承德市農(nóng)產(chǎn)品快速檢測技術(shù)現(xiàn)狀及應(yīng)用

王麗英 袁瑞敏 朱廣宇 喬紅碧 楊立欣

摘要：近年來，隨著市場經(jīng)濟(jì)的發(fā)展，食品安全問題層出不窮，嚴(yán)重威脅著人們的身體健康。農(nóng)產(chǎn)品是人們重要的生活資料，其安全問題與每個(gè)人息息相關(guān)。提高農(nóng)產(chǎn)品質(zhì)量，才能保障人們的生命和財(cái)產(chǎn)安全，才能促進(jìn)社會穩(wěn)定發(fā)展。作為新型檢測方法，快速檢測技術(shù)的應(yīng)用能顯著提高農(nóng)產(chǎn)品的安全。基于此，本文主要闡述了承德市目前使用的主要的快速檢測方法、原理、快速檢測標(biāo)準(zhǔn)、存在問題及建議，從而為提升我市農(nóng)產(chǎn)品檢測水平打下堅(jiān)實(shí)基礎(chǔ)。

關(guān)鍵詞：承德市;農(nóng)產(chǎn)品;檢測;快速檢測技術(shù)

承德作為習(xí)近平總書記定位的京津冀水源涵養(yǎng)功能區(qū)，水源充沛、氣候適宜、生態(tài)優(yōu)良、土壤條件較好，發(fā)展現(xiàn)代農(nóng)業(yè)基礎(chǔ)和條件得天獨(dú)厚。近年來，我市構(gòu)建起“一環(huán)六帶”生態(tài)特色農(nóng)業(yè)產(chǎn)業(yè)布局和產(chǎn)業(yè)體系，特別是蔬菜產(chǎn)業(yè)呈現(xiàn)出強(qiáng)勁的發(fā)展勢頭，確保食品安全重要手段的安全快速度檢測技術(shù)，也起到越來越重要的作用。由于許多食品原材料大量使用農(nóng)藥、激素、抗生素等有害物質(zhì)使食品中毒現(xiàn)象時(shí)有發(fā)生，且突發(fā)性強(qiáng)，蔓延迅速。常規(guī)的農(nóng)獸藥殘留分析方法利用氣相色譜儀、液相色譜儀、質(zhì)譜儀或各種光譜儀等大型精密儀器來進(jìn)行農(nóng)藥殘留，基于色譜和質(zhì)譜的分析方法檢測精度高、重復(fù)性好，是農(nóng)獸藥殘留定量檢測分析的主要方式。但這些方法不僅需要大型的儀器設(shè)備，而且需要比較復(fù)雜的前處理過程、儀器設(shè)備昂貴、檢測時(shí)間較長、要求熟練的技術(shù)人員才能完成等問題，既無法適應(yīng)大批量快速檢測的需要也不能滿足樣品現(xiàn)場快速檢測的要求，迫使人們運(yùn)用新的原理和方法去開發(fā)特異性強(qiáng)、靈敏度高、方便快捷、準(zhǔn)確安全的快速檢測新技術(shù)。

一、農(nóng)產(chǎn)品快速檢驗(yàn)技術(shù)的重要性

當(dāng)前，在市場經(jīng)濟(jì)快速發(fā)展的背景下，人們的生活質(zhì)量得到了很大的提高。但是，在這個(gè)過程中也產(chǎn)生了很多問題，如農(nóng)產(chǎn)品過剩。不能充分關(guān)注農(nóng)產(chǎn)品質(zhì)量，就無法促進(jìn)優(yōu)質(zhì)產(chǎn)品的有效供給。并且隨著各項(xiàng)技術(shù)的快速發(fā)展，農(nóng)產(chǎn)品種類更加多樣化，并且向著優(yōu)質(zhì)化的趨勢發(fā)展。各種技術(shù)和肥料也被應(yīng)用在農(nóng)產(chǎn)品的種植過程中，其中很多人在市場經(jīng)濟(jì)利益的驅(qū)逐下無視食品安全，給人們的生活和財(cái)產(chǎn)安全帶來很大的威脅。要想提高農(nóng)產(chǎn)品的生產(chǎn)質(zhì)量，就必須加強(qiáng)對農(nóng)產(chǎn)品生產(chǎn)和加工的質(zhì)量檢測。為了 增 強(qiáng) 檢測的有效性，提高檢測效率，引進(jìn)并使用了快速檢測技術(shù)。但是該技術(shù)的應(yīng)用需要國家的政策作為保障，需要國家給予更多的支持，如在生產(chǎn)無公害產(chǎn)品的過程中擁有一套標(biāo)準(zhǔn)流程、加強(qiáng)全方面管理，才能保障人們能食用到綠色的、放心的農(nóng)產(chǎn)品。

分析我國農(nóng)產(chǎn)品的發(fā)展?fàn)顩r可以看出，農(nóng)戶的種植水平參差不齊，當(dāng)然這與我國的家庭聯(lián)產(chǎn)承包責(zé)任制有很大的關(guān)系。不同農(nóng)戶在農(nóng)作物生產(chǎn)的過程中實(shí)施的標(biāo)準(zhǔn)不同，導(dǎo)致他們產(chǎn)出的農(nóng)作物存在很大的質(zhì)量差距。因此，需要利用準(zhǔn)確、快速的檢測技術(shù)，挑選出高質(zhì)量的農(nóng)產(chǎn)品，防止不合格的農(nóng)產(chǎn)品流入市場，從而不斷提高我國的食品安全水平。

二、快速檢測技術(shù)的原理和應(yīng)用現(xiàn)狀

快速檢測技術(shù)原理分為 2 個(gè)層面，即化學(xué)方面和生物方面?；瘜W(xué)方面主要是針對各種化學(xué)成分，利用化學(xué)試劑，發(fā)生氧化和絡(luò)合等反應(yīng)，將結(jié)果和色卡進(jìn)行對比，得到檢測結(jié)論。

采取這種化學(xué)色比法，能夠檢測到農(nóng)作物中殘留的化學(xué)物質(zhì)，例如有機(jī)磷農(nóng)藥和亞硝酸鹽等。檢測方便并且成本低。

生物檢測方法有生物傳感法和免疫學(xué)方法。酶抑制技術(shù)就是使用最為廣泛的一種，并且其操作也十分成熟。

但是在使用中，不能對有機(jī)磷和氨基甲酸酯進(jìn)行有效檢測。并且對于不同的農(nóng)藥，其抑制效果也不相同。酶聯(lián)免疫吸附法在日常檢測中十分常見，利用酶作為標(biāo)記，與抗原或抗體發(fā)生反應(yīng)，從而導(dǎo)致顏色發(fā)生變化，肉眼即可判斷結(jié)果。利用這種方法能夠?qū)崿F(xiàn)自動化操作，并且對農(nóng)產(chǎn)品的危害小，而且不需要價(jià)格高的機(jī)器，就能針農(nóng)產(chǎn)品中的沙門氏菌、大腸桿菌進(jìn)行有效檢測。聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)是當(dāng)前比較新型的生物檢測技術(shù)。其對環(huán)境有著很高的要求，多數(shù)操作環(huán)節(jié)都是在特定環(huán)境下開展的。在農(nóng)產(chǎn)品檢測中，主要是檢測其含有的微生物。生物芯片主要應(yīng)用于肉食類農(nóng)產(chǎn)品的檢測，可以檢測到是否摻假，并檢測出其中的化學(xué)物質(zhì)含量。

三、農(nóng)產(chǎn)品安全快速檢測技術(shù)

從對我各市縣（區(qū)）調(diào)查結(jié)果來看我市各縣、區(qū)檢測中心及鄉(xiāng)鎮(zhèn)檢測站主要采取的農(nóng)產(chǎn)品快速檢測方法主要為酶抑制法、酶聯(lián)免疫法。

（一）酶抑制技術(shù)

酶抑制技術(shù)是研究比較成熟、在國內(nèi)應(yīng)用最廣泛的速測技術(shù)之一，是利用有機(jī)磷和氨基甲酸酯類農(nóng)藥抑制膽堿酯酶（ChE）的特異性生化反應(yīng)。膽堿酯酶主要分為乙酰膽堿酯酶（ACHE）和丁酰膽堿酯酶（BcllE），農(nóng)藥對其抑制由于來源不同而有差異，對農(nóng)殘的檢測精度也因不同品種的農(nóng)藥產(chǎn)品而不同。目前，依據(jù)酶抑制法原理設(shè)計(jì)并廣泛使用的農(nóng)藥殘留檢測方法主要有速測卡法（紙片法）、比色法（分光光度法）。

1.比色法（分光光度法）?！禛B/T 18630—2002 蔬菜中有機(jī)磷及氨基甲酸酯農(nóng)藥殘留量的簡易檢驗(yàn)方法酶抑制法》和《NY/T 448—2001蔬菜上有機(jī)磷和氨基甲酸酯類農(nóng)藥殘留毒快速檢測方法》均為比色法（分光光度法）。乙酰膽堿酯酶水解后，水解產(chǎn)物可與顯色劑反應(yīng)產(chǎn)生顏色。有機(jī)磷和氨基甲酸酯類農(nóng)藥對膽堿酯酶正常功能有抑制作用，其抑制率與農(nóng)藥的濃度呈正相關(guān)。正常情況下，酶催化神經(jīng)傳導(dǎo)代謝產(chǎn)物（乙酰膽堿）水解，其水解產(chǎn)物與顯色劑反應(yīng)，產(chǎn)生黃色物質(zhì)，用分光光度計(jì)在412nm處測定吸光度隨時(shí)間的變化 值，計(jì)算出抑制率，通過抑制率可以判斷出樣品中是否有高劑 量有機(jī)磷或氨基甲酸酯類農(nóng)藥的存在。但是酶抑制法只能檢測有機(jī)磷和氨基甲酸酯兩類農(nóng)藥，且對同類、不同種農(nóng)藥的抑制率差別很大。它具有短時(shí)間能夠檢測大量蔬菜樣本，檢測成本低對于檢測人員技術(shù)水平要求低，易于在基層推廣等特點(diǎn)，是目前我國控制高毒農(nóng)藥殘留的一種有效方法，也是目前國內(nèi)和我市應(yīng)用最為廣泛的農(nóng)藥殘留快速檢測方法。

2.農(nóng)藥殘留速測卡農(nóng)藥殘留速測卡法（紙片法）。農(nóng)藥殘留速測卡又名農(nóng)藥殘留快速檢測卡、農(nóng)藥殘留檢測卡、農(nóng)殘速測卡。是以國家2003年公布的農(nóng)藥殘留快速檢測的標(biāo)準(zhǔn)方（《GB/T 5009.199—2003蔬菜中有機(jī)磷和氨基甲酸酯類農(nóng)藥殘留量的快速檢測》）為原理，利用對有機(jī)磷和氨基甲酸脂類農(nóng)藥高敏感的膽堿酯酶和顯色劑做成的試紙，利用迅速產(chǎn)生明顯顏色的化學(xué)反應(yīng)檢測待測物質(zhì)，通過與標(biāo)準(zhǔn)比色卡進(jìn)行目視定性或半定量分析。速測卡法與一般的儀器分析方法相比，具有價(jià)格便宜，操作相對簡便，結(jié)果顯示直觀，一次性使用，不需檢修維護(hù)，具有一定的靈敏度和專一性等一系列優(yōu)點(diǎn)，非常適于食品安全的現(xiàn)場檢測。

（二）酶聯(lián)免疫技術(shù)

ELISA是一種以酶作為標(biāo)記物的免疫分析方法，也是目前應(yīng)用最廣泛的免疫分析方法之一，它將酶標(biāo)記在抗體/抗原分子上形成酶標(biāo)抗體/酶標(biāo)抗原，酶作用于能呈現(xiàn)出顏色的底物，通過儀器或肉眼進(jìn)行辨別。ELISA法基本原理是預(yù)先結(jié)合在固相載體上的抗體或抗原分子與樣品中的抗原或抗體分子在一定條件下進(jìn)行免疫學(xué)反應(yīng)。有很多方法諸如雙抗體夾心 EL ISA、直接競爭 ELISA、放射免疫測定法。放射免疫法是基于檢測免疫復(fù)合物放射性強(qiáng)度。一些其他方法則利用了發(fā)光檢測方法如用化學(xué)發(fā)光復(fù)合物，這些方法顯著的提高了檢出痕量。目前，很多不同種類用于檢測藥品殘留的 EL ISA檢測試劑盒可以購買。如檢測-受體激動劑，腎上腺皮質(zhì)激素，類固醇，芪類藥物，二羥基苯甲酸內(nèi)酯，及其他的一些抗生素。ELISA檢測試劑盒可以用于特異性檢出（氨基二甲基嘧啶基苯磺酰胺）或者一群相關(guān)的復(fù)合物（磺胺類藥物）。一個(gè)檢測試劑盒可以用來檢測很多樣品，而且不需要精密的儀器，在很短的時(shí)間內(nèi)得到精確的檢測結(jié)果。

（三）膠體金試紙條檢測技術(shù)

膠體金標(biāo)記技術(shù)（Immunogold labeling technique）是以膠體金作為示蹤標(biāo)記物應(yīng)用于抗原抗體反應(yīng)的一種新型免疫標(biāo)記技術(shù)。膠體金試紙條技術(shù)方法分為膠體金競爭和膠體金雙抗體夾心法。一是膠體金競爭法。膠體金標(biāo)記抗體、抗原分別包被在相應(yīng)的固相載體上，當(dāng)樣品中待測樣品達(dá)到一定的濃度時(shí)，即與固著在載體上的膠體金標(biāo)記抗體結(jié)合，從而阻止其與固著在檢測區(qū)（T）的抗原結(jié)合，無法在檢測區(qū)形成紅色沉淀帶。若樣品中不含待測樣品時(shí)，膠體金標(biāo)記抗體與檢測區(qū)的抗原結(jié)合，在檢測區(qū)（T）形成紅色沉淀色帶。無論樣品中是否含有待測樣品，在控制區(qū)（C）均應(yīng)出現(xiàn)一條紅色條帶。此方法主要用于小分子抗原（毒品、農(nóng)藥、肽鏈等）的檢測。由于抗原分子量小不能直接固定于NC膜上，常常用化學(xué)方法把小分子偶聯(lián)到BSA等大分子物質(zhì)上再固定于NC膜上。

國家發(fā)布的膠體金層析法，主要用于動物肌肉克倫特羅、萊克多巴胺、沙丁胺醇的快速復(fù)查和牛奶中β-內(nèi)酰胺類抗生素等項(xiàng)目的檢測。

四、農(nóng)產(chǎn)品快速檢測標(biāo)準(zhǔn)

各縣市目前使用的檢測標(biāo)準(zhǔn)主要有GB/T5009.199-2003蔬菜中有機(jī)磷和氨基甲酸酯類農(nóng)藥殘留的快速測定、NY/T448-2001蔬菜中有機(jī)磷和氨基甲酸酯類農(nóng)藥殘留的快速測定、中華人民共和國農(nóng)業(yè)部1025號公告動物源食品中萊克多巴胺的測定-酶聯(lián)免疫法1025號-6-2008、中華人民共和國農(nóng)業(yè)部1025號公告動物源食品中氯霉素的測定-酶聯(lián)免疫法1025號-26-2008、中華人民共和國農(nóng)業(yè)部1025號公告動物源食品中磺胺類藥物的測定-酶聯(lián)免疫法1025號-7-2008、中華人民共和國農(nóng)業(yè)部1025號公告動物源食品中氟喹諾酮的測定-酶聯(lián)免疫法1025號-8-2008、《動物性食品中克倫特羅殘留量測定方法-酶聯(lián)免疫吸附》GB/T5009.192.2003動物性食品中克倫特羅殘留量測定方法-酶聯(lián)免疫吸附法等。

五、快速檢測技術(shù)在承德市鄉(xiāng)鎮(zhèn)檢測體系中的運(yùn)用

1.鄉(xiāng)鎮(zhèn)檢測站的建設(shè)及運(yùn)行。農(nóng)產(chǎn)品快速檢測技術(shù)是保障農(nóng)產(chǎn)品質(zhì)量的重要技術(shù)手段，是農(nóng)產(chǎn)品質(zhì)量安全監(jiān)管的的科學(xué)依據(jù)、數(shù)據(jù)支撐和重要的技術(shù)來源。為加強(qiáng)流通領(lǐng)域農(nóng)產(chǎn)品的監(jiān)管檢測，承德市充分運(yùn)用農(nóng)產(chǎn)品質(zhì)量安全提升項(xiàng)目在全市各鄉(xiāng)鎮(zhèn)建立了農(nóng)產(chǎn)品質(zhì)量安全農(nóng)藥殘留速測檢測室，并在縣級農(nóng)產(chǎn)品檢測中心的統(tǒng)籌下進(jìn)行工作，開展蔬菜、水果的農(nóng)藥殘留檢測工作，形成了覆蓋全市各鄉(xiāng)鎮(zhèn)的農(nóng)產(chǎn)品質(zhì)量安全監(jiān)測網(wǎng)絡(luò)。各檢測站由縣級檢測中心統(tǒng)一配發(fā)農(nóng)產(chǎn)品速測藥品及相關(guān)設(shè)備并負(fù)責(zé)培訓(xùn)檢測技術(shù)人員，隨時(shí)提供相關(guān)技術(shù)支持。各鄉(xiāng)鎮(zhèn)設(shè)立專門檢測技術(shù)人員1-2名，負(fù)責(zé)本鄉(xiāng)鎮(zhèn)農(nóng)產(chǎn)品質(zhì)量安全監(jiān)管、田間生產(chǎn)監(jiān)督檢查和產(chǎn)地日常抽樣檢測。堅(jiān)持每月送縣級檢測中心樣品10-15個(gè)，鄉(xiāng)鎮(zhèn)檢測站每月開展1次速測檢測，每月自檢20個(gè)以上樣品并負(fù)責(zé)配合縣級和市級檢測中心的抽檢工作。

2.快速檢測技術(shù)在農(nóng)貿(mào)市場檢測中的運(yùn)用。農(nóng)貿(mào)交易市場的農(nóng)產(chǎn)品快速檢測工作任務(wù)由市場檢測點(diǎn)承擔(dān)，建立隨機(jī)抽樣制度，在產(chǎn)品交易之前能夠及時(shí)快速的檢測，對發(fā)現(xiàn)問題的產(chǎn)品及時(shí)通知經(jīng)營者下架處理，通過市場公示發(fā)揮監(jiān)督警示作用，能夠避免不合格產(chǎn)品流向社會，確保農(nóng)貿(mào)市場農(nóng)產(chǎn)品的安全。

3.農(nóng)產(chǎn)品種植企業(yè)或合作社實(shí)行合格證制度。對于種植大戶縣級檢測中心也配發(fā)了農(nóng)產(chǎn)品速測藥品及相關(guān)設(shè)備并負(fù)責(zé)培訓(xùn)檢測技術(shù)人員。產(chǎn)品在上市前進(jìn)行自檢，把住了農(nóng)產(chǎn)品安全的第一道關(guān)口。合格證制度采用自檢、委托檢驗(yàn)、內(nèi)部質(zhì)量控制、自我承諾，四種方式任選其一。另外，像無公害農(nóng)產(chǎn)品、綠色食品、有機(jī)農(nóng)產(chǎn)品及地標(biāo)產(chǎn)品等認(rèn)證證書，還有質(zhì)量安全追溯標(biāo)簽、肉品質(zhì)檢驗(yàn)合格證章都可以視同合格證。把農(nóng)產(chǎn)品合格證作為市場準(zhǔn)入的必要條件，倒逼生產(chǎn)經(jīng)營者采取一系列質(zhì)量控制措施，自行開具農(nóng)產(chǎn)品合格證，確保其銷售農(nóng)產(chǎn)品的質(zhì)量安全，同時(shí)把市場準(zhǔn)入的壓力傳遞給生產(chǎn)者，形成有效的倒逼機(jī)制。同時(shí)加大宣傳培訓(xùn)，建立生產(chǎn)經(jīng)營者開具、市場經(jīng)營者查驗(yàn)留存、監(jiān)管部門監(jiān)管核查的合格證制度體系，督促生產(chǎn)經(jīng)營者落實(shí)主體責(zé)任，提升農(nóng)產(chǎn)品質(zhì)量安全監(jiān)管能力和水平，為推動農(nóng)業(yè)高質(zhì)量發(fā)展、促進(jìn)鄉(xiāng)村振興提供有力支撐。

六、儀器設(shè)備及檢測方法在使用中存在問題及建議

（一）存在問題

一是目前的快速檢測儀器只能夠?qū)μ囟悇e的農(nóng)藥進(jìn)行定性檢測（有機(jī)磷和氨基甲酸酯類），不能檢測有機(jī)氯、菊酯和其他類農(nóng)藥;二是酶試劑容易失活，反應(yīng)不穩(wěn)定，檢測結(jié)果誤差較大，重復(fù)性不好;三是快速檢測設(shè)備靈敏度低，檢測數(shù)據(jù)結(jié)果穩(wěn)定性差，酶標(biāo)用試劑盒價(jià)格昂貴且質(zhì)量參差不齊，個(gè)別檢驗(yàn)方法繁瑣，假陽性率偏高等。四是某些蔬菜在檢測過程中容易出現(xiàn)假陽性，影響判斷。

（二）建議

一是引進(jìn)新型的速測儀器，能夠?qū)ζ渌愞r(nóng)藥進(jìn)行檢測，改進(jìn)檢測方法，提高速測結(jié)果的穩(wěn)定性和可重復(fù)性。二是應(yīng)增加對有機(jī)氯、擬除蟲菊酯類農(nóng)藥的快速檢測方法。三是提高試劑盒廠家準(zhǔn)入門檻，從而提高試劑盒的質(zhì)量和穩(wěn)定性。

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