草履蟲活體觀察和培養(yǎng)方法探討

楊佳明

摘 要：草履蟲的觀察實驗是中學里常見的演示實驗，為了尋找較好的草履蟲觀察和培養(yǎng)方法，實驗對幾種不同的觀察和培養(yǎng)方法進行了對比，以供中學師生參考。

關鍵詞：草履蟲; 棉片法; 活體觀察

中圖分類號：Q95-331? ? ? ? ? ? ?文獻標識碼：A? ? ?文章編號：1006-3315（2019）05-015-001

草履蟲是中學實驗中常見的動物實驗材料，因其結構簡單、數(shù)量眾多、形體微小，在中學里比較適合結合顯微鏡的使用來作為一個演示實驗考察學生的實驗綜合能力，包括顯微鏡的使用、動手能力，還能鍛煉大家的耐心和細心等。草履蟲種類比較多，其中普遍用于觀察實驗的是體形較大的一種，被稱為大草履蟲。下面就草履蟲的活體觀察和培養(yǎng)方法進行分析探討，以期為中學師生提供實驗觀察和飼養(yǎng)繁殖方面的參考。

1.草履蟲的觀察

中學生尤其是初中生，往往第一個動物的活體實驗就是草履蟲的觀察，此實驗對培養(yǎng)學生熱愛生物的興趣有重要作用。

相關的實驗指導叢書上介紹的通常的方法是取棉花做成很薄的棉片，利用棉花纖維來阻擋草履蟲的運動，這里我們姑且稱之為“棉片法”。

這種方法明顯的不足就是棉片的量拿不準，少了阻滯不了，多了又將草履蟲都蓋住了看不到，而且棉花纖維不容易分開，易造成模糊而影響草履蟲的觀察效果。為此，我們嘗試了其他幾種不同的方法，收到了較好的效果，現(xiàn)對其進行介紹。

1.1膠水法

我們首先想到的方法是尋找有黏性的東西來限制草履蟲的運動。為此我們首先想到的是膠水。具體操作如下：先加少量膠水于載玻片，然后加適量草履蟲培養(yǎng)液于膠水中，用東西（如鑷子）混勻，再蓋上蓋玻片，鏡檢。

這種方法操作簡便，草履蟲運動緩慢，能清楚地用來觀察內部結構，尤其是由于膠水與普通水溶液滲透壓不同導致草履蟲的伸縮泡和收集管變化顯著，另外由于沒有遮擋物，所以能清楚的觀察到草履蟲的運動器官纖毛的擺動。這種方法缺點是膠水與草履蟲溶液的混合比例要恰當，膠水過量很容易導致草履蟲過快地失水變形和死亡。

1.2玉米糊法

日常使用的有黏性的除了膠水外，首先考慮到的就是各種有粘稠性的“粥”。其中玉米粥是日常最常見而且制作比較簡單，結構比較單一的粥，為此考慮使用這種方法。

具體方法：將玉米面跟水按照一定比例（實驗中采用的是1：20的重量比），熬成玉米粥，然后待冷卻后將其與草履蟲培養(yǎng)液按照一定的比例混合，具體混合比例根據(jù)粥放置后的粘稠度而定，如果放置時間較長會更干，需要的草履蟲溶液要多一些，反之不干稠的粥混合的草履蟲溶液可以少一些，具體在實驗中可以隨時的根據(jù)混合后的粘稠程度和實驗效果，再加入其中的一種物質來調整粘稠度。這種方法的效果與膠水法相比，對混合比例的要求不是很高，不會導致草履蟲因過快失水死亡，而且草履蟲的體型不容易變化，觀察效果較好。

1.3鏡頭紙法

具體方法：把鏡頭紙剪成與蓋玻片等大的方塊，將含有草履蟲的溶液加到上面去，量不能太多，以剛好能濕潤鏡頭紙為宜，然后蓋上蓋玻片觀察。這種方法的優(yōu)點是鏡頭紙薄，里面的纖維比較均勻，能較好地限制草履蟲的運動;但要注意草履蟲溶液的量不能加多，量過多容易阻滯不了草履蟲。

綜上所述：經(jīng)過幾種方法的對比發(fā)現(xiàn)，草履蟲活體觀察，不同的方法觀察到的特征有所不同，但就整體而言效果更好的是玉米糊法，這種方法簡單、快速，因為沒有遮擋物，草履蟲的觀察能做到一覽無余，效果理想。

2.草履蟲的培養(yǎng)

2.1各種培養(yǎng)液的制備

2.1.1稻草培養(yǎng)液。取稻草將中部稻莖剪成2cm左右長度，稱取15g放入燒杯中，加1000mL蒸餾水煮沸15min，當液體呈現(xiàn)黃褐色時停止加熱。把燒杯放在有陽光的區(qū)域，不需要陽光直射，經(jīng)過3-4天，稻草中的枯草桿菌的芽孢開始萌發(fā)，并依靠稻草液中的豐富養(yǎng)料迅速繁殖，液體逐漸混濁，等到大量細菌在液體表面形成了一層灰白色薄膜時，稻草培養(yǎng)液便制成了。按10ml加入1滴含草履蟲的水樣比例將草履蟲移至培養(yǎng)液中。

2.1.2酵母片培養(yǎng)液。稱取干酵母2g放入容器中，加1000mL蒸餾水，搖蕩均勻，使其充分溶解。為了防止空氣中其他原生動物的包囊落入和蚊蟲產(chǎn)卵，燒杯口要用雙層紗布包嚴。同樣放置一段時間，待液體表面有一層灰白色薄膜時，酵母培養(yǎng)液便制成了。按10ml加入1滴含草履蟲的水樣比例將草履蟲移至培養(yǎng)液中。

2.1.3小米培養(yǎng)液。取未淘洗過的小米10g放入100g清水中煮沸15min，自然冷卻，然后用濾紙過濾，經(jīng)大約24h待培養(yǎng)液表層同樣出現(xiàn)灰白色薄膜時，表明有大量細菌繁殖后，小米培養(yǎng)液便可以使用了。按10ml加入1滴含草履蟲的水樣比例將草履蟲移至培養(yǎng)液中。

2.1.4馬鈴薯培養(yǎng)液。將馬鈴薯200g切塊后放在鍋里煮沸15min，用紗布過濾大塊，加水1000ml放置3-4d左右，會自然滋生大量的細菌，以供草履蟲培養(yǎng)使用，表層同樣出現(xiàn)灰白色薄膜時表明有大量細菌繁殖后，馬鈴薯培養(yǎng)液便可以使用了。為了防止空氣中其他原生動物的包囊落入和蚊蟲產(chǎn)卵，燒杯口要用雙層紗布包嚴。按10ml加入1滴含草履蟲的水樣比例將草履蟲移至培養(yǎng)液中。

2.1.5玉米粉培養(yǎng)液。把10g的玉米粉放入1000ml水中，加熱至沸騰后再用小火煮10min，趁熱用紗布濾去較大的顆粒，待放涼后表層同樣出現(xiàn)灰白色薄膜時表明有大量細菌繁殖后，玉米粉培養(yǎng)液便可以使用了。為了防止空氣中其他原生動物的包囊落入和蚊蟲產(chǎn)卵，燒杯口要用雙層紗布包嚴。按10ml加入1滴含草履蟲的水樣比例將草履蟲移至培養(yǎng)液中。

2.2草履蟲的計數(shù)方法

采用同樣大小的吸管在凹玻片上滴加一滴，在光學顯微鏡下統(tǒng)計數(shù)目，每種溶液取上中下三層，每層各取3滴，最后取平均值作為計數(shù)結果，未見草履蟲者用空白表示。

2.3各種培養(yǎng)方法的結果比較

稻草培養(yǎng)液和酵母片培養(yǎng)液草履蟲的數(shù)量優(yōu)于小米培養(yǎng)液、玉米粉培養(yǎng)液和馬鈴薯培養(yǎng)液，其中又以酵母培養(yǎng)液效果最好，優(yōu)于傳統(tǒng)的草履蟲培養(yǎng)液——稻草培養(yǎng)液。