胰島素樣生長因子-Ⅰ及其受體在糖尿病足潰瘍的表達(dá)及臨床價(jià)值

王亭

（濟(jì)寧市第一人民醫(yī)院檢驗(yàn)科，山東濟(jì)寧 272000）

糖尿病患者常并發(fā)嚴(yán)重的足部潰瘍，研究表明，約有15%的糖尿病患者可能會并發(fā)足部潰瘍，而糖尿病足部潰瘍的患者其死亡率高達(dá)29%[1-2]。臨床上，導(dǎo)致糖尿病足的因素多種多樣，目前有研究表明，胰島素樣生長因子-I(ICF-I)和傷口的愈合有密切的關(guān)系[3]。為進(jìn)一步的研究ICF-I的表達(dá)和糖尿病足的關(guān)系，現(xiàn)該院以2018年6月—2019年6月為研究時(shí)段，開展深入探究，詳細(xì)報(bào)道見下。

1. 資料與方法

1.1 一般資料

經(jīng)患者和患者家屬同意以及醫(yī)院倫理委員會的批準(zhǔn)實(shí)施，選該院治療的30例糖尿病足患者（A組），30例單純糖尿病患者（B組）和30例非感染非糖尿病手術(shù)患者(C組)作為本次研究對象。A組患者年齡：57～78 歲，平均年齡（64.43±12.24）歲，病程在 4～12 年，平均病程(7.45±2.20)年，餐后 2 h 的血糖為（13.31±2.34）mmol/L；空腹血糖為（8.45±1.21）mmol/L；B 組患者的年齡為 50～78 歲，平均年齡（59.67±14.33）歲，病程在3～14年，平均病程(8.18±2.54)年;C組病患的年齡為 61～80 年，平均年齡（58.37±19.34）歲，病程在 4～13年，平均病程(7.17±2.92)年。上述患者進(jìn)行一般資料對比，差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05）。 納入標(biāo)準(zhǔn)[4]：（1）確診為2型糖尿?。唬?）無嚴(yán)重臟器損傷。排除標(biāo)準(zhǔn)：（1）患者昏迷或存在精神障礙；（2）患者在90 d內(nèi)有糖尿病并發(fā)癥史；（3）嚴(yán)重的腎肝功能不全；（4）其他疾病導(dǎo)致的周圍神經(jīng)病變和血管病變；（5）不署知情協(xié)議書。

1.2 方法

獲取足部組織標(biāo)本：A組：在手術(shù)中或是清創(chuàng)換藥時(shí)取病變交界處的皮膚組織；B組、C組：在手術(shù)中取切緣皮膚的全層組織，組織的厚度約為2.5 mm，大小取1 cm×1 cm。用10%的甲醛將所取標(biāo)本固定2 d，脫水，包埋，最后制備為石蠟切片，厚度4 μm，至少2張，其中1張進(jìn)行常規(guī)的HE染色，另1張進(jìn)行ICF-I抗體的免疫化學(xué)染色。在400倍的顯微鏡下對3組標(biāo)本進(jìn)行觀察。

1.3 組織ICF-I的表達(dá)強(qiáng)度依據(jù)組織免疫組化的染色深淺

棕褐色是3分，棕黃色是2分，淡黃色是1分，無色是0分。依據(jù)陽性細(xì)胞概率打分：細(xì)胞陽性概率，10%是 1分，11%～50%是2分，51%是3分，無陽性的細(xì)胞評分為0分。組織的表達(dá)強(qiáng)度可用染色強(qiáng)度乘以細(xì)胞陽性率表示：0～2 分是(-)，3～4 分是(+)，5～7 分是(++)，8～9分是(+++)。組織ICF-1陽性指數(shù)的測定方式：首先用低倍鏡下選出ICF-I(+)細(xì)胞分布最密集的區(qū)域，之后在400倍鏡下對5個(gè)視野中的陽性細(xì)胞和上皮細(xì)胞數(shù)計(jì)數(shù)，陽性指標(biāo)可用（陽性細(xì)胞/上皮細(xì)胞）%來表示，由2人完成，計(jì)數(shù)采用雙盲法，差異大于10%，便需要重新計(jì)數(shù)。

1.4 統(tǒng)計(jì)方法

使用SPSS 20.0統(tǒng)計(jì)學(xué)軟件進(jìn)行數(shù)據(jù)的統(tǒng)計(jì)分析，使用（±s）表示計(jì)量資料，使用[n(%)]表示計(jì)數(shù)資料。P＜0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2. 結(jié)果

2.1 組織IGF-ⅠRα的免疫組化

在IGF-ⅠRα的免疫組化染色中，上皮細(xì)胞的胞膜與胞漿內(nèi)出現(xiàn)棕黃色顆粒則為陽性。IGF-ⅠRα蛋白主要分布在少量的成纖維細(xì)胞與表皮細(xì)胞的胞膜上。

2.2 組織IGF-ⅠRβ的免疫組化

在IGF-ⅠRβ的免疫組化染色中，上皮細(xì)胞的胞膜與胞漿內(nèi)出現(xiàn)棕黃色顆粒則為陽性。IGF-ⅠRβ蛋白主要分布在中性粒細(xì)胞、巨噬細(xì)胞和表皮細(xì)胞的胞膜上。

2.3 IGF-ⅠRβ和IGF-ⅠRα的陽性指數(shù)

在三組皮膚標(biāo)本檢測中，IGF-Ⅰ Rβ和IGF-ⅠRα的組織陽性指數(shù)存在統(tǒng)計(jì)學(xué)差異，B組較C組的表達(dá)減弱，A組較B組的表達(dá)則進(jìn)一步減弱，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05）。 詳見表1。

表1 各組皮膚組織中IGF-ⅠRβ和IGF-Ⅰ Rα陽性指數(shù)比較（±s）

表1 各組皮膚組織中IGF-ⅠRβ和IGF-Ⅰ Rα陽性指數(shù)比較（±s）

組別IGF-Ⅰ Rα IGF-Ⅰ Rβ A 組（n=30）B 組（n=30）C 組（n=30）74.45±20.45 46.97±14.08 19.45±8.45 69.87±15.51 53.24±12.48 16.09±9.45

2.4 IGF-ⅠRβ和IGF-ⅠRα的表達(dá)強(qiáng)度

在三組皮膚標(biāo)本檢測中，IGF-Ⅰ Rβ和IGF-ⅠRα的表達(dá)強(qiáng)度存在統(tǒng)計(jì)學(xué)差異，B組較C組的表達(dá)減弱，A組較B組的表達(dá)則進(jìn)一步減弱，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05）。 詳見表2。

表2 各組皮膚組織中IGF-ⅠRα和IGF-ⅡRβ表達(dá)強(qiáng)度比較

3 討論

糖尿病足潰瘍是一種嚴(yán)重的糖尿病并發(fā)癥，導(dǎo)致慢性潰瘍，最終引起截肢，影響患者的生活質(zhì)量。由于糖尿病足的發(fā)病率較高，而且對患者的影響較大，所以更應(yīng)引起人們對于該疾病的關(guān)注[5]。研究表明，ICFI和糖尿病足有一定的關(guān)系，ICF-I為一種由70個(gè)氨基酸共同組成的單鏈多肽，編碼基因在12號染色體的短臂上，和胰島素原具有高度同源性。ICF-I不僅可以能誘導(dǎo)多種細(xì)胞因子的表達(dá)，還能促進(jìn)膠原、聚葡萄糖胺和纖粘連蛋白等胞外基質(zhì)的分泌和合成，加速創(chuàng)面修復(fù)之后的組織改建，和糖尿病足部潰瘍密切相關(guān)[6]。該次的研究表明，在IGF-Ⅰ Rβ和IGF-Ⅰ Rα的免疫組化染色中，上皮細(xì)胞的胞膜與胞漿內(nèi)出現(xiàn)棕黃色顆粒則為陽性。IGF-ⅠRα蛋白主要分布在少量的成纖維細(xì)胞與表皮細(xì)胞的胞膜上。IGF-ⅠRβ蛋白主要分布在中性粒細(xì)胞、巨噬細(xì)胞和表皮細(xì)胞的胞膜上。在三組皮膚標(biāo)本檢測中，IGF-Ⅰ Rβ和IGF-ⅠRα的組織陽性指數(shù)以及表達(dá)強(qiáng)度均存在統(tǒng)計(jì)學(xué)差異，且B組較C組的表達(dá)減弱，A組較B組的表達(dá)則進(jìn)一步減弱，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05）。

綜上所述，ICF-I的不足或是缺乏可能和糖尿病導(dǎo)致機(jī)體內(nèi)皮細(xì)胞破壞有關(guān)，和糖尿病足部潰瘍病人潰瘍長期存在密切相關(guān)，建議在臨床進(jìn)行進(jìn)一步研究。