25%敵草隆·丙炔氟草胺懸浮劑高效液相色譜分析

李彥飛，馮澤騰，張小軍

（中農(nóng)立華生物科技股份有限公司，北京 100052）

敵草?。╠iuron），化學(xué)名稱為3-(3,4-二氯苯基)-1,1-二甲基脲，其屬于光合系統(tǒng)Ⅱ受體位點(diǎn)的光合作用電子傳遞抑制劑。敵草隆為脲類除草劑，用于非耕作區(qū)防除一年生禾本科雜草和某些闊葉雜草，如旱稗、馬唐、狗尾草、野莧草、莎草、藜等，也能防除稻田眼子菜、四葉萍，牛毛草等[1-5]。丙炔氟草胺（flumioxazin），化學(xué)名稱為N-(7-氟-3,4-二氫-3-氧-(2-丙炔基)-2H-1,4-苯并嗪-6-基)環(huán)己-1-烯-1,2-二羧酰亞胺，其屬于原卟啉原氧化酶抑制劑。在光和氧中，引起敏感作物中原卟啉的大量累積，使細(xì)胞膜脂質(zhì)過氧化作用增強(qiáng)，從而導(dǎo)致敏感雜草的細(xì)胞膜結(jié)構(gòu)和細(xì)胞功能不可逆損害。丙炔氟草胺可穩(wěn)定控制棉花、大豆、花生、蘋果、柑橘、葡萄、梨等田間的水萱麻、藜、地膚、刺苞果、粟米草、望江南、野菊、毛木藍(lán)、曼陀羅、牽牛、鼠李、龍葵、黑茄、馬齒莧等雜草，尤其是對(duì)闊葉雜草防效較好，并且對(duì)三嗪類光合作用抑制劑、磺酰脲類、磺酰苯胺和咪唑啉酮類等ALS抑制劑產(chǎn)生抗藥性的雜草具有較好的防治效果[6-10]。目前丙炔氟草胺、丙草胺分析方法均較成熟，但對(duì)于兩者的復(fù)配制劑分析方法尚未見報(bào)道。

本文建立了高效液相色譜法對(duì)25%敵草隆·丙炔氟草胺懸浮劑中2種有效成分進(jìn)行同時(shí)分析，結(jié)果表明該方法具有重現(xiàn)性好，準(zhǔn)確度高，分離效果好等優(yōu)點(diǎn)。

1 實(shí)驗(yàn)部分

1.1 儀器與試劑

美國(guó)安捷倫Agilent 1220高效液相色譜儀（具備紫外可變波長(zhǎng)檢測(cè)器）；TU-1901型普析通用紫外可見分光光度計(jì)；色譜柱：Agilent TC-C18色譜柱（250 mm×4.6 mm，5 m）。

乙腈（色譜純），新蒸2次蒸餾水；敵草隆標(biāo)樣（純度≥99%）、丙炔氟草胺標(biāo)樣（純度≥99%），北京勤誠(chéng)亦信科技開發(fā)有限公司提供；25%敵草隆·丙炔氟草胺懸浮劑，中農(nóng)立華生物科技股份有限公司。

1.2 色譜條件

流動(dòng)相：乙腈+水（體積比為55∶45），流速0.8 mL/min，柱溫30℃，檢測(cè)波長(zhǎng)230 nm，進(jìn)樣體積5.0 L，在上述色譜操作條件下，敵草隆的保留時(shí)間約為6.2 min，丙炔氟草胺的保留時(shí)間約為7.7 min。敵草隆及丙炔氟草胺標(biāo)樣色譜見圖1。25%敵草隆·丙炔氟草胺懸浮劑樣品的高效液相色譜圖見圖2。

圖1 敵草隆及丙炔氟草胺標(biāo)樣高效液相色譜圖

圖2 25%敵草隆·丙炔氟草胺懸浮劑高效液相色譜圖

1.3 溶液配制

1.3.1 標(biāo)樣溶液的配制

稱取敵草隆標(biāo)樣0.05 g（精確至0.000 2 g），丙炔氟草胺標(biāo)樣0.02 g（精確至0.000 2 g），置于100 mL的容量瓶中，用乙腈溶解并稀釋至刻度，搖勻并超聲溶解10 min，用0.45 m濾膜過濾，備用。

1.3.2 試樣溶液的配制

稱取25%敵草隆·丙炔氟草胺懸浮劑試樣0.3 g（精確至0.000 2 g），放置于100 mL容量瓶中，用乙腈溶解并稀釋至刻度，搖勻并超聲溶解10 min，用0.45 m濾膜過濾，備用。

1.4 測(cè)定

在上述操作條件下，待儀器穩(wěn)定后，連續(xù)注入數(shù)針標(biāo)樣溶液，直至相鄰2針敵草隆或丙炔氟草胺標(biāo)樣的峰面積相對(duì)變化小于1.0%后，按照標(biāo)樣溶液、試樣溶液、試樣溶液、標(biāo)樣溶液的順序進(jìn)行測(cè)定。

1.5 計(jì)算

將測(cè)得的兩針試樣溶液以及試樣前后兩針標(biāo)樣溶液中的敵草隆或丙炔氟草胺峰面積分別進(jìn)行平均。試樣中敵草隆或丙炔氟草胺的質(zhì)量分?jǐn)?shù)w（%）按下式計(jì)算。

式中：A1為標(biāo)樣溶液中敵草隆或丙炔氟草胺峰面積平均值；A2為試樣溶液中敵草隆或丙炔氟草胺峰面積平均值；m1為標(biāo)樣的質(zhì)量，g；m2為試樣的質(zhì)量，g；P為標(biāo)樣中敵草隆或丙炔氟草胺的質(zhì)量分?jǐn)?shù)，%。

2 結(jié)果與討論

2.1 流動(dòng)相的選擇

以甲醇與水按不同比例為流動(dòng)相時(shí)，敵草隆和丙炔氟草胺的出峰時(shí)間晚且峰形較寬。當(dāng)以乙腈與水作為流動(dòng)相時(shí)，二者的出峰時(shí)間適中，峰形尖銳無拖尾，且分離效果良好。綜合考慮，最終選定乙腈+水（體積比為55∶45）為流動(dòng)相。

2.2 檢測(cè)波長(zhǎng)的選擇

通過使用TU-1901型普析通用紫外可見分光光度計(jì)對(duì)敵草隆和丙炔氟草胺標(biāo)樣溶液在近紫外區(qū)波段范圍內(nèi)進(jìn)行掃描，可得到該標(biāo)樣溶液對(duì)應(yīng)的吸收波長(zhǎng)與響應(yīng)值的紫外光譜圖。當(dāng)檢測(cè)波長(zhǎng)選定為230 nm時(shí)，敵草隆與丙炔氟草胺的吸收峰強(qiáng)烈，且基線平穩(wěn)，雜質(zhì)吸收較小，主峰和雜質(zhì)峰分離效果較好。因此，最終選定230 nm作為本分析方法的檢測(cè)波長(zhǎng)。

2.3 分析方法的線性相關(guān)性

分別稱取5個(gè)不同質(zhì)量的敵草隆、丙炔氟草胺標(biāo)準(zhǔn)品于100 mL的容量瓶中，依據(jù)上述色譜條件配置成一系列不同質(zhì)量濃度的標(biāo)準(zhǔn)溶液進(jìn)行測(cè)定。以敵草?。ū卜莅罚┻M(jìn)樣質(zhì)量為橫坐標(biāo)，以敵草?。ū卜莅罚┓迕娣e為縱坐標(biāo)繪圖，得敵草隆和丙炔氟草胺的線性相關(guān)性曲線，分別見圖3、圖4。

圖3 敵草隆線性關(guān)系圖

圖4 丙炔氟草胺線性關(guān)系圖

敵草隆線性方程為y=2 220.6x+154.39，r2=0.999 3。丙炔氟草胺線性方程為y=4 855x-30.48，r2=0.999 8。該方法在測(cè)定范圍內(nèi)線性相關(guān)性很好。

2.4 方法的精密度

從同一個(gè)25%敵草隆·丙炔氟草胺懸浮劑中準(zhǔn)確稱取5個(gè)試樣，在上述色譜操作條件下進(jìn)行分析，試驗(yàn)結(jié)果見表1。由表1可知，敵草隆質(zhì)量分?jǐn)?shù)為18.08%，標(biāo)準(zhǔn)偏差為0.039，變異系數(shù)為0.22%。丙炔氟草胺質(zhì)量分?jǐn)?shù)為7.29%，標(biāo)準(zhǔn)偏差為0.038，變異系數(shù)為0.52%。該方法的精密度能滿足定量分析要求。

表1 25%敵草隆·丙炔氟草胺懸浮劑精密度測(cè)定

2.5 方法的準(zhǔn)確度

在已知含量的25%敵草隆·丙炔氟草胺懸浮劑中加入一定量的敵草隆、丙炔氟草胺標(biāo)樣，在上述液相色譜操作條件下進(jìn)行測(cè)定，并計(jì)算回收率?；厥章蕼y(cè)定結(jié)果見表2。

表2 25%敵草隆·丙炔氟草胺懸浮劑回收率測(cè)定

3 結(jié)論

本文采用高效液相色譜法同時(shí)測(cè)定25%敵草隆·丙炔氟草胺懸浮劑中有效成分質(zhì)量分?jǐn)?shù)。本方法準(zhǔn)確度和精密度高，線性關(guān)系良好，簡(jiǎn)便、快速，是25%敵草隆·丙炔氟草胺懸浮劑可行的分析方法。