肉蔻-5味丸對(duì)慢性抑郁模型大鼠血清IL-1和IL-6含量的影響

呼日樂(lè)巴根　烏蘭其其格　蓮花　宏梅　烏日罕　木奇　佟海英

【摘 要】 目的：觀察肉蔻-5味丸對(duì)慢性抑郁模型大鼠血清IL-1和IL-6含量的影響，探討其抗抑郁機(jī)制。方法：60只雄性SD大鼠，隨機(jī)分為正常組、模型組、西藥組（鹽酸氟西汀0.0036g/kg），蒙藥低、中、高劑量組（分別給予肉蔻-5味丸0.2、0.4、0.8 g/kg），每組10只。建立CUMS模型，同時(shí)ig給藥，每天1次，連續(xù)給藥21d。以體重變化、糖水消耗實(shí)驗(yàn)進(jìn)行評(píng)價(jià)模型，ELISA檢測(cè)大鼠血清IL-1和IL-6的含量。結(jié)果：實(shí)驗(yàn)過(guò)程中模型組大鼠體重增長(zhǎng)較緩慢，糖水消耗量降低，應(yīng)激結(jié)束時(shí)，與正常組比較模型大鼠血清IL-1和IL-6的含量明顯升高，而鹽酸氟西汀和蒙藥肉蔻-5味丸均可不同程度改善模型大鼠抑郁狀態(tài)。與模型組比較，給予鹽酸氟西汀和蒙藥肉蔻-5味丸高、中劑量組大鼠血清IL-1和IL-6含量明顯降低（P<0.05）;低劑量組大鼠血清IL-1和IL-6含量有降低趨勢(shì)，但無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。結(jié)論：蒙藥肉蔻-5味丸可通過(guò)抑制模型大鼠血清IL-1和IL-6含量升高發(fā)揮抗抑郁作用。

【關(guān)鍵詞】 肉蔻-5味丸;抑郁模型;大鼠;IL-1;IL-6

【中圖分類號(hào)】R285.5 【文獻(xiàn)標(biāo)志碼】 A【文章編號(hào)】1007-8517（2019）15-0009-04

抑郁癥（Major Depressive Disorder，MDD）是一種患病率、復(fù)發(fā)率、自殺率較高的慢性精神障礙疾病，帶來(lái)嚴(yán)重社會(huì)經(jīng)濟(jì)負(fù)擔(dān)，已成為世界范圍內(nèi)最有負(fù)擔(dān)的疾病，其致殘率超過(guò)缺血性心腦血管疾病，將成為全世界第二大致殘疾病[1-2]。目前，盡管研發(fā)有很多抗抑郁藥，但仍存在療效不佳或反應(yīng)差異、長(zhǎng)期服用出現(xiàn)毒副作用以及停藥后復(fù)發(fā)等不令患者滿意的問(wèn)題[3-4]。民族醫(yī)藥其獨(dú)特的診療方法及藥物，在治療疑難雜病方面發(fā)揮著一定作用，日益受到抑郁癥研究者的關(guān)注。蒙醫(yī)驗(yàn)方肉蔻-5味丸是蒙醫(yī)臨床上常用于治療“赫依”病、心煩失眠、心神不安、心跳、心悸、胸悶氣喘、心絞痛等心血管疾病及抑郁、焦慮等病癥[5-6]，并療效顯著。本藥方出自于蒙醫(yī)經(jīng)典著作《蒙醫(yī)成方集》，在《蒙醫(yī)百科全書·蒙醫(yī)學(xué)》和《衛(wèi)生部藥品標(biāo)準(zhǔn)·蒙藥分冊(cè)》均有記載，由肉豆蔻、廣棗、蓽茇、土木香、木香等5種天然藥物組成。前期研究已發(fā)現(xiàn)其能夠改善慢性抑郁模型大鼠抑郁狀態(tài)[7-8]。研究以蒙醫(yī)驗(yàn)方肉蔻-5味丸為受試藥，利用慢性輕度不可預(yù)知性應(yīng)激（Chronic unpredictable mild stress，CUMS）結(jié)合孤養(yǎng)方法，建立CUMS大鼠模型，并給藥干預(yù)后觀察其對(duì)CUMS大鼠血清白細(xì)胞介素1（interleukin，IL-1）和白細(xì)胞介素6（interleukin，IL-6）含量的影響，從而探討其抗抑郁作用途徑。

1 材料

1.1 動(dòng)物 清潔級(jí)SD雄性大白鼠，體質(zhì)量為180～220g，北京維通利華實(shí)驗(yàn)動(dòng)物技術(shù)有限公提供，許可證號(hào)：SCXK（京）20140004。

1.2 受試藥及試劑 肉蔻-5味丸（批號(hào)：Z15020881，內(nèi)蒙古自治區(qū)庫(kù)倫蒙藥廠）;鹽酸氟西汀膠囊（批號(hào)：H20073985，山西仟源制藥股份有限公司）;水合氯醛（批號(hào)：20130401，天津市福晨化學(xué)試劑廠）;IL-1（批號(hào)：CSB-E08055r）、IL-6（批號(hào)：CSB-E04640r）等ELISA試劑盒均由武漢華美生物工程有限公司提供。

1.3 儀器 MULTISKAN MK3酶聯(lián)免疫吸附儀（美國(guó)Thermo公司）;ST16R高速低溫離心機(jī)（美國(guó)Thermo公司）;BSA124SCW電子天秤（德國(guó)Sartorius科學(xué)儀器有限公司）;DHG9145電熱鼓風(fēng)干燥箱（中國(guó)上海一恒科學(xué)儀器有限公司）;5mL真空采血管、采血針、手術(shù)刀、鑷子等器材。

2 方法

2.1 分組及給藥 將60只大鼠一周適應(yīng)性飼養(yǎng)之后按體質(zhì)量隨機(jī)分為正常組、模型組、西藥組、蒙藥肉蔻-5味丸低、中、高劑量組等6組，每組10只。應(yīng)激同時(shí)對(duì)各組大鼠進(jìn)行ig給藥，除正常組和模型組給予等量生理鹽水外，西藥組給予鹽酸氟西汀3.6mg/kg，蒙藥低、中、高劑量組給予0.2、0.4、0.8g/kg不同劑量的肉蔻-5味丸。每日固定時(shí)間給藥1次，給藥體積為1mL/100g，連續(xù)刺激21天，同時(shí)給藥干預(yù)。

2.2 復(fù)制模型方法[9-10] 采取CUMS和孤養(yǎng)兩種經(jīng)典造模方法的配合使用，建立抑郁癥動(dòng)物模型。將正常組5只為一籠群養(yǎng)，不給予任何外界刺激，并自由飲水?dāng)z食。其余各組大鼠孤養(yǎng)，并每天給予不同刺激，且接受刺激盡量反差較大確保不可預(yù)知目的，應(yīng)激源包括24h禁食禁水， 5min游泳4℃冷水， 5min放置45℃熱環(huán)境，1min夾尾，15min高速水平震蕩，24h潮濕墊料，12h晝夜顛倒等7種。各組大鼠每天接受隨機(jī)安排的一種刺激，對(duì)一組大鼠不能連續(xù)接受同種刺激，且同種刺激最多使用3次。

2.3 體質(zhì)量變化 每日給藥時(shí)觀察大鼠的一般狀態(tài)，并稱量大鼠體質(zhì)量，記錄統(tǒng)計(jì)造模前和造模后第14天、第21天之間的差異變化。

2.4 糖水消耗測(cè)試（sucrose preference test，SPT）???? 測(cè)試前對(duì)各組大白鼠適應(yīng)性飲用1%蔗糖水48h，盡量避免產(chǎn)生其對(duì)新事物的恐懼感，以及避免飲水位置的偏愛(ài)，每日要調(diào)換一次飲水瓶的位置。測(cè)試時(shí)，先將大白鼠禁水4h后給予等體積或重量A和B兩瓶水（A瓶水為自來(lái)水，B瓶水為1%蔗糖水），分別計(jì)算大白鼠在飲用1h期間的糖水?dāng)z取量和自來(lái)水?dāng)z取量（糖水偏好% =[A/（A+B）]×100%）。

2.5 檢測(cè)指標(biāo) SPT 實(shí)驗(yàn)結(jié)束后10%水合氯醛（體積為0.3mL/100g）麻醉大鼠，縱向切開(kāi)腹部，用5mL真空采血管從腹主動(dòng)脈取血，待凝血后轉(zhuǎn)速為每分鐘3500r離心15min。取上清液移置于血清杯后24℃冰箱保存待測(cè)。按照IL-1和IL-6試劑盒的操作說(shuō)明進(jìn)行檢測(cè)含量。

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（收稿日期：2019-05-21 編輯：劉斌）