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    硫化氫后處理對(duì)大鼠肺缺血再灌注損傷的影響

    2014-07-09 00:57李鯤鵬朱磊馬捷
    中國(guó)現(xiàn)代醫(yī)生 2014年13期
    關(guān)鍵詞:再灌注損傷肺水腫硫化氫

    李鯤鵬 朱磊 馬捷

    [摘要] 目的 用外源性硫化氫后處理大鼠肺缺血再灌注損傷模型,檢測(cè)其對(duì)肺缺血再灌注損傷的影響。 方法 將24只健康SD大鼠,隨機(jī)分成3組,每組8只,分別為:假手術(shù)(Sham)組、肺缺血再灌注(I/R)組及I/R+硫氫化鈉(NaHS)干預(yù)組。在每組實(shí)驗(yàn)結(jié)束后取大鼠肺組織,觀察肺組織病理學(xué)的變化,檢測(cè)大鼠肺濕/干重(W/D)比值,肺組織丙二醛(MDA)含量及超氧化物岐化酶(SOD)活性的測(cè)定,提取支氣管肺泡灌洗液(BALF)檢測(cè)BALF中白細(xì)胞計(jì)數(shù)、中性粒細(xì)胞百分比及肺通透性指數(shù)。結(jié)果 I/R組肺組織W/D值、MDA水平與Sham組比較顯著升高(P<0.05),而I/R+硫氫化鈉(NaHS)干預(yù)組明顯低于I/R組(P<0.05);I/R組肺組織SOD活性與Sham組比較顯著降低(P<0.05), I/R+硫氫化鈉(NaHS)干預(yù)組明顯高于I/R組(P<0.05)。肺組織病理結(jié)果表明,I/R+硫氫化鈉(NaHS)干預(yù)組與I/R組比較損傷減輕,肺泡腔內(nèi)炎性細(xì)胞減少。 結(jié)論 硫化氫后處理通過(guò)減輕肺水腫、降低氧自由基水平有關(guān),對(duì)肺缺血再灌注損傷具有保護(hù)作用。

    [關(guān)鍵詞] 再灌注損傷;硫化氫;氧自由基;肺水腫

    [中圖分類號(hào)] R363 [文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼] B [文章編號(hào)] 1673-9701(2014)13-0010-03

    肺缺血/再灌注(Ischemia/Reperfusion,I/R)損傷往往出現(xiàn)于臨床肺移植、體外循環(huán)心臟手術(shù)、機(jī)體大出血等情況下,造成肺缺血,恢復(fù)灌注后,缺血所導(dǎo)致的損傷并沒(méi)有減輕,甚至更加嚴(yán)重[1]。如何降低肺缺血/再灌注損傷的危害,改善患者的預(yù)后,是如今尚需解決的重要問(wèn)題[2]。硫化氫(hydrogensulfide,H2S)具有類似NO和CO的某些生物學(xué)特性,在NO和CO之后被認(rèn)為是第3類內(nèi)源性氣體分子[3]。經(jīng)研究證實(shí),其對(duì)多種臟器以及組織的缺血再灌注損傷有保護(hù)作用。在此研究中,通過(guò)建立大鼠在體肺缺血/再灌注模型, 以硫氫化鈉作為預(yù)處理藥物,研究硫化氫(H2S)后處理對(duì)肺缺血再灌注損傷的作用及機(jī)制。

    1 材料與方法

    1.1 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物

    健康SD大鼠24只(山西醫(yī)科大學(xué)動(dòng)物實(shí)驗(yàn)中心提供),體重220~280 g,雌雄不拘。

    1.2 動(dòng)物模型復(fù)制

    實(shí)驗(yàn)大鼠通過(guò)腹腔注射5%水合氯醛(0.7 mL/100 g),麻醉后取仰臥位固定于手術(shù)臺(tái)上。頸部正中切口,予氣管切開(kāi)插管,動(dòng)物呼吸機(jī)行機(jī)械通氣[吸入室內(nèi)空氣,呼吸頻率(50~60)次/min]。沿胸骨左緣切斷第3~5肋骨,打開(kāi)胸腔,游離左側(cè)肺門(mén),切斷左側(cè)肺下韌帶。按Sekido[4]法復(fù)制在體大鼠肺缺血-再灌注模型,結(jié)扎阻斷左側(cè)肺門(mén)血管及支氣管,左肺血供及通氣終止30 min后,開(kāi)放左肺門(mén)予再灌注120 min。

    1.3 實(shí)驗(yàn)分組

    24只大鼠隨機(jī)分成以下3組,假手術(shù)組(Sham)、肺缺血再灌注組(I/R)及I/R+硫氫化鈉(NaHS)干預(yù)組,每組8只。I/R+硫氫化鈉(NaHS)干預(yù)組實(shí)驗(yàn)前5 d始每天腹腔注射NaHS(NaHS 20 μmol/kg,溶入0.3 mL生理鹽水),于實(shí)驗(yàn)前15 min再次給藥;Sham組和I/R組實(shí)驗(yàn)前5 d,每天經(jīng)腹腔注射0.3 mL生理鹽水;實(shí)驗(yàn)15 min再次注射。

    1.4觀察指標(biāo)及檢測(cè)方法

    1.4.1 肺組織濕/干重(W/D)值測(cè)定 大鼠處死后立即留取左肺部分肺組織測(cè)量濕重(W)并記錄,然后放入60℃恒溫烘箱烘干至恒重,48 h后測(cè)量干重(D),從而算得肺組織濕/干(W/D)值,W/D值可反映肺組織水腫情況。

    1.4.2 肺組織勻漿中MDA含量、SOD活性的測(cè)定 左肺取部分肺組織凍存,實(shí)驗(yàn)結(jié)束后,按試劑盒的要求將肺組織制成勻漿, 3500 r/min離心10 min,取上清液,用分光光度計(jì)測(cè)反應(yīng)后的吸光度值,計(jì)算出MDA含量及SOD活性,嚴(yán)格按照試劑盒說(shuō)明操作。

    1.4.3支氣管肺泡灌洗液(BALF)中肺通透性指數(shù)、白細(xì)胞(WBC)計(jì)數(shù)、中性粒細(xì)胞(PMN)百分比及肺通透性指數(shù)(LPI)的測(cè)定 取左肺上葉,經(jīng)氣管用5 mL生理鹽水行左肺灌洗,收集支氣管肺泡灌洗液,以3000 r/min高速離心15 min取上清液,雙縮脲法測(cè)BALF及血清中蛋白含量,BALF中蛋白含量與血清蛋白含量之比為肺通透性指數(shù)。將BALF離心沉渣涂片,瑞氏染色,光鏡下行白細(xì)胞及PMN計(jì)數(shù),求得PMN百分比。

    1.4.4 病理學(xué)檢查 留取左肺部分肺組織行病理學(xué)分析,用10%甲醛固定肺組織標(biāo)本,然后常規(guī)石蠟包埋,切片,HE染色,觀察光鏡下病理學(xué)改變。

    1.5 統(tǒng)計(jì)學(xué)處理

    所有結(jié)果均采用SPSS 16.0統(tǒng)計(jì)學(xué)軟件進(jìn)行處理,實(shí)驗(yàn)結(jié)果以均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差(x±s)表示,實(shí)驗(yàn)數(shù)結(jié)果組間比較行方差分析和t檢驗(yàn),P<0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

    2 結(jié)果

    2.1 肺組織W/D值

    Sham組肺組織基本無(wú)水腫,而I/R組肺組織嚴(yán)重水腫,I/R組與Sham組比較W/D值明顯升高,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.01),I/R+ NaHS組W/D值雖比Sham組有所升高(P<0.05),但與I/R組對(duì)比,W/D值明顯下降,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.01)。見(jiàn)表1。

    表1 各組大鼠肺組織W /D值比較(x±s)

    注:與Sham組比較,*P<0.05;與I/R組比較,#P<0.01

    2.2 肺組織血漿丙二醛(MDA)含量及超氧化物岐化酶(SOD)活性

    與Sham組比較,I/R組肺組織勻漿中MDA含量明顯增多,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.01), I/R+ NaHS組MDA含量雖比Sham組有所升高(P<0.05),但與I/R組對(duì)比,肺組織勻漿中MDA含量明顯減少,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.01);與Sham組比較,I/R組肺組織勻漿中SOD活性明顯下降,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.01),I/R+ NaHS組SOD活性雖比Sham組有所降低(P<0.05),但顯著高于I/R組,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.01)。見(jiàn)表2。

    表2 各組血漿MDA含量及超氧化物岐化酶(SOD)活性(x±s)

    注:與Sham組比較,*P<0.05;與I/R組比較,#P<0.01

    2.3 肺通透性指數(shù)(LPI)和BALF中白細(xì)胞計(jì)數(shù)、中性粒細(xì)胞百分比

    與Sham組比較,I/R組BALF中WBC總數(shù)及中性粒細(xì)胞百分比明顯升高,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.01),I/R+ NaHS組BALF中WBC總數(shù)及中性粒細(xì)胞百分比雖比Sham組有所升高(P<0.05),但與I/R組對(duì)比BALF中WBC總數(shù)及中性粒細(xì)胞百分比明顯降低, 差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P均<0.01);與Sham組比較,I/R組肺通透指數(shù)明顯升高,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.01),I/R+ NaHS組肺通透指數(shù)雖比Sham組有所升高(P<0.05)但與I/R組對(duì)比,肺通透指數(shù)明顯降低,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.01)。見(jiàn)表3。

    表3 各組肺通透性指數(shù)及BALF中WBC計(jì)數(shù)、PMN百分比(x±s,n=8)

    注:與Sham組比較,*P<0.05;與I/R組比較,#P<0.01

    2.4 肺組織病理結(jié)果

    Sham組肺泡腔完整性好,肺泡間隔均勻無(wú)增厚,肺泡壁光滑,無(wú)滲出物及炎細(xì)胞浸潤(rùn)(封三圖1);I/R組出現(xiàn)明顯的肺組織水腫,毛細(xì)血管擴(kuò)張、充血,肺泡間隔增厚,肺泡腔內(nèi)充滿大量紅細(xì)胞及滲出物(封三圖2);I/R+ NaHS組肺組織毛細(xì)血管輕微擴(kuò)張,與I/R組比較,肺泡間隔及肺泡水腫減輕,肺泡腔滲出物明顯減少(封三圖3)。

    3 討論

    H2S本是一種有毒氣體,但近些年發(fā)現(xiàn)H2S是一種新型氣體信號(hào)分子,對(duì)心血管系統(tǒng)、神經(jīng)系統(tǒng)、消化道系統(tǒng)等均具有重要的調(diào)節(jié)作用[5]。新近研究證實(shí),H2S對(duì)心臟[6]、肝臟[7]、腦[8]、小腸[9]缺血再灌注損傷有一定的保護(hù)作用,其機(jī)制可能與抗氧化凋亡提高缺血耐受性有關(guān)[10]。

    肺缺血再灌注損傷(ischemia-reperfusion injury,I/R)的機(jī)制還不特別清晰,近年來(lái)認(rèn)為炎性介質(zhì)、氧自由基、內(nèi)皮細(xì)胞的損傷等機(jī)制在肺缺血再灌注損傷中有重要作用[11]。內(nèi)皮細(xì)胞的損傷引起肺毛細(xì)血管擴(kuò)張,從而通透性增高,引發(fā)肺組織水腫,肺組織濕/干重比值可反映肺水腫情況,再灌注后W/D比值,BALF中白細(xì)胞計(jì)數(shù)、中性粒細(xì)胞百分比及肺通透性指數(shù)均增高,而NaHS后處理后上述指標(biāo)明顯下降(P<0.05),其對(duì)肺缺血再灌注損傷產(chǎn)生了很好的效果。

    近年來(lái)證明氧自由基和活性氧是引起缺血再灌注損傷的主要影響因素。與缺血再灌注損傷有關(guān)的氧自由基(OFR)有過(guò)氧化氫(H2O2)、超氧陰離子(O2-)[12]。正常生理狀態(tài)下,氧自由基所引起的損傷可被機(jī)體“抗氧化屏障”所抑制,然而缺血再灌注使組織產(chǎn)生過(guò)多的氧自由基,破壞了內(nèi)源性抗氧化系統(tǒng),從而引起細(xì)胞壞死和組織的損傷。在此過(guò)程中,雙鍵脂肪酸在氧化后形成丙二醛,其含量可間接反映肺組織氧化損傷的情況。本實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明,I/R組中MDA含量與Sham組相比顯著升高,表明肺缺血再灌注時(shí),體內(nèi)大量的氧自由基積累,導(dǎo)致肺水腫。而NaHS處理后,MDA含量雖然比Sham組高,而與I/R組相比顯著下降(P<0.05)。實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明H2S處理后,可降低再灌注后血漿MDA的含量,能減輕氧自由基所引起的氧化損傷,從而達(dá)到一定的保護(hù)能力。SOD是機(jī)體的重要抗氧化活性酶,其活性水平能間接反映機(jī)體的抗氧化能力[13]。本實(shí)驗(yàn)中觀察到I/R組SOD活性與Sham組相比顯著下降,表明肺缺血再灌注后內(nèi)源性抗氧化活性酶消耗,從而導(dǎo)致氧自由基含量增加,破壞肺組織內(nèi)皮細(xì)胞,引起肺毛細(xì)血管擴(kuò)張,引起肺水腫,而NaHS處理后,SOD活性與I/R組相比顯著升高(P<0.05)。實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明,H2S處理后可以提高機(jī)體內(nèi)源性抗氧化活性酶的活性,從而達(dá)到清除氧自由基的目的。

    本實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明,外源性硫化氫可通過(guò)清除基體氧自由基,提高抗氧化酶活性,起到對(duì)肺缺血再灌注損傷起保護(hù)作用。然而對(duì)其劑量、給藥時(shí)間等尚需進(jìn)一步研究。

    [參考文獻(xiàn)]

    [1] Alam S,Chan KM. Noninfectious pulmonary complications after organ transplantation[J]. Curr Opin PulmMed,1996,2(5):412-418.

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    [4] Sekido N,Mukadia N,Harada A,et al. Prevention of lung reperfusion injury in rabbits by a monoclonal antibody against interleukin-8 [J]. Nature,1993,365:654-657.

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    [13] 李穎川,姜禎. 尿蛋白酶抑制劑防治肺缺血再灌注損傷的實(shí)驗(yàn)研究[J]. 復(fù)旦學(xué)報(bào)(醫(yī)學(xué)版), 2004,31(2):182-184.

    (收稿日期:2014-02-25)

    表2 各組血漿MDA含量及超氧化物岐化酶(SOD)活性(x±s)

    注:與Sham組比較,*P<0.05;與I/R組比較,#P<0.01

    2.3 肺通透性指數(shù)(LPI)和BALF中白細(xì)胞計(jì)數(shù)、中性粒細(xì)胞百分比

    與Sham組比較,I/R組BALF中WBC總數(shù)及中性粒細(xì)胞百分比明顯升高,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.01),I/R+ NaHS組BALF中WBC總數(shù)及中性粒細(xì)胞百分比雖比Sham組有所升高(P<0.05),但與I/R組對(duì)比BALF中WBC總數(shù)及中性粒細(xì)胞百分比明顯降低, 差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P均<0.01);與Sham組比較,I/R組肺通透指數(shù)明顯升高,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.01),I/R+ NaHS組肺通透指數(shù)雖比Sham組有所升高(P<0.05)但與I/R組對(duì)比,肺通透指數(shù)明顯降低,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.01)。見(jiàn)表3。

    表3 各組肺通透性指數(shù)及BALF中WBC計(jì)數(shù)、PMN百分比(x±s,n=8)

    注:與Sham組比較,*P<0.05;與I/R組比較,#P<0.01

    2.4 肺組織病理結(jié)果

    Sham組肺泡腔完整性好,肺泡間隔均勻無(wú)增厚,肺泡壁光滑,無(wú)滲出物及炎細(xì)胞浸潤(rùn)(封三圖1);I/R組出現(xiàn)明顯的肺組織水腫,毛細(xì)血管擴(kuò)張、充血,肺泡間隔增厚,肺泡腔內(nèi)充滿大量紅細(xì)胞及滲出物(封三圖2);I/R+ NaHS組肺組織毛細(xì)血管輕微擴(kuò)張,與I/R組比較,肺泡間隔及肺泡水腫減輕,肺泡腔滲出物明顯減少(封三圖3)。

    3 討論

    H2S本是一種有毒氣體,但近些年發(fā)現(xiàn)H2S是一種新型氣體信號(hào)分子,對(duì)心血管系統(tǒng)、神經(jīng)系統(tǒng)、消化道系統(tǒng)等均具有重要的調(diào)節(jié)作用[5]。新近研究證實(shí),H2S對(duì)心臟[6]、肝臟[7]、腦[8]、小腸[9]缺血再灌注損傷有一定的保護(hù)作用,其機(jī)制可能與抗氧化凋亡提高缺血耐受性有關(guān)[10]。

    肺缺血再灌注損傷(ischemia-reperfusion injury,I/R)的機(jī)制還不特別清晰,近年來(lái)認(rèn)為炎性介質(zhì)、氧自由基、內(nèi)皮細(xì)胞的損傷等機(jī)制在肺缺血再灌注損傷中有重要作用[11]。內(nèi)皮細(xì)胞的損傷引起肺毛細(xì)血管擴(kuò)張,從而通透性增高,引發(fā)肺組織水腫,肺組織濕/干重比值可反映肺水腫情況,再灌注后W/D比值,BALF中白細(xì)胞計(jì)數(shù)、中性粒細(xì)胞百分比及肺通透性指數(shù)均增高,而NaHS后處理后上述指標(biāo)明顯下降(P<0.05),其對(duì)肺缺血再灌注損傷產(chǎn)生了很好的效果。

    近年來(lái)證明氧自由基和活性氧是引起缺血再灌注損傷的主要影響因素。與缺血再灌注損傷有關(guān)的氧自由基(OFR)有過(guò)氧化氫(H2O2)、超氧陰離子(O2-)[12]。正常生理狀態(tài)下,氧自由基所引起的損傷可被機(jī)體“抗氧化屏障”所抑制,然而缺血再灌注使組織產(chǎn)生過(guò)多的氧自由基,破壞了內(nèi)源性抗氧化系統(tǒng),從而引起細(xì)胞壞死和組織的損傷。在此過(guò)程中,雙鍵脂肪酸在氧化后形成丙二醛,其含量可間接反映肺組織氧化損傷的情況。本實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明,I/R組中MDA含量與Sham組相比顯著升高,表明肺缺血再灌注時(shí),體內(nèi)大量的氧自由基積累,導(dǎo)致肺水腫。而NaHS處理后,MDA含量雖然比Sham組高,而與I/R組相比顯著下降(P<0.05)。實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明H2S處理后,可降低再灌注后血漿MDA的含量,能減輕氧自由基所引起的氧化損傷,從而達(dá)到一定的保護(hù)能力。SOD是機(jī)體的重要抗氧化活性酶,其活性水平能間接反映機(jī)體的抗氧化能力[13]。本實(shí)驗(yàn)中觀察到I/R組SOD活性與Sham組相比顯著下降,表明肺缺血再灌注后內(nèi)源性抗氧化活性酶消耗,從而導(dǎo)致氧自由基含量增加,破壞肺組織內(nèi)皮細(xì)胞,引起肺毛細(xì)血管擴(kuò)張,引起肺水腫,而NaHS處理后,SOD活性與I/R組相比顯著升高(P<0.05)。實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明,H2S處理后可以提高機(jī)體內(nèi)源性抗氧化活性酶的活性,從而達(dá)到清除氧自由基的目的。

    本實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明,外源性硫化氫可通過(guò)清除基體氧自由基,提高抗氧化酶活性,起到對(duì)肺缺血再灌注損傷起保護(hù)作用。然而對(duì)其劑量、給藥時(shí)間等尚需進(jìn)一步研究。

    [參考文獻(xiàn)]

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    (收稿日期:2014-02-25)

    表2 各組血漿MDA含量及超氧化物岐化酶(SOD)活性(x±s)

    注:與Sham組比較,*P<0.05;與I/R組比較,#P<0.01

    2.3 肺通透性指數(shù)(LPI)和BALF中白細(xì)胞計(jì)數(shù)、中性粒細(xì)胞百分比

    與Sham組比較,I/R組BALF中WBC總數(shù)及中性粒細(xì)胞百分比明顯升高,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.01),I/R+ NaHS組BALF中WBC總數(shù)及中性粒細(xì)胞百分比雖比Sham組有所升高(P<0.05),但與I/R組對(duì)比BALF中WBC總數(shù)及中性粒細(xì)胞百分比明顯降低, 差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P均<0.01);與Sham組比較,I/R組肺通透指數(shù)明顯升高,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.01),I/R+ NaHS組肺通透指數(shù)雖比Sham組有所升高(P<0.05)但與I/R組對(duì)比,肺通透指數(shù)明顯降低,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.01)。見(jiàn)表3。

    表3 各組肺通透性指數(shù)及BALF中WBC計(jì)數(shù)、PMN百分比(x±s,n=8)

    注:與Sham組比較,*P<0.05;與I/R組比較,#P<0.01

    2.4 肺組織病理結(jié)果

    Sham組肺泡腔完整性好,肺泡間隔均勻無(wú)增厚,肺泡壁光滑,無(wú)滲出物及炎細(xì)胞浸潤(rùn)(封三圖1);I/R組出現(xiàn)明顯的肺組織水腫,毛細(xì)血管擴(kuò)張、充血,肺泡間隔增厚,肺泡腔內(nèi)充滿大量紅細(xì)胞及滲出物(封三圖2);I/R+ NaHS組肺組織毛細(xì)血管輕微擴(kuò)張,與I/R組比較,肺泡間隔及肺泡水腫減輕,肺泡腔滲出物明顯減少(封三圖3)。

    3 討論

    H2S本是一種有毒氣體,但近些年發(fā)現(xiàn)H2S是一種新型氣體信號(hào)分子,對(duì)心血管系統(tǒng)、神經(jīng)系統(tǒng)、消化道系統(tǒng)等均具有重要的調(diào)節(jié)作用[5]。新近研究證實(shí),H2S對(duì)心臟[6]、肝臟[7]、腦[8]、小腸[9]缺血再灌注損傷有一定的保護(hù)作用,其機(jī)制可能與抗氧化凋亡提高缺血耐受性有關(guān)[10]。

    肺缺血再灌注損傷(ischemia-reperfusion injury,I/R)的機(jī)制還不特別清晰,近年來(lái)認(rèn)為炎性介質(zhì)、氧自由基、內(nèi)皮細(xì)胞的損傷等機(jī)制在肺缺血再灌注損傷中有重要作用[11]。內(nèi)皮細(xì)胞的損傷引起肺毛細(xì)血管擴(kuò)張,從而通透性增高,引發(fā)肺組織水腫,肺組織濕/干重比值可反映肺水腫情況,再灌注后W/D比值,BALF中白細(xì)胞計(jì)數(shù)、中性粒細(xì)胞百分比及肺通透性指數(shù)均增高,而NaHS后處理后上述指標(biāo)明顯下降(P<0.05),其對(duì)肺缺血再灌注損傷產(chǎn)生了很好的效果。

    近年來(lái)證明氧自由基和活性氧是引起缺血再灌注損傷的主要影響因素。與缺血再灌注損傷有關(guān)的氧自由基(OFR)有過(guò)氧化氫(H2O2)、超氧陰離子(O2-)[12]。正常生理狀態(tài)下,氧自由基所引起的損傷可被機(jī)體“抗氧化屏障”所抑制,然而缺血再灌注使組織產(chǎn)生過(guò)多的氧自由基,破壞了內(nèi)源性抗氧化系統(tǒng),從而引起細(xì)胞壞死和組織的損傷。在此過(guò)程中,雙鍵脂肪酸在氧化后形成丙二醛,其含量可間接反映肺組織氧化損傷的情況。本實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明,I/R組中MDA含量與Sham組相比顯著升高,表明肺缺血再灌注時(shí),體內(nèi)大量的氧自由基積累,導(dǎo)致肺水腫。而NaHS處理后,MDA含量雖然比Sham組高,而與I/R組相比顯著下降(P<0.05)。實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明H2S處理后,可降低再灌注后血漿MDA的含量,能減輕氧自由基所引起的氧化損傷,從而達(dá)到一定的保護(hù)能力。SOD是機(jī)體的重要抗氧化活性酶,其活性水平能間接反映機(jī)體的抗氧化能力[13]。本實(shí)驗(yàn)中觀察到I/R組SOD活性與Sham組相比顯著下降,表明肺缺血再灌注后內(nèi)源性抗氧化活性酶消耗,從而導(dǎo)致氧自由基含量增加,破壞肺組織內(nèi)皮細(xì)胞,引起肺毛細(xì)血管擴(kuò)張,引起肺水腫,而NaHS處理后,SOD活性與I/R組相比顯著升高(P<0.05)。實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明,H2S處理后可以提高機(jī)體內(nèi)源性抗氧化活性酶的活性,從而達(dá)到清除氧自由基的目的。

    本實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明,外源性硫化氫可通過(guò)清除基體氧自由基,提高抗氧化酶活性,起到對(duì)肺缺血再灌注損傷起保護(hù)作用。然而對(duì)其劑量、給藥時(shí)間等尚需進(jìn)一步研究。

    [參考文獻(xiàn)]

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    (收稿日期:2014-02-25)

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