富維生素C中藥負(fù)離子復(fù)合制劑對(duì)斷奶仔豬生長(zhǎng)性能的影響

殷成港， 金楚硯， 于 磊， 張 敏

(延邊大學(xué)農(nóng)學(xué)院，吉林延吉 133000)

隨著人們生活水平的提高，畜產(chǎn)品品質(zhì)越來(lái)越受公眾關(guān)注[1]。調(diào)查發(fā)現(xiàn)，使用抗生素會(huì)導(dǎo)致病原菌產(chǎn)生耐藥性和抗藥性，動(dòng)物的免疫能力降低，同時(shí)也會(huì)影響未來(lái)畜禽及人類疫病的控制[2]。目前,市場(chǎng)上有很多種飼料添加劑可以改善豬的免疫系統(tǒng)，調(diào)節(jié)豬腸道微生物菌群，減少仔豬斷奶環(huán)境應(yīng)激[3]。斷奶是仔豬生長(zhǎng)發(fā)育過(guò)程中的一個(gè)重要環(huán)節(jié)，營(yíng)養(yǎng)和環(huán)境等生長(zhǎng)條件的改變對(duì)仔豬造成極大應(yīng)激，斷奶應(yīng)激會(huì)造成仔豬胃腸道黏膜損傷[4]，引起消化吸收障礙和腹瀉, 是現(xiàn)代養(yǎng)豬生產(chǎn)中面臨的主要問(wèn)題。近年來(lái)，國(guó)家飼料法規(guī)直接限制了抗生素在養(yǎng)殖業(yè)上的使用，因此抗生素替代產(chǎn)品的研究就備受關(guān)注。中藥以天然性、多功能性、來(lái)源廣泛、毒副作用低和不易產(chǎn)生耐藥性等優(yōu)點(diǎn)而得到醫(yī)學(xué)界的普遍認(rèn)可, 在飼料添加劑領(lǐng)域具有巨大潛力[5-6]。近年發(fā)現(xiàn)，負(fù)離子制劑是可以提高動(dòng)物免疫力的新型礦物質(zhì)，維生素C是一種常見(jiàn)的飼料添加劑，具有抗氧化和抗應(yīng)激等功能[7]。此試驗(yàn)特將維生素C、中藥和負(fù)離子礦物質(zhì)制成復(fù)合制劑，添加于斷奶仔豬飼料中，以研究其對(duì)斷奶仔豬生產(chǎn)性能及相關(guān)指標(biāo)的影響，以便于在生豬無(wú)抗養(yǎng)殖生產(chǎn)中應(yīng)用推廣。

1 材料與方法

1.1 材料

試驗(yàn)所用富維生素C中藥負(fù)離子復(fù)合制劑由延邊大學(xué)動(dòng)物營(yíng)養(yǎng)實(shí)驗(yàn)室自制。通過(guò)納米技術(shù)對(duì)礦物質(zhì)進(jìn)行特殊加工，得到負(fù)離子制劑。所用中藥主要有大棗、陳皮、白術(shù)和維生素C等，大棗∶陳皮∶白術(shù)∶維生素C∶負(fù)離子制劑比例為2∶3∶2∶1∶2，混合均勻制得富維生素C中藥負(fù)離子復(fù)合制劑。

1.2 試驗(yàn)設(shè)計(jì)

試驗(yàn)在圖們富巖生態(tài)養(yǎng)殖場(chǎng)完成。試驗(yàn)隨機(jī)選取60頭健康無(wú)病、日齡相近，血緣關(guān)系一致、體重為(8±0.77) kg的杜×長(zhǎng)×大三元雜交斷奶仔豬，按公母各半隨機(jī)分為對(duì)照組和試驗(yàn)組，每組30頭，設(shè)3個(gè)重復(fù)，每個(gè)重復(fù)10頭。對(duì)照組飼喂基礎(chǔ)日糧，試驗(yàn)組飼喂基礎(chǔ)日糧+0.5%富維生素C中藥負(fù)離子復(fù)合制劑。試驗(yàn)期共49 d，預(yù)飼期7 d，正式試驗(yàn)期42 d，試驗(yàn)分3個(gè)階段，每個(gè)階段為14 d。 基礎(chǔ)日糧營(yíng)養(yǎng)成分見(jiàn)表1。

表1 基礎(chǔ)日糧組成及營(yíng)養(yǎng)水平Table 1 Basic dietary compostition and nutrient level

注：4%預(yù)混料含維生素A 154 000 IU/kg、維生素D323 000 IU/kg、維生素E 291 IU/kg、維生素B139 mg/kg、維生素B288 mg/kg、維生素B614.7 mg/kg、維生素B120.30 mg/kg、維生素K374 mg/kg、泛酸鈣218 mg/kg、煙酰胺510 mg/kg、葉酸75 mg/kg、鐵13 g/kg、銅3.5 g/kg、鋅3.4 g/kg、錳3.3 g/kg、碘11.8 mg/kg。

1.3 飼養(yǎng)管理

在開(kāi)始試驗(yàn)前，對(duì)豬舍的設(shè)備進(jìn)行維修，對(duì)豬舍進(jìn)行全面徹底的清掃、洗刷，最后進(jìn)行消毒。試驗(yàn)期間仔豬自由飲水，確保水源清潔，水量充足。每天清掃圈舍2次，及時(shí)清掃漏糞地板及床下糞便，保持料槽清潔，保證圈內(nèi)外清潔，圈舍自然通風(fēng)，防止氨氣味過(guò)大及舍內(nèi)蚊蟲(chóng)的滋生。隨時(shí)觀測(cè)舍內(nèi)溫度，做好保暖措施。試驗(yàn)期間對(duì)各組仔豬采食情況進(jìn)行記錄，試驗(yàn)結(jié)束時(shí)對(duì)仔豬停食1次空腹稱重，并記錄相關(guān)數(shù)據(jù)。試驗(yàn)組除日糧中添加0.5%富維生素C中藥負(fù)離子復(fù)合制劑外，其他飼養(yǎng)管理與對(duì)照組相同。

1.4 樣品的采集與分析方法

1) 飼料樣的采集：在換料前1 d用四分法采集適量飼料樣品，連續(xù)采集3 d并在65 ℃烘干48 h，回潮24 h，然后粉碎過(guò)40目篩，并將其儲(chǔ)存在密封袋后置于冰箱中，用于常規(guī)分析的檢測(cè)。

2) 消化試驗(yàn)糞樣的采集：采用全收糞法。從換料前1 d開(kāi)始，從對(duì)照組及試驗(yàn)組豬隨機(jī)選取4頭豬(公母各半)，采取24 h全收糞，每天早晨定時(shí)收取糞樣。每天收集的新鮮糞樣置于滅菌管中，將鮮糞混合均勻后取總量的10%，加入15滴左右10%硫酸溶液固氮，置于烘干箱，以60～70 ℃鼓風(fēng)烘干，粉碎后保存。

3) 菌群測(cè)定試驗(yàn)糞樣的采集：在每種飼料飼喂結(jié)束時(shí)，將滅菌棉棒插入豬直腸中并內(nèi)刮下內(nèi)容物，置于滅菌后的容器中低溫保存。

4) 血樣的采集：仔豬采血前12 h，應(yīng)清理料槽內(nèi)剩余飼料，保證采血時(shí)仔豬處于空腹?fàn)顟B(tài)。從前腔靜脈采15 mL血液，并將5 mL血液注入肝素鈉抗凝采血管中。將10 mL注射到普通采血管中，靜置30 min，然后以3 500 r/min于離心機(jī)中離心15 min，抽取血清，-20 ℃保存，用于血清指標(biāo)的檢測(cè)。每組各隨機(jī)抽取5頭進(jìn)行取樣。

1.5 測(cè)定指標(biāo)及方法

1) 生長(zhǎng)性能指標(biāo)的測(cè)定：試驗(yàn)期間每天準(zhǔn)確記錄各組仔豬的采食量。于試驗(yàn)正式期的第1天、第14天、第28天和第42天對(duì)仔豬進(jìn)行空腹稱重，在試驗(yàn)結(jié)束時(shí)綜合統(tǒng)計(jì)數(shù)據(jù)，結(jié)算各組飼料消耗量。相關(guān)公式如下：

2) 激素的測(cè)定：采用酶聯(lián)免疫試劑盒測(cè)定，試劑盒采購(gòu)于南京建成生物技術(shù)有限公司

3) 表觀消化率的測(cè)定：通過(guò)采集的糞樣以及飼料樣品，對(duì)其中相關(guān)營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)的表觀消化率進(jìn)行測(cè)定。測(cè)定方法及相關(guān)公式如下：

①水分的測(cè)定：105 ℃恒重法測(cè)定。

②粗蛋白的測(cè)定：半微量凱氏定氮法測(cè)定。

③粗脂肪的測(cè)定：索氏脂肪抽提法測(cè)定。

④灰分的測(cè)定：灼燒重量法測(cè)定。

4) 腹瀉率及死亡率的測(cè)定：每天早、中、晚觀測(cè)仔豬排糞情況，看糞便的外觀(形狀及顏色)、含水量都是否正常，記錄腹瀉仔豬頭數(shù)。

5) 糞便中微生物菌群的測(cè)定：①稀釋：將滅菌棉棒插入豬直腸中并內(nèi)刮下內(nèi)容物，放入無(wú)菌離心管，加10倍體積的無(wú)菌稀釋液。劇烈震蕩，充分溶解，逐級(jí)稀釋至10-6。每個(gè)樣品選擇10-4、10-5、10-6等3個(gè)稀釋度，由高稀釋度開(kāi)始稀釋，配制成相應(yīng)稀釋液，每個(gè)稀釋度3個(gè)平板。②培養(yǎng)：將糞樣的稀釋液接種于相應(yīng)的選擇性培養(yǎng)基中(乳酸菌用MRS培養(yǎng)基；大腸桿菌用麥康凱培養(yǎng)基)。大腸桿菌在37 ℃有氧培養(yǎng)24 h，乳酸菌在37 ℃有氧培養(yǎng)36 h。每個(gè)梯度重復(fù)3次后取平均值，細(xì)菌數(shù)用[1 g(CFU/g)]表示。

1.6 數(shù)據(jù)與分析

試驗(yàn)數(shù)據(jù)先用WPS2016工作表預(yù)處理，后采用SPSS22.0統(tǒng)計(jì)處理軟件對(duì)所得數(shù)據(jù)進(jìn)行單因素方差分析，試驗(yàn)數(shù)據(jù)用平均值±標(biāo)準(zhǔn)差表示。

2 結(jié)果與分析

2.1 日糧中添加富維生素C中藥負(fù)離子復(fù)合制劑對(duì)斷奶仔豬生長(zhǎng)性能的影響

富維生素C中藥負(fù)離子復(fù)合制劑對(duì)斷奶仔豬生長(zhǎng)性能的影響見(jiàn)表2。

表2 富維生素C中藥負(fù)離子復(fù)合制劑對(duì)斷奶仔豬生長(zhǎng)性能的影響Table 2 Effect of rich vitamin C traditional Chinese medicine anion compound preparation on growth performance of weaned piglets

注：同一行數(shù)據(jù)肩標(biāo)不同小寫(xiě)字母表示差異顯著(P<0.05)，肩標(biāo)不同大寫(xiě)字母表示差異極顯著(P<0.01)，下同。

由表2可知，斷奶仔豬平均日增重，試驗(yàn)組與對(duì)照組相比，在1～14 d相對(duì)提高18.07%,差異極顯著(P<0.01)，29～42 d 相對(duì)提高6.65%,差異顯著(P<0.05)，全期相對(duì)提高7.37%,差異顯著(P<0.05)。試驗(yàn)組的料重比與對(duì)照組相比，1～14 d相對(duì)降低了5.4%,差異顯著(P<0.05)，29～42 d 相對(duì)降低了9.35%,差異顯著(P<0.05)，全期相對(duì)降低了7.07%,差異顯著(P<0.05)。從斷奶仔豬的平均日增重和料重比可以看出，富維生素C中藥負(fù)離子復(fù)合制劑對(duì)斷奶仔豬生長(zhǎng)性能具有明顯的促進(jìn)作用。

2.2 日糧中添加富維生素C中藥負(fù)離子復(fù)合制劑對(duì)斷奶仔豬生長(zhǎng)激素的影響

由表3數(shù)據(jù)對(duì)比可知，與對(duì)照組相比，試驗(yàn)組生長(zhǎng)激素GH含量提高了16.42%,呈極顯著提高(P<0.01)；甲狀腺素T4含量與對(duì)照組比，提高了5.59%,差異顯著(P<0.05)。富維生素C中藥負(fù)離子復(fù)合制劑具有促進(jìn)斷奶仔豬生長(zhǎng)激素和甲狀腺素T4提高的作用。

表3 日糧中添加富維生素C中藥負(fù)離子復(fù)合制劑對(duì)斷奶仔豬生長(zhǎng)激素影響

2.3 日糧中添加富維生素C中藥負(fù)離子復(fù)合制劑對(duì)斷奶仔豬應(yīng)激激素影響

由表4可知，試驗(yàn)組皮質(zhì)醇COR與對(duì)照組相比降低了27.89%,差異極顯著(P<0.01)，促腎上腺皮質(zhì)激素ACTH、胰島素INS、胰島素生長(zhǎng)因子IGF-1兩組間均無(wú)顯著性差異(P>0.05)。富維生素C中藥負(fù)離子復(fù)合制劑可明顯降低斷奶仔豬的應(yīng)激反應(yīng)。

表4 日糧中添加富維生素C中藥負(fù)離子復(fù)合制劑對(duì)斷奶仔豬應(yīng)激激素的影響Table 4 Effect of dietary supplementation of vitamin C-rich Chinese medicine anion complex on stress hormone in weaned piglets

2.4 日糧中添加富維生素C中藥負(fù)離子復(fù)合制劑對(duì)斷奶仔豬表觀消化率的影響

由表5數(shù)據(jù)對(duì)比可知，與對(duì)照組相比，第1階段試驗(yàn)組粗灰分表觀消化率提高了13.40%，差異極顯著(P<0.01)，試驗(yàn)組干物質(zhì)表觀消化率提高了8.75%，差異顯著(P<0.05)。第2階段試驗(yàn)組粗脂肪表觀消化率提高了8.87%，差異顯著(P<0.05)。說(shuō)明富維生素C中藥負(fù)離子復(fù)合制劑可明顯提高礦物質(zhì)、脂肪的消化率。

表5 日糧中添加富維生素C中藥負(fù)離子復(fù)合制劑對(duì)斷奶仔豬表觀消化率的影響Table 5 Apparent digestibility of traditional Chinese medicine anion complex preparations supplemented with vitamin C (%)

2.5 日糧中添加富維生素C中藥負(fù)離子復(fù)合制劑對(duì)斷奶仔豬腹瀉率及死亡率影響

由表6數(shù)據(jù)對(duì)比可知，整個(gè)試驗(yàn)階段仔豬無(wú)死亡情況。與對(duì)照組相比，3個(gè)試驗(yàn)階段中試驗(yàn)組腹瀉率較對(duì)照組都有下降趨勢(shì)，其中第2階段試驗(yàn)組較對(duì)照組腹瀉率降低了18.46%，差異極顯著(P<0.01)。富維生素C中藥負(fù)離子復(fù)合制劑具有降低斷奶仔豬腹瀉率的作用。

表6 日糧中添加富維生素C中藥負(fù)離子復(fù)合制劑對(duì)斷奶仔豬腹瀉率及死亡率影響Table 6 Effect of dietary supplementation of vitamin C-rich Chinese medicine anion complex on diarrhea rate and mortality in weaned piglets (%)

2.6 日糧中添加富維生素C中藥負(fù)離子復(fù)合制劑對(duì)斷奶仔豬糞便菌群的影響

由表7數(shù)據(jù)對(duì)比可知，與對(duì)照組相比，乳酸菌在1～14 d提高了11.18%，15～28 d提高了13.87%，差異均極顯著(P<0.01)。大腸桿菌在15～28 d降低了9.76%,差異顯著(P<0.05)。富維生素C中藥負(fù)離子復(fù)合制劑具有促進(jìn)乳酸菌增殖、抑制大腸桿菌繁殖的作用。

表7 日糧中添加富維生素C中藥負(fù)離子復(fù)合制劑對(duì)斷奶仔豬糞便菌群的影響

3 討論

趙紅梅等[8]以黨參、紫蘇等中草藥為原料,通過(guò)超微粉碎后添加到斷奶仔豬日糧中，發(fā)現(xiàn)可以促進(jìn)仔豬采食，降低料重比進(jìn)而提高了斷奶仔豬的日增重?？紫榉宓萚9]利用早期斷奶仔豬試驗(yàn),研究了中藥飼料添加劑對(duì)斷奶仔豬血清生化指標(biāo)和生長(zhǎng)性能的影響,結(jié)果表明，該中藥添加劑能夠顯著提高早期斷奶仔豬的采食量，降低料重比。葛洪偉等[10]研究了中藥飼料添加劑對(duì)早期斷奶仔豬生長(zhǎng)性能的影響,結(jié)果也表明中藥飼料添加劑可降低料重比，對(duì)斷奶仔豬增重有明顯作用。本試驗(yàn)中的試驗(yàn)組仔豬平均日增重顯著提高，料重比顯著降低，平均日采食量也有增加趨勢(shì)。與上述研究的結(jié)果一致，從斷奶仔豬的平均日增重和料重比可以看出，富維生素C中藥負(fù)離子復(fù)合制劑對(duì)斷奶仔豬生長(zhǎng)性能具有明顯的促進(jìn)作用。

生長(zhǎng)激素GH可以促進(jìn)動(dòng)物發(fā)育以及細(xì)胞的增殖。翟向和等[11]利用中藥添加劑飼喂“冀合白豬”，日糧中添加2%的中藥時(shí)，試驗(yàn)組豬血清GH濃度顯著高于對(duì)照組，同時(shí)甲狀腺素含量也顯著升高。本試驗(yàn)中的試驗(yàn)組生長(zhǎng)激素GH含量呈極顯著提高，甲狀腺素T4含量呈顯著提高，與上述報(bào)道結(jié)果一致，因此可以說(shuō)明富維生素C中藥負(fù)離子復(fù)合制劑具有促進(jìn)斷奶仔豬生長(zhǎng)激素和甲狀腺素T4提高的作用。

應(yīng)激對(duì)動(dòng)物的免疫機(jī)能產(chǎn)生廣泛的影響[12]。斷奶仔豬對(duì)周圍環(huán)境、溫度等因素的變化非常敏感，容易引起仔豬的應(yīng)激反應(yīng),造成持續(xù)性腹瀉、生長(zhǎng)遲緩、營(yíng)養(yǎng)不良等,嚴(yán)重時(shí)還會(huì)引起死亡。由于應(yīng)激時(shí)血清皮質(zhì)醇水平升高,抑制了甲狀腺素、生長(zhǎng)激素等促進(jìn)淋巴細(xì)胞增殖、免疫系統(tǒng)發(fā)育類激素的合成和分泌[13]。本試驗(yàn)中的試驗(yàn)組皮質(zhì)醇COR與對(duì)照組相比顯著降低，促腎上腺皮質(zhì)激素ACTH、胰島素INS、胰島素生長(zhǎng)因子IGF～1兩組間均無(wú)顯著性差異，與上述報(bào)道結(jié)果一致。富維生素C中藥負(fù)離子復(fù)合制劑可明顯降低斷奶仔豬的應(yīng)激反應(yīng)。

仔豬斷奶時(shí)腸道結(jié)構(gòu)尚未完全發(fā)育,消化腺分泌各種消化酶不足且活性較低,難以對(duì)飼料中的營(yíng)養(yǎng)充分消化吸收[14];Van Beers-Schreurs等[15]研究表明,仔豬斷奶會(huì)引起小腸形態(tài)結(jié)構(gòu)發(fā)生變化,如隱窩深度，絨毛萎縮和絨毛長(zhǎng)度的增加,這些變化會(huì)將腸道的吸收面積減少。中藥制劑能夠促進(jìn)腸道蠕動(dòng),使腸壁絨毛增長(zhǎng),同時(shí)中藥刺激消化腺,增加消化液的分泌量,激活蛋白酶、脂肪酶等酶的活性[16]。游玉波等[17]研究表明,將山楂、蒼術(shù)、甘草以及神曲等中藥粉劑按一定比例加入到飼糧中,可以提高生長(zhǎng)豬對(duì)飼料干物質(zhì)、粗蛋白、粗灰分以及粗纖維的表觀消化率。本試驗(yàn)中第1階段試驗(yàn)組粗灰分表觀消化率極顯著提高，試驗(yàn)組干物質(zhì)表觀消化率顯著提高。第2階段試驗(yàn)組粗脂肪表觀消化率顯著提高，與上述報(bào)道結(jié)果相似，富維生素C中藥負(fù)離子復(fù)合制劑可明顯提高礦物質(zhì)、脂肪的消化率。

仔豬幼小,機(jī)體調(diào)節(jié)能力差,脾胃發(fā)育未成熟,易受濕邪侵襲,水濕納運(yùn)失常,濕熱互結(jié),可致腸道功能紊亂從而導(dǎo)致腹瀉[18]。中草藥飼料添加劑提高仔豬日增重,改善飼料的適口性，提高采食量，增強(qiáng)腸道酶活性，改善腸道內(nèi)環(huán)境,以此提高仔豬消化吸收，從而降低腹瀉率[19]。周學(xué)軍采用復(fù)方中藥配方，試驗(yàn)Ⅰ組,飼喂基礎(chǔ)日糧2周+1%中藥制劑,中草藥含量10 g/kg。試驗(yàn)Ⅱ組,飼喂基礎(chǔ)日糧+2%中藥制劑2周,中草藥含量20 g/kg。試驗(yàn)Ⅲ組,飼喂基礎(chǔ)日糧。試驗(yàn)結(jié)果Ⅰ組、Ⅱ組仔豬腹瀉率比試驗(yàn)Ⅲ組分別下降了32.73%(P<0.01)和22.40%(P<0.01),效果顯著,差異均達(dá)0.01極顯著水平[20]。本試驗(yàn)中，整個(gè)試驗(yàn)階段仔豬無(wú)死亡情況。與對(duì)照組相比，3個(gè)試驗(yàn)階段中試驗(yàn)組腹瀉率較對(duì)照組都有下降趨勢(shì)，其中第2階段試驗(yàn)組較對(duì)照組腹瀉率極顯著降低，與上述報(bào)道結(jié)果一致。說(shuō)明富維生素C中藥負(fù)離子復(fù)合制劑具有降低斷奶仔豬腹瀉率的作用。

胃腸道健康是動(dòng)物體吸收利用營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)的先決條件。仔豬腸道作為機(jī)體的重要組成部分,承擔(dān)著吸收和消化營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)的作用,同時(shí)也能抵御病原微生物的入侵。研究表明,通過(guò)改善仔豬腸道菌群結(jié)構(gòu),達(dá)到最優(yōu)化,可以有效促進(jìn)機(jī)體有效吸收營(yíng)養(yǎng)物質(zhì),降低仔豬的腹瀉率[21]。本試驗(yàn)中，試驗(yàn)組乳酸菌在1～28 d極顯著提高。大腸桿菌在15～28 d顯著降低，與上述報(bào)道結(jié)果一致。富維生素C中藥負(fù)離子復(fù)合制劑具有促進(jìn)乳酸菌增殖，抑制大腸桿菌繁殖的作用。

4 結(jié)論

本試驗(yàn)研究結(jié)果表明，富維生素C中藥負(fù)離子復(fù)合制劑能促進(jìn)斷奶仔豬的生長(zhǎng)性能的提高，提高了仔豬對(duì)飼料的消化吸收和機(jī)體的免疫力，顯著降低了仔豬腹瀉率，有效改善了斷奶仔豬腸道菌群的平衡。