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    高壓超聲波協(xié)同改性紅松松仁膜衣膳食纖維工藝優(yōu)化及結(jié)構(gòu)分析

    2019-09-02 07:43:50王秋陽徐紅艷
    關(guān)鍵詞:松仁紅松膳食

    王秋陽, 付 剛, 王 超, 張 敏, 徐紅艷

    (延邊大學(xué),吉林 延吉 133002)

    紅松(Pinuskoraiensis)在中國東北的小興安嶺到長白山一帶分布較廣[1]。紅松仁富含單不飽和脂肪酸和生育酚、蛋白質(zhì)[2-3],具有良好的風(fēng)味、營養(yǎng)和保健特性,深受消費(fèi)者喜愛。紅松松仁膜衣為松仁外層所附的一層薄皮,在堅果企業(yè)精加工松仁過程中,產(chǎn)生大量膜衣副產(chǎn)物[4]。課題組前期研究發(fā)現(xiàn),紅松松仁膜衣含有黃酮類化合物、多酚和蛋白質(zhì)等成分[5],具有較高的營養(yǎng)價值。

    膳食纖維(Dietary Fiber,DF)的溶解度與其化學(xué)結(jié)構(gòu)關(guān)系密切,可分為水溶性膳食纖維(Soluble Dietary Fiber,SDF)和水不溶性膳食纖維(Insoluble Dietary Fiber,IDF)2種[6]。高膳食纖維飲食,可降低各種慢性疾病的風(fēng)險[7-8],為人類健康的可持續(xù)性提供重要的健康益處,增加最終產(chǎn)品的營養(yǎng)價值。因此,有關(guān)膳食纖維的粒度、表面積、微觀結(jié)構(gòu)、改善其功能特性,以及提高在食品工業(yè)中的應(yīng)用受到廣泛關(guān)注[9]。本文采用高壓-超聲波協(xié)同法通過高溫、高壓以及高頻振動的剪切作用使其中的非共價鍵發(fā)生變化從而改變其結(jié)構(gòu),達(dá)到改性目的。

    本文以PIDF為原料,通過響應(yīng)面法優(yōu)化高壓-超聲波協(xié)同作用的改性條件,并采用掃描電子顯微鏡、X射線衍射、傅里葉變換紅外光譜進(jìn)行進(jìn)一步分析。旨在為松仁膜衣的精深加工提供理論依據(jù),促進(jìn)其在食品、保健品領(lǐng)域的應(yīng)用,為堅果副產(chǎn)物的綜合利用提供新思路。

    1 材料與方法

    1.1 材料與試劑

    紅松松仁膜衣:梅河口市實全土特產(chǎn)品有限公司于2018年提供。

    高峰α-淀粉酶(≥4 000 U/g),購自上海源葉生物科技有限公司;無水檸檬酸,購自濰坊英軒實業(yè)有限公司;檸檬酸三鈉,購自福晨(天津)化學(xué)試劑有限公司;H2O2、無水乙醇等試劑均為國家級分析純。

    1.2 儀器與設(shè)備

    PHS-3C型酸度計(上海儀電科學(xué)儀器股份有限公司);KQ-500DE型超聲波清洗器(昆山市超聲儀器有限公司);YXQ-LS-50SⅡ型立式壓力蒸汽滅菌器(上海博訊實業(yè)有限公司醫(yī)療設(shè)備廠);D/max-2200型X射線衍射儀(日本理學(xué)公司);SU8010型掃描電子顯微鏡(日立儀器有限公司)。

    1.3 PIDF的制備

    根據(jù)GB 5009.88-2014方法,將紅松松仁膜衣經(jīng)粉碎后過60目篩,按料液比 1∶10(g/mL)加入蒸餾水,調(diào)節(jié)溶液pH值至中性,加入木瓜蛋白酶0.6 g,50 ℃水浴60 min;再調(diào)節(jié)溶液pH值至4.5,加入1%葡萄糖苷酶,60 ℃水浴30 min,滅酶10 min后抽濾,將濾渣烘干稱重并粉碎,過60目篩得PIDF。

    1.4 高壓-超聲波協(xié)同法改性PIDF的工藝流程

    PIDF→按不同的料液比加入不同pH值1% H2O2溶液→以固定條件,即壓力0.1 MPa、溫度121 ℃、時間20 min進(jìn)行處理→不同功率、時間的超聲波處理→溶液調(diào)至中性→抽濾→乙醇醇沉→沉淀干燥→改性SDF[10]

    1.5 響應(yīng)面優(yōu)化高壓-超聲波協(xié)同法改性PIDF工藝條件

    考慮到節(jié)省原料及試劑等因素,因此選擇pH值、超聲波功率和超聲波時間3個因素,采用Box-Behnken中心設(shè)計原理[11-13],設(shè)計高壓-超聲波協(xié)同法改性的響應(yīng)面試驗。試驗因素和水平編碼見表1[14-15]。

    表1 高壓-超聲波協(xié)同法響應(yīng)面試驗因素水平

    1.6 掃描電子顯微鏡、X射線衍射和傅里葉變換紅外光譜測試

    根據(jù)曹龍奎等[16]的方法對未改性SDF和改性SDF進(jìn)行超微結(jié)構(gòu)、X射線衍射強(qiáng)度以及紅外光譜透光率的測定。

    2 結(jié)果與分析

    2.1 高壓-超聲波協(xié)同法改性PIDF單因素

    2.1.1 pH值對改性SDF得率的影響

    稱取5.00 g PIDF,按1∶10(g/mL)加入不同pH值的1%過氧化氫溶液,在壓力0.1 MPa、溫度121 ℃條件下處理20 min,然后在超聲波功率300 W,超聲溫度60 ℃條件下處理90 min,調(diào)節(jié)pH值至中性,醇沉后得到的沉淀烘干稱重,計算改性SDF得率。

    圖1 pH值對紅松松仁膜衣改性SDF得率的影響

    pH值是影響膳食纖維溶解度和穩(wěn)定性的重要因素。由圖1可知,改性SDF得率隨pH值的升高而逐漸增加,可能是體系中離子濃度升高,有利于膳食纖維充分溶解。當(dāng)pH值為12時,改性SDF得率達(dá)到最高,達(dá)到飽和狀態(tài),為20.6%。當(dāng)pH值超過12后,改性SDF結(jié)構(gòu)被破壞并降低其溶解度,改性SDF得率下降[10]。因此,確定12為最適pH值。

    2.1.2 超聲波功率對改性SDF得率的影響

    稱取5.00 g PIDF,按1∶10(g/mL)加入pH值為12的1%過氧化氫溶液,在壓力0.1 MPa、溫度121 ℃條件下處理20 min,然后在不同超聲波功率下,超聲溫度60 ℃處理90 min,調(diào)節(jié)pH值至中性,醇沉后得到的沉淀烘干稱重,計算改性SDF得率。

    圖2 超聲波功率對紅松松仁膜衣改性SDF得率的影響

    由圖2可知,當(dāng)超聲波功率由250 W上升到350 W時,改性SDF得率由6.2%增加到20.4%。當(dāng)超聲波功率為350 W時,其高頻振動作用趨于飽和,改性SDF得率達(dá)到最大。當(dāng)超聲波功率超過350 W后,改性SDF得率略微降低。表明在相同時間內(nèi),超聲波產(chǎn)生的空化和機(jī)械振動作用[17],使改性SDF中化學(xué)鍵斷裂,導(dǎo)致得率下降,因此,確定350 W為最適超聲波功率。

    2.1.3 超聲波時間對改性SDF得率的影響

    稱取5.00 g PIDF,按1∶10(g/mL)加入pH值為12的1%過氧化氫溶液,在壓力0.1 MPa、溫度121 ℃條件下處理20 min,然后在超聲波功率350 W,超聲溫度60 ℃條件下分別處理不同時間,調(diào)節(jié)pH值至中性,醇沉后得到的沉淀烘干稱重,計算改性SDF得率。

    圖3 超聲波時間對紅松松仁膜衣改性SDF得率的影響

    由圖3可知,當(dāng)超聲波時間從30到90 min時,改性SDF得率上升較快,當(dāng)超聲波時間為90 min時,改性SDF得率為17.6%,達(dá)到最大。時間超過90 min時,反應(yīng)體系溫度逐漸升高,改性SDF中的成分被分解成小分子,得率降低。因此,確定90 min為最適超聲波時間。

    2.1.4 料液比對改性SDF得率的影響

    稱取5.00 g PIDF,分別按1∶15、1∶20、1∶25、1∶30、1∶35(g/mL)加入pH值為12的1%過氧化氫溶液,在壓力0.1 MPa、溫度121 ℃條件下處理20 min,然后在超聲波功率350 W,超聲溫度為60 ℃條件下處理90 min,調(diào)節(jié)pH值至中性,醇沉后得到的沉淀烘干稱重,計算改性SDF得率。

    圖4 料液比對紅松松仁膜衣改性SDF得率的影響

    由圖4可知,當(dāng)料液比從1∶15到1∶30時,改性SDF得率也隨之增加,可能因為料液比過小時,原料不能在緩沖溶液中充分溶脹,影響了超聲波與其相互作用,不能達(dá)到理想的改性效果;當(dāng)料液比為1∶30時,改性SDF得率達(dá)到最大,為41.2%。之后料液比增加導(dǎo)致原料被稀釋,改性效率降低,得率減少。因此,確定1∶30為最適料液比。

    2.2 高壓-超聲波協(xié)同法改性PIDF響應(yīng)面

    2.2.1 響應(yīng)面設(shè)計與結(jié)果

    選取pH值、超聲波功率和超聲波時間3個試驗因素進(jìn)行響應(yīng)面分析,以確定高壓-超聲波協(xié)同改性的最優(yōu)條件。試驗設(shè)計與結(jié)果見表2,系數(shù)檢驗見表3,方差分析見表4。

    表2 響應(yīng)面試驗設(shè)計方案與結(jié)果

    表3 響應(yīng)面分析優(yōu)化后改性SDF得率模型的系數(shù)檢驗

    表4 響應(yīng)面優(yōu)化改性SDF得率回歸方程的方差分析

    改性SDF得率的結(jié)果經(jīng)回歸擬合,得到回歸模型為:

    Y=41.133 3+0.650 000X1+2.200 00X2+1.150 00X3-5.216 67X12-4.016 67X22-4.516 67X32+2.200 00X1X2+1.400 00X1X3-2.500 00X2X3

    綜上所述,對于年齡≥80歲患者,在3 h溶栓時間窗內(nèi),低劑量與標(biāo)準(zhǔn)劑量阿替普酶靜脈溶栓具有相似的有效性和安全性。但是,本研究納入樣本較少,結(jié)論可能存在偏倚。因此,有待擴(kuò)大樣本量,反復(fù)論證低劑量阿替普酶治療高齡急性腦梗死患者的療效及安全性。

    通過方差及其相關(guān)系數(shù)的可靠性分析模型,由表3可知,一次項X2、二次項X12、X22、X32和交互項X2X3極顯著影響可溶性膳食纖維得率(P<0.01),一次項X3和交互項X1X2顯著影響膳食纖維得率(P<0.05),其余項影響不顯著(P>0.05)。

    由響應(yīng)面分析結(jié)果可知,R2=93.44%;膳食纖維得率回歸模型的P值極顯著(P<0.01);失擬項的P值不顯著(P>0.05);表明該模型對各因素與響應(yīng)值之間的真實關(guān)系具有可靠性,可以利用此模型進(jìn)行分析和預(yù)測高壓-超聲波協(xié)同法對PIDF的改性效果。

    2.2.2 高壓-超聲波協(xié)同法改性最優(yōu)條件的確定

    pH值、超聲波功率和超聲波時間3個因素影響改性SDF得率的響應(yīng)面見圖5。

    圖5 各因素交互作用的響應(yīng)面圖

    綜合分析響應(yīng)面改性SDF得率的試驗結(jié)果表明,各因素對改性SDF得率的影響大小排序為:超聲波功率>超聲波時間>pH值,其中,超聲波功率影響極顯著(P<0.01),超聲波時間影響顯著(P<0.05),交互項按影響大小排列依次為:超聲波功率和超聲波時間>超聲波功率和pH值>pH值和超聲波時間。

    依據(jù)回歸方程,最佳改性工藝為:pH值為12、超聲波功率378 W、超聲波時間92 min。

    2.2.3 驗證試驗

    根據(jù)最佳工藝條件進(jìn)行3次驗證試驗,改性SDF得率分別為43.2%、42.6%和44.2%,平均得率為43.3%,驗證試驗結(jié)果與理論預(yù)測值41.53% 接近,RSD為1.8%,表明該模型符合實際情況,響應(yīng)面法優(yōu)化得到的高壓-超聲波協(xié)同改性條件具有真實可靠性。

    2.3 高壓-超聲波協(xié)同法改性前后SDF結(jié)構(gòu)分析

    2.3.1 高壓-超聲波協(xié)同法改性前后SDF超微結(jié)構(gòu)

    由圖6可知,相同倍數(shù)下,改性前后SDF具有不同的超微結(jié)構(gòu)。未改性SDF表面無縫隙,結(jié)構(gòu)致密,呈現(xiàn)團(tuán)狀結(jié)構(gòu);改性SDF表面有蜂窩狀孔隙,凹凸不平,比表面積增大,組織被顆?;?,且形狀不規(guī)則[18]。表明高壓-超聲波協(xié)同法改性SDF聚合度較低,可能導(dǎo)致兩者的理化性質(zhì)如溶脹性和吸水性的不同。

    注:1為未改性SDF(×3 000);2為未改性SDF(×500);3為改性SDF(×3 000);4為改性SDF(×500)

    2.3.2 高壓-超聲波協(xié)同法改性前后SDF的X射線衍射結(jié)果

    由圖7可知,未改性SDF和改性SDF在掃描角度2θ為21°~24°均有明顯的結(jié)晶衍射峰,表明它們具有纖維素I型的特征[19-20],其中,改性SDF的衍射強(qiáng)度低于未改性SDF,表明高壓-超聲波協(xié)同法使結(jié)晶區(qū)纖維素分子間的氫鍵破壞,纖維素分子發(fā)生部分降解,但并沒有使SDF的晶型發(fā)生改變。

    注:1為未改性SDF;2為改性SDF。

    2.3.3 高壓-超聲波協(xié)同法改性前后SDF傅里葉變換紅外光譜

    高壓-超聲波協(xié)同法改性前后SDF的紅外光譜見圖8。

    注:1.為未改性SDF;2.為改性SDF

    由圖8可知,改性SDF在3 398.57 cm-1出現(xiàn)的寬吸收峰是由于O-H伸縮振動產(chǎn)生,可能是高壓-超聲波協(xié)同法破壞了IDF中的糖苷鍵,暴露出更多O-H[19];改性前后的SDF均在2 924.09 cm-1出現(xiàn)的尖峰是由C-H振動引起,但改性SDF的峰強(qiáng)度更大,1 745.58 cm-1的尖峰是由CHO的碳氧鍵的收縮振動形成,1 200.00 cm-1附近的寬吸收峰,也是半纖維素糖單元中C-O-C的特征吸收峰,880~890.00 cm-1附近的吸收峰為糖單元間β-糖苷鍵的特征吸收峰,改性SDF的峰強(qiáng)度明顯高于改性前,且未出現(xiàn)位移,表明高壓-超聲波協(xié)同法未對主要成分產(chǎn)生影響。

    3 結(jié)論

    以PIDF為試驗材料,利用高壓-超聲波協(xié)同法進(jìn)行改性。在固定條件壓力0.1 MPa、溫度121 ℃、時間20 min下,采用響應(yīng)面法優(yōu)化得到高壓-超聲波協(xié)同法的最佳改性條件為pH值12、超聲波功率378 W、超聲波時間92 min。驗證試驗結(jié)果與回歸模型預(yù)測的理論值接近,RSD小于2%,表明采用響應(yīng)面法優(yōu)化的條件具有真實可靠性。利用掃描電子顯微鏡、X射線衍射和傅里葉變換紅外光譜將改性前后SDF的結(jié)構(gòu)進(jìn)行比較的結(jié)果表明,未改性SDF結(jié)構(gòu)致密,表面光滑,高壓-超聲波協(xié)同法改性SDF的表面疏松多孔且結(jié)晶束較少,且主要成分未發(fā)生明顯改變,改性效果良好。

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