阿托伐他汀與一氧化碳供體分子3聯(lián)用對動脈粥樣硬化易損斑塊模型大鼠炎癥及氧化應(yīng)激指標的影響

魏剛 包小敏 張英 黃維義

中圖分類號 R543.5 文獻標志碼 A 文章編號 1001-0408（2019）03-0338-06

DOI 10.6039/j.issn.1001-0408.2019.03.12

摘 要 目的：研究阿托伐他汀與一氧化碳供體分子3（CORM-3）聯(lián)用對動脈粥樣硬化（AS）易損斑塊模型大鼠炎癥及氧化應(yīng)激指標的影響。方法：取大鼠隨機分為對照組（灌胃生理鹽水）、模型組（灌胃生理鹽水）、他汀組[灌胃阿托伐他汀2 mg/kg]、他汀+CORM-3組[灌胃阿托伐他汀2 mg/kg+腹腔注射CORM-3 10 mg/kg]，每組8只。對照組大鼠予以基礎(chǔ)飼料喂養(yǎng)，右頸總動脈只經(jīng)歷手術(shù)暴露但不予損傷并用生理鹽水代替藥物干預(yù)；其余3組大鼠均予以高脂飼料喂養(yǎng)+右頸總動脈損傷+異種蛋白注射刺激免疫炎癥反應(yīng)等方法復(fù)制AS易損斑塊模型，繼續(xù)飼養(yǎng)10周后，給予相應(yīng)藥物進行干預(yù)，每天1次，連續(xù)2周。末次給藥24 h后取腹腔動脈血，使用全自動生化分析儀測定血漿中低密度脂蛋白膽固醇（LDL-C）、高密度脂蛋白膽固醇（HDL-C）濃度，采用酶聯(lián)免疫吸附試驗檢測血漿中超敏C反應(yīng)蛋白（hs-CRP）、白細胞介素10（IL-10）、單核細胞超化蛋白1（MCP-1）、基質(zhì)金屬蛋白酶9（MMP-9）水平，化學(xué)比色法測定血漿中丙二醛（MDA）、氧化修飾型低密度脂蛋白（ox-LDL）水平，Western blot法測定血紅素氧合酶1（HO-1）蛋白表達水平，并取右頸總動脈在光鏡下觀察病理學(xué)變化。結(jié)果：與對照組比較，模型組大鼠LDL-C、hs-CRP、MCP-1、MMP-9、MDA、ox-LDL水平和HO-1蛋白表達水平均明顯升高（P<0.05），HDL-C、IL-10水平均明顯降低（P<0.05），右頸總動脈形成明顯的易損斑塊。與模型組比較，他汀組和他汀+CORM-3組大鼠LDL-C、hs-CRP、MCP-1、MMP-9、MDA、ox-LDL水平均明顯降低（P<0.05），HDL-C、IL-10水平和HO-1蛋白表達水平均明顯升高（P<0.05），其中除LDL-C、HDL-C外其余指標他汀+CORM-3組改善效果較他汀組更明顯（P<0.05），他汀組頸動脈斑塊改變尚不明顯，但他汀+CORM-3組AS病變較模型組和他汀組顯著減輕，斑塊結(jié)構(gòu)也更趨穩(wěn)定。結(jié)論：阿托伐他汀與CORM-3聯(lián)用對AS易損斑塊模型大鼠炎癥及氧化應(yīng)激指標的改善作用強于單用阿托伐他汀，能促進AS易損斑塊穩(wěn)定。

關(guān)鍵詞 阿托伐他??；一氧化碳供體分子3；動脈粥樣硬化；易損斑塊；炎癥；氧化應(yīng)激；大鼠

ABSTRACT OBJECTIVE： To study the effects of atorvastatin combined with carbon monoxide releasing molecule 3 （CORM-3） on inflammation and oxidative stress indexes in atherosclerotic （AS） vulnerable plaque model rats. METHODS： The rats were randomly divided into control group （normal saline， i.g.）， model group （normal saline， i.g.）， statin group （atorvastatin 2 mg/kg， i.g.）， and statin+CORM-3 group （atorvastatin 2 mg/kg， i.g.+CORM-3 10 mg/kg， i.p.）， with 8 rats in each group. Control group was fed with basal diet， and the right common carotid artery was exposed to surgery without injury and was treated with normal saline instead of drug； other three groups were fed with high-fat diet+right common carotid artery injury+heteroprotein injection to induce AS vulnerable plaque model， for 10 weeks； and then they were given relevant medicine for intervention， once a day， for consecutive 2 weeks. 24 h after last medication， abdominal artery blood was collected； the concentration of LDL-C and HDL-C were determined by fully automatic biochemical analyzer. The levels of hs-CRP， IL-10， MCP-1 and MMP-9 in plasma were detected by ELISA； plasma levels of MDA and oxidized low density lipoprotein （ox-LDL） were determined by chemical colorimetry； the protein expression of heme oxygenase-1 （HO-1） was determined by Western blot. The pathological changes of right common carotid artery were observed under light microscope. RESULTS： Compared with control group， the levels of LDL-C， hs-CRP， MCP-1， MMP-9， MDA and ox-LDL， and protein expression of HO-1 were increased significantly （P<0.05）， while the levels of HDL-C and IL-10 were decreased significantly in model group （P<0.05）； the right common carotid artery formed obvious AS plaques. Compared with model group， the levels of LDL-C， hs-CRP， MCP-1， MMP-9， MDA and ox-LDL were decreased significantly in statin group and statin+CORM-3 group in model group （P<0.05）， while the levels of HDL-C， IL-10 and the protein expression of HO-1 were increased significantly （P<0.05）. Except for LDL-C and HDL-C， the improvement of other indexes in statin+CORM-3 group was more significant than statin group （P<0.05）； pathological changes of right common carotid artery in statin group were not obvious， but the pathological changes of rats in statin+CORM-3 group were significantly alleviated and plaque structure also tended to be more stable. CONCLUSIONS： Atorvastatin combined with CORM-3 is better than atorvastatin alone in improving inflammation and oxidative stress indexes of AS vulnerable plaque model rats， and can promote the stability of AS vulnerable plaques.

KEYWORDS Atorvastatin； CORM-3； Atherosclerosis； Vulnerable plaque； Inflammation； Oxidative stress； Rat

易損斑塊是引發(fā)主要心血管不良事件的重要病理基礎(chǔ)，而炎癥和氧化應(yīng)激是易損斑塊進展的罪魁禍首，由此可見，在動脈粥樣硬化（Atherosclerosis ，AS）防治中，抑制炎癥進而穩(wěn)定斑塊比消退斑塊更有臨床意義[1-2]。他汀類藥自問世以來因其顯著的調(diào)脂作用已成為AS防治的基石，但常規(guī)應(yīng)用他汀類藥僅能預(yù)防30%～40%的心血管事件，殘余風(fēng)險仍然很高[3]。近年來有研究發(fā)現(xiàn)，他汀類藥還能通過誘導(dǎo)血紅素氧合酶1（Heme oxygenase-1，HO-1）這一內(nèi)源性保護酶的表達發(fā)揮抗炎、抗氧化應(yīng)激、保護血管內(nèi)皮等調(diào)脂外作用，后者對穩(wěn)定AS易損斑塊尤其重要[4]。還有研究表明，他汀誘導(dǎo)HO-1表達與其劑量呈正相關(guān)性，誘導(dǎo)HO-1持續(xù)高表達所需劑量可能遠超臨床常規(guī)用量[5]。實際上，我國患者對強化他汀類藥治療的耐受性差[6]，采用中小劑量的常規(guī)他汀類藥進行治療時，可能會因劑量不足以高效誘導(dǎo)HO-1表達而削弱其穩(wěn)定易損斑塊及減少心血管不良事件的作用，如何彌補這一缺陷值得探討。已知HO-1能夠催化游離血紅素降解生成膽紅素、一氧化碳（CO）和Fe2+，且CO是HO-1發(fā)揮有益作用的主要效應(yīng)分子[7-8]，此外外源性CO也能通過多種細胞內(nèi)信號途徑產(chǎn)生與HO-1表達相似的抗炎、抗組織細胞乃至器官損傷等作用[9]，但補充外源性CO能否協(xié)同小劑量他汀類藥增強易損斑塊的穩(wěn)定性目前國內(nèi)外均無研究報道。CO供體物質(zhì)經(jīng)過不斷的研究開發(fā)，目前主要有五種類型，其中新型一氧化碳供體分子3（CORM-3）為目前開發(fā)的第三代過渡金屬羰基類有機化合物，為新型水溶性CO供體分子，具有良好的應(yīng)用前景，在體內(nèi)可持續(xù)釋放CO作用于靶點組織發(fā)揮抗炎、抗氧化作用[10-12]。本文擬選用CORM-3及循證醫(yī)學(xué)證據(jù)最足的阿托伐他汀[13]，探討兩者聯(lián)用對AS易損斑塊模型大鼠炎癥及氧化應(yīng)激指標的影響，以期為AS的臨床治療提供參考。

1 材料

1.1 儀器

TBA-40FR全自動生化分析儀（湖南湘儀實驗室儀器開發(fā)有限公司）；DR-200Bs酶標儀（濟南Diatek公司）；TGL-16c臺式離心機（上海安亭科學(xué)儀器廠）；WD-9405A脫色搖床（北京市六一儀器廠）；光學(xué)顯微鏡（日本 Olympus 公司）。

1.2 藥品與試劑

維生素D3注射液（上海通用藥業(yè)股份有限公司，批號：170921，規(guī)格：30萬u ∶ 1 mL）；卵清白蛋白（批號：201706P9）和牛血清白蛋白（批號：712W051）均購自北京索萊寶科技有限公司；阿托伐他汀鈣片（輝瑞制藥有限公司，批號：W19186，規(guī)格：20 mg）、CORM-3（美國Sigma公司，批號：LQ2657-467，純度：>98%）；氧化修飾型低密度脂蛋白（ox-LDL）、丙二醛（MDA）、基質(zhì)金屬蛋白酶9（MMP-9）、超敏C反應(yīng)蛋白（hs-CRP）、白細胞介素10（IL-10）、單核細胞超化蛋白1（MCP-1）（英國Abcam公司，批號：Ek-R31009、Ek-AQ2098、Ek-LQ5402、Ek-R30252、Ek-HT0183、Z06527）；HO-1抗體試劑盒（美國Novus公司，批號：HU-203242）；甘油醛-3-磷酸脫氫酶（GAPDH）（中杉金橋公司，批號：ZPI-9032）。

1.3 動物

SPF級SD大鼠32只，♂，8周齡，體質(zhì)量（200±10） g，由西南醫(yī)科大學(xué)醫(yī)學(xué)實驗中心提供和飼養(yǎng)，實驗動物生產(chǎn)許可證號：SCXK（川）2018-17，使用許可證號：SYXK（川）2018-065。飼養(yǎng)環(huán)境室溫：21～22 ℃，相對濕度：50%～60%，本實驗研究方案已獲得西南醫(yī)科大學(xué)實驗動物倫理委員會批準（IACUC：20170917006），所有大鼠均按照3R原則給予人道主義關(guān)懷。

1.4 高脂飼料

高脂飼料配方：在81.3%比例的基礎(chǔ)飼料中均勻混入丙基氧嘧啶-膽酸鈉-膽固醇-豬油的混合物，混合物比例分別為0.2%、0.5%、3%、10%，經(jīng)消毒滅菌后制成顆粒狀飼料。

2 方法

2.1 分組與給藥

經(jīng)適應(yīng)性喂養(yǎng)1周的大鼠隨機分為4組，即對照組（灌胃生理鹽水）、模型組（灌胃生理鹽水）、他汀組（灌胃阿托伐他汀2 mg/kg）、他汀+CORM-3組（灌胃阿托伐他汀2 mg/kg+腹腔注射CORM-3 10 mg/kg），每組8只。對照組大鼠持續(xù)予以基礎(chǔ)飼料喂養(yǎng)，其余3組大鼠均以高脂飼料喂養(yǎng)2周，并在高脂飲食基礎(chǔ)上復(fù)制AS易損斑塊模型，繼續(xù)經(jīng)高脂飼料喂養(yǎng)10周后，給予相應(yīng)藥物進行干預(yù)，每天給藥1次，連續(xù)干預(yù)2周。阿托伐他汀的給藥劑量是按照實驗動物與人體用藥量的折算系數(shù)換算的臨床常規(guī)用量；CORM-3的給藥劑量是參考文獻[10]中的劑量，二者均以生理鹽水為溶劑進行稀釋。

2.2 造模

對照組大鼠右頸總動脈只分離暴露但不予損傷，各時間點的干預(yù)操作與其余組相同，但所用藥物均用生理鹽水代替。其余3組大鼠參照文獻[14-15]方法復(fù)制AS易損斑塊模型，經(jīng)腹腔一次性注射維生素D3注射液70萬u/kg并以高脂飼料飼養(yǎng)2周后，在無菌環(huán)境下進行以下操作：首先經(jīng)腹腔注射50 mg/kg戊巴比妥鈉進行麻醉手術(shù)，充分麻醉后沿其頸前正中線位置將其皮膚切開，使其右側(cè)勁總動脈充分暴露，排空血液并以微動脈夾阻斷右頸總動脈近心端及遠心端，以液氮對該段血管冷凍損傷約15 s，去除動脈夾恢復(fù)血流，縫合傷口。術(shù)后繼續(xù)高脂飼料喂養(yǎng)并經(jīng)皮下注射牛血清白蛋白（40 mg/kg，每周3次，共計3周），并經(jīng)腹腔注射卵清白蛋白（2.5 mg/kg，每3 d 1次，共計5次）；并于第5、7周各追加腹腔注射維生素D3 30萬u/kg，第6周不給藥和維生素D3，僅持續(xù)予以高脂飼料飼養(yǎng)。10周后，光鏡下觀察血管內(nèi)膜、纖維帽、脂質(zhì)沉積、炎癥細胞、膠原含量等形態(tài)結(jié)構(gòu)的變化，并結(jié)合血清學(xué)炎癥、氧化應(yīng)激指標綜合判斷AS易損斑塊模型是否復(fù)制成功[16]。

2.3 血漿中血脂指標的檢測

于最后一次給藥24 h后，經(jīng)腹腔動脈取血5 mL后，立即以3 000 r/min離心5 min后分離出血漿，然后通過TBA-40FR全自動生化分析儀測定其中低密度脂蛋白膽固醇（LDL-C）、高密度脂蛋白膽固醇（HDL-C）的濃度。

2.4 血漿炎癥、氧化應(yīng)激指標的檢測

經(jīng)腹主動脈取血后分離血漿，采用酶聯(lián)免疫吸附試驗檢測其中相關(guān)炎癥指標hs-CRP、IL-10、MCP-1、MMP-9水平，采用化學(xué)比色法檢測相關(guān)氧化損傷指標MDA、ox-LDL水平，均按照試劑盒說明書操作。

2.5 Western blot法檢測HO-1的表達

經(jīng)腹主動脈取血后離心，小心吸取白細胞層，加入3倍體積紅細胞裂解液，反復(fù)輕晃5～10 min，經(jīng)1 000 r/min離心3 min后吸棄上清液，然后再加入3倍體積的紅細胞裂解液，重復(fù)進行上述操作，到出現(xiàn)白色沉淀物為止。按照HO-1抗體試劑盒說明書進行操作，采用Western blot法檢測HO-1蛋白表達量，以GAPDH為內(nèi)參，通過Quantity圖像分析軟件對相對表達量進行分析，并且以目標蛋白與內(nèi)參的灰度比值來表示。

2.6 右頸總動脈病理組織學(xué)檢查

取血完畢后處死各組大鼠，取造模的靶血管段，于西南醫(yī)科大學(xué)附屬醫(yī)院病理科經(jīng)10%甲醛進行固定、包埋和脫水處理后行蘇木精-伊紅（HE）染色，然后在光鏡下觀察纖維帽厚度、脂質(zhì)含量、膠原含量、炎癥細胞浸潤等AS易損斑塊特征的病理形態(tài)學(xué)變化。

2.7 統(tǒng)計學(xué)方法

采用SPSS 19.0軟件進行統(tǒng)計分析，計量數(shù)據(jù)以x±s表示。采用單因素方差分析，方差齊時采用LSD法進行組間比較；反之，則采用t檢驗。P<0.05表示差異有統(tǒng)計學(xué)意義。

3 結(jié)果

3.1 血脂指標變化

與對照組比較，模型組大鼠血漿中LDL-C濃度含量明顯升高，而HDL-C濃度則明顯降低（P<0.05）。與模型組比較，他汀組和他汀+CORM-3組大鼠血漿中LDL-C濃度明顯降低，HDL-C濃度則明顯升高（P<0.05）。他汀組與他汀+CORM-3組比較，LDL-C、HDL-C濃度差異均無統(tǒng)計學(xué)意義（P>0.05）。各組大鼠血漿中LDL-C、HDL-C濃度的測定結(jié)果見表1。

3.2 血漿中炎癥與氧化應(yīng)激指標變化

與對照組比較，其余3組大鼠血漿中hs-CRP、MCP-1、MMP-9、MDA、ox-LDL水平均明顯升高（P<0.05），IL-10水平明顯降低（P<0.05）。與模型組比較，他汀組、他汀+CORM-3組大鼠血漿中hs-CRP、MCP-1、MMP-9、MDA、ox-LDL水平均明顯降低（P<0.05），IL-10水平明顯升高（P<0.05）。與他汀組比較，他汀+CORM-3組大鼠血漿中hs-CRP、MCP-1、MMP-9、MDA、ox-LDL水平均明顯降低（P<0.05），IL-10水平明顯升高（P<0.05）。各組大鼠血漿中炎癥指標的測定結(jié)果見表2，氧化應(yīng)激指標的測定結(jié)果見表3。

3.3 HO-1蛋白表達變化

對照組、模型組、他汀組、他汀+CORM-3組大鼠的HO-1蛋白相對表達量分別為0.050±0.008、0.093±0.007、0.226±0.015、0.397±0.012。與對照組比較，其余3組大鼠的HO-1蛋白相對表達量均明顯升高（P<0.05）。與模型組比較，他汀組、他汀+CORM-3組大鼠的HO-1蛋白相對表達量均明顯升高（P<0.05）。與他汀組比較，他汀+CORM-3組大鼠的HO-1蛋白相對表達量明顯升高（P<0.05）。各組大鼠HO-1蛋白表達的電泳圖見圖1，相對表達量測定結(jié)果見圖2。

3.4 頸總動脈組織病理學(xué)變化

對照組大鼠右側(cè)頸總動脈鏡下病理學(xué)提示，各層結(jié)構(gòu)排列整齊，未見明顯AS易損斑塊形成；模型組大鼠右側(cè)頸總動脈鏡下病理學(xué)提示，內(nèi)皮存在明顯隆起的AS易損斑塊，纖維帽薄且不完整，其下含有大量的脂質(zhì)沉積，且脂核較明顯，斑塊內(nèi)膠原纖維含量較少且存在大量的炎癥細胞浸潤情況，內(nèi)膜增厚，結(jié)構(gòu)明顯紊亂；他汀組與模型組大鼠右側(cè)頸總動脈鏡下病理學(xué)提示，他汀組與模型組相似，均可見內(nèi)皮明顯增厚隆起，纖維帽薄且不完整，存在大量泡沫細胞，中膜平滑肌纖維排列紊亂，但他汀組頸總動脈炎癥細胞浸潤減少；他汀+CORM-3組AS病變較模型組和他汀組顯著減輕，脂核已不明顯，纖維帽雖薄但內(nèi)皮覆蓋較完整，炎癥細胞浸潤明顯減少。各組大鼠右頸總動脈組織病理學(xué)變化見圖3。

4 討論

鼠與人類同屬雜食性動物，可以復(fù)制出與人體AS相似的模型，且在內(nèi)皮受損及炎癥刺激基礎(chǔ)上更易于復(fù)制出易損斑塊，考慮到雌性大鼠體內(nèi)雌激素水平對復(fù)制AS易損斑塊模型干擾較大，因此，本研究選用雄性SD大鼠，并借鑒文獻[14-15]采用了如下綜合方法：在高脂飼料喂養(yǎng)+多次注射維生素D3基礎(chǔ)上，特地用液氮冷凍右側(cè)頸總動脈造成靶血管內(nèi)皮損傷和局部無菌性炎癥，隨后數(shù)次注射異種蛋白進一步激發(fā)免疫性炎癥反應(yīng)，歷經(jīng)12周后，檢測模型組大鼠顯示右頸總動脈出現(xiàn)典型形態(tài)的不穩(wěn)定AS易損斑塊，同時測得血漿中多種炎癥與氧化應(yīng)激指標均明顯升高，這些變化證明采用的綜合方法成功復(fù)制出了大鼠AS易損斑塊模型[16]，為后續(xù)的干預(yù)實驗奠定了基礎(chǔ)。

HO-1是一種具有抗AS作用的酶，在AS斑塊形成過程中是有一定表達的，但表達量不足以發(fā)揮抗AS的作用，因此誘導(dǎo)HO-1的表達使其發(fā)揮抗炎、抗氧化應(yīng)激、保護血管內(nèi)皮等對穩(wěn)定AS易損斑塊尤其重要[8]。因此本研究在復(fù)制AS易損斑塊模型后設(shè)置了他汀、他汀+CORM-3兩個干預(yù)組，兩組阿托伐他汀用量相等，均約等于臨床常規(guī)劑量。結(jié)果顯示，與對照組及模型組比較，他汀組和他汀+CORM-3組取得的調(diào)脂效果相同，且都能增加HO-1蛋白表達，但他汀+CORM-3組誘導(dǎo)HO-1蛋白表達的效果強于他汀組，同時，兩組在改善炎癥、氧化應(yīng)激與AS易損斑塊方面效果也有明顯差異。相較于模型組，他汀組促炎癥與氧化應(yīng)激的指標雖明顯降低且抗炎因子IL-10水平增加，但AS易損斑塊卻無明顯改善；他汀+CORM-3組在促炎癥與氧化應(yīng)激的指標更顯著降低的同時AS易損斑塊也明顯改善，表明阿托伐他汀聯(lián)合CORM-3在抗炎、抗氧化和穩(wěn)定易損斑塊等效果上強于單用阿托伐他汀。

他汀類藥主要通過調(diào)脂作用抑制AS[17]，其穩(wěn)定或逆轉(zhuǎn)AS易損斑塊的過程緩慢，短期干預(yù)常難有顯著改善。然而又有研究發(fā)現(xiàn)，他汀類藥能通過p38腺苷酸活化蛋白激酶（p38MAPK）、核轉(zhuǎn)錄因子 κB（NF-κB）、Nrf-2/ARE等細胞信號轉(zhuǎn)導(dǎo)途徑誘導(dǎo)HO-1蛋白表達，后者可能是他汀類藥抗炎、抗氧化應(yīng)激等“調(diào)脂外作用”的主要介導(dǎo)者，可先于調(diào)脂作用顯現(xiàn)出對AS易損斑塊的穩(wěn)定效果[18]。HO-1實質(zhì)是細胞內(nèi)一種可誘導(dǎo)型抗氧化酶，其主要作用是催化游離血紅素降解成膽紅素和CO等產(chǎn)物。現(xiàn)已明確，膽紅素是一種細胞內(nèi)源性強抗氧化劑，對多種自由基均能有效清除以抑制氧化應(yīng)激損傷；CO則是重要的細胞內(nèi)氣體信號分子，主要通過抑制Toll樣受體4（TLR4）/NF-κB信號通路產(chǎn)生抗炎及抗氧化等作用[19]。HO-1/膽紅素/CO共同組成了組織細胞應(yīng)對炎癥和氧化應(yīng)激損傷所不可或缺的內(nèi)源性保護系統(tǒng)，先天缺乏HO-1基因或后天阻滯HO-1表達與活性均可促發(fā)嚴重的AS病變，而合理上調(diào)HO-1表達則已成為包括AS在內(nèi)的許多疾病的有效防治靶點[18]。

有研究表明，他汀類藥誘導(dǎo)HO-1表達具有明顯的劑量依賴性[20]。正如本研究中他汀組所用常規(guī)劑量的阿托伐他汀，盡管能誘導(dǎo)HO-1表達，但畢竟上調(diào)的幅度有限，其抗炎、抗氧化作用較弱，短期內(nèi)難以快速顯現(xiàn)出穩(wěn)定AS易損斑塊的效果。此外，多數(shù)國人因橫紋肌溶解、肝毒性等副作用對大劑量他汀類藥耐受性較差也是一個不可忽視的限制性因素[6，21]，如何彌補這一缺陷值得探討?；贑O是HO-1發(fā)揮抗炎、抗氧化以及抗細胞凋亡等作用的主要效應(yīng)分子，理論上誘導(dǎo)HO-1的表達缺乏可以通過補充外源性CO來替代并取得相似的生物學(xué)效應(yīng)。為此，本研究特別設(shè)計了他汀+CORM-3組，其中CORM-3為低毒的新型水溶性CO供體分子，在體內(nèi)可不經(jīng)代謝而持續(xù)24 h以上釋放CO作用于靶點組織發(fā)揮抗炎作用，且CORM-3本身也能誘導(dǎo)HO-1表達[10-11]。本研究結(jié)果顯示，他汀+CORM-3組調(diào)脂效果雖與他汀組相當，但誘導(dǎo)的HO-1相對表達量明顯高于他汀組，由此提示加用CORM-3能通過釋放CO和增加HO-1誘導(dǎo)表達雙重機制發(fā)揮更強的抗炎、抗氧化應(yīng)激損傷作用。該作用再與阿托伐他汀的調(diào)脂作用相疊加從而協(xié)同增強了穩(wěn)定AS易損斑塊的最終效果，具體表現(xiàn)在右頸總動脈AS易損斑塊病變程度減輕、脂核縮小、斑塊內(nèi)炎癥細胞浸潤減少、斑塊表面內(nèi)皮覆蓋較完整等。

目前離體和在體實驗均表明，CO有助于抑制炎癥和氧化應(yīng)激損傷。但由于第一代CO供體物質(zhì)（CORM-1）及第二代CO供體物質(zhì)（CORM-2）均需在理化因素刺激下才能有效釋放CO，其難以操控的安全閾值限制了二者在生物系統(tǒng)中的應(yīng)用。相比之下，新開發(fā)的CORM-3不受理化因素的影響，溶于水溶液中可穩(wěn)定而持續(xù)低濃度釋放CO，其安全性大大提升，因此具有很好的應(yīng)用前景[12]。

綜上所述，常規(guī)劑量的阿托伐他汀聯(lián)合CORM-3治療AS時有望能協(xié)同增強抗炎、抗氧化應(yīng)激損傷、穩(wěn)定AS易損斑塊，從而有效降低心血管不良事件，但這一推論尚需獲得臨床試驗證實。

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（收稿日期：2018-09-10 修回日期：2018-12-06）

（編輯：鄒麗娟）