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    淋巴細胞主動免疫和傳統(tǒng)保胎治療不明原因復發(fā)性流產的臨床效果對比

    2019-08-27 06:00葛鴻
    中國醫(yī)學創(chuàng)新 2019年14期
    關鍵詞:復發(fā)性流產淋巴細胞

    葛鴻

    【摘要】 目的:對比淋巴細胞主動免疫和傳統(tǒng)保胎治療不明原因復發(fā)性流產的臨床效果。方法:選取2016年12月-2018年1月到本院接受治療的不明原因復發(fā)性流產患者90例,按照隨機數字表法分為對照組與研究組,各45例。對照組由本院使用傳統(tǒng)保胎方法進行治療,由于本院醫(yī)療條件的局限性,研究組患者送至其他醫(yī)院進行淋巴細胞主動免疫法治療,由本院進行相關研究數據提取。對比兩組患者妊娠結果、免疫抗體水平以及IFN-γ、IL-4、Th1/Th2水平。結果:研究組患者妊娠成功率顯著高于對照組,差異有統(tǒng)計學意義(P<0.05)。治療前,兩組患者免疫抗體細胞因子水平比較,差異均無統(tǒng)計學意義(P>0.05);治療后,研究組患者CD3+、CD4+、CD4+/CD8+免疫抗體因子水平均高于對照組,CD8+水平低于對照組,差異均有統(tǒng)計學意義(P<0.05)。治療前,兩組患者Th1/Th2、IFN-γ、IL-4水平比較,差異均無統(tǒng)計學意義(P>0.05);治療后,研究組Th1/Th2、IFN-γ水平均低于對照組,IL-4水平高于對照組,差異均有統(tǒng)計學意義(P<0.05)。結論:對不明原因復發(fā)性流產的患者進行淋巴細胞主動免疫治療,其治療效果較傳統(tǒng)保胎好,安全可靠,妊娠成功率高,同時,還可調節(jié)患者免疫抗體水平以及IFN-γ、IL-4、Th1/Th2水平,臨床應用價值較高,值得推廣。

    【關鍵詞】 淋巴細胞; 主動免疫; 傳統(tǒng)保胎治療; 不明原因; 復發(fā)性流產

    【Abstract】 Objective:To compare the clinical effects of lymphocyte active immunity and traditional fetal preservation in the treatment of unexplained recurrent abortion.Method:90 patients with unexplained recurrent abortion who were admitted to our hospital for treatment from December 2016 to January 2018 were selected,they were divided into control group and study group by random number table method,45 cases in each group.The control group was treated by our hospital with traditional methods of fetal preservation,due to the limitations of our hospitals medical conditions,the patients in the study group were sent to other hospitals for lymphocyte active immunotherapy,and relevant research data were extracted from our hospital.Pregnancy results and immune antibody,IFN-γ,IL-4 and Th1/Th2 levels of the two groups were compared.Result:The pregnancy success rate of the study group was significantly higher than that of the control group,the difference was statistically significant(P<0.05).Before treatment,there were no significant differences in the levels of immune antibody cytokines between the two groups(P>0.05);after treatment,the levels of CD3+,CD4+,CD4+/CD8+ in the study group were all higher than those in the control group,and the level of CD8+ was lower than that in the control group,with statistically significant differences(P<0.05).Before treatment,there were no significant differences in Th1/Th2,IFN-γ,IL-4 levels between the two groups(P>0.05);after treatment,the levels of Th1/Th2 and IFN-γ in the study group were lower than those in the control group,and the level of IL-4 was higher than that in the control group,with statistically significant differences(P<0.05).Conclusion:Lymphocyte active immunotherapy for patients with unexplained recurrent abortion has better therapeutic effect than traditional fetal protection,is safe and reliable and the pregnancy success rate is high,at the same time,the immune antibody level,IFN-γ,IL-4 and Th1/Th2 levels of patients can also be adjusted,which has high clinical application value and is worth promoting.

    【Key words】 Lymphocytes; Active immunization; Traditional fetal-preservation therapy; Unknown cause; Recurrent abortion

    First-authors address:Qingdao Maternal and Infant Hospital Co.,Ltd.,Qingdao 266000,China

    doi:10.3969/j.issn.1674-4985.2019.14.011

    流產的危險度會隨著連續(xù)流產次數的增加而升高,非外在因素下連續(xù)流產2次及以上,即稱為復發(fā)性流產(RSA)[1]。該病致病因素復雜多樣,多為內分泌失調、染色體異常、生殖系統(tǒng)生理結構異常、生殖道感染、免疫缺陷等[2]。其中45%~50%的流產患者會出現不明原因流產,稱為不明原因復發(fā)性流產(URSA),為常見婦產科并發(fā)癥,該病治療比較棘手,嚴重危害女性生殖健康[3]。文獻[4]研究發(fā)現,不明原因復發(fā)性流產的主要原因與免疫因素相關,主要是母胎雙方存在免疫不適應,根本原因為缺乏封閉抗體,而針對這一因素導致的復發(fā)性流產,文獻[5]提出“淋巴細胞主動免疫”的治療方案,本研究將該治療方案應用于臨床,效果良好,現將研究結果報道如下。

    1 資料與方法

    1.1 一般資料 選取2016年12月-2018年1月到本院接受治療的不明原因復發(fā)性流產患者90例,按照隨機數字表法將患者分為對照組和研究組,各45例。納入標準:(1)患者均為不明原因反復性流產;(2)完善封閉抗體檢查,檢查結果顯示為陰性;(3)自然流產次數為2次及以上;(4)不存在家族遺傳史,夫婦染色體均無異常;(5)均完善HIV、梅毒、肝炎等檢查,結果顯示為陰性;(6)生殖道病菌檢查為陰性;(7)患者內分泌系統(tǒng)及血糖水平等正常。排除標準:(1)患者生殖道存在畸形或者存在解剖學異常;(2)本研究所涉及藥物或治療方法存在禁忌的患者;(3)精神異常,存在交流溝通障礙的患者;(4)心、肝、脾、肺、腎等臟器功能障礙,或者存在造血系統(tǒng)異常;(5)中途退出本研究者;(6)患者治療前進行過對免疫功能造成影響的相關治療?;颊呒捌浼覍倬ぶ狙芯績热?,表示同意參與,并簽署了知情同意書。本院倫理委員會對本次研究進行了審核批準。

    1.2 方法

    1.2.1 對照組 患者進行傳統(tǒng)保胎療法,即黃體酮加人絨毛膜促性腺激素(hCG)治療。實施黃體支持,B超監(jiān)測卵泡發(fā)育狀況,指導同房[6]?;颊吲怕押髴胔CG,劑量為2 000 U/d,持續(xù)用藥

    3 d,黃體酮(生產廠家:湖北葛店人福藥業(yè),批準文號:國藥準字H20066109)劑量為20 mg/d,治療7 d;妊娠后持續(xù)進行hCG治療,劑量同上,直至孕12周[7]。

    1.2.2 研究組 使用淋巴細胞主動免疫法進行治療,方法:排除供血者傳染性疾病,之后采集供血者20 mL外周靜脈血,加入肝素鈉進行血液抗凝,離心后進行淋巴細胞提取,將細胞密度調整為1×107/mL,與2 mL 0.9%氯化鈉注射液混合稀釋[8]。將稀釋好的淋巴細胞注射于左前臂,每邊3點[9]。皮下首次注射淋巴細胞懸濁液后,需要觀察30 min[10]。2~3周注射治療1次,每療程注射4~6次,一個療程后進行封閉抗體復查,檢查結果顯示陽性時,在3~5個月內妊娠。妊娠確診后,加強淋巴細胞主動免疫治療一療程,即至妊娠15~16周[11]。對于轉陽后6個月內還未妊娠者,需要鞏固淋巴細胞主動免疫治療,頻率為每8~10周一次,避免封閉抗體轉陰。對封閉抗體陰性者進行復查,加強淋巴細胞主動免疫治療治療2次,未出現轉陰者可進行備孕[12]。

    1.3 觀察指標與評價標準 (1)對比兩組患者妊娠結果,妊娠成功評價標準:已經足月分娩健康正常的活體嬰兒;妊娠時間大于28周,經B超檢查顯示宮內活胎,胎兒、羊水、胎盤無異常表現。(2)對比兩組患者免疫抗體因子水平,治療前后采集患者晨腹外周靜脈血5 mL,進行高速離心分離血清,將CD3+、CD4+、CD8+、CD4+/CD8+等免疫抗體因子水平用免疫熒光法依據操作指示進行檢測。試劑盒由武漢博士德生物科技公司提供。(3)對比兩組患者IFN-γ、IL-4、Th1/Th2水平,采集患者5 mL肘靜脈血,用購自上海精華生物公司的淋巴細胞分離液,分離出單個核細胞,應用PBS洗3次,用濃度為10%的小牛血清(由美國Sigma公司提供),濃度調至1×106/mL,與濃度為1%的植物血凝素(購自美國Sigma),于37 ℃環(huán)境下靜置,孵箱培養(yǎng)68 h,之后進行離心分離出上清液,用雙抗體夾心酶聯免疫吸附法檢測IFN-γ與IL-4因子水平,試劑盒購自深圳晶美生物科技有限公司,操作嚴格按照說明進行。

    1.4 統(tǒng)計學處理 采用SPSS 18.0軟件對所得數據進行統(tǒng)計分析,計量資料用(x±s)表示,比較采用t檢驗;計數資料以率(%)表示,比較采用字2檢驗,P<0.05為差異有統(tǒng)計學意義。

    2 結果

    2.1 兩組一般資料比較 對照組患者45例,年齡21~39歲,平均(30.2±1.5)歲;流產次數:流產2次14例,流產3次22例,流產4次及以上9例。研究組患者45例,年齡22~40歲,平均(30.6±1.4)歲;流產次數:流產2次14例,流產3次20例,流產4次及以上11例。兩組患者基線資料比較,差異均無統(tǒng)計學意義(P>0.05),具有可比性。

    2.2 兩組患者妊娠結果對比 研究組患者足月分娩率、妊娠成功率顯著高于對照組,差異有統(tǒng)計學意義(P<0.05),見表1。

    2.3 兩組患者免疫抗體水平對比 治療前,兩組患者免疫抗體細胞因子水平比較,差異均無統(tǒng)計學意義(P>0.05);治療后,研究組患者CD3+、CD4+、CD4+/CD8+免疫抗體因子水平均高于對照組,CD8+水平低于對照組,差異均有統(tǒng)計學意義(P<0.05),見表2。

    2.4 兩組患者IFN-γ、IL-4、Th1/Th2水平對比 治療前,兩組患者Th1/Th2、IFN-γ、IL-4水平比較,差異均無統(tǒng)計學意義(P>0.05);治療后,研究組Th1/Th2、IFN-γ水平均低于對照組,IL-4水平高于對照組,差異均有統(tǒng)計學意義(P<0.05),見表3。

    3 討論

    不明原因復發(fā)性流產為妊娠期常見并發(fā)癥,約占生育期女性總數的6%。該病會嚴重損害患者的身體與心理健康[13]。文獻[14]研究證實,該疾病主要與同種免疫、自身免疫等因素相關。機體免疫功能能夠處于正常狀態(tài),主要依賴于T細胞亞群等各類免疫細胞相互制約協作,機體才會有適度的免疫應答,既可清除異物抗原,又不會對機體組織造成損傷。免疫抗體T細胞具有調節(jié)機體免疫的功能,CD3+、CD4+、CD8+等免疫抗體因子對機體免疫功能狀態(tài)具有重要的檢測指標作用,利于對細胞免疫功能的具體狀況做出判斷,便于治療方案的制定[15]。成熟的T細胞會對細胞的抗原差異做出判斷,相應的分化成為CD4+與CD8+兩個T細胞亞群,CD4+為具有輔助功能的細胞,CD8+具有抑制細胞毒性的功能,正常狀態(tài)下,CD4+/CD8+比值可反映機體免疫平衡狀態(tài),比值改變能夠反映出免疫力的高低狀況和免疫功能的變化情況,其比值越高證明免疫調節(jié)功能越好,比值降低說明機體免疫力下降,不良反應發(fā)生率也會增加[16]。本研究結果顯示,治療前,兩組患者免疫抗體細胞因子水平比較,差異均無統(tǒng)計學意義(P>0.05);治療后,研究組患者CD3+、CD4+、CD4+/CD8+免疫抗體因子水平均高于對照組,CD8+水平低于對照組,差異均有統(tǒng)計學意義(P<0.05)。

    本研究結果顯示,治療前,兩組患者Th1/Th2、IFN-γ、IL-4水平比較,差異均無統(tǒng)計學意義(P>0.05);治療后,研究組Th1/Th2、IFN-γ水平均低于對照組,IL-4水平高于對照組,差異均有統(tǒng)計學意義(P<0.05)。這表明,對不明原因復發(fā)性流產患者進行主動免疫治療后,患者血清中出現Th1、IFN-γ水平降低,Th2、IL-4水平升高,即Th1/Th2比值偏向Th2,充分證明,淋巴細胞主動免疫治療可以降低Th1型細胞因子水平,升高Th2細胞因子水平,免疫抑制效果良好,誘導母體提升對胚胎的免疫耐受能力,防止胚胎受到母體排斥,成功妊娠[17]。

    淋巴細胞主動免疫治療機制是向計劃妊娠的女性注射丈夫或者其他供血者的健康淋巴細胞,使患者免疫系統(tǒng)激活,刺激生產封閉抗體,患者在再次妊娠時,生成的封閉抗體,會對胚胎上的外來抗原進行識別并結合,形成封閉保護作用,保護胚胎正常生長發(fā)育[18]。有研究證實,對患者進行淋巴細胞主動免疫治療后,85%以上的患者會產生封閉抗體,免疫保護胚胎,降低Th1型細胞因子水平,升高Th2型細胞因子水平,誘導Th1型因子轉換為Th2型因子,提升母體對胚胎的免疫耐受能力,利于妊娠成功[19]。文獻[20]報道顯示,患者進行淋巴細胞主動免疫治療后,妊娠成功率會達到70%~85%。本研究結果顯示妊娠成功率達75.6%,與文獻[20]報道相符。不明原因復發(fā)性患者與Th1/Th2平衡存在一定關系,經現代生殖免疫學資料顯示,妊娠屬于半同種移植行為,母胎間的相互作用決定了妊娠受的成功率。在避免胎兒受到母體排斥,以及防止入侵過度方面,Th1/Th2型因子平衡狀態(tài)起到了決定性的作用。相對精準的Th1/Th2型因子平衡可有效維持正常生理妊娠,該平衡失調時會出現妊娠失敗并引發(fā)妊娠并發(fā)癥。妊娠的正常表現是一種Th2現象,Th2型因子能夠對Th1型因子介導的免疫應答進行抑制,避免胎兒以及滋養(yǎng)層細胞遭受繼發(fā)性損傷,保障妊娠成功,Th1型因子過度表達,會造成流產。Th1型因子分泌的IFN-γ、IL-2等因子,會對急性排斥、炎癥、細胞免疫等反應形成介導。Th2型因子分泌的IL-5、IL-4等因子,會對B淋巴細胞的抗體產生、增殖形成介導,兩者相互制約下維持機體免疫平衡。IFN-γ會對殺傷細胞的活化、增殖產生促進作用,而活化的殺傷細胞會對胎盤組織產生損害。除此之外,生殖道生成的刺激因子會促進胚胎發(fā)育,而IFN-γ會對刺激因子的產生進行抑制其,直接對滋養(yǎng)層產生損害。IL-4能夠促進子宮胎盤細胞的生長分化,還可抑制殺傷細胞在內皮細胞黏附,抑制其聚集分化。免疫學上多以IL-4、IFN-γ作為Th2、Th1的特征性因子,檢測IL-4與IFN-γ因水平可以對Th2、Th1的功能狀態(tài)進行掌握。同時本研究結果顯示,研究組患者妊娠成功率顯著高于對照組(P<0.05),充分證實不明原因復發(fā)性流產臨床應用淋巴細胞主動免疫比傳統(tǒng)保胎治療臨床效果更為顯著。

    綜上所述,對不明原因復發(fā)性流產的患者進行淋巴細胞主動免疫治療,其治療效果較傳統(tǒng)保胎好,安全可靠,妊娠成功率高,可調節(jié)患者免疫抗體水平以及IFN-γ、IL-4、Th1/Th2水平,臨床應用價值較高,值得推廣。

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    (收稿日期:2019-02-27) (本文編輯:張爽)

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