高頻右心房起搏建立犬心房顫動(dòng)模型和植入式心電監(jiān)測器的評(píng)估

趙璐露，華寶桐，陳麗玲，蒲里津，代榮俗，徐永玄，郭 濤，趙 玲*

(1.昆明醫(yī)科大學(xué)第一附屬醫(yī)院，昆明 650032； 2.昆明醫(yī)科大學(xué)，昆明 650500；3.云南省阜外心血管病醫(yī)院，昆明 650106)

心房顫動(dòng)是臨床上最常見的快速性心律失常，由于心房喪失了有效的舒縮功能，導(dǎo)致患者生活質(zhì)量下降、繼發(fā)導(dǎo)致心力衰竭、心律失常性猝死和缺血性腦卒中等疾病[1]，其具有很高的發(fā)病率及死亡率[2]，已成為嚴(yán)重威脅人類健康的慢性非傳染性心血管流行病。隨著基礎(chǔ)和臨床研究的不斷深入，心房顫動(dòng)的診治能力得到顯著提高，發(fā)生和發(fā)展機(jī)制也逐漸被闡明，但房顫的診療仍不容樂觀，導(dǎo)致了對(duì)房顫機(jī)制及新療法的研究迫在眉睫。為了更好更全面的深入研究心房顫動(dòng)的發(fā)生機(jī)制，穩(wěn)定的心房顫動(dòng)動(dòng)物模型的建立對(duì)于研究心房顫動(dòng)的機(jī)制以及治療方法有重要的意義。

本研究中通過心房快速起搏的方法建立穩(wěn)定的慢性心房顫動(dòng)的動(dòng)物模型，在建立模型的過程中，借助SelectSecure系統(tǒng)，將直徑僅為4.1 Fr的細(xì)雙極實(shí)心電極導(dǎo)線3830主動(dòng)固定電極建立心房快速起搏系統(tǒng)[3]，同時(shí)運(yùn)用植入式心電監(jiān)測器，檢測、記錄心房顫動(dòng)的發(fā)生，提高高頻起搏建立心房顫動(dòng)模型的效率。

1 材料和方法

1.1 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物

12只SPF級(jí)成年比格犬，年齡為7～12個(gè)月，雌雄不限，體質(zhì)量12～16 kg，由昆明醫(yī)科大學(xué)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物中心提供(購自重慶市中藥研究院實(shí)驗(yàn)動(dòng)物研究所[SCXK (渝)2012-0006])。動(dòng)物飼養(yǎng)于昆明醫(yī)科大學(xué)動(dòng)物實(shí)驗(yàn)中心比格犬飼養(yǎng)動(dòng)物房[SYXK (滇) K2015-0002]，常規(guī)飲食，光照保持晝夜節(jié)奏各12 h，溫度控制在20℃～25℃，相對(duì)濕度控制在50%～70%。本研究獲得昆明醫(yī)科大學(xué)動(dòng)物實(shí)驗(yàn)倫理審查委員會(huì)審核批準(zhǔn)(倫理批準(zhǔn)號(hào)：KMMU2018022，批準(zhǔn)時(shí)間：2016年1月)。遵循國家衛(wèi)生研究院實(shí)驗(yàn)動(dòng)物護(hù)理和使用概述的指導(dǎo)原則，按照實(shí)驗(yàn)動(dòng)物使用的3R原則給予人道的關(guān)懷。

實(shí)驗(yàn)用比格犬隨機(jī)分為空白對(duì)照組(6只)和心房顫動(dòng)模型組(AF組，6只)，所有的犬在術(shù)前使用電推剪備皮，備皮部位包括雙側(cè)頸部、雙側(cè)腹股溝區(qū)、前胸部、腰背部L2～3區(qū)及四肢。

1.2 主要試劑與儀器

戊巴比妥鈉(美國Fluka公司進(jìn)口分裝)；甲醛(上海生工生物)；戊二醛(上海生工生物)。房顫模型起搏器(中國陜西秦明公司)；8631起搏系統(tǒng)程控儀(中國陜西秦明公司)；SelectSiteTM鞘管系統(tǒng)(美國美敦力公司，C304 S-59)；SelectSecureTM電極導(dǎo)線(美國美敦力公司，3830-59 cm)；植入式心電監(jiān)測器Reveal LINQ(美國美敦力公司)；Vivid q型彩色多普勒心臟彩色超聲診斷儀(美國GE公司)；體表12導(dǎo)心電圖儀(美國Marquet)；普通光鏡Olympus-CX31(日本奧林巴斯公司)；電鏡(日本株式會(huì)社)。

1.3 實(shí)驗(yàn)方法

1.3.1 建立犬右心房快速起搏系統(tǒng)

對(duì)進(jìn)行心房顫動(dòng)模型制備的實(shí)驗(yàn)犬(AF組)進(jìn)行常規(guī)備皮后，側(cè)臥于導(dǎo)管床上，給予鼻導(dǎo)管維持低流量吸氧，以3%戊巴比妥鈉30 mg/kg靜脈麻醉，以每小時(shí)2 mg/kg維持麻醉。在手術(shù)過程中，持續(xù)監(jiān)測體表標(biāo)準(zhǔn)肢體導(dǎo)聯(lián)心電圖，心率，血壓氧飽和度等生命體征指標(biāo)。在無菌操作下,穿刺右側(cè)頸外靜脈，送入配套長100 cm的“J”型導(dǎo)引鋼絲至下腔靜脈，將SelectSiteTM鞘管系統(tǒng)組裝完成，沿導(dǎo)引導(dǎo)絲送入右心房，而后導(dǎo)引導(dǎo)絲緩慢地移除，鞘管使用肝素水進(jìn)行沖洗，將直徑僅為4.1 Fr的細(xì)電極導(dǎo)線準(zhǔn)確插入止血閥，推送電極導(dǎo)線至螺旋進(jìn)入鞘管頂端的黑色Mark標(biāo)記處，旋轉(zhuǎn)3830螺旋電極，將其在高位右心房處定位并固定鞘管，緩慢推進(jìn)電極導(dǎo)線直至螺旋環(huán)超出導(dǎo)管2～3 cm并接觸到心房肌壁，以順時(shí)針的方向?qū)㈦姌O導(dǎo)線旋轉(zhuǎn)3～4圈，X線透視下確認(rèn)導(dǎo)線固定，測試起搏電極參數(shù)(包括閾值、脈寬、感知、阻抗等)，參數(shù)滿意后撤出鞘管并固定電極導(dǎo)線；將電極與起搏器連接,將埋藏式高頻率(頻率90～810次/min)房顫模型起搏器埋藏于頸前外側(cè)的囊袋內(nèi)(圖1)。確認(rèn)生命體征正常后，術(shù)后注射青霉素800 000 U 3 d，預(yù)防感染。空白對(duì)照組實(shí)驗(yàn)犬不建立犬右心房快速起搏系統(tǒng)。

1.3.2 心房顫動(dòng)動(dòng)物模型的建立

術(shù)后進(jìn)行心房顫動(dòng)模型的建立，運(yùn)用體外起搏器系統(tǒng)程控儀將高頻房顫模型起搏器程控為AOO起搏模式，設(shè)置起搏器的輸出、脈寬，均為所測閾值的兩倍。將起搏器的基礎(chǔ)刺激頻率從90次/min起始設(shè)置，觀察實(shí)驗(yàn)犬呼吸、心率、飲食等基本狀況，是否出現(xiàn)心衰的相關(guān)癥狀及其他異常征象，當(dāng)實(shí)驗(yàn)犬呼吸急促，聽診心率快，不思飲食，四肢冰涼等情況時(shí)，多考慮實(shí)驗(yàn)犬出現(xiàn)心衰癥狀。根據(jù)實(shí)際情況，持續(xù)性或間斷性地進(jìn)行右心房高頻起搏，逐步調(diào)整起搏刺激頻率，每次增加幅度為10～20次/min，每周分別描記一次標(biāo)準(zhǔn)肢體導(dǎo)聯(lián)心電圖,程控心臟起搏器起搏狀態(tài)，結(jié)合植入式心電監(jiān)測器Reveal LINQ追蹤器所記錄數(shù)據(jù)，高頻起搏直至關(guān)閉房顫模型起搏器起搏功能后，可在不需要心房程序性刺激誘發(fā)下，通過所記錄的標(biāo)準(zhǔn)肢體導(dǎo)聯(lián)心電圖，當(dāng)心電圖表現(xiàn)為P波消失，代之以大小、形態(tài)及時(shí)限均不規(guī)則的顫動(dòng)波，心室律不規(guī)整時(shí)，提示出現(xiàn)心房顫動(dòng)[4]，判定房顫模型建立成功，持續(xù)時(shí)間大于15 min的房顫定義為持續(xù)性房顫[4]。

1.3.3 Reveal LINQ追蹤器的植入

AF組實(shí)驗(yàn)犬植入心電監(jiān)測器Reveal LINQ。實(shí)驗(yàn)犬呈仰臥位，常規(guī)在前胸部消毒，進(jìn)行鋪巾，定位于胸部第四至第五肋間,于胸部正中線左緣2 cm，與胸部正中線呈45°夾角，定位成功后，利多卡因進(jìn)行局部麻醉，以特質(zhì)手術(shù)刀切開皮膚，使用分離工具分離皮下組織形成植入通路，最后以植入心電監(jiān)測器配套注射工具注入心電監(jiān)測器Reveal LINQ(圖2)。術(shù)后進(jìn)行程控，設(shè)置追蹤器工作參數(shù),將“AT/AF Detection”設(shè)置為“AF Only”，記錄AF負(fù)荷。

注：A：實(shí)驗(yàn)犬仰臥于手術(shù)臺(tái)上，將植入部位定位于胸部第四至第五肋間,正中線左緣2 cm；B：以特質(zhì)手術(shù)刀切開皮膚；C：使用分離工具分離皮下組織；D：使用分離工具分離皮下組織后形成植入通路；E：用配套注射工具注入植入式心電監(jiān)測器Reveal LINQ；F：成功植入心電監(jiān)測器Reveal LINQ。圖2 Reveal LINQ追蹤器的植入Note. A, The experimental dog was supine on the operating table. The implantation site was located between the fourth and fifth ribs of the chest, 2 cm from the left margin of the median line. B, A skin incision was made with a special scalpel. C, The subcutaneous tissues were separated with a separating tool. D, An implantation pathway was formed after the subcutaneous tissues were separated by a separating tool. E, The implanted ECG monitor, Reveal LINQ, was injected with matching injection tools. F, The Reveal LINQ was successfully established.Figure 2 The implantation of Reveal LINQ

1.3.4 超聲心動(dòng)圖的檢查

入選實(shí)驗(yàn)的比格犬在術(shù)前均進(jìn)行超聲心動(dòng)圖的檢查(采用心臟彩色超聲顯像儀，探頭發(fā)射頻率2.5 MHZ)，AF組的實(shí)驗(yàn)犬分別在房顫模型成功建立后、處死前進(jìn)行超聲心動(dòng)圖檢查；對(duì)照組實(shí)驗(yàn)犬均進(jìn)行同期超聲心動(dòng)圖檢查。在心尖四腔切面測量雙心房面積，取3～5個(gè)心動(dòng)周期測量參數(shù)，取平均值。

1.3.5 處死實(shí)驗(yàn)犬并采集組織標(biāo)本

處死兩實(shí)驗(yàn)組實(shí)驗(yàn)犬后，于其胸部正中線，逐層開胸，取出心臟，分離采集左心房組織標(biāo)本備檢。進(jìn)行形態(tài)學(xué)光鏡觀察的標(biāo)本以10%甲醛固定，制作石蠟切片；進(jìn)行形態(tài)學(xué)電鏡觀察的標(biāo)本以2.5%戊二醛固定，用于電鏡切片觀察，進(jìn)行免疫組化檢測的標(biāo)本用4%多聚甲醛固定。

1.4 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法

2 結(jié)果

2.1 實(shí)驗(yàn)整體情況

整個(gè)實(shí)驗(yàn)中共納入12只犬，在建模過程中死亡2只，其余10只實(shí)驗(yàn)犬完成實(shí)驗(yàn)。AF組實(shí)驗(yàn)犬均成功植入高頻率房顫模型起搏器建立房顫模型系統(tǒng)，并均植入心電監(jiān)測器Reveal LINQ。在AF組建立房顫模型過程中，有2只實(shí)驗(yàn)犬在建模過程中猝死，根據(jù)Reveal LINQ追蹤器數(shù)據(jù)提示，發(fā)生室性惡性心律失常。空白組6只犬均存活。

2.2 心房顫動(dòng)建模中房顫誘發(fā)時(shí)間及建模成功率

AF組成功植入高頻率房顫模型起搏器，在可無需心房程序性刺激，自身出現(xiàn)心房顫動(dòng)(圖3)。建立成功誘發(fā)出心房顫動(dòng)的時(shí)間為(10.63±2.13)周；房顫模型建立成功時(shí)，在AOO起搏模式下，高頻房顫模型起搏器心房刺激頻率為(588.75±11.26)次/min。

2.3 植入式心電監(jiān)測器動(dòng)態(tài)追蹤記錄房顫負(fù)荷的比較

通過運(yùn)用植入式心電監(jiān)測器Reveal LINQ動(dòng)態(tài)追蹤記錄房顫負(fù)荷，用以監(jiān)測心房顫動(dòng)的發(fā)生的房顫的負(fù)荷變化。房顫負(fù)荷的定義是AT/AF的總發(fā)作時(shí)間。當(dāng)程控為“AF Only”時(shí)，AT/AF時(shí)間報(bào)告的是AF事件時(shí)長，即當(dāng)Reveal LINQ追蹤器程控為“AF Only”時(shí)，房顫負(fù)荷的定義為AF的總的發(fā)作時(shí)間[5](圖4)。

在建立的心房顫動(dòng)模型中，運(yùn)用該植入式心電監(jiān)測器動(dòng)態(tài)追蹤記錄房顫負(fù)荷，結(jié)合描記標(biāo)準(zhǔn)肢體導(dǎo)聯(lián)心電圖結(jié)果提示，有3只實(shí)驗(yàn)犬為陣發(fā)性心房顫動(dòng)，1只實(shí)驗(yàn)犬房顫負(fù)荷可達(dá)99.9%，同時(shí)行體表心電圖檢查，為心房顫動(dòng)心電圖表現(xiàn)，提示該實(shí)驗(yàn)犬運(yùn)用快速心房起搏的方式成功建立心房顫動(dòng)模型，且呈持續(xù)性房顫。

注：A、B：實(shí)驗(yàn)犬術(shù)前心電圖，竇性心律；C、D：通過快速心房起搏建立心房顫動(dòng)模型；E、F：在心房顫動(dòng)模型建立中，當(dāng)高頻房顫模型起搏器心房刺激頻率為500次/min時(shí)，關(guān)閉起搏器后，心電圖呈竇性心律，心動(dòng)過速，P波高尖；G、H：心房顫動(dòng)模型建立成功，心電圖表現(xiàn)為P波消失，代之以大小、形態(tài)及時(shí)限均不規(guī)則的顫動(dòng)波，心室律不規(guī)整。圖3 心房顫動(dòng)模型建立過程心電圖及建模成功后心電圖Note. A and B, Electrocardiograms were performed before the operation of the experimental dogs, showing a sinus rhythm. C and D, Atrial fibrillation models were established by rapid atrial pacing. E and F, In the establishment of the atrial fibrillation model, the atrial stimulation frequency of the pacemaker in the high-frequency atrial fibrillation model was 500 beats per min. After closing the pacing function of the pacemaker, ECG showed a sinus rhythm, tachycardia and peaked P waves. G and H, Atrial fibrillation models were successfully established. The electrocardiogram showed that the P wave disappeared and was replaced by an irregular tremor wave with an irregular size, shape and time limit, and an irregular ventricular rhythm.Figure 3 ECG during and after the establishment of the atrial fibrillation model

圖4 植入式心電監(jiān)測器Reveal LINQ記錄房顫事件報(bào)告Figure 4 Atrial fibrillation events recorded by the implantable ECG monitor, Reveal LINQ

2.4 超聲心動(dòng)圖檢測實(shí)驗(yàn)犬左心房及右心房面積比較

采用心臟彩色超聲顯像儀，探頭發(fā)射頻率2.5 MHZ對(duì)入選實(shí)驗(yàn)的比格犬進(jìn)行超聲心動(dòng)圖的檢查，經(jīng)心尖四腔測量左、右心房收縮末期心房面積(圖5)。

注：A：對(duì)左心房面積的測量；B：對(duì)右心房面積的測量。圖5 超聲心動(dòng)圖測量左心房及右心房面積Note. A, Measurement of the left atrial area. B, Measurement of the right atrial area.Figure 5 The areas of the left atrium and right atrium were measured by echocardiography

經(jīng)配對(duì)t檢驗(yàn)，心房顫動(dòng)建模成功后，AF組實(shí)驗(yàn)犬在房顫模型成功建立后與建模前相比較，左心房面積明顯增大[(8.20±0.83) cm2與(3.80±0.08) cm2相比，P<0.05]；右心房面積增大[(4.52±0.44) cm2與(2.75±0.96) cm2相比，P<0.05](表1)。

經(jīng)配對(duì)t檢驗(yàn)，AF組實(shí)驗(yàn)犬在房顫模型成功建立后與對(duì)照組相比較，左心房面積明顯增大[(8.20±0.83) cm2與(3.72±0.15) cm2相比，P<0.05]；右心房面積增大[(4.52±0.44) cm2與(2.78±0.18) cm2相比，P<0.05](表2)。

2.5 左心房心肌形態(tài)學(xué)觀察

2.5.1 左心房心肌病理結(jié)構(gòu)的改變

在HE染色切片上，對(duì)照組中左心房心肌細(xì)胞結(jié)構(gòu)完整，排列整齊，細(xì)胞核清晰，規(guī)則的纖維網(wǎng)填充與整個(gè)心肌細(xì)胞；間質(zhì)內(nèi)成纖維細(xì)胞形狀規(guī)則數(shù)量適中。AF組中，心肌細(xì)胞增大，排列紊亂，細(xì)胞核大小不規(guī)則，核出現(xiàn)異型改變，部分細(xì)胞出現(xiàn)明顯壞死，空泡變性及顆粒樣變性，細(xì)胞間質(zhì)疏松，出現(xiàn)心肌纖維化，有炎癥細(xì)胞的浸潤(圖6)。

2.5.2 左心房心肌超微結(jié)構(gòu)的改變

左心房心肌細(xì)胞電鏡結(jié)果提示對(duì)照組左心房肌細(xì)胞的肌原纖維節(jié)的排列是有序的，核膜內(nèi)染色質(zhì)結(jié)構(gòu)表現(xiàn)為正常；AF組左心房肌細(xì)胞超微結(jié)構(gòu)明顯異常，肌原纖維節(jié)出現(xiàn)了嚴(yán)重的退化，細(xì)胞核出現(xiàn)嚴(yán)重的固縮的現(xiàn)象，同時(shí)還可見有細(xì)胞的凋亡，內(nèi)質(zhì)網(wǎng)出現(xiàn)腫大征象，伴隨著部分肌絲的崩解，肌纖維表現(xiàn)出雜亂無序(圖7)。

3 討論

心房顫動(dòng)是臨床上最常見的一種心律失常，已成為一種心血管流行性疾病[6-7]。對(duì)心房顫動(dòng)機(jī)制的深入研究需要基于心房顫動(dòng)動(dòng)物模型進(jìn)行研究。文獻(xiàn)報(bào)道，目前在疾病狀態(tài)下的在體動(dòng)物房顫模型依據(jù)不同的制備方法，可根據(jù)實(shí)施建模方法的不同分為藥物房顫模型[8-10]、創(chuàng)傷房顫模型、電刺激房顫模型、缺血房顫模型、基因工程房顫模型等。在上述的各種房顫模型的建立方法中，高頻心房起搏具有房顫誘發(fā)率高，持續(xù)時(shí)間長，制作方法不復(fù)雜，可重復(fù)性強(qiáng)，對(duì)動(dòng)物損傷小，可較貼近臨床狀況等特點(diǎn)。

Wijffels等[11]于1995年首次報(bào)道了在建立持續(xù)性房顫模型時(shí)，是通過運(yùn)用快速心房起搏的方法制作的，將起搏電極置于右心耳，300～600次起搏4～6周制備持續(xù)性房顫模型。通過該模型的建立，可動(dòng)物模型發(fā)生心房電重構(gòu)改變，心房異質(zhì)性增加，繼而導(dǎo)致房顫易于誘發(fā)。Tan等[12]研究報(bào)道快速心房起搏最初可誘發(fā)出陣發(fā)性房顫;當(dāng)繼續(xù)進(jìn)行心房快速起搏，將會(huì)發(fā)展成為持續(xù)性房顫。

表1 心房顫動(dòng)建模前與心房顫動(dòng)建模后左、右心房面積的比較

表2 兩組間左、右心房面積的比較

注：對(duì)照組兩圖顯示左心房心肌細(xì)胞結(jié)構(gòu)完整，排列整齊，細(xì)胞核清晰，規(guī)則的纖維網(wǎng)填充與整個(gè)心肌細(xì)胞。AF組左圖顯示左心房心肌細(xì)胞間質(zhì)疏松，明顯的空泡變性及顆粒樣變性；AF組右圖顯示左心房心肌細(xì)胞有明顯細(xì)胞間質(zhì)纖維化改變。圖6 光鏡觀察兩組實(shí)驗(yàn)犬左心房心肌細(xì)胞病理結(jié)構(gòu)的改變(HE染色，× 200)Note. Those two pictures of the control group showed that the left atrial myocardial cells in the control group were well organized, with clear nuclei and regular fibrous reticulum filling with intact myocardial cells. The left picture of the AF group showed a larger intercellular space, obvious vacuolar degeneration and granular degeneration of the left atrial myocardial cells, and the right picture of the AF group showed obvious interstitial fibrosis of the left atrial myocardial tissue.Figure 6 Pathological changes in atrial myocardial cells observed under light microscopy. HE staining

注：對(duì)照組兩圖顯示左心房心肌細(xì)胞的肌原纖維節(jié)的排列是有序的，核膜內(nèi)染色質(zhì)結(jié)構(gòu)正常。AF組兩圖顯示左心房心肌細(xì)胞超微結(jié)構(gòu)明顯異常，肌原纖維節(jié)出現(xiàn)了嚴(yán)重的退化，細(xì)胞核出現(xiàn)嚴(yán)重的固縮的現(xiàn)象，有細(xì)胞的凋亡，內(nèi)質(zhì)網(wǎng)出現(xiàn)腫大征象，伴隨著部分肌絲的崩解，肌纖維表現(xiàn)出雜亂無序。圖7 電鏡觀察兩組實(shí)驗(yàn)犬左心房心肌細(xì)胞超微結(jié)構(gòu)改變(× 6000)Note. The two pictures of the control group showed normal arrangement of myofibrillar seqments of the left atrial myocytes and normal chromatin structure in the nuclei. The two pictures of the AF group showed abnormal ultrastructure of the left atrial myocytes in the AF group , as the myofibrillar segments showed serious degeneration, obvious karyopycnosis, cell apoptosis, endoplasmic reticulum delatation disintegration of some muscle filaments, and dissarangement of myofibrils.Figure 7 Ultrastructural observation of the cardiomyocytes of left atria in the two groups of experimental dogs

本研究選用高頻心房起搏建立心房顫動(dòng)模型，在無需心房程序性刺激的情況下，自身出現(xiàn)心房顫動(dòng)，在建模過程中運(yùn)用可操控性較強(qiáng)的系統(tǒng)將直徑僅為4.1 Fr的細(xì)雙極電極導(dǎo)線3830主動(dòng)固定電極精準(zhǔn)地植入實(shí)驗(yàn)犬右心房建立快速起搏系統(tǒng)，是建立心房顫動(dòng)模型的一個(gè)創(chuàng)新亮點(diǎn)，它可提高在植入過程中電極導(dǎo)線在心房植入的成功率，能更好的選取起搏部位。

本研究所用的植入式心電監(jiān)測器，是一種用于記錄皮下心電圖，可自動(dòng)激活或由患者激活的植入式監(jiān)測系統(tǒng)。本研究的另一創(chuàng)新亮點(diǎn)是，首次運(yùn)用該植入式心電監(jiān)測器在房顫模型建模過程中檢測AF的發(fā)生及持續(xù)時(shí)間，可實(shí)時(shí)、精確地檢測AF并進(jìn)行長程監(jiān)測，保證了實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)的客觀性和準(zhǔn)確性，其裝置內(nèi)存，可自動(dòng)記錄檢測到的心律失常事件，并將心律失常事件圖進(jìn)行存儲(chǔ)，便于回顧、收集、分析心律失常事件心電圖。在高頻心房刺激建立房顫模型的動(dòng)物實(shí)驗(yàn)中，運(yùn)用植入式心電監(jiān)測器，提高了在無心房程序性刺激誘發(fā)房顫的情況下動(dòng)態(tài)檢測房顫的效率。

心房顫動(dòng)時(shí)，發(fā)生呈快速而無規(guī)律的心房活動(dòng)，細(xì)胞內(nèi)鈣內(nèi)流增加出現(xiàn)鈣超載，心房收縮功能受到影響，心房內(nèi)負(fù)荷及壓力增大，最終心房肌纖維被拉伸，使得心房被動(dòng)性擴(kuò)大[13]，這一改變?yōu)榇龠M(jìn)房顫的發(fā)生提供了結(jié)構(gòu)與病理生理基礎(chǔ)[14]。本研究通過超聲心動(dòng)圖測量左心房、右心房面積，提示經(jīng)過右心房快速起搏建立房顫模型后，左、右心房面積增大，心房的擴(kuò)大提示實(shí)驗(yàn)犬心房肌結(jié)構(gòu)發(fā)生重構(gòu)，這一結(jié)構(gòu)的改變正是心房顫動(dòng)結(jié)構(gòu)重構(gòu)的一個(gè)重要標(biāo)志[13]。心房結(jié)構(gòu)重塑是指心房肌的間質(zhì)組織增生或者纖維化增多，細(xì)胞膜的穩(wěn)定性下降，部分細(xì)胞器的結(jié)構(gòu)、形態(tài)及數(shù)量出現(xiàn)變化[15]。通過對(duì)心房顫動(dòng)模型犬及空白對(duì)照實(shí)驗(yàn)犬進(jìn)行左心房組織切片形態(tài)學(xué)觀察提示心房顫動(dòng)實(shí)驗(yàn)犬心房結(jié)構(gòu)發(fā)生了重構(gòu)。

本研究中，在犬心房顫動(dòng)模型建立中創(chuàng)新性地運(yùn)用了先進(jìn)的導(dǎo)管操控系統(tǒng)及精細(xì)的電極導(dǎo)線，使房顫模型的建立高效、安全；采用體內(nèi)心臟追蹤器追蹤房顫發(fā)作情況，為建立房顫模型提供了精確、高效的完整記錄。在后續(xù)的研究中，將進(jìn)一步對(duì)心房顫動(dòng)實(shí)驗(yàn)犬的蛋白質(zhì)組學(xué)進(jìn)行深入研究，以期初篩出可能具有指導(dǎo)意義、敏感性高、特異性好的蛋白質(zhì)生物分子標(biāo)記物，同時(shí)對(duì)應(yīng)收集臨床標(biāo)本，將所篩選的目標(biāo)差異表達(dá)蛋白在人體臨床標(biāo)本中，檢測驗(yàn)證其表達(dá)情況，分析其與臨床表型的關(guān)聯(lián)性，期望可為臨床治療提供特異性高的蛋白質(zhì)生物分子標(biāo)記物，為長遠(yuǎn)的臨床治療提供動(dòng)態(tài)監(jiān)測預(yù)后的新靶點(diǎn)。