維生素D水平與成人哮喘及非哮喘的相關(guān)性研究

付慶萍 黃萬(wàn)秀 李毅

摘要：目的? 評(píng)估哮喘及非哮喘者的血清維生素D水平及其與肺功能、嗜酸性粒細(xì)胞計(jì)數(shù)的相關(guān)性。方法? 選取我院2015年9月1日～2016年1月20日收治的85例哮喘患者以及73例健康體檢者作為研究對(duì)象。根據(jù)皮膚過(guò)敏試驗(yàn)結(jié)果將哮喘患者分為過(guò)敏哮喘組56例和非過(guò)敏性哮喘組29例，對(duì)比兩亞組間維生素D水平的差異性;采外周血測(cè)量嗜酸性粒細(xì)胞計(jì)數(shù)，用肺功能儀測(cè)量肺功能，包括肺活量（FVC）、第1秒最大呼氣量（FEV1）、第1秒最大呼氣率（FEV1/FVC），分析過(guò)敏哮喘組和非過(guò)敏性哮喘組維生素D水平與肺功能、嗜酸性粒細(xì)胞計(jì)數(shù)的相關(guān)性。結(jié)果? 哮喘患者的維生素D水平為（14.36±0.57）ng/ml，低于健康體檢組的（22.13±0.84）ng/ml，統(tǒng)計(jì)學(xué)意義顯著（P<0.01）。過(guò)敏哮喘組和非過(guò)敏哮喘組的維生素D水平比較，差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P>0.05）。低水平維生素D患哮喘的風(fēng)險(xiǎn)增加1.2倍（優(yōu)勢(shì)比：1.194，95%可信區(qū)間：1.194～1.286，P<0.01）。維生素D水平與肺功能和嗜酸性粒細(xì)胞計(jì)數(shù)水平無(wú)顯著相關(guān)性。結(jié)論? 哮喘患者的維生素D水平低于正常人群，維生素D的缺乏與哮喘的發(fā)生密切相關(guān);維生素D水平與肺功能、嗜酸性粒細(xì)胞計(jì)數(shù)沒(méi)有相關(guān)性。

關(guān)鍵詞：維生素D;哮喘;肺功能;嗜酸性粒細(xì)胞計(jì)數(shù)

中圖分類號(hào)：R562.25? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? 文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼：A? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ?DOI：10.3969/j.issn.1006-1959.2019.05.026

文章編號(hào)：1006-1959（2019）05-0087-04

Abstract：Objective? To assess serum vitamin D levels in asthma and non-asthmatic individuals and their association with lung function and eosinophil count. Methods? 85 patients with asthma and 73 healthy subjects were enrolled in our hospital from September 1， 2015 to January 20， 2016. According to the results of skin allergy test， asthma patients were divided into 56 patients with allergic asthma and 29 patients with non-allergic asthma. The difference of vitamin D levels between the two subgroups was compared. The eosinophil count was measured by peripheral blood. Measurement of lung function， including vital capacity （FVC）， maximum expiratory volume in 1 second （FEV1）， maximum expiratory rate in 1 second （FEV1/FVC）， analysis of vitamin D levels and pulmonary function in allergic asthma and non-allergic asthma groups Correlation between eosinophil counts. Results? The vitamin D level of asthmatic patients was （14.36±0.57） ng/ml， which was lower than that of healthy subjects （22.13±0.84） ng/ml， which was statistically significant （P<0.01）. There was no significant difference in vitamin D levels between the allergic asthma group and the non-allergic asthma group （P>0.05）. The risk of asthma with low levels of vitamin D increased 1.2-fold （odds ratio： 1.194， 95% confidence interval： 1.194 to 1.286， P<0.01）. There was no significant correlation between vitamin D levels and lung function and eosinophil counts. Conclusion? The vitamin D level of asthma patients is lower than that of normal people. The deficiency of vitamin D is closely related to the occurrence of asthma. There is no correlation between vitamin D level and lung function and eosinophil count.

Key words：Vitamin D;Asthma;Lung function;Eosinophil count

哮喘（asthma）是一種氣道慢性炎癥性疾病，其發(fā)病機(jī)理尚不完全清楚。盡管近年來(lái)哮喘領(lǐng)域的研究較多，但這種疾病在全球的發(fā)病率仍然很高[1]。研究表明，維生素D的作用非常廣泛，不僅是骨沉積的關(guān)鍵因素，它也參與腫瘤、內(nèi)分泌疾病、心血管疾病、精神病、自身免疫性疾病和過(guò)敏性疾病包括哮喘的發(fā)生[2]。維生素D可能影響哮喘氣道平滑肌的重塑[3]，另外，與維生素D相關(guān)的一些基因也可能參與了哮喘的發(fā)生。本研究的目的是評(píng)估成人哮喘和非哮喘血清維生素D水平及其與肺功能、嗜酸性粒細(xì)胞計(jì)數(shù)相關(guān)性。

1對(duì)象與方法

1.1研究對(duì)象? 選取四川大學(xué)華西廣安醫(yī)院/廣安市人民醫(yī)院2015年9月1日～2016年1月20日收治的85例哮喘控制穩(wěn)定患者為觀察組，符合我國(guó)2008年制定的《支氣管哮喘防治指南》中的診斷標(biāo)準(zhǔn)，中低劑量吸入糖皮質(zhì)激素[1]。另選取同期我院73例健康體檢者為對(duì)照組，均為年齡超過(guò)18歲的成人。所有研究對(duì)象患者在1個(gè)月內(nèi)均無(wú)急性呼吸道感染的跡象，排除任何急性或慢性呼吸道疾?。ㄏ猓?、妊娠、自身免疫和腫瘤疾病。本研究經(jīng)醫(yī)院倫理會(huì)批準(zhǔn)，患者均知情同意。根據(jù)哮喘患者的過(guò)敏狀態(tài)將觀察組分為兩個(gè)亞組：過(guò)敏哮喘組（n=56）和非過(guò)敏性哮喘組（n=29）。過(guò)敏哮喘組根據(jù)皮膚過(guò)敏試驗(yàn)結(jié)果再次分為三個(gè)亞組：?jiǎn)我晃脒^(guò)敏原組（n=9）、多個(gè)吸入過(guò)敏原組（n=40）和混合性過(guò)敏原組（吸入和食物，n=7）。

1.2方法

1.2.1肺功能檢測(cè)? 采用CustovitM 肺活量?jī)x（Custo Med，德國(guó)）檢測(cè)?；颊呷∽?，使用鼻夾。采納三個(gè)測(cè)量值：第1秒最大呼氣量（FEV1）、用力肺活量（FVC）、第1秒最大呼氣率（FEV1/FVC）。

1.2.2過(guò)敏性評(píng)估? 患者過(guò)敏性評(píng)估采用皮膚注射過(guò)敏原的方法與標(biāo)準(zhǔn)。皮膚過(guò)敏試驗(yàn)是在患者的前臂注入常見(jiàn)過(guò)敏原試劑，20 min后觀察結(jié)果。如果測(cè)試部位起水皰的直徑≥3 mm則為陽(yáng)性。

1.2.3維生素D水平測(cè)量? 血清25（OH）D3濃度代表維生素D水平。酶聯(lián)免疫法（ELISA，Bio-Clin-Inc，美國(guó)）測(cè)量血清25（OH）D3濃度，25（OH）D3標(biāo)準(zhǔn)范圍定義：30～150 ng/ml為正常;<10 ng/ml為缺乏，10～30 ng/ml為不足，>150 ng/ml為過(guò)多。研究對(duì)象1年之內(nèi)沒(méi)有接受維生素D補(bǔ)充。

1.3統(tǒng)計(jì)學(xué)方法? 采用SPSS 13.0統(tǒng)計(jì)軟件包分析處理數(shù)據(jù)。計(jì)數(shù)資料以（%）表示，采用？字2檢驗(yàn)。符合正態(tài)分布的計(jì)量資料均以（x±s）表示。哮喘患者與健康人群、過(guò)敏性與非過(guò)敏性哮喘、吸煙者與不吸煙者以及過(guò)敏性哮喘亞組的組間維生素D水平比較采用非參數(shù)檢驗(yàn)（曼惠特尼U檢驗(yàn)和Kruskal-Wallis檢驗(yàn)）。各組之間比較嗜酸性粒細(xì)胞計(jì)數(shù)采用曼惠特尼U檢驗(yàn)。采用Spearman相關(guān)系數(shù)和線性回歸分析維生素D與肺功能（FEV1、FVC和FEV1/FVC）、嗜酸性粒細(xì)胞計(jì)數(shù)之間的關(guān)聯(lián)性。二元邏輯回歸分析不同因素導(dǎo)致哮喘發(fā)生的風(fēng)險(xiǎn)度。P<0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，P<0.01為統(tǒng)計(jì)學(xué)意義顯著。

2結(jié)果

2.1觀察組和對(duì)照組一般資料比較? 觀察組和對(duì)照組性別、年齡、BMI等一般資料比較，差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P>0.05），具有可比性，見(jiàn)表1。

2.2觀察組和對(duì)照組維生素D水平比較? 觀察組維生素D水平低于對(duì)照組，統(tǒng)計(jì)學(xué)意義顯著（P<0.01），見(jiàn)圖1。

2.3哮喘的危險(xiǎn)因素評(píng)估? 二分類邏輯回歸分析結(jié)果顯示，低水平維生素D患哮喘的風(fēng)險(xiǎn)增加1.2倍（優(yōu)勢(shì)比：1.194，95%可信區(qū)間：1.194～1.286，P<0.01），同時(shí)還與性別也顯著相關(guān)。年齡、吸煙、BMI與哮喘的發(fā)病沒(méi)有相關(guān)性。見(jiàn)表2。

2.4維生素D水平與肺功能、嗜酸性粒細(xì)胞計(jì)數(shù)之間的關(guān)系? 觀察組維生素D水平與肺功能（FEV1、FVC、FEV1/FVC）、嗜酸性粒細(xì)胞計(jì)數(shù)沒(méi)有相關(guān)性;對(duì)照組的維生素D水平與以上指標(biāo)也無(wú)相關(guān)性?；旌闲赃^(guò)敏原組的維生素D水平與嗜酸性粒細(xì)胞計(jì)數(shù)呈現(xiàn)負(fù)相關(guān)（P<0.05），見(jiàn)表3。

3討論

本研究結(jié)果表明，哮喘患者的維生素D水平顯著低于健康人群，這與目前多數(shù)學(xué)者觀點(diǎn)一致[4];缺乏維生素D使哮喘患病風(fēng)險(xiǎn)增加了1.2倍，因此，有理由推論維生素D可能在哮喘的發(fā)病機(jī)制中發(fā)揮了重要的作用。本研究中選擇測(cè)量25（OH）D3的濃度作為維生素D水平的評(píng)估。25（OH）D3在體內(nèi)僅通肝臟中代謝，而1，25（OH）2D3可在肝臟和腎臟代謝，其形成是由甲狀旁腺素和降鈣素調(diào)節(jié)，因此1，25（OH）2D3濃度受多種因素影響，可能會(huì)使結(jié)論產(chǎn)生偏倚，故相對(duì)于D[1，25（OH）2D3]，25（OH）D3的濃度作為維生素D水平評(píng)估更準(zhǔn)確[5]。此外，血液樣本在秋季和冬季（10、11和12月份）采集[6]，盡可能避免了陽(yáng)光照射所產(chǎn)生的影響。

無(wú)論是成人或是兒童哮喘患者維生素D水平均降低，其原因之一可能是維生素D的缺乏降低了IL-10的分泌。IL-10是一種抗炎因子，在淋巴細(xì)胞和單核細(xì)胞內(nèi)調(diào)節(jié)細(xì)胞對(duì)糖皮質(zhì)激素的敏感性[7]。另外，低水平的維生素D誘導(dǎo)了IL-5、IL-6和IL-8的分泌，其在炎癥反應(yīng)發(fā)生機(jī)制中發(fā)揮著重要的作用[8]。所有這些因素都可能導(dǎo)致哮喘的發(fā)生或發(fā)作。也有學(xué)者提出相反的觀點(diǎn)，低維生素D狀態(tài)與哮喘的發(fā)病沒(méi)有顯著相關(guān)性[9]。有研究認(rèn)為，維生素D不足僅與哮喘急性發(fā)作相關(guān)[10]。但經(jīng)分析，在這些研究中，均在春季和夏季取血液樣本，這可能會(huì)導(dǎo)致維生素D水平假性升高。

有越來(lái)越多的共識(shí)認(rèn)為，哮喘的發(fā)病不僅復(fù)雜而且是多因素，不同環(huán)境因素均可誘發(fā)，受多種基因控制，可表現(xiàn)為不同的形式或類型[11]。過(guò)敏性和非過(guò)敏性哮喘在免疫機(jī)制和危險(xiǎn)因素方面都是不同的。過(guò)敏性哮喘的特點(diǎn)是依賴T2淋巴細(xì)胞的嗜酸性粒細(xì)胞炎癥反應(yīng)，而非過(guò)敏性哮喘的特點(diǎn)是不依賴T2淋巴細(xì)胞的中性粒細(xì)胞炎癥反應(yīng)。最近文獻(xiàn)數(shù)據(jù)顯示[12]，低維生素D水平可誘發(fā)過(guò)敏反應(yīng)，特別是兒童。這表明了維生素D與T細(xì)胞以及各種細(xì)胞因子均有相關(guān)性，這在過(guò)敏反應(yīng)中起著非常重要的作用。但是，本研究數(shù)據(jù)并未發(fā)現(xiàn)維生素D水平與哮喘患者的高敏狀態(tài)有顯著的相關(guān)性。

過(guò)敏性疾病的發(fā)病機(jī)理目前已基本明確，嗜酸性粒細(xì)胞是參與過(guò)敏反應(yīng)的重要成分。盡管本研究數(shù)據(jù)表明，外周血嗜酸性粒細(xì)胞計(jì)數(shù)在過(guò)敏性哮喘患者中高于非過(guò)敏性哮喘患者，但統(tǒng)計(jì)學(xué)表明這些標(biāo)記物與維生素D水平之間沒(méi)有相關(guān)性。然而，在哮喘患者進(jìn)一步分成的三個(gè)亞組的研究結(jié)果表明，混合性過(guò)敏原組患者的維生素D水平和嗜酸性粒細(xì)胞計(jì)數(shù)呈現(xiàn)負(fù)相關(guān)。由此有理由推論，有多種混合性過(guò)敏原的過(guò)敏性哮喘患者，維生素D缺乏是重要的發(fā)病原因之一。維生素D水平與嗜酸性粒細(xì)胞計(jì)數(shù)之間的相關(guān)性目前仍有爭(zhēng)議。有學(xué)者認(rèn)為維生素D水平與這些標(biāo)志物無(wú)相關(guān)性[13]，也有些學(xué)者認(rèn)為有相關(guān)性[14]，因此，還需要進(jìn)一步的研究來(lái)闡明。

慢性炎癥增加了氣道的反應(yīng)性，降低了肺功能。研究表明，缺乏維生素D可引起氣道平滑肌細(xì)胞的增生，可在氣道重塑時(shí)通過(guò)調(diào)節(jié)基因轉(zhuǎn)錄從而影響這些細(xì)胞的生長(zhǎng)[15]。維生素D水平和肺功能的相關(guān)性仍有爭(zhēng)議。本研究發(fā)現(xiàn)維生素D水平和肺功能（FEV1、FVC、FEV1/FVC）之間沒(méi)有相關(guān)性。一些研究表明，維生素D水平和FEV1、FEV1/FVC有顯著相關(guān)性[14]。Tolppanen AM等[12]研究證實(shí)，F(xiàn)EV1和25（OH）的D2之間顯著相關(guān)，但肺功能和25（OH）D3無(wú)顯著相關(guān)性，這與本研究結(jié)論一致。

綜上所述，哮喘患者的維生素D水平低于健康人群，維生素D的缺乏與哮喘的發(fā)生密切相關(guān);維生素D水平與肺功能、嗜酸性粒細(xì)胞計(jì)數(shù)沒(méi)有相關(guān)性。

參考文獻(xiàn)：

[1]中華醫(yī)學(xué)會(huì)呼吸病學(xué)分會(huì)哮喘學(xué)組.支氣管哮喘防治指南（支氣管哮喘的定義、診斷、治療和管理方案）[J].中華結(jié)核和呼吸雜志，2008，31（3）：177-185.

[2]Meems LM，de Borst MH，Postma DS，et al.Low levels of vitamin D are associated with multimorbidity： results from the LifeLines Cohort Study[J].Ann Med，2015，47（6）：474-481.

[3]Hall SC，F(xiàn)ischer KD，Agrawal DK.The impact of vitamin D on asthmatic human airway smooth muscle[J].Expert Rev Respir Med，2015，28（12）：1-9.

[4]Ahmed SZ，Jaleel A，Hameed K.Does Vitamin D deficiency contribute to the severity of asthma in chiildren and adults？[J].J Ayub Med Coll Abbottabad，2015，27（2）：458-463.

[5]Castro M，King TS，Kunselman SJ，et al.Effect of vitamin D3 on asthma treatment failures in adults with symptomatic asthma and lower vitamin D levels： the VIDA randomized clinical trial[J].JAMA，2014，311（20）：2083-2091.

[6]Holy X，Bégot L，Renault S.Seasonal influence over serum and urine metabolic markers in submariners during prolonged patrols[J].Physiol Rep，2015，3（8）：e12494.

[7]Urry Z，Chambers ES，Xystrakis E，et al.The role of 1ɑ，25-dihydroxyvitamin D3 and cytokines in the promotion of distinct Foxp3+ and IL-10+ CD4+ T cells[J].Eur J Immunol，2012，42（10）：2697-2708.

[8]Poon AH，Mahboub B，Qutayba Hamid Q.Vitamin D deficiency and severe asthma[J].Pharmacol Ther，2013，140（2）：148-155.

[9]Menon J，Maranda L，Nwosu BU.Serum 25-hydroxyvitamin D levels do not correlate with asthma severity in a case-controlled study of children and adolescents[J].J Pediatr Endorinol Metab，2012，25（7-8）：673-679.

[10]Brehm JM，Acosta-Pérez E，Klei L，et al.Vitamin D insufficiency and severe asthma exacerbations in Puerto Rican children[J].Am J Respir Crit Care Med，2012，186（2）：140-146.

[11]Vimaleswaran KS，Berry DJ，Lu C，et al.Causal relationship between obesity and vitamin D status： bi-directional Mendelian randomization analysis of multiple cohorts[J].PLoS Med，2013，10（2）：e1001383.

[12]Tolppanen AM，Sayers A，Granell R，et al.Prospective association of 25-hydroxyvitamin d3 and d2 with childhood lung function， asthma， wheezing， and flexural dermatitis[J].Epidemiology，2013，24（2）：310-319.

[13]Li F，Peng M，Jiang L，et al.Vitamin D deficiency is associated with decreased lung function in Chinese adults with asthma[J].Respiration，2011，81（6）：469-475.

[14]馬秀麗，甄艷芬.支氣管哮喘兒童血清25-（OH）D3和總免疫球蛋白E的變化[J].中國(guó)當(dāng)代兒科雜志，2011，13（7）：551-553.

[15]Tripathi P，Awasthi S，Gao P.ADAM metallopeptidase domain 33 （ADAM33）： a promising target for asthma[J].Mediators Inflamm，2014（4）：572025.

收稿日期：2018-11-27;修回日期：2018-12-23

編輯/楊倩