢查及病理學(xué)檢查確診為原發(fā)性肝癌；(2)采集血液前無免疫抑制劑應(yīng)用史，近期無病毒、細(xì)菌感染史；(3)心、腦、腎等臟器無明顯異常。排除標(biāo)準(zhǔn)：(1)活動性肝病、轉(zhuǎn)移性肝癌；(2)嚴(yán)重創(chuàng)傷、妊娠或者哺乳階段。73例原發(fā)性肝癌患者作為原發(fā)性肝癌組，男41例，女32例，年齡32～73歲，平均(56.84±7.69)歲。同期選擇該院收治的58例良性肝病患者作為良性肝病組，肝硬化26例、慢性乙型肝炎20例、病毒性肝炎12例，男35例，女23例，年齡29～72歲，平均(57.39±6.11)歲。并選擇本院健康體檢者46例作為健康對照組，男26例，女20例，年齡30～71歲，平均(56.99±8.05)歲。3組年齡、性別等資料比較均無統(tǒng)計學(xué)意義(P>0.05)。本研究患者及家屬均簽署知情同意書，且通過醫(yī)院倫理委員會批準(zhǔn)。

1.2方法 Ⅰa、Ⅰb、Ⅱa期原發(fā)性肝癌患者均接受肝癌根治性切除術(shù)治療；Ⅱb期及Ⅲa期原發(fā)性肝癌患者，腫瘤數(shù)目>3枚，腫瘤局限在同側(cè)半肝或者同一段者，予以手術(shù)切除，范圍以外的病灶術(shù)中接受射頻消融處理；合并分支癌栓或者門靜脈主干，腫瘤局限在半肝內(nèi)，預(yù)期術(shù)中癌栓能夠取凈或者完整切除，予以手術(shù)切除腫瘤并與門靜脈取栓，術(shù)后接受經(jīng)導(dǎo)管動脈化學(xué)栓塞治療。記錄以上患者1年內(nèi)存活情況。采集原發(fā)性肝癌患者手術(shù)前1 d及手術(shù)后7 d、良性肝病組及健康對照組入院時空腹外周靜脈血，采用 TD5A-WS 臺式低速離心機(jī)(購自中國山東濟(jì)南福的機(jī)械有限公司)3 000 r/min離心15 min，將上清液保存在-20 ℃低溫箱中待檢。采用DG5033B型全自動酶聯(lián)免疫分析儀(購自中國南京普朗生物技術(shù)有限公司)檢測血清INF-γ、sIL-2R、IL-12水平。

2 結(jié) 果

2.1各組血清INF-γ、sIL-2R、IL-12水平比較 原發(fā)性肝癌組血清INF-γ、IL-12水平低于良性肝病組，良性肝病組血清INF-γ、IL-12水平低于健康對照組；原發(fā)性肝癌組血清sIL-2R水平高于良性肝病組，良性肝病組血清sIL-2R水平高于健康對照組，差異有統(tǒng)計學(xué)意義(均P<0.05)。見表1。

表1 各組血清INF-γ、sIL-2R、IL-12水平比較

2.2原發(fā)性肝癌不同分期組血清INF-γ、sIL-2R、IL-12水平比較 原發(fā)性肝癌患者Ⅲ期組血清INF-γ、IL-12水平低于Ⅱ期組，Ⅱ期組血清INF-γ、IL-12水平低于Ⅰ期組，原發(fā)性肝癌患者Ⅲ期組sIL-2R水平高于Ⅱ期組，Ⅱ期組sIL-2R水平高于Ⅰ期組，差異有統(tǒng)計學(xué)意義(均P<0.05)。見表2。

表2 原發(fā)性肝癌不同分期組血清INF-γ、sIL-2R、IL-12水平比較

2.3原發(fā)性肝癌患者治療前后血清INF-γ、sIL-2R、IL-12水平比較 原發(fā)性肝癌患者治療后血清INF-γ、IL-12水平高于治療前，sIL-2R水平低于治療前，差異有統(tǒng)計學(xué)意義(均P<0.05)。見表3。

2.4原發(fā)性肝癌患者存活組及死亡組血清INF-γ、sIL-2R、IL-12水平比較 原發(fā)性肝癌存活組血清INF-γ、IL-12水平高于死亡組，sIL-2R水平低于死亡組，差異有統(tǒng)計學(xué)意義(均P<0.05)。見表4。

表3 原發(fā)性肝癌患者治療前后血清INF-γ、sIL-2R、IL-12水平比較

2.5血清INF-γ、sIL-2R、IL-12水平對原發(fā)性肝癌預(yù)后的預(yù)測價值分析 血清INF-γ預(yù)測原發(fā)性肝癌預(yù)后的AUC為0.856；sIL-2R預(yù)測原發(fā)性肝癌預(yù)后的AUC為0.880；IL-12預(yù)測原發(fā)性肝癌預(yù)后的AUC為0.787；指標(biāo)聯(lián)合測定預(yù)測原發(fā)性肝癌預(yù)后的AUC為0.931。見表5、圖1。

表4 原發(fā)性肝癌患者存活組及死亡組血清INF-γ、sIL-2R、IL-12水平比較

表5 血清INF-γ、sIL-2R、IL-12水平對原發(fā)性肝癌預(yù)后的預(yù)測價值分析

注：-表示此項無數(shù)據(jù)

圖1 血清INF-γ、sIL-2R、IL-12水平預(yù)測原發(fā)性肝癌預(yù)后的ROC曲線

3 討 論

原發(fā)性肝癌是嚴(yán)重威脅機(jī)體健康的惡性腫瘤之一，其發(fā)病隱匿，容易通過淋巴、血液系統(tǒng)轉(zhuǎn)移，發(fā)病率及病死率極高[7]。目前臨床對惡性腫瘤的篩查程度不高，患者就診時多為中晚期，已錯過最佳診療時機(jī)。因此非介入性、重復(fù)性高、操作簡便的檢查方法在腫瘤篩查中備受關(guān)注，近年來有研究認(rèn)為，多種血液標(biāo)志物對惡性腫瘤的診斷有良好的預(yù)測價值[8]。

IFN-γ為同源性二聚體糖蛋白，主要來自于T細(xì)胞、NK細(xì)胞、巨噬細(xì)胞及B細(xì)胞，其和細(xì)胞表面受體結(jié)合后能夠引起信號傳導(dǎo)，發(fā)揮生物學(xué)功能。IFN-γ通過多種途徑起到抗腫瘤作用，可激活巨噬細(xì)胞并增強(qiáng)其活性，提高免疫系統(tǒng)對腫瘤的殺傷及清除能力，IFN-γ作為內(nèi)源性血管生成抑制因子，通過誘導(dǎo)多種物質(zhì)的表達(dá)抑制血管生成，阻斷腫瘤血管供應(yīng)，阻止腫瘤復(fù)發(fā)及轉(zhuǎn)移[9]。IFN-γ可導(dǎo)致血管內(nèi)皮細(xì)胞凋亡，出現(xiàn)出血性壞死，其濃度下降有利于腫瘤細(xì)胞的免疫逃逸，促進(jìn)腫瘤細(xì)胞的修復(fù)，降低放化療等治療敏感性[10]。相關(guān)研究報道，原發(fā)性肝癌患者血清IFN-γ濃度顯著下降[11]，本研究也支持此觀點(diǎn)，且發(fā)現(xiàn)隨著腫瘤分期的增加患者血清IFN-γ水平相應(yīng)降低，說明測定機(jī)體血清IFN-γ水平有助于原發(fā)性肝癌的診斷，客觀反映疾病的進(jìn)展情況。同時本研究顯示，治療后患者血清IFN-γ水平顯著高于治療前，說明腫瘤的存在是抑制IFN-γ分泌的因素。

惡性腫瘤的發(fā)生發(fā)展和機(jī)體免疫功能有良好關(guān)系，sIL-2R是來自于活化單核細(xì)胞及淋巴細(xì)胞的多肽，為機(jī)體重要的免疫抑制物質(zhì)，現(xiàn)已成為腫瘤免疫的監(jiān)測指標(biāo)[12]。sIL-2R和IL-2結(jié)合后可抑制T細(xì)胞增殖，影響機(jī)體免疫功能，其水平上升可能是因癌細(xì)胞刺激，在惡性腫瘤細(xì)胞表層脫落而釋放入血，從而增加血清sIL-2R濃度[13]。本研究顯示，原發(fā)性肝癌患者血清sIL-2R濃度顯著高于良性肝病組及健康對照組，Ⅲ組上升最為明顯，考慮與原發(fā)性肝癌患者隨著病情進(jìn)展，進(jìn)一步加重肝細(xì)胞損傷，導(dǎo)致免疫功能低下有關(guān)，經(jīng)有效治療后sIL-2R濃度明顯下降，死亡患者則濃度上升，和既往報道相似。以上結(jié)果說明，sIL-2R水平上升可反映原發(fā)性肝癌患病情的進(jìn)展及惡化。

IL-12是由免疫活性細(xì)胞分泌的細(xì)胞因子，有正向調(diào)節(jié)細(xì)胞免疫功能，抑制腫瘤生長的作用。IL-12具有多種生物學(xué)功能，可增強(qiáng)T細(xì)胞毒作用，誘導(dǎo)激活毒T細(xì)胞及促進(jìn)T細(xì)胞增殖、活化成NK細(xì)胞，提高其細(xì)胞毒作用，從而起到抗腫瘤的作用[14]。正常的IL-12水平是維持T細(xì)胞功能正常的重要因素，原發(fā)性肝癌患者血清IL-12下降可導(dǎo)致免疫調(diào)節(jié)網(wǎng)絡(luò)失衡，產(chǎn)生病理性惡性循環(huán)，促進(jìn)原發(fā)性肝癌發(fā)生、發(fā)展[15]。本研究顯示，原發(fā)性肝癌組、良性肝病組血清IL-12濃度均有程度不一的降低，但原發(fā)性肝癌組濃度相對更低，說明血清IL-12濃度能較好反映肝臟病情進(jìn)展及肝臟損傷程度。治療后原發(fā)性肝癌患者血清IL-12水平有所上升，考慮與腫瘤緩解后可明顯減輕腫瘤負(fù)荷，從而改善免疫功能，促進(jìn)IL-12表達(dá)。進(jìn)一步分析發(fā)現(xiàn)，INF-γ、sIL-2R、IL-12 AUC均大于0.50，說明INF-γ、sIL-2R、IL-12能夠一定程度地預(yù)測原發(fā)性肝癌患者預(yù)后情況。

4 結(jié) 論

INF-γ、sIL-2R、IL-12參與原發(fā)性肝癌的發(fā)生發(fā)展，通過檢測以上指標(biāo)能夠輔助原發(fā)性肝癌診斷，且可作為預(yù)后評價的參考指標(biāo)。