血循環(huán)腫瘤細(xì)胞檢測在中晚期乳腺癌療效評價(jià)及轉(zhuǎn)移監(jiān)測中的應(yīng)用

崔海燕 王海濤

【摘 要】目的：探討并分析血循環(huán)腫瘤細(xì)胞（CTCs）檢測對中晚期乳腺癌療效評價(jià)及轉(zhuǎn)移監(jiān)測中的應(yīng)用價(jià)值。方法：抽選濰坊市中醫(yī)院近3年來收治的90例中晚期乳腺癌患者，在1周期、第2周期和3周期分別抽取外周血，使用免疫磁珠陰性富集聯(lián)合免疫熒光染色法完成CTCs檢測;在3周期化療前評價(jià)影像學(xué)療效，對化療兩個周期后各轉(zhuǎn)歸患者的CTCs情況進(jìn)行對比;全部患者都在3周期化療進(jìn)行各月隨訪，一直到新增轉(zhuǎn)移灶出現(xiàn)停止;在所有化療完成后再次分別3個月、6個月、9個月進(jìn)行CTCs檢測以及影像學(xué)檢查。結(jié)果：在第1個周期、2周期、3周期化療前，中晚期乳腺癌患者化療1周期、2周期后的陽性率以及CTCs數(shù)量都明顯低于首次化療前，p<0.05;所有化療結(jié)束后，3個月、6個月、9個月，CTCs陽性患者的轉(zhuǎn)移復(fù)發(fā)率都高于CTCs陰性患者，p<0.05。結(jié)論：在中晚期乳腺癌的化療療效評價(jià)及轉(zhuǎn)移監(jiān)測中可以運(yùn)用外周血CTCs檢測，對預(yù)測乳腺癌預(yù)后具有重要的作用。

【關(guān)鍵詞】血循環(huán)腫瘤細(xì)胞檢測;中晚期乳腺癌;療效評價(jià);轉(zhuǎn)移監(jiān)測

【中圖分類號】R97【文獻(xiàn)標(biāo)識碼】A【文章編號】1005-0019（2019）13--01

乳腺癌屬于惡性腫瘤，多發(fā)病于女性身上，全球每年大概新增150萬例女性乳腺癌患者，而60例婦女致死的原因是乳腺癌?，F(xiàn)如今，盡管乳腺癌的診斷方式及治療手段不斷提升，但是尚未有效控制死亡率，而患者死亡的根本原因是腫瘤的錯誤治療和轉(zhuǎn)移復(fù)發(fā)。充分了解血液里CTCs的具體變化情況對診斷乳腺癌等具有重要的臨床作用。本研究通過對中晚期乳腺癌患者外周血中的 CTCs進(jìn)行動態(tài)監(jiān)測，對患者實(shí)施化療療效和轉(zhuǎn)移風(fēng)險(xiǎn)評價(jià)，最終目的在于為制定個性化治療奠定堅(jiān)實(shí)基礎(chǔ)。

1 資料與方法

1.1 一般資料 抽選抽選濰坊市中醫(yī)院近3年來收治的90例中晚期乳腺癌患者，都是女性，年齡最小34歲，最大76歲，平均（38.24±2.4）歲。列入標(biāo)準(zhǔn)：①進(jìn)組前告知患者有關(guān)內(nèi)容主動進(jìn)行研究，而且簽訂知情同意書，估計(jì)有5個月的生存期;②所有患者都經(jīng)過空心針穿刺活檢和乳腺影像學(xué)檢查確診，已經(jīng)證實(shí)患者是中晚期乳腺癌;排除標(biāo)準(zhǔn)：①哺乳期及妊娠期乳腺癌患者;②伴有肝腎功能障礙者。剔除標(biāo)準(zhǔn)：①不能根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)進(jìn)行化療或者化療時間延遲超出3個星期的患者;②由于多種原因不能在規(guī)定時間內(nèi)進(jìn)行復(fù)查的患者。

1.2 方法

CTCs檢測方式（1）免疫雌株陰性富集方法：在1周期、2周期、3周期化療前3日內(nèi)使用ACD抗凝劑真空采血管收集患者3.2ml肘正中靜脈血，獲得CTC檢測標(biāo)本后在室內(nèi)溫度（15攝氏度-30攝氏度）存放，而且在一天內(nèi)進(jìn)行CD45磁珠富集。（2）免疫熒光染色：添加根據(jù)比例配合制成的抗體工作液實(shí)施抗體孵育，DAPI復(fù)染。通過熒光顯微鏡判斷及計(jì)數(shù)CTCs。

1.3 療效評價(jià)和隨訪 在3周期化療前科學(xué)評估影像學(xué)療效，對化療2周期后每個轉(zhuǎn)歸患者的CTCs情況進(jìn)行對比;全部患者都在3周期化療進(jìn)行各月隨訪，一直到新增轉(zhuǎn)移灶出現(xiàn)停止;在所有化療完成后再次分別3個月、6個月、9個月進(jìn)行CTCs檢測以及影像學(xué)檢查。

1.4 療效評價(jià)標(biāo)準(zhǔn) 結(jié)合1.1版RECIST標(biāo)準(zhǔn)：其一，全部緩解：每個目標(biāo)病灶都消失，沒有出現(xiàn)新的病灶，而且腫瘤標(biāo)志物顯示正常，維持時間至少有5周;其二，局部緩解：基線病灶長徑綜合縮小超過35%，維持時間不少于5周;其三，進(jìn)展：基線病灶長徑綜合縮小超過20%;其四，穩(wěn)定：基線病灶長徑綜合縮小且沒有達(dá)到局部緩解或者上升但沒有達(dá)到進(jìn)展?？傆行适?（局部緩解例數(shù)+全部緩解例數(shù)）/總例數(shù)×100%。

1.5 統(tǒng)計(jì)學(xué)分析 使用SPSS17.0統(tǒng)計(jì)學(xué)軟件分析所獲取的數(shù)據(jù)。用均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差表示CTCs數(shù)量，各個時間點(diǎn)對比使用單因素方差分析;用n（%）表示計(jì)數(shù)治療，使用x2進(jìn)行檢驗(yàn)，差異顯著，具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（p<0.05）。

2 結(jié)果

2.1 化療前和化療后CTCs所得的檢測結(jié)果 在在第1個周期、第2個周期、第3個周期化療前，中晚期乳腺癌患者的CTCs數(shù)量分別是（16.27±3.27）、（6.59±2.19）、（4.29±2.18），陽性差分別是67.00%、48.00%、17.00%;化療1個周期、2個周期后的陽性率以及CTCs數(shù)量都明顯減少，具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（p<0.05）。

2.2 化療結(jié)束后CTCs變化和轉(zhuǎn)移復(fù)發(fā)之間的關(guān)系 隨訪中晚期癌癥患者共90例，其中有效隨訪80例，失訪10例。所有化療結(jié)束后，3個月、6個月、9個月，CTCs陽性患者的轉(zhuǎn)移復(fù)發(fā)率分別是4.28%、11.28%和27.00%，顯著高于CTCs陽性患者。

3 討論

隨著全球醫(yī)學(xué)技術(shù)的日益發(fā)展和新型腫瘤治療藥物的研發(fā)和應(yīng)用，乳腺癌已經(jīng)逐漸成為可以采用化療、手術(shù)等不同治療方法而取得很高的治愈率，特別是早期的乳腺癌。然而對于很多中晚期乳腺癌患者而言，經(jīng)過手術(shù)等部分治療后仍舊有相對較高的轉(zhuǎn)移復(fù)發(fā)率，這些患者一般預(yù)后較差[1]。因此，當(dāng)前臨床上急迫需要的是可以預(yù)計(jì)死亡風(fēng)險(xiǎn)及療效的檢測因素，對治療中晚期乳腺癌具有現(xiàn)實(shí)的意義。當(dāng)前，在臨床方面預(yù)計(jì)腫瘤患者的死亡風(fēng)險(xiǎn)及復(fù)發(fā)的關(guān)鍵是借助綜合腫瘤病理學(xué)特點(diǎn)等等，但是這些檢查方法都不能及時正確的找到腫瘤病灶的遠(yuǎn)處轉(zhuǎn)移，很難緩解患者病情。CTCs是以細(xì)胞的血液播散學(xué)院為基礎(chǔ)提出的概念年，出現(xiàn)轉(zhuǎn)移的前提是CTCs的游走與產(chǎn)生。大量的研究結(jié)果顯示，CTCs主要存在于各種惡性腫瘤患者的外周血內(nèi)。

一般來說，治療中晚期乳腺癌患者的主要手段是化療。其療效好壞關(guān)乎到患者的生存時間以及生存水平?，F(xiàn)如今，判定臨床評價(jià)療效的常用方式是影像學(xué)檢查，但是研究表示，影像學(xué)可以觀察的腫瘤大小并不符合CTCs的侵襲能力。也有研究顯示，CTCs對化療反應(yīng)較為敏感，具有檢測方法簡便、創(chuàng)傷較小等特征[2]。本研究結(jié)果表明：在1周期、2周期、3周期化療前，中晚期乳腺癌患者化療1周期、2周期后的陽性率以及CTCs數(shù)量都明顯低于首次化療前;所有化療結(jié)束后，3個月、6個月、9個月，CTCs陽性患者的轉(zhuǎn)移復(fù)發(fā)率都高于CTCs陰性患者，說明中晚期乳腺癌的化療療效評價(jià)及轉(zhuǎn)移監(jiān)測中可以運(yùn)用外周血CTCs檢測，對預(yù)后預(yù)測乳腺癌具有重要的作用。

綜上所述，外周血CTCs檢測可以適用于中晚期乳腺癌的化療療效評價(jià)及轉(zhuǎn)移監(jiān)測，對預(yù)后預(yù)測乳腺癌具有現(xiàn)實(shí)的意義，可以降低診斷失誤率，確定治療方案。

參考文獻(xiàn)

吳江.乳腺癌患者外周血循環(huán)腫瘤細(xì)胞陰性富集法檢測及其臨床意義的研究[D].南京醫(yī)科大學(xué)，2018.

單海琳，邵清，蘇瑛，周斌，鄒潤龍.乳腺癌術(shù)前外周血循環(huán)腫瘤細(xì)胞計(jì)數(shù)的臨床應(yīng)用價(jià)值研究[J].東南大學(xué)學(xué)報(bào)（醫(yī)學(xué)版），2018，37（02）：272-276.