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    采用顯微鑒別方法對(duì)柴胡藥材質(zhì)量的分析研究

    2019-10-20 01:16:42河南省新鄉(xiāng)市中醫(yī)院453000韓麗新
    首都食品與醫(yī)藥 2019年11期
    關(guān)鍵詞:染液二甲苯油管

    河南省新鄉(xiāng)市中醫(yī)院(453000)韓麗新

    柴胡在中醫(yī)學(xué)上屬于一類常用的中藥,其性味涼且苦,可發(fā)揮解熱、抗菌、鎮(zhèn)靜、抗病毒(流感病毒)、抗肝損傷等功效[1]。據(jù)《中國(guó)藥典》記載,柴胡一般類型為狹葉柴胡或傘形科植物柴胡的干燥根[2]。目前,在化學(xué)成分分析、醫(yī)學(xué)、栽培技術(shù)等領(lǐng)域?qū)Σ窈难芯肯鄬?duì)比較集中[3],但鮮有報(bào)道通過(guò)顯微鑒別方法對(duì)不同產(chǎn)地柴胡的藥材質(zhì)量進(jìn)行研究,本文通過(guò)收集來(lái)自不同產(chǎn)地的柴胡樣品,以期通過(guò)顯微鑒別方法來(lái)評(píng)價(jià)柴胡藥材質(zhì)量,為臨床上提供判定依據(jù)。

    1 材料與試劑

    1.1 材料 試驗(yàn)設(shè)備器材:切片機(jī)(生產(chǎn)商:石家莊現(xiàn)代儀器儀表公司),DGF-4A型立式電熱鼓風(fēng)干燥箱(生產(chǎn)商:天津市泰斯特儀器公司),電熱恒溫水浴鍋(生產(chǎn)商:北京科偉永興儀器公司),萬(wàn)用電爐(生產(chǎn)商:石家莊現(xiàn)代儀器儀表公司),解剖刀,毛筆,鑷子,染色缸,酒精燈,玻片架。

    1.2 試驗(yàn)試劑 石蠟,二甲苯、無(wú)水乙醇、甲醛、冰乙酸,蕃紅染液、樹膠、固綠染液。

    1.3 試驗(yàn)藥材 于2017年1月~2018年1月收集了24個(gè)柴胡樣品。見附表1。

    2 方法

    (1)取材:洗凈收集的藥材,并去除雜質(zhì),以溫水將其軟化(約1h),最后切成段備用(約0.5~1cm)。(2)制蠟片:①軟化:先將小瓶編號(hào),再將備好的藥材放入小瓶中,并記錄下來(lái),之后倒入軟化劑封上(軟化24h)。②固定:再將固定液FAA倒入裝有材料的小瓶中(固定24h)。③脫水:先后以50%、70%和90%的酒精對(duì)其脫水2h、2h和1.5h,最后再以無(wú)水乙醇脫水1.5h。④透明:先后以25%和75%二甲苯(酒精稀釋)將藥材透明1h和0.5h,之后,再以無(wú)水二甲苯透明20min。⑤滲蠟:分別在37、45和55℃下進(jìn)行滲蠟處理5h,2h和3h,保持在62℃時(shí),2h換蠟1次。⑥包埋:使蠟盒中的蠟維持固態(tài),將滲蠟處理完成的藥材放入蠟盒,靜置,直至蠟自然凝固。⑦切片和拷片:用切片機(jī)對(duì)樣品切橫切片(厚度9um),并將其在60℃拷2h。⑧染色:拷片過(guò)后的藥材先后在二甲苯(20min),無(wú)水乙醇(15min),95%乙醇(10min),85%乙醇(8min),70%乙醇(5min)中浸泡,最后將其置入翻紅染液中(浸泡一夜),之后再在酸性酒精(15min),85%乙醇(10min),95%乙醇(8min),固綠染液(2s),無(wú)水酒精(20min)和二甲苯(25min)中依次浸泡。⑨封片:染色完成后以樹膠對(duì)其封片。(3)在光學(xué)顯微鏡下對(duì)其顯微特征進(jìn)行觀察記錄,并簡(jiǎn)易繪制出其結(jié)構(gòu)圖。

    附表1 柴胡樣品

    3 結(jié)果

    顯微鑒別特征:產(chǎn)地為河北的柴胡大部分油管分布密集,排列較整齊,其中以石家莊市靈壽縣南營(yíng)鄉(xiāng)的油管分布最密集;而產(chǎn)地為甘肅的部分市縣的柴胡油管分布相對(duì)較多,如甘肅隴西縣菜子鎮(zhèn)、甘肅策底米家梁和甘肅漳縣;產(chǎn)地為河南的柴胡的油管大部分分布比較疏散。山西產(chǎn)地的柴胡僅有部分市縣的油管分布多。

    此外,柴胡產(chǎn)地在甘肅和河北的柴胡皂苷含量較高,而河南和山西所產(chǎn)的柴胡皂苷含量比較少。因此,我們認(rèn)為甘肅和河北生產(chǎn)的柴胡質(zhì)量較好,具體見附表2。

    4 討論

    在中藥鑒定中,顯微鑒定是一種常用手段,其能通過(guò)對(duì)藥材細(xì)胞形狀、組織構(gòu)造、和成分特征進(jìn)行觀察,從而實(shí)現(xiàn)對(duì)藥材真?zhèn)魏推焚|(zhì)的鑒定[4][5]。該方法的特點(diǎn)是操作簡(jiǎn)便、準(zhǔn)確且快捷,并且可以配合其它鑒定分析方法,有效的將中藥鑒定質(zhì)量提高[6]。

    本實(shí)驗(yàn)通過(guò)對(duì)不同產(chǎn)地的柴胡藥材進(jìn)行分析,實(shí)現(xiàn)了從顯微、性狀,再到成分的多重指標(biāo)控制,較傳統(tǒng)單一成分控制,有了新的突破,其在對(duì)中藥材質(zhì)量的控制方面有著較強(qiáng)的合理性。本實(shí)驗(yàn)在現(xiàn)有的樣品中得出柴胡質(zhì)量與其纖維和油管數(shù)相關(guān),但考慮到本研究樣品有限,研究?jī)?nèi)容僅僅考慮了柴胡的顯微和化學(xué)成分,因此需要結(jié)合藥理做進(jìn)一步研究。

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