快速檢測技術在藥物分析中的應用進展

路明亮

摘要：隨著醫(yī)學技術的不斷進步與發(fā)展，快速檢測技術被廣泛應用到臨床藥物檢測中，該技術一方面能提高藥物檢測的穩(wěn)定性與迅速性，另一方面能動態(tài)分析檢測范圍內的臨床診斷、體內藥物代謝以及藥物殘留?；诖耍疚囊浴翱焖贆z測”為基礎，詳細論述了不同快速檢測技術在藥物分析中的應用，旨在為臨床藥物分析提供可靠的依據(jù)。

關鍵詞：快速檢測技術；藥物分析；藥物質量；穩(wěn)定性；醫(yī)療體制

近年來，藥物安全問題受到人們越來越多的關注，提高藥物安全質量，不僅能確保臨床用藥的安全性與可靠性，還能有效推動醫(yī)療事業(yè)改革的深化發(fā)展。

1 現(xiàn)代藥物分析簡介

藥物分析是臨床控制藥物質量的主要方式，通過藥物分析完成藥物研發(fā)與使用過程中的質量控制以及其與疾病治療之間的關系。在醫(yī)療體制改革深化發(fā)展的今天，藥物分析更需要快速、簡潔、靈敏的檢測方法，從而更好地獲取藥物信息。隨著藥物分析范圍的增加，快速檢測技術因數(shù)據(jù)準確、耗時少、檢測環(huán)境標準低等優(yōu)勢，能有效實現(xiàn)高通量、快捷檢測。

2 快速檢測技術

2.1化學發(fā)光技術 該技術多為痕量分析，主要是通過測量藥物中的化學發(fā)光成分，反應其對應成分含量的高低，化學發(fā)光技術檢測方法操作簡便，分析速度較快，且背景價值低。目前來說，化學發(fā)光技術已廣泛應用于土霉素、金霉素含量測定等生物醫(yī)藥領域。

2.2光譜快速檢測技術 光譜快速檢測技術主要分為如下幾種：①拉曼光譜。拉曼光譜是散射光譜的一種類型，其能通過分子振動、分子轉動等信息探究分子具體結構，拉曼光譜具有樣品用量少、穿透力強、攜帶方便、容易獲取信息等優(yōu)勢。目前來說，拉曼光譜技術主要用于結構解析與實驗鑒別[1]。阮健等人研究，將拉曼光譜技術應用于氧氟沙星、左氧氟沙星、鹽酸左氧氟沙星化合物分子結構的分析中，結果顯示三種物質的化學分子結構有一定差異，在拉曼光譜圖中，這些細小差異展現(xiàn)的非常清晰[2]。②近紅外光譜。該技術具有無損、快速等優(yōu)勢，其能應用于多組分在線同時檢測，尤其是高光譜分離技術的分辨率高達幾十微米，是目前鑒別假藥的重要方式。目前來說，近紅外光譜技術廣泛應用于煙草、醫(yī)藥、食品安全、農(nóng)業(yè)等領域，特別是在醫(yī)藥領域中發(fā)揮著重要作用[3]。

2.3色譜法與色譜聯(lián)用技術 從本質上來說，色譜法不屬于快速檢測方式，但是，現(xiàn)階段發(fā)展研究的色譜方法越來越趨近于高效、穩(wěn)定與快速等目標[4]。色譜技術是充分利用混合物中不同組分的溶解性能不同、吸附性能差別以及親和性能差異，促使混合物流經(jīng)這一物質，通過反復分配或吸附等作用，有效分開各組分[5]。因色譜法具有較高的靈敏度、精確度與準確度等優(yōu)勢，且樣品預處理非常簡單，該技術在食品藥品、生物組織以及保健品等領域中得到了廣泛的應用。具體來說，色譜法有如下幾種方式：①薄層色譜法：該技術是定性分析、快速分離少量物質的重要方式，在薄層板上點上試樣溶液，使用溶劑點開試樣溶液，分離試樣組分。薄層色譜技術靈敏度高、耐用性良好，僅需1～2 min就可檢測完成，該技術方便、快捷。在市場經(jīng)濟利益的驅使下，不少商販將雙胍類物質直接添加到保健品中，且未注明保健品成分組成，若患者長期服用該類保健品，將會嚴重威脅到患者的身體健康與生命安全。而通過薄層色譜技術就能有效、便捷地檢測出保健品中的雙胍類成分。Lucotti A等人將拉曼光譜技術與薄層色譜技術聯(lián)用，檢測血液中代謝物、嗎啡以及中草藥結構類似物，取得了良好的效果[6]。②液相色譜技術：該技術是臨床上廣泛應用的分析、分離技術，該技術將液體溶劑作為流動相的色譜，具有靈敏度高、高效快速等特點，能有效實現(xiàn)不同成分的快速測定，液相色譜技術在質量控制環(huán)節(jié)、分析純度環(huán)節(jié)、分析微量雜質與降解代謝產(chǎn)物等環(huán)節(jié)應用廣泛。韓樂等人通過高效液相色譜技術對玄參中的化合物含量進行測定，并有效評價與控制藥材內在質量，取得了顯著的成效[7]。③氣相色譜技術：該技術具有快速、高效、獨特分離等特性，比較適合殘留溶劑以及揮發(fā)性組分檢測。張艷華指出，在未來時間內，氣相色譜技術應向著微型、通用型方向發(fā)展[8]。④色譜質譜聯(lián)用：該技術充分運用色譜的分離高效性以及質譜所提供的化合物分子量信息，有效、連續(xù)地進行樣品定性定量分析。色譜質譜聯(lián)用，充分發(fā)揮了兩者的優(yōu)勢，全面提高了檢測效果。簡化預處理過程，全面實現(xiàn)預處理與藥品分析檢測的在線連接，是全面提高快速檢測技術的關鍵點。固相萃取技術通過固相萃取模塊，以自動進樣器為平臺，對樣品進行高效分離，并切換到色譜流路中分析，能有效提高分離檢測的高效性、靈敏性與全自動化水平。Kantiani L等人充分利用色質聯(lián)用技術檢測了牛奶中β-內酰胺物質的殘留情況，取得了良好的效果，極大地縮短了檢測時間，提高了自動化程度[9]。Jing T等人以金霉素、土霉素為聚合物并作為固相萃取材料，通過固相萃取測定了雞蛋中四環(huán)素類物質的殘留問題[10]。

2.4傳感器 傳感器是實現(xiàn)實時分析的主要方式，主要分為生物傳感器與化學傳感器兩種。目前，傳感器已廣泛應用于藥物分析以及生命科學研究之中?；瘜W傳感器具有體積小、靈敏度高、測量范圍廣、價格低廉等優(yōu)勢，通過信號轉換器、化學敏感層將化合物轉化為電信號，實現(xiàn)在線連續(xù)檢測或自動化測量。王真真等人通過化學傳感器測量磷酸根離子濃度，效果良好[11]?；瘜W傳感器在食品安全領域、環(huán)境監(jiān)測領域、疾病診斷領域有著廣闊的發(fā)展前景。生物傳感器具有靈敏度高、選擇性高、成本低廉、分析快速等優(yōu)勢，其通過信號轉換器、生物敏感層將化合物轉化為電信號，實現(xiàn)在線連續(xù)檢測或自動化測量。目前，生物傳感器在醫(yī)學領域、食品行業(yè)、化工及發(fā)酵行業(yè)廣泛應用。翟慧泉等人將生物識別物質與待測物結合，并使用生物傳感器進行檢測，通過光、電形式輸出，全面提高了檢測效率[12]。

2.5 DNA擴增檢查技術 DNA擴增技術在現(xiàn)代生物學中應用廣泛，對促進遺傳學快速發(fā)展起到了重要的推動作用。該技術的基本原理是利用了DNA雙螺旋結構、DNA堿基配對原則、DNA半保留復制原則以及DNA邊復制邊解旋的特性，其結果準確可靠且精度高。同時，該項技術本身具有快速高效、特異性強、靈敏度高、可大量生產(chǎn)的特點，且操作并不復雜，只需三步即可完成：第一步是改變模板DNA的性質；第二步是將引物與DNA母鏈相復合并延伸引物；第三步是通過引物的作用將目的DNA不斷復制出來。此項技術在應用時，無需把樣品和病毒互相分離，利用幾步簡單的操作就可獲取模板。此項技術也可應用于毛發(fā)和人體血液的鑒定中。

DNA擴增技術在Polymerase Chain Reaction（PCR）檢測中應用較多，而PCR檢測技術主要用于兩個方面：①疾病診斷：通過核苷酸鏈的堿基互補配對原則可快速將DNA片段里的細菌和病毒等病原體分離出來，判斷范圍可延伸到病毒流感、腫瘤等。此項技術實現(xiàn)了快速檢測單個核苷酸差異的功能，有類別差異的菌株以及耐藥性的變異菌株能同時被快速檢測出來。在我國的醫(yī)療衛(wèi)生事業(yè)中，也廣泛應用到了該項技術，極大地方便了醫(yī)生對疾病種類的判斷。例如，2009年曾爆發(fā)H1N1流感，為了有效區(qū)分此病毒與其他各類病毒的不同，有日本科學家應用DNA擴增技術為確診H1N1流感提供了幫助[13]。通過檢測H1N1流感病毒，再與廣泛使用的流感快速診斷試驗進行比較可發(fā)現(xiàn)，此項技術方法可以在疾病發(fā)生早期就將病毒檢測出來。因此，該技術可用于區(qū)分其他技術難以區(qū)分的季節(jié)性H1N1毒株和甲型流感毒株H1N1。②用于基因鑒定，實現(xiàn)基因快速篩查、快速檢測。在利用人體口腔、血液、毛發(fā)或指甲屑等來篩選基因標志物方面，科學家獲得了重大發(fā)現(xiàn)：肥胖或心臟病可能與患者的基因多態(tài)性相關。Ota等基因科學研究者用此技術分析并發(fā)現(xiàn)了ABCC11基因野生型538G的等位基因538G>A和耳垢類型、腋臭以及肺癌等疾病風險有關[14]。Azuma等人通過此項技術發(fā)現(xiàn)日本男性吸煙者中，是否會患上肺癌的決定性因素在于多態(tài)基因[15]?？傊珼NA擴增技術實現(xiàn)了疾病快速檢測、快速篩查、準確判斷，有助于醫(yī)療衛(wèi)生事業(yè)進一步發(fā)展?？赏ㄟ^PCR技術逐一對人體內的DNA進行判斷分析，找出存在缺陷的DNA以盡早實現(xiàn)強化，防止某些疾病的發(fā)生。預見在未來的醫(yī)療事業(yè)中，DNA擴增技術必將發(fā)揮更加不可替代的作用。

上述快速檢測技術的研究與應用會有效促進現(xiàn)代藥物分析的發(fā)展，并為多參量技術、多尺度、高通量技術的發(fā)展提供參考，進而促進現(xiàn)代藥物分析跨越式發(fā)展。

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